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祖先羰基还原酶的挖掘及酶法合成(S)-乙偶姻的研究

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微生物学通报 2024年第5期51卷 1512-1521页

作者：王嘉乐奚安安彤郑香玉吴达束茹欣许国超上海烟草集团有限责任公司上海200082 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122

【背景】(S)-乙偶姻是一种重要的精细化学品,开展其绿色高效合成具有重要的应用价值。【目的】祖先酶可能具有较好的热稳定性。论文以筛选高活性和稳定性的祖先羰基还原酶为目标,并探究其酶学性质,实现(S)-乙偶姻的高效酶法合成。【方... 详细信息

【背景】(S)-乙偶姻是一种重要的精细化学品,开展其绿色高效合成具有重要的应用价值。【目的】祖先酶可能具有较好的热稳定性。论文以筛选高活性和稳定性的祖先羰基还原酶为目标,并探究其酶学性质,实现(S)-乙偶姻的高效酶法合成。【方法】基于祖先序列重建法的基因挖掘策略筛选双乙酰还原酶,并对其进行了酶学性质表征,构建不对称还原双乙酰合成(S)-乙偶姻的反应体系。【结果】获得了一种可以不对称还原双乙酰合成(S)-乙偶姻的祖先羰基还原酶AncBDH1,并在Escherichia coli中实现可溶性表达。序列保守性分析显示,AncBDH1含有短链醇脱氢酶家族的特征基序,且与已报道羰基还原酶的同源性均较低。对AncBDH1进行了镍柱纯化和酶学性质表征,显示其仅可利用NADH为辅酶,最适反应pH值为7.0,最适反应温度为60℃,催化活性不依赖金属离子,并且表现出对二甲基亚砜等有机溶剂的良好耐受性。Anc BDH1可以在12 h内将200 mmol/L双乙酰完全转化为(S)-乙偶姻。【结论】发现了一个具有较高的最适温度及有机溶剂耐受性的祖先羰基还原酶AncBDH1,并实现了(S)-乙偶姻的高效酶法合成,为(S)-乙偶姻的酶法合成奠定了一定的研究基础。

关键词：祖先序列重建基因挖掘羰基还原酶 (S)-乙偶姻

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地域文化在文创产品设计中的应用策略研究

大众文艺 2022年第2期 77-79页

作者：许国超 Jeonju University 沧州师范学院

随着文化创意产业的快速发展,关于文创产品设计的地域文化传承和人文特色成为提升产品价值的重要因素。文章通过对地域文化与文创产品的概念、特征及相互关系开始,对地域文化在文创产品设计中的价值展开分析,重点从强化地域文化符号特... 详细信息

随着文化创意产业的快速发展,关于文创产品设计的地域文化传承和人文特色成为提升产品价值的重要因素。文章通过对地域文化与文创产品的概念、特征及相互关系开始,对地域文化在文创产品设计中的价值展开分析,重点从强化地域文化符号特征、深挖地域文化精神内涵、促进文创产品产业化三个方面探究地域文化在文创产品设计中的应用策略,进而得出地域文化可以为文创产品设计提供多样的创意资源及形式,以及赋予文创产品丰富的文化价值和生命力。

关键词：地域文化文创产品设计文化符号应用策略

来源：博看期刊

糖基转移酶UGT73C5在大肠杆菌中的可溶性表达研究

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食品与发酵工业 2023年第2期49卷 1-7页

作者：方红辉倪晔周婕妤董晋军许国超张兆俊韩瑞枝江南大学工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 江南大学生物工程学院江苏无锡214122 丹阳市金丹阳酒业有限公司江苏丹阳212300

络塞是一种抗高原反应药物的主要活性成分,可通过尿苷二磷酸糖基转移酶UGT73C5催化肉桂醇糖基化反应合成。然而UGT73C5在大肠杆菌宿主中可溶性表达极差,严重限制了其工业应用。该研究分别通过与分子伴侣共表达和与助溶蛋白标签融合表达... 详细信息

络塞是一种抗高原反应药物的主要活性成分,可通过尿苷二磷酸糖基转移酶UGT73C5催化肉桂醇糖基化反应合成。然而UGT73C5在大肠杆菌宿主中可溶性表达极差,严重限制了其工业应用。该研究分别通过与分子伴侣共表达和与助溶蛋白标签融合表达的方式,提高UGT73C5在Escherichia coli BL21(DE3)中的可溶性表达。结果显示,除质粒pKJE7外,与分子伴侣质粒pG-KJE8、pGro7和pG-TF2共表达后均可提高UGT73C5酶活力,分别为原始酶活力(18.56 U/g细胞)的1.27、1.18、1.37倍。此外,利用硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)和谷胱甘肽巯基转移蛋白(glutathione S-transferase,GST)两种助溶蛋白标签,构建的融合酶Trx-UGT73C5和GST-UGT73C5的酶活力为原始酶活力的1.45、2.54倍,且纯化后的比酶活力为原始酶的80%~90%。最后,在2 mmol/L肉桂醇合成络塞的反应中,相同浓度细胞破碎液(粗酶)融合酶GST-UGT73C5比原始酶催化效率更高,4 h后转化率可以达到90%以上,最终转化率达到93.6%。因此,助溶蛋白标签融合表达法可有效提高UGT73C5在大肠杆菌中的可溶性表达,且融合酶GST-UGT73C5在络塞的酶法合成中具有更大的应用潜力。

关键词：糖基转移酶可溶性表达分子伴侣融合酶肉桂醇络塞

美育背景下地方高校美术馆的育人效能及实施路径

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沧州师范学院学报 2022年第3期38卷 8-12页

作者：许国超孔维艳沧州师范学院美术系河北沧州061001

美术馆作为艺术文化交流传播与教育教学实践研究的重要载体,在弘扬美育精神,提升人文素养,助力文化继承与传播方面具有多元效能。然而,地方高校美术馆存在自身定位不清晰、与高校教学体系联系不紧密、社会美育职能发挥不充分等问题。根... 详细信息

美术馆作为艺术文化交流传播与教育教学实践研究的重要载体,在弘扬美育精神,提升人文素养,助力文化继承与传播方面具有多元效能。然而,地方高校美术馆存在自身定位不清晰、与高校教学体系联系不紧密、社会美育职能发挥不充分等问题。根据地方高校美术馆自身特点和资源拥有情况,可以将其作为高校艺术教育、思政教育、社会美育的重要平台,探索出专业教学实践、思政教育实践、社会拓展实践等多路径融合的地方高校美术馆育人模式。

关键词：美育地方高校美术馆育人

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表面活性剂对粗煤泥离心脱水促进作用研究

表面活性剂对粗煤泥离心脱水促进作用研究

作者：许国超太原理工大学

学位级别：硕士

煤炭的洗选加工是其洁净、高效利用的基础,洗选过程主要以湿法为主,在此过程中不可避免地引入水。大部分选煤厂粗煤泥离心脱水后的产品水分仍偏高,制约着总精煤的水分指标。因此寻找一种能够提高粗煤泥离心机脱水效率,进一步降低产品水... 详细信息

煤炭的洗选加工是其洁净、高效利用的基础,洗选过程主要以湿法为主,在此过程中不可避免地引入水。大部分选煤厂粗煤泥离心脱水后的产品水分仍偏高,制约着总精煤的水分指标。因此寻找一种能够提高粗煤泥离心机脱水效率,进一步降低产品水分,达到市场要求的方法十分必要。论文选取了脂肪醇聚氧乙烯醚类、辛基酚聚氧乙烯醚类、聚氧乙烯醚失水山梨醇脂肪酸酯类和醇醚羧酸盐类表面活性剂作为脱水助剂,对四种不同变质的粗煤泥(古交屯兰焦煤、汾西柳湾1/3焦煤、朔州麻家梁弱粘煤、鄂尔多斯李家壕长焰煤)进行了离心脱水助滤试验研究。试验结果表明:脂肪醇聚氧乙烯醚类、辛基酚聚氧乙烯醚类和醇醚羧酸盐类所有试验药剂对屯兰和柳湾粗精煤泥都有显著的助滤效果。其中,AEO-7、AEO-9、Tween-80、Tween-85和AEC钠是其所属类中助滤效果突出的,如AEO-7能够使屯兰粗精煤泥水分降低7.92%,脱水率为52.26%,使柳湾粗精煤泥水分降低4.50%,脱水率为47.50%。筛选出助滤效果较好的表面活性剂对麻家梁粗煤泥都有显著的助滤效果,如AEO-7使煤样水分从11.18%降低到8.42%,脱水率为24.70%,而对李家壕粗煤泥没有明显的助滤效果。采用接触角测量仪、表面张力仪、原子力显微镜和扫描电镜测定了添加表面活性剂前后煤表面的接触角、离心液的表面张力、煤表面水化膜的厚度以及煤颗粒结构。测试结果表明:添加Tween-20、Tween-40、Tween-60、Tween-80和Tween-85的煤表面上的接触角分别为72.70°、71.70°、71.95°、73.50°和75.25°,均高于空白样时的68.25°;添加浓度为200g/t和400g/t的Tween85,煤样表面水化膜厚度分别为5.90nm和5.88nm,比空白样水化膜分别变薄了1.92nm和1.94nm;离心液表面张力随着药剂用量增大逐渐减小;观察大颗粒煤电镜扫描的图片发现,添加Tween类表面剂后煤表面吸附的小颗粒细泥明显减少。因此,表面活性剂能够促进离心脱水,一方面原因是表面活性剂吸附在煤粒表面,对煤表面进行疏水改性,使其亲水性变差,表面的水化膜变薄,同时能够降低离心液的表面张力;另一方面原因是,表面活性剂对大的煤颗粒有一定的“洗涤”作用。测量离心液表面张力时发现,刚开始随着离心液表面张力的降低,脱水率逐渐增加,当离心液表面张力降低到67mN/m左右后,离心液的表面张力再降低,脱水率几乎不变,说明离心液的表面张力对于离心助滤结果有一定的指示作用。另外,研究离心液中残留的表面活性剂对后续浮选的影响,结果表明:添加助滤剂后精煤产率增加,因此离心液中残留的助滤剂有利于后续的浮选试验。选定Tween-80在麻家梁选煤厂进行了工业试验,结果表明:Tween-80对麻家梁煤有一定的助滤效果,可将螺旋分选机的精煤水分从12.28%降至10.43%。

关键词：粗煤泥离心脱水表面活性剂水分表面张力

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绿色液压技术发展与推广

机床与液压 2010年第20期38卷 112-114页

作者：许国超唐山国丰钢铁有限公司热轧薄板厂河北唐山063313

在液压系统设计、制造、使用和维护过程中,存在污染环境、能耗过大等环保问题。发展绿色液压技术是人与自然和谐相处的需要,也是液压技术可持续发展方向。介绍绿色液压技术的定义、研究内容和推广的具体途径、目标、过程和内容。

关键词：绿色液压技术发展推广

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重组大肠杆菌产双乙酰还原酶的发酵条件优化

食品与生物技术学报 2017年第9期36卷 944-950页

作者：边雅倩许国超倪晔江南大学教育部工业生物技术重点实验室江苏无锡214122

光学纯2,3-丁二醇是重要的手性合成砌块。采用双乙酰还原酶催化还原双乙酰底物是一种合成光学纯2,3-丁二醇的绿色方法。作者在摇瓶中对产双乙酰还原酶重组大肠杆菌的发酵培养基及诱导条件进行了优化。优化后的发酵培养基组成为:甘油5 g... 详细信息

光学纯2,3-丁二醇是重要的手性合成砌块。采用双乙酰还原酶催化还原双乙酰底物是一种合成光学纯2,3-丁二醇的绿色方法。作者在摇瓶中对产双乙酰还原酶重组大肠杆菌的发酵培养基及诱导条件进行了优化。优化后的发酵培养基组成为:甘油5 g/L,酵母浸膏10 g/L,鱼粉蛋白胨5 g/L,(NH_4)_2SO_41.5 g/L,柠檬酸钠5 g/L,KH_2PO_41 g/L,MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L,NaCl 2 g/L;优化后的诱导条件为37℃,IPTG终浓度为0.1 mmol/L。在优化培养基中,37℃和0.1 mmol/L IPTG条件下诱导发酵6 h,单位菌体(干重)产双乙酰还原酶量达13.84 kU/g,产酶水平达33.65kU/L,分别为基础培养基的2.04和4.23倍,LB培养基的1.16和1.71倍。在此最优条件,在3 L发酵罐中进行了重组大肠杆菌产双乙酰还原酶的验证,发酵8 h时酶活最高,单位菌体产双乙酰还原酶量达14.09 kU/g,产酶水平达64.62 kU/L。本研究为高效制备可用于不对称还原合成光学纯2,3-丁二醇的双乙酰还原酶奠定了基础。

关键词：重组大肠杆菌双乙酰还原酶发酵培养基优化诱导条件优化

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从中国传统年画的角度探索传统设计思维方式

从中国传统年画的角度探索传统设计思维方式

作者：许国超河北工业大学

学位级别：硕士

在现代化的历史潮流中，西方设计显然成为现代设计的代名词，充满了我们的生活空间。这无疑让承载着五千年辉煌文明的中国设计扼腕叹息。我们陶醉于中国设计的国际化和现代化，却忽视了中国设计的生存主题和民族特色。中国设计从对西方... 详细信息

在现代化的历史潮流中，西方设计显然成为现代设计的代名词，充满了我们的生活空间。这无疑让承载着五千年辉煌文明的中国设计扼腕叹息。我们陶醉于中国设计的国际化和现代化，却忽视了中国设计的生存主题和民族特色。中国设计从对西方现代设计的盲目模仿到今天的主动吸收和转化，其本质乃是一个自内的文化殖民过程。我们更应该关注中国本土设计文化的自我演进过程。深入挖掘中国传统文化、地域文化、民族文化的源头活水，研究中国古代设计的思想、观念、思维方式等文化内核，寻求中国现代设计的自我突破，同时也可能是将中国现代设计引向民族化设计的路径之一。中国传统设计思维方式的研究，应该以具体“物”为主线，不仅研究其造型、色彩等表面分析，更应该专注于历史背景和技术工艺等外部因素的影响。本文从中国传统年画的角度来探寻中国传统设计思维方式，传统年画是中国独特的民间艺术形式，带有浓郁的世俗化色彩，体现了世俗大众的审美观念、道德指向和思想观念。年画其悠久历史和长久不衰，至今仍然流传在人民大众的生活和文化之中，其独特的设计风格、运用形式在一定程度上反映了中华民族共同的文化特质。本文首先以时间为轴线，把年画分成起源、形成、繁荣三个阶段，逐一阐述其历史演变，从中寻找传统年画的演进轨迹、社会功能。同时选举典型案例进行研究分析，与演进轨迹和社会功能相互印证，最终归纳总结出年画的演进逻辑和设计意识。其次，在其设计意识的基础上结合古代工艺典籍之思和中国传统思维框架，进而得出探究传统设计思维方式。最后，将设计思维方式与西方现代设计理论相互结合，探索传统设计思维方式在现代设计的转化，并结合设计实践验证其可行性与可靠性。

关键词：传统设计思维方式传统年画设计意识演进逻辑

吐温类表面活性剂对粗煤泥离心脱水促进作用研究

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煤炭学报 2018年第B06期43卷 284-289页

作者：许国超樊民强刘爱荣杨宏丽太原理工大学矿业工程学院山西太原030024

为降低粗精煤泥水分,进行了吐温类表面活性剂(吐温20,吐温40,吐温60,吐温80,吐温85)对粗煤泥离心脱水促进作用的研究。通过测量这些药剂分别作用后离心脱水煤样的水分、接触角以及离心液的表面张力,发现吐温类表面活性剂对粗煤泥离心脱... 详细信息

为降低粗精煤泥水分,进行了吐温类表面活性剂(吐温20,吐温40,吐温60,吐温80,吐温85)对粗煤泥离心脱水促进作用的研究。通过测量这些药剂分别作用后离心脱水煤样的水分、接触角以及离心液的表面张力,发现吐温类表面活性剂对粗煤泥离心脱水均有促进效果,它们使煤颗粒的接触角变大;吐温20,吐温80和吐温85的脱水促进作用好于吐温40和吐温60;当离心液表面张力降至67 m N/m时,脱水效率最高。对效果较好的吐温85不同用量下作用后的煤表面水化膜厚度进行了测量,并对煤颗粒表面进行电镜扫描,结果发现,煤表面上的水化膜变薄,煤颗粒表面粘附的细泥也明显减少。可以认为,吐温类表面活性剂吸附在煤粒表面,通过疏水改性使水化膜变薄和对细泥的"洗涤"作用,是其助滤的主要机理;离心液的表面张力对脱水效果有指示作用。

关键词：吐温离心脱水水分水化膜