检索结果-南通市图书馆

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

把脉南京茶树种业发展

江苏农村经济 2024年第4期 40-41页

作者：殷玥许尹杰李松江苏省南京市农业技术推广站

南京市是江苏省重要的产茶区域,其代表茶类是具有独特历史背景的“雨花茶”。全市茶园面积稳定在12万亩左右,居全省第2位。茶树一次栽种定终生的特殊性,决定了品种选择的重要性,茶树良种化是茶叶优质高效生产的基础。

关键词：茶树良种种业发展优质高效雨花茶品种选择历史背景栽种江苏省

SPK1/S1P信号通路在慢性粒细胞白血病中的作用及机制研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

SPK1/S1P信号通路在慢性粒细胞白血病中的作用及机制研究

作者：许尹安徽医科大学

学位级别：硕士

1: BCR/ABL上调细胞外源性S1P 目的探讨bcr/abl融合基因对细胞SPK1/S1P信号通路的影响。方法通过转导bcr/abl融合基因,观察bcr/abl融合基因过表达对非慢粒细胞SPK1表达、活性和S1P分泌的影响。利用BCR/ABL酪氨酸激酶特异性阻断剂STI571... 详细信息

1: BCR/ABL上调细胞外源性S1P 目的探讨bcr/abl融合基因对细胞SPK1/S1P信号通路的影响。方法通过转导bcr/abl融合基因,观察bcr/abl融合基因过表达对非慢粒细胞SPK1表达、活性和S1P分泌的影响。利用BCR/ABL酪氨酸激酶特异性阻断剂STI571和MAPK信号通路阻断剂PD98059处理BCR/ABL阳性的慢粒细胞,检测阻断BCR/ABL信号通路对S1P分泌的影响。结果在ECV304和HL-60两种非慢粒细胞中过表达bcr/abl融合基因可显著提高细胞SPK1表达和活性,同时提高细胞S1P的分泌。STI571和MAPK处理慢粒细胞K562后可降低S1P分泌。结论bcr/abl融合基因可通过MAPK信号通路上调细胞SPK1表达、活性和S1P分泌。 2:慢粒细胞S1P/S1P2与MAPK信号通路间存在cross-talk 目的探讨慢粒细胞中SPK1/S1P信号通路与MAPK信号通路的关系。方法利用RT-PCR技术检测慢粒细胞系K562和慢粒病人外周血单个核细胞中S1P受体的表达情况。用外源性S1P处理慢粒细胞中观察MAPK信号通路的磷酸化水平。利用SPK特异性阻断剂DMS处理K562细胞,观察阻断SPK对细胞S1P分泌和MAPK磷酸化水平的影响。通过多种S1P受体激动剂和拮抗剂,确定S1P受体与MAPK信号通路的关系。结果K562和慢粒病人外周血单个核细胞均表达S1P受体。外源性S1P处理K562细胞可增加MAPK磷酸化。而DMS处理K562细胞后可以降低S1P分泌和MAPK磷酸化。S1P2受体拮抗剂JTE-013处理后也可降低MAPK磷酸化。结论MAPK信号通路和SPK1/S1P/S1P2信号通路之间存在cross-talk现象。 3:干涉SPK1基因对慢粒细胞的影响目的探讨干涉SPK1基因对慢粒细胞系K562增殖和凋亡的影响。方法利用293细胞生产携带SPK1干涉序列的腺病毒。所生产病毒经CsCl密度梯度离心法纯化后,用以感染细胞,检测细胞增殖和凋亡。结果所生产病毒对K562细胞增殖无明显影响,但可显著增加细胞的凋亡。结论干涉SPK1可增加细胞凋亡。

关键词： SPK1-S1P信号慢性粒细胞白血病 MAPK cross-talk

BCR/ABL融合蛋白对鞘氨醇激酶和1-磷酸鞘氨醇分泌的影响

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2009年第4期44卷 411-415页

作者：许尹王超吴彬秦宜德安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室合肥230032 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

目的研究高表达BCR/ABL融合蛋白对人鞘氨醇激酶(SPK)表达、活性及1-磷酸鞘氨醇(S1P)分泌的影响。方法使用pLXSN和pLXSN-bcr/abl的重组逆转录病毒感染HL-60和ECV304细胞并筛选出pLXSN和pLXSN-bcr/abl的细胞。利用RT-PCR鉴定病毒转染。Wes... 详细信息

目的研究高表达BCR/ABL融合蛋白对人鞘氨醇激酶(SPK)表达、活性及1-磷酸鞘氨醇(S1P)分泌的影响。方法使用pLXSN和pLXSN-bcr/abl的重组逆转录病毒感染HL-60和ECV304细胞并筛选出pLXSN和pLXSN-bcr/abl的细胞。利用RT-PCR鉴定病毒转染。WesternBlot检测SPK表达,γ-32P-ATP掺入法检测细胞SPK活性和培养上清的S1P含量。应用同样方法检测不同剂量Gleevec对K562细胞培养上清中S1P的影响。结果RT-PCR结果显示bcr/abl基因转染成功。高表达BCR/ABL融合蛋白的HL-60和ECV304均比转染空载体后的细胞SPK表达、活性和S1P分泌均显著提高。随着Gleevec浓度的增加,K562细胞培养上清中S1P的含量逐渐减少。结论BCR/ABL融合蛋白可提高细胞SPK表达、活性和S1P分泌。

关键词：融合蛋白质类,bcr—abl 重组逆转录病毒人鞘氨醇激酶 1-磷酸鞘氨醇

腺病毒介导HGF基因逆转肝纤维化的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2013年第10期48卷 1178-1182页

作者：郑斐群李玮吴彬许尹方佳深圳市第三人民医院放射科深圳518000 军事医学科学院放射与辐射研究所血液病实验室北京100850

目的评价腺病毒介导肝细胞生长因子(HGF)对肝纤维化的治疗作用。方法 30只雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)8周,诱导肝纤维化产生。大鼠随机均分为5组,分别注射不同剂量的Ad-HGF或病毒。A组注入PBS,B组注入5×109PFU病毒;C组注入1... 详细信息

目的评价腺病毒介导肝细胞生长因子(HGF)对肝纤维化的治疗作用。方法 30只雄性Wistar大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)8周,诱导肝纤维化产生。大鼠随机均分为5组,分别注射不同剂量的Ad-HGF或病毒。A组注入PBS,B组注入5×109PFU病毒;C组注入1×109PFU Ad-HGF,D组注入2.5×109PFU Ad-HGF;E组注入5×109PFU AdHGF。定时采大鼠血清样品,以动态监测大鼠肝功能。8周后处死大鼠,并采血和检测肝组织。采用ELISA法测定在体外和体内的HGF表达;并测定血清中腔脯氨酸(Hyp)含量;病理分析肝脏组织变化及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达和胶原蛋白沉积。结果在细胞培养液中HGF分泌增加约44倍,达到8.8 ng/ml。在注射Ad-HGF大鼠组内,血浆HGF的浓度增加约5倍,超过50 ng/ml,并持续至少10 d。在基因治疗后谷丙转氨酶(GOT)、谷草转氨酶(GPT)、血清中总蛋白,白蛋白,总胆红素明显恢复(P<0.05)。离体肝组织显示,D及E组肝脏形态有明显恢复。在注射CCl48周后,肝组织Hyp含量明显增加,D及E组Hyp含量低于B组及C组。病理研究提示Ad-HGF同样也减弱了转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达和胶原蛋白的沉积。结论静脉注射AdHGF可促进肝功能的恢复和提高胶原溶解能力,有利于缓解肝脏纤维化。

关键词：肝纤维化基因治疗肝细胞生长因子腺病毒

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

自噬与病毒复制

医学分子生物学杂志 2012年第4期9卷 286-291页

作者：许尹田婵董小平中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所传染病预防控制国家重点实验室北京市102206

自噬是真核生物中一类保守的胁迫机制，是溶酶体蛋白降解途径的主要形式之一。自噬通过降解衰老损伤的细胞器和老龄蛋白维持细胞内稳态（homeostasis），同时通过吞噬细胞内微生物病原体行使天然免疫功能。在不同病毒感染过程中，自噬... 详细信息

自噬是真核生物中一类保守的胁迫机制，是溶酶体蛋白降解途径的主要形式之一。自噬通过降解衰老损伤的细胞器和老龄蛋白维持细胞内稳态（homeostasis），同时通过吞噬细胞内微生物病原体行使天然免疫功能。在不同病毒感染过程中，自噬也可以发挥不同的作用：既能阻止病毒复制也可以促进病毒复制。当自噬发挥抗病毒作用时，通过包裹病毒蛋白或病毒颗粒运至溶酶体，进行降解，这一过程称作异自噬（xenophagy）。相反，一些病毒蛋白与宿主自噬蛋白相互作用，阻滞自噬过程，促进病毒复制。另外，还有～些病毒利用自噬机制完成自身复制并行非裂解细胞型释放。

关键词：病毒病病毒复制自噬

过表达OPTN和TAU-P301-L基因腺相关病毒构建与鉴定

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2020年第11期55卷 1649-1654页

作者：陈曦王鹏徐恰刘会郭若文刘芸许尹秦宜德安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院免疫学教研室合肥230032

目的获得能够过表达OPTN和TAU-P301-L基因的重组腺相关病毒,检测其在体外对293T细胞的感染,并且为阿尔茨海默氏病(AD)研究提供新思路。方法从含有目的基因的大肠杆菌中提取包涵目的基因的质粒,利用PCR扩增获得目的基因,目的基因OPTN构建... 详细信息

目的获得能够过表达OPTN和TAU-P301-L基因的重组腺相关病毒,检测其在体外对293T细胞的感染,并且为阿尔茨海默氏病(AD)研究提供新思路。方法从含有目的基因的大肠杆菌中提取包涵目的基因的质粒,利用PCR扩增获得目的基因,目的基因OPTN构建到pAAV-IRES-ZsGreen1载体,目的基因TAU-P301L-V5构建到pAAV-CMV-mkate-IRES载体。鉴定质粒阳性克隆并测序。重组质粒pAAV-IRES-ZsGreen1-AAV9-OPTN和pAAV-CMV-mkate-IRES-AAV9-TAU-P301L-V5分别与包装质粒pAAV-RC9、辅助质粒pHelper通过Lipofiter^(TM)2000共转染293T细胞,获得AAV9病毒。利用相同方法,不使用目的基因构建对应绿色和红色AAV9对照病毒。qPCR法测定重组腺相关病毒载体滴度,病毒载体感染293T细胞进行病毒有效性及安全性鉴定,Western blotting和RT-PCR进行蛋白表达的鉴定,MTT检测OPTN蛋白与TAU-P301-L蛋白对293T细胞活力的影响。结果测序结果显示成功构建pAAV-IRES-ZsGreen1-AAV9-OPTN和pAAV-CMV-mkate-IRES-AAV9-TAU-P301L-V5腺相关病毒载体,qPCR测得病毒滴度为1.0×10^(12) vg/ml,病毒载体感染293T细胞转染效率为33.6%和20.5%, Western blot和RT-PCR显示蛋白过量表达。MTT结果显示OPTN组挽救了TAU-P301-L组的细胞凋亡。结论成功构建过表达OPTN和TAU-P301-L基因的腺相关病毒。OPTN蛋白可以减弱TAU-P301-L蛋白的细胞毒性。

关键词： OPTN TAU-P301-L 腺相关病毒 AAV9

敲低和敲除OPTN基因SKOV3细胞的构建及其对抗癌药物敏感性的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2020年第9期55卷 1315-1320页

作者：王鹏陈曦徐恰刘会郭若文刘芸许尹秦宜德安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院免疫学教研室合肥230032

目的利用RNA干扰技术建立稳定敲低OPTN蛋白的人SKOV3细胞株和利用CRISPR/Cas 9基因编辑技术建立稳定敲除OPTN蛋白的人SKOV3细胞株,并研究降低OPTN基因表达对细胞抗癌药物敏感性的影响。方法针对OPTN基因设计shRNA和sgRNA的序列,并与慢... 详细信息

目的利用RNA干扰技术建立稳定敲低OPTN蛋白的人SKOV3细胞株和利用CRISPR/Cas 9基因编辑技术建立稳定敲除OPTN蛋白的人SKOV3细胞株,并研究降低OPTN基因表达对细胞抗癌药物敏感性的影响。方法针对OPTN基因设计shRNA和sgRNA的序列,并与慢病毒载体质粒pGPU 6_GFP_Neo和敲除质粒PX 459载体连接产生重组载体。并将重组的质粒测序验证,将测序成功的重组质粒载体与包装质粒(psPAX 2、pMD 2.G)共转染293 T细胞进行病毒包装,收集病毒上清液并感染SKOV3细胞,获得稳定敲低和稳定敲除OPTN基因的SKOV3细胞株。RT-PCR检测敲低组OPTN基因的表达的变化,PCR检测敲除组的基因组DNA的变化,Western blot法分析检测OPTN蛋白的表达情况。MTT法检测DDP对卵巢癌细胞增殖的影响,qRT-PCR检测caspase3、Bax、Bcl-2的mRNA的表达情况,Western blot检测caspase3、Bax、和Bcl-2蛋白的表达情况。结果成功构建慢病毒载体和基因敲除载体,在SKOV3细胞中的OPTN蛋白表达降低(敲减细胞株)或完全敲除(敲除细胞株)。OPTN基因被敲减和敲除的卵巢癌细胞(SKOV3)对顺铂(DDP)的敏感性降低;与对照组相比,DDP对细胞抑制率降低(P<0.05,P<0.01),基因敲除的细胞效果更好。通过qRT-PCR和Western blot检测稳定敲减和敲除OPTN蛋白的SKOV3细胞其凋亡相关基因caspase3、Bax的mRNA和蛋白的表达量降低,而Bcl-2的表达量上升(P<0.05,P<0.01)。结论在卵巢癌中降低或去除OPTN基因表达,能够降低卵巢癌细胞对抗癌药物DDP的敏感性,OPTN可能通过影响凋亡相关途径实现的。

关键词：卵巢癌 OPTN 基因敲减基因敲除细胞耐药性

乳源六肽预防和降低小鼠急性酒精性肝损伤及其机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2019年第10期54卷 1546-1551页

作者：席浩刘沁雪陈曦王鹏李敬文姚晓炜吕志昊许尹秦宜德安徽医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室合肥230032 安徽医科大学第一临床医学院合肥230032 安徽医科大学药学院合肥230032

目的研究乳源六肽(PGPIPN)在降低小鼠酒精性肝损伤方面的作用及其机制。方法建立小鼠急性酒精肝损伤的动物模型,健康雄性昆明种小鼠60只,体质量18~22 g,动物预饲养1周后分成6组:对照组、模型组、PGPIPN L组、PGPIPN M组、PGPIPN H组和... 详细信息

目的研究乳源六肽(PGPIPN)在降低小鼠酒精性肝损伤方面的作用及其机制。方法建立小鼠急性酒精肝损伤的动物模型,健康雄性昆明种小鼠60只,体质量18~22 g,动物预饲养1周后分成6组:对照组、模型组、PGPIPN L组、PGPIPN M组、PGPIPN H组和谷胱甘肽(GSH)组,每组10只小鼠。为了制作小鼠急性酒精性肝损伤的动物模型,实验最后3 d,PGPIPN低、中、高剂量组、GSH组和模型对照组以56°红星二锅头酒灌胃,对照组使用等量蒸馏水灌胃,建立小鼠的急性酒精性肝损伤的对照模型。12 h后,将小鼠颈椎脱臼处死,取材检测相关指标。在实验结束时,将小鼠称重并麻醉,收集血清和肝脏样品,取肝脏称重后保存,计算出肝脏指数。同时,测定小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量,血清和肝匀浆中三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的含量。取肝脏组织制作成病理切片,观察肝脏细胞的病理学变化。原代细胞培养,流式细胞术检测肝脏组织的凋亡状况。结果生化分析显示模型组小鼠血清TG、TC和肝脏TG(肝匀浆中TG的浓度)高于对照组,PGPIPN H剂量组、PGPIPN M剂量组和PGPIPN L剂量组血清中ALT、AST含量与模型组相比降低,PGPIPN高剂量组中TNF-α含量较模型组也有减少。对照组中,肝细胞结构完整,凋亡指数为3.61%。而模型组中肝索结构紊乱,液泡数目增加,肝脏细胞的边界不清晰,细胞核消失,细胞皱缩,凋亡指数为36.87%,出现了明显的细胞凋亡状态。PGPIPN L组细胞出现凋亡状态,而PGPIPN H组细胞状态良好,无凋亡现象发生。流式细胞术检测细胞凋亡,对照组为4.558%,模型组为31.50%。结论PGPIPN能够预防和降低小鼠急性酒精性肝损伤。

关键词：乳源六肽小鼠急性酒精肝损伤保护机制

羊瘙痒因子139A感染的小鼠脑组织中AMPK—ULKl自噬调节通路的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华实验和临床病毒学杂志 2014年第2期28卷 126-128页

作者：范学宇王荟许尹邵启祥董小平田婵江苏大学基础医学与医学技术学院免疫学系镇江212013 中国疾病预防控中心病毒病预防控制所

目的研究感染羊瘙痒因子139A的小鼠脑组织中自噬的活化及其机制。方法采用WesternBlot方法检测感染羊瘙痒因子139A的小鼠终末期脑组织匀浆中的AMPK、ULKl及其磷酸化水平和LC3II的表达，并对其进行定量分析。结果感染139A毒株的小鼠脑组... 详细信息

目的研究感染羊瘙痒因子139A的小鼠脑组织中自噬的活化及其机制。方法采用WesternBlot方法检测感染羊瘙痒因子139A的小鼠终末期脑组织匀浆中的AMPK、ULKl及其磷酸化水平和LC3II的表达，并对其进行定量分析。结果感染139A毒株的小鼠脑组织终末期脑组织中AMPK、ULKl及其磷酸化水平均表达升高。同时发现LC3II水平增加。结论AMPK-ULKl通路在139A感染的小鼠脑组织中活化并且有可能对自噬的激活起到了重要的作用。

关键词：蛋白激酶类羊瘙痒症自吞噬作用