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马立克病毒MDLV21株对SPF鸡的致病性与免疫保护

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中国动物传染病学报 2022年

作者：安子齐赵亚楠王淑雯徐敏丽崔宁许传田苏帅山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东农业大学动物医学院山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室

为了研究缺失RLORF6、Meq基因的鸡马立克病病毒（MDV）MDLV21株对SPF鸡的致病性与免疫保护效果。通过接种SPF鸡，比较MDLV21株对鸡的体重、免疫器官指数、灭活疫苗诱导抗体水平的影响并统计死亡率和肿瘤率；通过攻毒保护试验，统计分析M... 详细信息

为了研究缺失RLORF6、Meq基因的鸡马立克病病毒（MDV）MDLV21株对SPF鸡的致病性与免疫保护效果。通过接种SPF鸡，比较MDLV21株对鸡的体重、免疫器官指数、灭活疫苗诱导抗体水平的影响并统计死亡率和肿瘤率；通过攻毒保护试验，统计分析MDLV21与CVI988/Rispens对MDV超强毒Md5的免疫保护指数。结果显示，MDLV21株接种SPF鸡的体重、胸腺和法氏囊免疫器官指数均与对照组SPF鸡差异不显著；接种鸡与对照组鸡的禽流感、新城疫抗体滴度相似。MDLV21株接种鸡在整个周期没有死亡以及肿瘤发生，脾脏、肝脏组织切片显示细胞结构正常。MDLV21、CVI988/Rispens对感染Md5的SPF鸡分别提供90%、70%的免疫保护。综上，MDV MDLV21株对SPF鸡没有致病性，对MDV Md5具有良好的免疫保护。为MD的防控提供一株新的生物安全性、免疫效果良好的疫苗候选株。

关键词：马立克病毒 RLORF6基因 Meq基因缺失株致病性免疫保护效果

山东省H5N1和H9N2亚型猪流感病毒的分子流行病学调查

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山东省H5N1和H9N2亚型猪流感病毒的分子流行病学调查

作者：许传田山东农业大学

学位级别：硕士

近年来,山东省各地猪场不断发生以呼吸道症状为主要表现的疾病,给养猪业造成了严重的损失,这些呼吸道疾病包括蓝耳病、猪喘气病、猪圆环病毒、猪流感等,有时为两种或两种以上的病原同时感染,为了弄清猪流感病毒在引起猪呼吸道疾病中所... 详细信息

近年来,山东省各地猪场不断发生以呼吸道症状为主要表现的疾病,给养猪业造成了严重的损失,这些呼吸道疾病包括蓝耳病、猪喘气病、猪圆环病毒、猪流感等,有时为两种或两种以上的病原同时感染,为了弄清猪流感病毒在引起猪呼吸道疾病中所起的作用,2002-2003年我们在山东省20多个发病比较典型的猪场展开对猪流感病毒的分离鉴定和分子流行病学的调查。首先在各疑似猪流感发病地区进行采样,按常规把病料处理之后接种SPF鸡胚,在鸡胚中进行连续传代,每代无菌收获鸡胚液,用鸡或豚鼠的红细胞进行血凝和血凝抑制试验来验证是否有流感病毒,待传代后鸡胚液的血凝价较高并比较稳定后再用标准血清进行定型。对初步确诊为H5和H9两个猪流感病毒株进行了电镜观察,并作了小白鼠攻毒和猪体回归试验来验证这两个毒株的致病性。对山东10个发病猪场的30份血清进行检测,H5和H9的抗体检出率为30%,尽管抗体水平不高(由哈尔滨兽医研究所流感中心代测),所测的血清中有H3和H1的猪流感病毒的抗体,但本次流感病毒分离中没有分离到H3和H1亚型。在细胞上观察H9和H5猪流感病毒引起的致细胞病变效应CPE,山东分离株H5和H9流感病毒能在鸡成纤维细胞、HeLa细胞,MDCK,以及MDBK上产生的CPE。分别挑选一株H9N2和H5N1亚型典型毒株进全基因克隆测序,利用DNA-STAR软件进行序列分析,并和GenBank中的禽、人和猪的核苷酸同源性分析和氨基酸形成的进化树进行分析,同时对HA的氨基酸裂解位点

关键词：猪流感病毒 H9N2和H5N1亚型重组病毒

三株新城疫病毒强毒株的生物学特性及全基因组序列分析

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病毒学报 2012年第2期28卷 143-150页

作者：杨少华胡北侠许传田颜世敢张琳黄艳艳张秀美山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100

2009～2011年从北方发病鸡群和鸭群中分离出3株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)。通过致病性指数测定及交叉血凝抑制试验初步分析了3个毒株的毒力和相互之间的同源性。选取鸡源分离株SDLY01与新城疫疫苗株(LaSota)进行了交叉... 详细信息

2009～2011年从北方发病鸡群和鸭群中分离出3株新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)。通过致病性指数测定及交叉血凝抑制试验初步分析了3个毒株的毒力和相互之间的同源性。选取鸡源分离株SDLY01与新城疫疫苗株(LaSota)进行了交叉保护试验,选取鸭源毒株SD03对樱桃谷鸭进行攻毒实验,同时设计引物对3个毒株进行了全基因组测序,并与36株NDV参考株进行了分子进化分析。结果表明3个分离株F蛋白裂解位点的氨基酸序列均为112R-R-Q-K-R-F117符合强毒株的序列特征,并与致病性指数测定结果相符。交叉血凝抑制试验发现3个分离株与疫苗株LaSota的抗原同源性较低为82.5%～89.4%,两个鸡源分离株间的抗原同源性为90%,而鸭源毒株SD03与鸡源毒株SDSG01同源性为100%。交叉保护试验和攻毒实验结果显示传统的LaSota疫苗能对SDLY01流行株提供100%免疫保护,但第5天仍检测到排毒;鸭源毒株SD03对樱桃谷鸭不致病,但能检出排毒,排毒期最长为5d。全基因组测序与分析表明3个毒株基因组长度均为15 192bp,属于基因Ⅶd型毒株,与同期流行的鹅源及鸭源NDV毒株之间全基因组核苷酸序列具有高度的同源性,揭示鸭源、鹅源NDV与鸡源NDV在遗传学和流行病学上密切相关。

关键词：新城疫病毒全基因组测序基因型

H9N2亚型猪流感病毒山东分离株的分离鉴定及其HA、NP、NS基因序列分析

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中国兽医学报 2004年第6期24卷 528-530页

作者：许传田赵宏坤范伟兴山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

从山东地区疑似流感发病猪分离到 10株流感病毒 ,经国家流感中心鉴定均为 A型流感病毒 H9N2亚型。将其中 1株 Sw/ SD/ 1/ 2 0 0 3(H9N2 )的血凝素基因 (HA)、核蛋白基因 (NP)和非结构蛋白基因 (NS)进行克隆与测序 ,与Gen Bank收录的其... 详细信息

从山东地区疑似流感发病猪分离到 10株流感病毒 ,经国家流感中心鉴定均为 A型流感病毒 H9N2亚型。将其中 1株 Sw/ SD/ 1/ 2 0 0 3(H9N2 )的血凝素基因 (HA)、核蛋白基因 (NP)和非结构蛋白基因 (NS)进行克隆与测序 ,与Gen Bank收录的其他猪流感和禽流感 H9N2亚型的相关基因进行比较 ,推测 Sw/ SD/ 1/ 2 0 0 3(H9N2 )可能源于禽流感病毒 H9N2亚型和 H5 N1亚型的重组病毒 ;Sw/ SD/ 1/ 2 0 0 3的 HA氨基酸裂解位点与其他 H9N2亚型不同 ,Sw/ SD/1/ 2 0 0 3的 HA氨基酸裂解位点是 R- S- L- R- G,而其他猪流感和禽流感 H9N2亚型都是 R- S- S- R- G。

关键词： H9N2亚型猪流感病毒山东分离株分离鉴定 HA NP NS基因序列分析

传染性支气管炎病毒N蛋白CTL表位与BF2*15鸡MHC I基序的相互作用

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微生物学通报 2017年第10期44卷 2407-2414页

作者：鲁梅黄庆华崔宁许传田山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室山东济南250100 山东潍坊工程职业学院山东青州262500

【目的】近年来鸡传染性支气管炎病毒在国内鸡群呈现流行趋势,尤其是变异毒株的出现,加剧了对鸡群的危害。鸡主要组织相容复合体蛋白(MHC I)通过特定的基序结合抗原表位多肽,进而识别感染病毒的细胞并引起免疫反应,达到清除病毒的效果... 详细信息

【目的】近年来鸡传染性支气管炎病毒在国内鸡群呈现流行趋势,尤其是变异毒株的出现,加剧了对鸡群的危害。鸡主要组织相容复合体蛋白(MHC I)通过特定的基序结合抗原表位多肽,进而识别感染病毒的细胞并引起免疫反应,达到清除病毒的效果。鉴定BF2*15鸡主要组织相容复合体(MHC I)的结合基序。【方法】采用同源建模、分子动力学和分子对接等计算方法,构建了传染性支气管炎病毒(IBV)N蛋白表位多肽和鸡MHC I BF2*15之间的复合物结构,来探索BF2*15识别抗原表位多肽的潜在结合基序。【结果】通过对该复合物的相互作用关系分析,鉴定出BF2*15鸡主要组织相容复合体(MHC I)的一条潜在结合基序"x-Arg-xx-x-Arg"。【结论】解释了传染性支气管炎病毒N蛋白CTL表位与BF2*15鸡MHC I基序的相互作用原理,该研究结果对了解传染性支气管炎病毒免疫机制以及基于特定基序筛选和设计通用疫苗具有借鉴意义。

关键词：传染性支气管炎 MHC I结合基序 CTL表位

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一株新亚群禽白血病病毒全基因组序列分析

畜牧兽医学报 2017年第9期48卷 1718-1723页

作者：李久庆刘强郭雷许传田崔宁李冰崔治中滕州市畜牧局滕州277599 山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东农业大学动物科技学院泰安271018

为了解外源性禽白血病病毒(ALV)在山东省部分地区肉鸡中的流行状况,采集无菌抗凝血分离血浆接种DF-1细胞、ELISA p27抗原检测以及DNA提取进行PCR扩增等方法,从山东省某地区大型养殖场不同个体养殖场出栏肉鸡群中分离鉴定出1株ALV,命名为... 详细信息

为了解外源性禽白血病病毒(ALV)在山东省部分地区肉鸡中的流行状况,采集无菌抗凝血分离血浆接种DF-1细胞、ELISA p27抗原检测以及DNA提取进行PCR扩增等方法,从山东省某地区大型养殖场不同个体养殖场出栏肉鸡群中分离鉴定出1株ALV,命名为FC1505。分析其囊膜糖蛋白gp85氨基酸序列与近年来从地方品种鸡中疑似新亚群ALV-K分离株的相似性最高,相似性均在95%以上,而与其他已知亚群ALV的相似性均低于90%。为了进一步分析该分离株分子特性,对其进行全基因组测序,并与已知亚群ALV分离株序列进行比较。结果表明,FC1505分离株整个基因组中gag、pol和gp37基因相对保守,与ALV参考毒株序列相似性都在90%以上,但均与疑似K亚群的ALV分离株相似性最高;全基因组序列分析进一步说明FC1505属于ALV-K。本研究继我国江苏省和华南地区K亚群ALV报道后,首次从山东地区肉鸡中鉴定到一株ALV-K并完成其全基因组序列分析。

关键词：商品肉鸡禽白血病病毒分离鉴定全基因组序列分析

A型猪流感病毒山东分离株鉴定及其HA基因序列分析

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中国病毒学 2004年第1期19卷 27-31页

作者：许传田范伟兴赵宏坤山东农业大学动物科技学院山东泰安271018

从山东各地疑似流感发病猪分离到10株流感病毒,经国家流感中心鉴定均为A型流感病毒H9N2亚型。将其中一株Sw/SD/1/2003(H9N2)的血凝素全基因(HA)进行克隆与测序,与GenBank收录的其它猪流感和禽流感H9N2亚型的HA基因进行比较,发现Sw/SD/1/... 详细信息

从山东各地疑似流感发病猪分离到10株流感病毒,经国家流感中心鉴定均为A型流感病毒H9N2亚型。将其中一株Sw/SD/1/2003(H9N2)的血凝素全基因(HA)进行克隆与测序,与GenBank收录的其它猪流感和禽流感H9N2亚型的HA基因进行比较,发现Sw/SD/1/2003(H9N2)的血凝素基因在核苷酸序列方面同广西1999年分离的禽流感毒株Ck/GX/99(H9N2)和2000年云南分离的禽流感毒株Ck/YN/2000(H9N2)的同源性最高;进化树分析表明Sw/SD/1/2003(H9N2)起源于禽源的H9N2亚型流感病毒;Sw/SD/1/2003的HA氨基酸裂解位点与其他H9N2亚型不同,Sw/SD/1/2003的HA氨基酸裂解位点是R-S-L-R-G,而其它猪流感和禽流感H9N2亚型都是R-S-S-R-G。

关键词：猪流感病毒氨基酸裂解化点 HA基因序列分析

H9N2亚型禽流感病毒RT-LAMP方法建立及临床应用

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中国兽医学报 2012年第6期32卷 814-817页

作者：许传田鲁梅胡北侠杨少华颜世敢张琳张秀美山东农业科学院畜牧兽医研究所山东济南250100 山东潍坊教育学院山东青州262500

本研究建立一种能在基层鸡场使用的快速诊断H9禽流感试验方法(RT-LAMP),对于快速确诊H9禽流感感染,及时采取措施,降低H9禽流感给鸡场带来的经济损失起到了积极作用。试验结果具有重要兽医临床指导意义。

关键词：规模化养殖 LAMP H9N2亚型禽流感兽医临床意义

鸡传染性支气管炎病毒变异株全基因组序列分析

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病毒学报 2014年第4期30卷 339-345页

作者：胡北侠杨少华张秀美张伟曹三杰许传田黄庆华张琳黄艳艳文心田四川农业大学动物医学院雅安625014 山东省农业科学院畜牧兽医研究所山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室济南250100

为了明确传染性性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）分离株CK/CH/SD09/005的分子特征,以进一步丰富国内IBV的分子流行病学信息。本研究设计了25对引物对其全基因组进行了序列测定,并与参考株进行了同源性比较和S1基因遗... 详细信息

为了明确传染性性支气管炎病毒（Infectious bronchitis virus,IBV）分离株CK/CH/SD09/005的分子特征,以进一步丰富国内IBV的分子流行病学信息。本研究设计了25对引物对其全基因组进行了序列测定,并与参考株进行了同源性比较和S1基因遗传进化分析。结果显示CK/CH/SD09/005基因组为27 691bp（不包括5′端Cap和3′端Poly A）。全基因组同源性比对发现,CK/CH/SD09/005仅与GenBank中广西2009年分离株GX-NN09032各基因高度同源（97%~99%）。除GX-NN09032外,CK/CH/SD09/005基因组5′端复制酶基因（Gene 1）和3′端非转录区（Untranslated region,UTR）与2个QX基因型参考株ck/CH/LDL/091022和SDIB821/2012同源性最高,分别为97%和98%,但是3′端结构蛋白和非结构蛋白基因（S-3a-3b-3c/E-M-5a-5b-N）与这两个毒株同源性较低,仅为72%~90%。其ORF3c/E、5a、5b和N分别与韩国分离株1011、国内分离株CK/CH/LXJ/02I、DK/CH/HN/ZZ2004和YX10同源性最高,分别为97%、96%、99%和96%,而其ORF3a、3b和M与参考株同源性均低于90%。S1基因遗传进化分析发现,CK/CH/SD09/005和国内外39个参考株形成7个进化分支（基因型）,CK/CH/SD09/005和2007以来几个分离株属于基因Ⅳ型,与其它6个基因型参考株S1和S2基因同源性为66%~69%和72%~81%,S1基因不仅表现广泛性点突变,而且有多处碱基插入和缺失,S2仅表现点突变。本研究结果表明CK/CH/SD09/005是一个变异株,可能是QX基因型IBV流行株与其它毒株重组进化而来,此外还涉及基因突变、插入和缺失等多种变异机制。

关键词：传染性支气管炎病毒变异株基因组序列分析