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NO在小鼠早期胚胎吸收过程中的作用

中国兽医学报 2002年第1期22卷 90-93页

作者：解启发邓泽沛孙秉贵中国农业大学动物医学院北京100094

给妊娠 7d小鼠尾静脉注射细菌脂多糖 (L PS)诱导早期胚胎吸收。注射 L PS后 12、2 4、36 h,以 EL ISA、比色法检测血清和子宫匀浆中 Th1型细胞因子 IFN- γ、IL- 12与 NO的含量变化 ;免疫组织化学法观察 3种一氧化氮合酶(n NOS,e NOS,i ... 详细信息

给妊娠 7d小鼠尾静脉注射细菌脂多糖 (L PS)诱导早期胚胎吸收。注射 L PS后 12、2 4、36 h,以 EL ISA、比色法检测血清和子宫匀浆中 Th1型细胞因子 IFN- γ、IL- 12与 NO的含量变化 ;免疫组织化学法观察 3种一氧化氮合酶(n NOS,e NOS,i NOS)和 Th2型细胞在小鼠子宫表达的变化。此外 ,还观察了 NO供体硝普钠 (SNP)诱导孕鼠流产效果及氨基胍 (AG)对抗 L PS诱导孕鼠流产的效果。结果显示 ,相对于正常妊娠组 ,L PS处理组孕鼠子宫匀浆 NO含量及 IFN- γ、IL- 12水平极显著升高 (P<0 .0 1) ,血清 NO含量也极显著升高 (P<0 .0 1) ;n NOS、i NOS在 L PS处理组小鼠子宫可见阳性标记 ,而 e NOS未见阳性标记 ;大量 Th2型阳性细胞标记仅在正常妊娠组小鼠子宫内膜基质可见 ,L PS处理组未见阳性细胞。腹腔注射 SNP致使孕鼠早期胚胎吸收 ,然而妊娠 6～ 9d腹腔注射 AG却未能降低 L PS诱导的孕鼠早期胚胎吸收。上述结果提示 ,L PS处理后 ,Th1型免疫反应增强 ;源自升高表达的 i NOS的子宫局部高浓度 NO可能作为一种效应分子介导小鼠早期胚胎吸收。

关键词：一氧化氮一氧化氮合酶早期胚胎吸收免疫组织化学小鼠

肌肉异位表达pGHRH的两种质粒对大鼠的促生长作用

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生物化学与生物物理进展 2006年第4期33卷 357-361页

作者：孟庆勇张雅丽解启发巩霞李宁中国农业大学生物学院生物技术国家重点实验室北京100094 中国农业大学食品学院北京100094

构建了两种猪生长激素释放激素(GHRH)的肌肉特异表达质粒ppG-A53f-H6-GHRH(ppG-H6)及ppG-A53f-H4-GHRH(ppG-H4).通过对大鼠进行肌肉注射,并于注射后分别记录0,3,7,11,14,17,20,24,27,31,34,38以及第41天的体重变化结果,同时分析了第20、27、34和第41天的血清生长激素(GH)浓度,以研究促生长表达质粒在动物体内的促生长作用.通过研究表明,外源的GHRH表达质粒在肌肉中获得了表达,并使动物体内的GH水平维持在一个相对稳定的较高水平上,导致的直观效果表现为:通过肌肉注射表达质粒ppG-H6对大鼠的生长有促进效果,在第34天的净增重显著于对照组((200.57±3.99)gvs(185.85±9.45)g,P<0.05).实验结果预示,利用注射肌肉特异异位表达GHRH蛋白可能促进动物生长.

关键词：生长激素释放激素肌肉表达促生长质粒基因治疗

鸭肝炎病毒A66弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养

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中国兽医学报 2000年第1期20卷 19-21页

作者：张小飞解启发潘孝成赵瑞红安徽省农业科学院畜牧兽医研究所!安徽合肥230031

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒 ( DH V) A6 6 株接种于鸡胚成纤维细胞 ( CEF)进行细胞培养 ,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查 ,证明了 DHV A6 6 毒株能够在 CEF上增殖。试验还表明 ,犊牛血清对 DH V增殖具有明显的... 详细信息

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒 ( DH V) A6 6 株接种于鸡胚成纤维细胞 ( CEF)进行细胞培养 ,通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查 ,证明了 DHV A6 6 毒株能够在 CEF上增殖。试验还表明 ,犊牛血清对 DH V增殖具有明显的抑制作用。此外 ,还根据细胞培养物病毒滴度测定结果绘制出了病毒在 CEF上的生长曲线。

关键词：鸭肝炎病毒弱毒株鸡胚成纤维细胞培养

鸭肝炎病毒A66弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养：张小飞

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中国兽医学报 2000年第1期20卷 19-21页

作者：安徽省农解启发农业科学院畜牧兽医研究所

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）Ａ６６侏接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）进行细胞培养，通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查，证明了ＤＨＶＡ６６毒株能够在ＣＥＦ上增殖。试验还表明，犊牛血清对ＤＨＶ增殖... 详细信息

将鸡胚致弱的鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）Ａ６６侏接种于鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）进行细胞培养，通过对细胞培养物进行病毒滴度测定、鸡胚中和试验和电镜检查，证明了ＤＨＶＡ６６毒株能够在ＣＥＦ上增殖。试验还表明，犊牛血清对ＤＨＶ增殖具有明显的抑制作用。此外，还根据细胞培养物病毒滴度毒滴度测定结果绘制出了病毒在ＣＥＦ上的生长曲线。

关键词：鸭肝炎病毒弱毒株鸡胚成纤维细胞培养

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左旋咪唑增强传统疫苗免疫效果的研究

左旋咪唑增强传统疫苗免疫效果的研究

中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会

作者：康友敏金华利张晓莹解启发尹江梅于扬王宾中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室

传统的灭活疫苗能诱导较强的体液免疫反应,但其诱导的细胞免疫反应较弱。佐剂是增强灭活疫苗免疫效果的有效策略之一。灭活疫苗常用的是油佐剂,但其有严重的副作用。研究证明左旋咪唑(LMS)是一种良好的免疫增强剂,它能使受抑制的吞噬细...

传统的灭活疫苗能诱导较强的体液免疫反应,但其诱导的细胞免疫反应较弱。佐剂是增强灭活疫苗免疫效果的有效策略之一。灭活疫苗常用的是油佐剂,但其有严重的副作用。研究证明左旋咪唑(LMS)是一种良好的免疫增强剂,它能使受抑制的吞噬细胞和淋巴细胞功能恢复正常,而且也可增强细胞免疫机能,大大提高疫苗的免疫效果。而且左旋咪唑还应用于癌症的治疗上。本实验室研究证明LMS不但能够增加口蹄疫核酸疫苗的抗体水平,还能激发有效的细胞免疫。本研究利用蓝耳病灭活疫苗,进一步探讨LMS作为佐剂对灭活疫苗免疫效果的影响,并阐明其作为佐剂的作用机理。

关键词：

来源： cnki会议评论

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减蛋综合征AQ毒株的分离与鉴定

安徽农业科学 1997年第2期25卷 97-98,135页

作者：张小飞苏根元解启发胡晓苗范如龙安徽省农科院畜牧兽医研究所和县畜牧兽医站

通过鸭胚接种，从发生产蛋下降、产畸形蛋的鸡群中分离到一株病毒ＡＱ毒株。该病毒能在鸭胚和鸭胚成纤维细胞上生长，并能引起明显的胚体病变和细胞病变，对鸡红细胞的凝集作用能被ＥＤＳ７６标准阳性血清所抑制；病毒对氯仿不敏感、耐... 详细信息

通过鸭胚接种，从发生产蛋下降、产畸形蛋的鸡群中分离到一株病毒ＡＱ毒株。该病毒能在鸭胚和鸭胚成纤维细胞上生长，并能引起明显的胚体病变和细胞病变，对鸡红细胞的凝集作用能被ＥＤＳ７６标准阳性血清所抑制；病毒对氯仿不敏感、耐酸（ｐＨ３．０）、对热（５０℃３０ｍｉｎ）稳定，核酸型为ＤＮＡ，电镜观察见直径约７０～７５ｎｍ的圆形病毒颗粒。初步鉴定ＡＱ株是鸡减蛋综合征病毒。

关键词：减蛋综合征病毒鸡病免疫接种

新城疫新型佐剂疫苗与传统油苗免疫效果的比较

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新城疫新型佐剂疫苗与传统油苗免疫效果的比较

鸭肝炎病毒A66弱毒株在鸡胚成纤维细胞上的培养

2005全国第二届核酸疫苗研讨会

作者：尹江梅金华利解启发康友敏肖冲赵琳李小林王宾中国农业大学生物技术国家重点实验室

新城疫是由新城疫病毒引起的一种高接触性和致死性的急性败血性传染病,它在世界范围内对禽类养殖业造成了巨大的损失。传统预防新城疫的方法主要是对鸡等进行疫苗免疫接种,常用的疫苗主要有油佐剂的灭活疫苗,但这种疫苗在鸡体内仅产生... 详细信息

新城疫是由新城疫病毒引起的一种高接触性和致死性的急性败血性传染病,它在世界范围内对禽类养殖业造成了巨大的损失。传统预防新城疫的方法主要是对鸡等进行疫苗免疫接种,常用的疫苗主要有油佐剂的灭活疫苗,但这种疫苗在鸡体内仅产生体液免疫反应,故免疫效果并不理想。为了进一步提高疫苗的免疫效果,我们研制了一种新型水溶性佐剂-AD。与油佐剂疫苗相比,AD新型佐剂的新城疫疫苗在BALB/c小鼠体内产生的IgG抗体更早且更高,在加强免疫后14天,免疫AD新佐剂疫苗的小鼠抗体滴度达14 933,是油苗的1.7倍,且持续增长至70天时,AD新佐剂组的抗体仍高于油佐剂组,在免疫后90天,AD新佐剂组的IgG滴度为25 600,是油苗的2倍。在T细胞增殖实验中,AD新佐剂组小鼠脾脏的T细胞刺激指数达到3.4,是油苗组的2.4倍,在淋巴结中这两者差距达到2.7。进一步检测细胞因子和共刺激分子的表达发现,AD新佐剂组的Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ的表达水平明显高于油苗组,共刺激分子CD40、CD86的表达水平新佐剂组也较高。这些结果表明:与油苗组相比,AD新佐剂组不仅增强了体液免疫水平,也显著提高了细胞免疫水平,而细胞免疫水平的提高可能是由于共刺激分子CD86等参与的结果。最后为了综合检测AD新佐剂和油佐剂对免疫效果的影响,我们在SPF鸡上做了攻毒实验,结果两者都产生100%的保护。所以我们认为这种AD新型佐剂能够增强新城疫疫苗的免疫效果,它作为一种新的佐剂也可以应用于其他疫苗中。

关键词：新城疫佐剂疫苗

来源： cnki会议评论

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中国家禽 2000年第4期 36-36页

作者：张小飞解启发潘孝成赵瑞红安徽省农业科学院畜牧兽医研究所!安徽合肥230031

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斑点免疫金渗滤法检测鸭肝炎病毒的研究

安徽农业科学 1997年第4期25卷 373-376页

作者：张小飞陈毓川刘庆年姚淮平解启发胡晓苗安徽省农科院畜牧兽医研究所华中农业大学牧医学院淮南市牧工商

用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物的检测ＤＨＶ的斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），并确定了最佳试验条件。该法既可定性，亦可定量，对纯化ＤＨＶ的最小检... 详细信息

用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物的检测ＤＨＶ的斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），并确定了最佳试验条件。该法既可定性，亦可定量，对纯化ＤＨＶ的最小检测量为４．１２ｎｇ／点，其敏感性为抗原斑点试验（ＡＳＴ）的２倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明ＤＩＧＦＡ检测ＤＨＶ具有较高的特异性。对ＤＨＶ鸡胚尿囊液ＤＩＧＦＡ法检出率为１００％。ＤＩＧＦＡ和ＡＳＴ法对３６份临床样本检测阳性率分别为８３．３％和７５％，其阳性符合率为８６．７％。随机抽样的６份ＤＩＧＦＡ阳性肝脏样本经人工发病试验后电镜检查，均发现大量直径３０～４０ｎｍ的病毒粒子。实验结果表明，ＤＩＧＦＡ法是一种微量、敏感、特异、快速、简便的检测ＤＨＶ方法。

关键词：鸭病肝炎病毒斑点免疫金渗滤抗原斑点试验