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应用iTRAQ标记联合LC-MS/MS技术筛选肺腺癌血浆差异蛋白的研究

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应用iTRAQ标记联合LC-MS/MS技术筛选肺腺癌血浆差异蛋白的研究

作者：覃慧婵广西医科大学

学位级别：硕士

目的：本研究应用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation, iTRAQ)联合液相色谱串联质谱(1iquidchromatography tandem mass spectrometer, LC-MS/MS)技术筛选肺腺癌血浆中的差异蛋白,了解不同TNM分期的肺腺癌患者血浆中蛋白表达特点,探讨其临床意义。方法：应用iTRAQ标记联合LC-MS/MS技术,以正常者(10例)、肺炎患者(10例)、肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期患者(7例)及肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期患者(10例)的血浆为研究对象,对其进行定量蛋白组学研究;并通过生物信息学方法对差异蛋白进行功能分析。结果： 1.肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组与正常组比较的差异蛋白 1.1共发现差异表达的蛋白55种,肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组较正常组表达上调的蛋白共26种,下调的蛋白共29种。 1.2差异蛋白主要参与的生物学过程为应激反应、生物调节、单一生物过程;参与的通路包括趋化因子信号通路、p53信号通路等。 2.肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组与正常组比较的差异蛋白 2.1共发现差异表达的蛋白71种,肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组较正常组表达上调的蛋白共38种,下调的蛋白共33种。 2.2差异蛋白主要参与的生物学过程为应激反应、细胞成分组织、生物调节;参与的通路包括补体和凝血级联通路、p53信号通路。 3.肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组与肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组比较的差异蛋白 3.1共发现差异表达的蛋白68种,肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组较肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组表达上调的蛋白共39种,下调的蛋白共29种。 3.2差异蛋白主要参与的生物学过程为应激反应、单一生物过程、细胞成分组织;参与的通路包括p53信号通路、TGF-β信号通路等。 4.四组研究对象差异蛋白表达特点 4.1以正常组为参照,肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组及肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组所鉴定到的差异蛋白参与的最主要生物学过程为应激反应;最主要的信号通路为p53信号通路,参与该通路的蛋白包括胰岛素样生长因子结合蛋白1(insulin-like growth factor-binding protein1, IGFBP1)、胰岛素样生长因子结合蛋白2(insulin-like growth factor-binding protein2, IGFBP2)等;最主要行使的功能为翻译后修饰,行使该功能的蛋白包括脂蛋白A (lipoprotein A,LPA)、甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶1(mannan-binding lectin serine protease1,MASP1)等。 4.2以正常组为参照,结合珠蛋白(haptoglobin,HP)、纤维蛋白原相关蛋白1(fibrinogen-like protein1,FGL1)、整合素样金属蛋白酶与凝血酶样蛋白4(ADAMTS-like protein4,ADAMTSL4)在肺炎组表达无上调或下调,在肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组、肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组中表达均上调;以正常组为参照,多磷酸肌醇磷酸酶1(multiple inositol polyphosphate phosphatase1,MINPP1)、甲状腺素结合球蛋白(thyroxine-binding globulin,SERPINA7)、MASP1、抗菌肽(cathelicidin antimicrobial peptide,CAMP)、肌肽二肽酶1(carnosine dipeptidase1,CNDP1)在肺炎组表达无上调或下调,在肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组、肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组中表达均下调;肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组与肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组比较,子宫珠蛋白相关蛋白1(secretoglobin family3A member2, SCGB3A2)、血清淀粉样蛋白A2(serum amyloid A2,SAA2)、血红蛋白α亚基(hemoglobin subunit alpha,HBA2)、血小板反应蛋白1(thrombospondin-1,THBS1)表达有显著差异。结论： 1.肺腺癌患者的血浆中存在多种应激反应物质;IGFBP1,IGFBP2可能通过p53信号通路参与了肺腺癌的发生、发展过程;蛋白质的翻译后修饰异常可能与肺腺癌的发生、发展有关。 2. HP,MINPP1有望用于肺腺癌的临床诊断;SCGB3A2,SAA2将有助于肺腺癌的临床分期。

关键词：同位素标记相对和绝对定量蛋白质组学肺腺癌差异蛋白

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难治性恶性气管-支气管狭窄的治疗体会

中国内镜杂志 2013年第1期19卷 81-83页

作者：覃慧婵黄斯明柳广南张建全钟小宁广西医科大学第一附属医院呼吸内科广西南宁530021

目的探讨难治性恶性气管-支气管狭窄的有效处理方法。方法回顾性分析2006～2010年间在该院住院的3例肺癌术后复发致气管-支气管狭窄、3例甲状腺癌气管转移致气管狭窄、2例结肠癌术后复发致气管狭窄以及1例巨大纵隔原发精原细胞癌致气管... 详细信息

目的探讨难治性恶性气管-支气管狭窄的有效处理方法。方法回顾性分析2006～2010年间在该院住院的3例肺癌术后复发致气管-支气管狭窄、3例甲状腺癌气管转移致气管狭窄、2例结肠癌术后复发致气管狭窄以及1例巨大纵隔原发精原细胞癌致气管狭窄患者的诊疗过程。结果 1例肺癌复发患者绕过气管插管用纤支镜定位法将1镍钛金属支架置入于气管-左主支气管,其余2例肺癌复发者在使用高频电刀切除瘤体后将金属支架放置在气管-支气管;3例甲状腺癌患者在拔除气管插管后,1例置入2枚金属支架、1例置入1枚气管支架而迅速解除呼吸困难症状,1例置入2枚气管支架都不能缓解其呼吸困难;精原细胞癌患者经气管插管置入1枚镍钛金属支架后顺利撤机和拔除气管插管。结论肺癌复发引起的气管狭窄,可对气管内肿瘤组织用高频电刀予以切除,然后置入气管支架;转移性肿瘤致外压性气管狭窄者可绕过或经气管插管采用纤支镜定位法置入镍钛金属支架。

关键词：恶性的气管支气管狭窄金属支架纤维支气管镜定位

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呼吸机相关性肺炎诊断的研究进展

医学信息（医学与计算机应用） 2014年第18期18卷 646-647页

作者：刘凤鸣谢逢春覃慧婵南宁市第一人民医院重症医学科广西南宁530022

呼吸机相关性肺炎是一种特殊类型的医院内感染,尤其对于危重症患者,其发病率和病死率均较高。由于呼吸机相关性肺炎临床诊断标准的局限性,如何早期诊断仍存在争议。本文就近年来呼吸机相关性肺炎诊断的相关研究进行综述,以期提高呼吸机... 详细信息

呼吸机相关性肺炎是一种特殊类型的医院内感染,尤其对于危重症患者,其发病率和病死率均较高。由于呼吸机相关性肺炎临床诊断标准的局限性,如何早期诊断仍存在争议。本文就近年来呼吸机相关性肺炎诊断的相关研究进行综述,以期提高呼吸机相关性肺炎的诊断水平。

关键词：呼吸机相关性肺炎诊断进展

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难治性恶性气管-支气管狭窄治疗体会

难治性恶性气管-支气管狭窄治疗体会

应用iTRAQ联合LC-MS/MS技术检测肺腺癌血浆差异蛋白的研究

中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）

作者：覃慧婵黄斯明柳广南张建全钟小宁广西医科大学第一附属医院呼吸内科一病区

目的探讨难治性恶性气管-支气管狭窄的有效处理方法。方法回顾性分析2006年～2010年间在我院住院的3例肺癌术后复发致气管-支气管狭窄、3例甲状腺癌气管转移致气管狭窄、2例结肠癌术后复发致气管狭窄以及1例巨大纵隔原发精原细胞癌致气...

目的探讨难治性恶性气管-支气管狭窄的有效处理方法。方法回顾性分析2006年～2010年间在我院住院的3例肺癌术后复发致气管-支气管狭窄、3例甲状腺癌气管转移致气管狭窄、2例结肠癌术后复发致气管狭窄以及1例巨大纵隔原发精原细胞癌致气管狭窄患者的诊疗过程。

关键词：

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应用iTRAQ联合LC-MS/MS技术检测肺腺癌血浆差异蛋白的研究

乳酸和乳酸清除率在脓毒症病情判断及预后评估中的应用

中华医学会呼吸病学年会——2013（第十四次全国呼吸病学学术会议）

作者：覃慧婵傅钰雁柳广南张建全钟小宁广西医科大学第一附院呼吸内科

目的用iTRAQ和LC-MS/MS技术筛选肺腺癌血浆中差异蛋白,了解不同TNM分期患者蛋白特点和意义。方法对正常(10例)、肺炎(10例)、肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期(7例)及肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期患者(10例)血浆进行定量蛋白组学研究,用生物信息学方法对其功能分析。结果...

目的用iTRAQ和LC-MS/MS技术筛选肺腺癌血浆中差异蛋白,了解不同TNM分期患者蛋白特点和意义。方法对正常(10例)、肺炎(10例)、肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期(7例)及肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期患者(10例)血浆进行定量蛋白组学研究,用生物信息学方法对其功能分析。结果1肺腺癌Ⅰ-Ⅱ期组上调蛋白26种,下调29种,差异蛋白参与应激反应、生物调节、单一生物过程;参与趋化因子信号通路、p53信号通路等。2肺腺癌Ⅲ-Ⅳ期组上调蛋白38种,下调33种,差异蛋

关键词：

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蛇志 2021年第2期33卷 154-157页

作者：李振华陈远鹏覃慧婵南宁市第一人民医院重症医学科广西南宁530021

目的评价乳酸和乳酸清除率对脓毒症患者病情判断及预后评估的临床价值,为脓毒症患者诊治方案制定提供参考。方法纳入2017年1月~2019年1月在我院确诊的脓毒症患者202例作为研究对象,完善所有患者的基础检查,对患者不同阶段乳酸(LAC)、乳... 详细信息

目的评价乳酸和乳酸清除率对脓毒症患者病情判断及预后评估的临床价值,为脓毒症患者诊治方案制定提供参考。方法纳入2017年1月~2019年1月在我院确诊的脓毒症患者202例作为研究对象,完善所有患者的基础检查,对患者不同阶段乳酸(LAC)、乳酸清除率(LCR)、降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)进行监测,并同时行脓毒症相关序贯器官衰竭(SOFA)测评。根据患者确诊治疗后28 d的存活情况分为死亡组(46例)和存活组(156例),并根据患者脓毒症病情严重程度将其分为脓毒症组(55例)、严重脓毒症组(68例)和脓毒症休克组(79例),比较不同组别患者确诊时及确诊后24、48、72 h的LAC、LCR、PCT、CRP及SOFA水平,并采用Spearson分析患者LAC、LCR与脓毒症休克、死亡的相关性。结果(1)脓毒症休克组和严重脓毒症组患者确诊时及确诊后24、48、72 h的LAC、PCT、CRP及SOFA指标均高于脓毒症组(均P<0.05),而两组患者各时段的LCR均低于脓毒症组(均P<0.05);与严重脓毒症组比较,脓毒症休克组患者各时段的LAC、PCT、CRP及SOFA指标均高于严重脓毒症组(均P<0.05),而脓毒症休克组患者各时段的LCR均低于严重脓毒症组(均P<0.05)。(2)与存活组比较,死亡组患者确诊时及确诊后24、48、72 h的LAC、PCT、CRP及SOFA指标均高于存活组(均P<0.05),而死亡组患者各时段的LCR均低于存活组(均P<0.05)。(3)脓毒症患者的LAC水平与患者脓毒症病情严重程度密切相关,LAC越高,脓毒症病情越严重,并且越严重的患者治疗后LCR率越低。经Spearson分析显示,LAC与病情严重程度、死亡呈正相关(r=0.583、0.602,均P<0.05),LCR与脓毒症患者病情严重程度及死亡呈负相关(r=-0.611、-0.593,均P<0.05)。结论LAC、LCR在脓毒症患者不同阶段对脓毒症患者病情严重程度的判断及预后评估具有一定的临床价值。

关键词：脓毒症乳酸乳酸清除率病情严重程度预后临床价值

血清白细胞介素-32及降钙素原表达水平对呼吸机相关性肺炎早期诊断价值的研究

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广西医学 2016年第1期38卷 116-117页

作者：刘凤鸣易文枫覃慧婵黄贵梁立剑覃先连广西南宁市第一人民医院重症医学科南宁市530021

目的探讨血清白细胞介素32(IL-32)及降钙素原(PCT)表达水平对呼吸机相关性肺炎(VAP)的早期诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法检测30例VAP患者及30例非VAP患者血清IL-32及PCT表达水平。结果 VAP组患者血清IL-32、PCT表达水平均高于非VAP... 详细信息

目的探讨血清白细胞介素32(IL-32)及降钙素原(PCT)表达水平对呼吸机相关性肺炎(VAP)的早期诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法检测30例VAP患者及30例非VAP患者血清IL-32及PCT表达水平。结果 VAP组患者血清IL-32、PCT表达水平均高于非VAP组患者(P均<0.001)。结论血清PCT、IL-32表达水平升高可以作为VAP的早期诊断指标。

关键词：呼吸机相关性肺炎白细胞介素32 降钙素原

多学科协作诊疗下IL-32、PCT在呼吸机相关性肺炎ICU患者肺泡灌洗液中的表达及临床价值

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广东医学 2018年第7期39卷 1063-1065页

作者：刘凤鸣覃慧婵陈远鹏黄业李振华谢馥懋南宁市第一人民医院重症医学科广西南宁530022

目的研究多学科协作诊疗(MDT)下重症医学科(ICU)呼吸机相关性肺炎(VAP)患者肺泡灌洗液中白细胞介素-32(IL-32)、降钙素原(PCT)的表达水平及其临床价值的评估。方法收集ICU进行机械通气患者的肺泡灌洗液,按建议标准诊断分组,其中发生VAP... 详细信息

目的研究多学科协作诊疗(MDT)下重症医学科(ICU)呼吸机相关性肺炎(VAP)患者肺泡灌洗液中白细胞介素-32(IL-32)、降钙素原(PCT)的表达水平及其临床价值的评估。方法收集ICU进行机械通气患者的肺泡灌洗液,按建议标准诊断分组,其中发生VAP患者30例(VAP组),不发生VAP患者30例(N-VAP组)。采用酶联免疫吸附法测定ICU接受机械通气48 h以上、临床诊断当天VAP组30例及NVAP组30例患者的肺泡灌洗液中IL-32、PCT的浓度。结果 VAP组肺泡灌洗液中IL-32[(26.78±5.32)ng/L]、PCT表达水平[(7.18±0.91)μg/L]显著高于N-VAP组[(15.24±1.28)ng/L、(0.41±0.001)μg/L](P<0.01)。结论 MDT模式下的ICU接受机械通气48 h以上的患者肺泡灌洗液中IL-32、PCT的表达水平可作为VAP早期诊断的标志物,有利于患者早期治疗,值得临床选用。

关键词：呼吸机相关性肺炎肺泡灌洗液 IL-32 降钙素原

ICU老年重症患者呼吸机相关肺炎的治疗现状及研究进展

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世界最新医学信息文摘 2019年第34期19卷 21-22+24页

作者：刘凤鸣覃慧婵谢馥懋陈远鹏南宁市第一人民医院重症医学科

呼吸机相关性肺炎(VAP)是机械通气患者最常见的一种并发症,具有发病率高、住院时间长、病死率高、治疗费用昂贵等特点。老年患者因其生理机能日渐衰退,机体免疫力下降,其VAP发生率更高,病情更为严重,严重威胁着老年患者安全健康。目前... 详细信息

呼吸机相关性肺炎(VAP)是机械通气患者最常见的一种并发症,具有发病率高、住院时间长、病死率高、治疗费用昂贵等特点。老年患者因其生理机能日渐衰退,机体免疫力下降,其VAP发生率更高,病情更为严重,严重威胁着老年患者安全健康。目前越来越多的研究证实早期诊断及治疗有助于改善VAP患者预后,但总体来说,VAP的防治目前仍存在一定的困难。因此,作者就VAP防治现状及研究进展做一综述。

关键词：老年重症医学呼吸机相关肺炎治疗现状