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RNA干扰沉默LSD1基因对MOLT-4细胞增殖及凋亡的影响

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RNA干扰沉默LSD1基因对MOLT-4细胞增殖及凋亡的影响

作者：许可珍福建医科大学

学位级别：硕士

目的：应用RNA干扰（RNAi）方法沉默人急性T淋巴母细胞白血病细胞MOLT-4细胞组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1（LSD1）基因的表达，研究LSD1基因被与之对应的小干扰RNA沉默后，MOLT-4细胞的增殖、凋亡以及对组蛋白甲基化、乙酰化修饰及DNA... 详细信息

目的：应用RNA干扰（RNAi）方法沉默人急性T淋巴母细胞白血病细胞MOLT-4细胞组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1（LSD1）基因的表达，研究LSD1基因被与之对应的小干扰RNA沉默后，MOLT-4细胞的增殖、凋亡以及对组蛋白甲基化、乙酰化修饰及DNA甲基化修饰的影响。方法：（1）针对LSD1基因设计4个相对应的siRNA片段,使用LipofectamineTM2000将这四个片段分别转染进Molt-4细胞，随之采用RT-PCR方法筛选出最佳的siRNA片段。（2）应用MTS法检测LSD1siRNA对MOLT-4细胞增殖的影响;采用流式细胞术分析细胞的凋亡。（3）Western blot法检测组蛋白H3K4、H3K9甲基化及组蛋白H3乙酰化状态的变化以及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白P15、甲基转移酶DNMT1和Bcl-2、procaspase-3等凋亡相关蛋白表达水平的变化。结果：（1）转染6小时后，转染率较好，采用RT-PCR法筛选出最佳的siRNA为sense5’-CCACGAGUCAAACCUUUAUTT-3’;Anti-sense5’-AUAAAGGUUUGACUCGUGG TT-3’。（2）LSD1siRNA抑制MOLT-4细胞的增殖，LSD1siRNA0、30、60、120nM转染24小时后细胞增殖率分别为（99.35±1.38）%，（83.02±1.69）%，（65.72±2.16）%，（41.15±2.23）%，p＜0.05;60nM的LSD1siRNA转染0、24、48、72小时后细胞增殖率为（99.86±1.35）%，（65.72±2.16）%，（48.26±1.92）%，（37.86±1.66）%，p＜0.05，呈时间和浓度依赖性。（3）LSD1siRNA致凋亡相关蛋白Bcl-2、procaspase-3的表达下降，出现细胞凋亡，LSD1siRNA60、120、240μMol作用24小时后，MOLT-4细胞的凋亡率分别为（12.16±1.74）%、（32.74±2.47）%、（54.64±2.58）%，而对照组为（3.35±1.26）%，凋亡率随着LSD1siRNA浓度的增加逐渐上升,p＜0.05。（4）LSD1siRNA抑制LSD1蛋白及LSD1mRNA，上调组蛋白H3K4一甲基化、二甲基化及组蛋白H3的乙酰化水平，H3K4三甲基化、H3K9甲基化水平无显著变化。（5）LSD1siRNA下调DNA去甲基化酶DNMT1的表达，上调P15的表达。结论:（1）应用RNAi技术，LSD1siRNA可有效地干扰MOLT-4细胞LSD1基因的表达。（2） LSD1siRNA可使细胞增殖率减低并且增加细胞凋亡。（3） LSD1基因被LSD1siRNA介导的基因“敲低”后，MOLT-4细胞中的组蛋白甲基化H3K4一甲基化、二甲基化、组蛋白H3乙酰化表达增强，重新启动基因转录。但对组蛋白甲基化H3K4三甲基化、H3K9甲基化表达水平并没有影响。（4）LSD1siRNA抑制DNA去甲基转移酶1（DNMT1）表达，使P15基因从新表达。RNA干扰技术有望成急性淋巴细胞白血病靶向治疗的工具，LSD1可能成为治疗的新靶点。

关键词： RNA干扰 LSD1 MOLT-1 DNMT1 组蛋白甲基化组蛋白乙酰化

基于优化的Thevenin模型的镍氢电池仿真

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电池 2017年第3期47卷 144-147页

作者：许可珍金鹏北方工业大学北京电动车辆协同创新中心北京100144

针对镍氢动力电池开路电压的动态滞回特性,在Thevenin仿真模型的基础上对开路电压的选取进行优化,仿真模型主要优化开路电压与历史充放电方向的关系。对镍氢电池进行混合脉冲功率特性测试(HPPC),用递推最小二乘法对模型参数进行系统辨识... 详细信息

针对镍氢动力电池开路电压的动态滞回特性,在Thevenin仿真模型的基础上对开路电压的选取进行优化,仿真模型主要优化开路电压与历史充放电方向的关系。对镍氢电池进行混合脉冲功率特性测试(HPPC),用递推最小二乘法对模型参数进行系统辨识,用Simulink搭建电池Thevenin经典模型及优化模型,用变电流对模型进行仿真分析。仿真结果表明:优化模型输出平均电压误差10 mV,对于电动汽车的实际工况而言,优化模型更能体现电池特性。

关键词：开路电压 Thevenin模型参数辨识仿真镍氢电池

下调组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1的表达引起人白血病Molt-4细胞的凋亡

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中国药理学通报 2015年第11期31卷 1603-1607页

作者：许可珍黄轶群黄秀旺马旭东福建医科大学附属漳州市医院药学部福建漳州363000 福建医科大学附属漳州市医院血液内科福建漳州363000 福建医科大学药学院福建福州350004

目的观察LSD1基因对人类急性T淋巴母细胞性白血病Molt-4细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并筛选出针对LSD1基因的最佳siRNA片段,将其转染入Molt-4细胞后,MTS法观察LSD1 siRNA对Molt-4细胞增殖的影响;流式细胞术分析细胞凋亡;Western blo... 详细信息

目的观察LSD1基因对人类急性T淋巴母细胞性白血病Molt-4细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并筛选出针对LSD1基因的最佳siRNA片段,将其转染入Molt-4细胞后,MTS法观察LSD1 siRNA对Molt-4细胞增殖的影响;流式细胞术分析细胞凋亡;Western blot检测LSD1 siRNA作用后组蛋白H3K4、H3K9甲基化及组蛋白H3乙酰化状态,以及p15、DNA甲基化酶1(DNMT1)和凋亡相关蛋白Bcl-2、procaspase-3的表达变化。结果沉默LSD1基因可抑制细胞增殖,LSD1 siRNA浓度为0、30、60、120 nmol·L^(-1)作用48 h后,Molt-4细胞的增殖率分别为(99.65±1.21)%、(83.02±1.69)%、(65.72±2.16)%、(41.15±2.23)%,差异具有统计学意义(P<0.05);LSD1 siRNA以60 nmol·L^(-1)的浓度转染细胞0、24、48、72 h,增殖率分别为(99.86±1.35)%、(65.72±2.16)%、(48.26±1.92)%、(37.86±1.66)%,P<0.05,提示LSD1 siRNA可以抑制Molt-4细胞的增殖。LSD1 siRNA 0、30、60、120 nmol·L^(-1)作用48 h后,细胞凋亡率分别为(3.35±1.26)%、(12.16±1.74)%、(32.74±2.47)%、(54.64±2.58)%,P<0.05,凋亡率随着LSD1 siRNA浓度的增加逐渐上升;同时出现凋亡相关蛋白Bcl-2、procaspase-3的表达下降;LSD1 siRNA抑制LSD1蛋白及LSD1 mRNA,上调组蛋白H3K4一甲基化、二甲基化及组蛋白H3的乙酰化水平,H3K4三甲基化、H3K9甲基化水平无明显变化;LSD1 siRNA下调DNA去甲基化酶DNMT1的表达,上调p15的表达。结论 LSD1 siRNA能抑制Molt-4细胞的增殖并诱导其凋亡,其机制可能与表观遗传学调控有关,有望成为白血病治疗的一个新的靶点。

关键词：急性白血病 LSD1 组蛋白甲基化乙酰化表观遗传学

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镍氢动力电池特性

储能科学与技术 2017年第S1期6卷 26-30页

作者：张舜许可珍金鹏北方工业大学北京电动车辆协同创新中心北京100144

镍氢电池是一种高容量、大功率、无污染的电池,被广泛用于电动汽车领域和电网储能领域.为了后续的建模仿真和SOC估算以及在应用中发挥其优势,了解镍氢电池的基本特性是必要的.因此,对电池做性能测试,包括充放电特性、效率特性、内阻特性... 详细信息

镍氢电池是一种高容量、大功率、无污染的电池,被广泛用于电动汽车领域和电网储能领域.为了后续的建模仿真和SOC估算以及在应用中发挥其优势,了解镍氢电池的基本特性是必要的.因此,对电池做性能测试,包括充放电特性、效率特性、内阻特性等.针对测试结果,绘制出相应的曲线并分析.测试及分析结果表明,镍氢电池在SOC为0.2～0.8时性能最佳.

关键词：镍氢电池特性测试特性分析

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临床药师在内分泌科临床治疗中的作用探析

药学服务与研究 2011年第1期11卷 20-23页

作者：许可珍李碧峰吴佳滨陈宜锋福建医科大学附属漳州市医院药剂科福建漳州363000

目的:探讨临床药师在内分泌科临床治疗中的作用。方法:通过临床实例,对比分析福建医科大学附属漳州市医院临床药师在内分泌科对医师用药行为实施干预前、后的用药情况。结果:临床药师对医师的用药行为实施干预,可提高药物治疗水平、降... 详细信息

目的:探讨临床药师在内分泌科临床治疗中的作用。方法:通过临床实例,对比分析福建医科大学附属漳州市医院临床药师在内分泌科对医师用药行为实施干预前、后的用药情况。结果:临床药师对医师的用药行为实施干预,可提高药物治疗水平、降低医疗成本、缩短疗程。结论:临床药师在促进合理用药、提升医院疾病治疗的水平方面可发挥积极作用。

关键词：临床药师药学服务内分泌科合理用药

近零应力等效温度场驱动的CFRP复杂构件固化变形控制方法

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航空学报 2024年第16期45卷 294-306页

作者：曹关关许可南京航空航天大学机电学院南京210016

碳纤维树脂基复合材料(CFRP)构件的固化变形直接影响构件装配后的力学性能及服役寿命。现阶段采用的修模、结构优化等固化变形控制方法存在工艺周期长,迭代成本高等问题。微波加热和自阻电热等选择性加热方法有潜力实现固化温度场的精... 详细信息

碳纤维树脂基复合材料(CFRP)构件的固化变形直接影响构件装配后的力学性能及服役寿命。现阶段采用的修模、结构优化等固化变形控制方法存在工艺周期长,迭代成本高等问题。微波加热和自阻电热等选择性加热方法有潜力实现固化温度场的精准调控,进而通过构造不均匀温度场产生热应力来对冲原有的固化变形。针对如何构造不均匀温度场这一典型反问题,推导并定义出近“零应力”等效温度场,原理上可对冲构件脱模前的残余应力场实现近“零应力”固化,从而抑制脱模后的固化变形。针对实际固化温度工艺约束,设计了自适应压缩分割算法对理论等效温度场进行近似分区。在典型双曲面零件和回转体零件上进行了初步验证,相比于传统的等温固化工艺,固化变形和残余应力均减少了近50%;相比于仅考虑固化变形的温度工艺优化方法,固化变形和残余应力均减少了近15%。

关键词：碳纤维树脂基复合材料固化变形分区温度场图像处理变形控制

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部分头孢菌素类皮试液稀释液用量比较

海峡药学 2008年第7期20卷 39-40页

作者：许可珍李碧峰张华福建省漳州市医院漳州363000

目的探讨头孢菌素类药物皮试液的配制方法,提高配制皮试液浓度的准确性。方法选取各类头孢菌素类药物加入定量规定溶剂,使溶液体积相同,测量溶解各类头孢菌素所需溶剂的体积。结果不同的头孢菌素稀释成同样浓度的皮试液所需的溶媒体积... 详细信息

目的探讨头孢菌素类药物皮试液的配制方法,提高配制皮试液浓度的准确性。方法选取各类头孢菌素类药物加入定量规定溶剂,使溶液体积相同,测量溶解各类头孢菌素所需溶剂的体积。结果不同的头孢菌素稀释成同样浓度的皮试液所需的溶媒体积有较大差别。结论配制皮试液时应充分考虑到溶媒体积差异对皮试液浓度的影响。

关键词：头孢菌素皮试液稀释液用量

中期妊娠合并泌尿系统感染和尿潴留病人的药学服务

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药学服务与研究 2014年第4期14卷 279-279,285,300页

作者：李碧峰李悦许可珍福建医科大学附属漳州市医院药学部漳州363000 福建医科大学附属漳州市医院病案室漳州363000

临床药学是以服务临床医务人员和病人,提供安全、合理、有效的药物治疗为目的的药学工作,是新世纪医院药学的重点内容之一。自2006年卫生部开展临床药师培训以来,全国多家三级综合医院已经有了专职、专科的临床药师参与到临床查房和会... 详细信息

临床药学是以服务临床医务人员和病人,提供安全、合理、有效的药物治疗为目的的药学工作,是新世纪医院药学的重点内容之一。自2006年卫生部开展临床药师培训以来,全国多家三级综合医院已经有了专职、专科的临床药师参与到临床查房和会诊实践工作中。福建医科大学附属漳州市医院是一所三级甲等综合医院,为保障病人安全用药,降低临床医疗风险,自1995年11月起开展临床药学工作,并设置专职临床药师岗位。

关键词：药学服务妊娠泌尿道感染尿潴留葡萄球菌,金黄色,耐甲氧西林

组蛋白赖氨酸特异性脱甲基酶1(LSD1)在肿瘤治疗中的应用进展

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哈尔滨医药 2014年第6期34卷 405-407页

作者：许可珍马旭东福建医科大学附属漳州市医院福建漳州363000

组蛋白去甲基化酶LSD1的发现揭示了组蛋白赖氨酸的甲基化与其他化学修饰如乙酰化、泛素化等一样,是动态调节的过程。LSD1控制基因转录的激活和抑制以及p15、p19、p21、p53等抑癌基因的活性,在癌症的发生和发展中起着重要的作用,是一个... 详细信息

组蛋白去甲基化酶LSD1的发现揭示了组蛋白赖氨酸的甲基化与其他化学修饰如乙酰化、泛素化等一样,是动态调节的过程。LSD1控制基因转录的激活和抑制以及p15、p19、p21、p53等抑癌基因的活性,在癌症的发生和发展中起着重要的作用,是一个潜在的抗癌药物开发靶蛋白。

关键词： LSD1 组蛋白去甲基化酶肿瘤 LSD1