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宫腹腔镜联合诊治宫内妊娠合并子宫肌壁间妊娠1例

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中国实用妇科与产科杂志 2019年第2期35卷 251-253页

作者：申平覃庆锋贵州省人民医院妇科贵州贵阳550002

子宫肌壁间妊娠(IMP)为罕见病,发生率约为1∶30 000次妊娠[1],而合并宫内妊娠则鲜有报道。但随着人工流产、剖宫产增多及宫内操作机会增加,其发生率也逐渐上升。肌壁间妊娠存活病例极其罕见[2],多数孕周不超过12周即出现子宫破裂等严重... 详细信息

子宫肌壁间妊娠(IMP)为罕见病,发生率约为1∶30 000次妊娠[1],而合并宫内妊娠则鲜有报道。但随着人工流产、剖宫产增多及宫内操作机会增加,其发生率也逐渐上升。肌壁间妊娠存活病例极其罕见[2],多数孕周不超过12周即出现子宫破裂等严重后果,临床常误诊为妊娠滋养细胞疾病、妊娠物残留、宫角妊娠、子宫肌瘤[3]。患者接受错误的治疗,例如化疗或反复清宫.

关键词：肌壁间妊娠宫腔镜腹腔镜

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毛白杨巯基蛋白酶抑制剂基因克隆研究

毛白杨巯基蛋白酶抑制剂基因克隆研究

作者：覃庆锋北京林业大学

学位级别：硕士

基因控制技术是森林有害生物可持续控制策略实现的技术体系之一,发现自主产权的功能基因资源可以为我国森林保护工作者更好地利用这一控制技术打下良好的基础。巯基蛋白酶抑制剂(cysteine proteinase inhibitor(cystatin),CPI)是一类广... 详细信息

基因控制技术是森林有害生物可持续控制策略实现的技术体系之一,发现自主产权的功能基因资源可以为我国森林保护工作者更好地利用这一控制技术打下良好的基础。巯基蛋白酶抑制剂(cysteine proteinase inhibitor(cystatin),CPI)是一类广泛存在于动植物和微生物体内的蛋白超家族。根据它的蛋白特性植物CPI已经被归入一个新的CPI家族(Phytocystatin)。由于CPI可以通过抑制昆虫中肠中作为消化酶的巯基蛋白水解酶作用达到杀虫目的,它作为一种重要的抗虫因子已经被广泛用于转基因工程。本研究主要在毛白杨CPI基因的克隆、测序、鉴定以及其基因序列分析方面开展了一些工作。取得的初步成果有: 1.根据生物信息学相关原理,通过分析软件,获得毛白杨CPI的氨基酸保守序列区段,根据此保守区段首先设计合成了用于CPI保守序列区段扩增的正向及反向简并引物,通过对毛白杨形成层RNA的特异RT-PCR扩增,获得大小为165bp的单一片段条带,鉴定为毛白杨CPI基因的保守序列区段。 2.利用RT-PCR技术从毛白杨形成层提取的RNA中扩增出一个大小为696bp的的单一片段条带。将其克隆到pGEM-T Easy载体上,获得了重组质粒。通过对该重组质粒进行PCR扩增鉴定以及序列测序分析,证明插入到载体上的片段即是毛白杨CPI基因cDNA序列片段,包含完整的开放阅读框(ORF)。 3.通过相同的引物利用PCR技术从毛白杨形成层提取的基因组DNA中扩增出一个大小为1950bp的单一片段条带,将其克隆到pGEM-T Easy载体上,通过对该重组质粒进行了PCR扩增以及测序分析,证明插入到载体上的片段即是毛白杨CPI基因DNA片段。通过和毛白杨CPI基因cDNA片段的比较进行基因分析,获得基因编码区中内含子和外显子具体定位。

关键词：巯基蛋白酶抑制剂(CPI) 毛白杨 RI-PCR

长江流域防护林体系工程建设30年回顾与展望

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中国水土保持科学 2018年第5期16卷 145-152页

作者：覃庆锋陈晨曾宪芷贺佳飞国家林业和草原局造林绿化管理司北京100714 北京市共青林场北京101300

通过对长江流域防护林体系工程建设30年历程的回顾,明晰我国针对大江大河的流域性工程治理的发展脉络,总结植树造林等生物措施防治水土流失的技术体系和综合治理模式,将取得的成功经验和典范成果推广至其他地区,并展望我国流域性防护林... 详细信息

通过对长江流域防护林体系工程建设30年历程的回顾,明晰我国针对大江大河的流域性工程治理的发展脉络,总结植树造林等生物措施防治水土流失的技术体系和综合治理模式,将取得的成功经验和典范成果推广至其他地区,并展望我国流域性防护林建设的未来发展方向。长江流域防护林体系工程建设以生物措施治理水土流失为主要方式,在长江全流域大力推进生态建设,增加绿色资源,扩大生态容量,取得了十分明显的生态、经济和社会效益。同时存在工程建设难度越来越大、工程建设投资支持力度不够、投资项目过少等问题。未来长江流域仍有大面积可造林地需要绿化,工程建设任务还很重,工程建设空间还很大,流域生态治理仍然任重道远。

关键词：防护林工程建设长江流域

同时性子宫内膜和卵巢癌与子宫内膜癌卵巢转移的临床对比分析

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大家健康(学术版) 2013年第22期 5-5页

作者：覃庆锋贵州省人民医院妇科

目的:对同时性子宫内膜和卵巢癌以及子宫内膜癌卵巢转移之间的临床治疗情况进行分析和探讨。方法:随机选择同时性子宫内膜和卵巢癌患者(A组)和子宫内膜癌卵巢转移患者(B组)各30例,并就他们的临床诊断治疗情况进行统计、对比和分析。结果... 详细信息

目的:对同时性子宫内膜和卵巢癌以及子宫内膜癌卵巢转移之间的临床治疗情况进行分析和探讨。方法:随机选择同时性子宫内膜和卵巢癌患者(A组)和子宫内膜癌卵巢转移患者(B组)各30例,并就他们的临床诊断治疗情况进行统计、对比和分析。结果:比较显示,两组患者在患病年龄、首发症状、血清CA125、卵巢与子宫病理类型方面都具有统计学意义(P<0.05)。其中,双癌病症主要病发于55岁以下的群体(76.67%),转移病症则主要发生在55岁以上的人群(76.67%);首发病症中,双癌病症主要表现为盆腔发生包块(76.67%),而转移病症则主要是阴道异常出血(100.0%);在血清CA125中,双癌病症主要为≥200(53.33%),转移病症则主要是<200(100.0%);病理类型中,双癌病症主要是病理不同(53.33%),而转移病症则主要是病理相同(100.0%)。经过手术治疗以及相应辅助治疗,双癌患者的术后治疗效果以及生存时间要明显的优于转移组,比较存在统计学意义(P<0.05)。结论:在生存期和预后方面,同时性子宫内膜和卵巢癌要优于子宫内膜癌卵巢转移。

关键词：子宫内膜癌同时性卵巢癌卵巢转移临床分析

紫草素通过Keap1/Nrf2信号通路介导的自噬对卵巢癌SK-OV-3细胞的影响

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中药新药与临床药理 2023年第8期34卷 1053-1060页

作者：方堃邱芳丁娅妮邓丹妮覃庆锋贵州省人民医院妇科贵州贵阳550002

目的探讨紫草素通过Keap1/Nrf2信号通路介导的自噬对卵巢癌SK-OV-3细胞的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖情况,计算顺铂、紫草素及在紫草素作用下顺铂的半数抑制浓度(IC50),以确定后续干预浓度。采用pcDNA3-EGFP-C4-Nrf2质粒及其阴性... 详细信息

目的探讨紫草素通过Keap1/Nrf2信号通路介导的自噬对卵巢癌SK-OV-3细胞的影响。方法采用MTT法检测细胞增殖情况,计算顺铂、紫草素及在紫草素作用下顺铂的半数抑制浓度(IC50),以确定后续干预浓度。采用pcDNA3-EGFP-C4-Nrf2质粒及其阴性对照对SK-OV-3细胞进行转染,分别记为OE-Nrf2组、NC-Nrf2组。将SK-OV-3细胞分为对照组、顺铂(14μmol·L^(-1))组、顺铂(14μmol·L^(-1))+紫草素(9μmol·L^(-1))组,以及将转染后细胞分为顺铂(14μmol·L^(-1))+紫草素(9μmol·L^(-1))+NC-Nrf2组、顺铂(14μmol·L^(-1))+紫草素(9μmol·L^(-1))+OE-Nrf2组;培养48 h后,采用MTT法检测细胞的增殖抑制情况;RT-qPCR法检测细胞Nrf2mRNA表达情况;Transwell实验检测细胞侵袭能力;AO染色法检测细胞自噬情况;Western Blot法检测细胞增殖、侵袭及自噬相关蛋白(CyclinD1、PCNA、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Beclin-1、LC3II/I、ULK、Keap1、Nrf2、p62)表达情况。结果(1)与对照组比较,紫草素4~20μmol·L^(-1)浓度组的SK-OV-3细胞活力明显降低(P<0.05),紫草素对SK-OV-3细胞的IC50为9.04μmol·L^(-1);单用顺铂10~80μmol·L^(-1)浓度组及紫草素(9μmol·L^(-1))+顺铂10~80μmol·L^(-1)浓度组的SK-OV-3细胞活力均明显降低(P<0.05)。与单用顺铂组比较,紫草素(9μmol·L^(-1))+顺铂10~80μmol·L^(-1)浓度组的SK-OV-3细胞活力均明显降低(P<0.05)。单用顺铂对SK-OV-3细胞的IC50为28.49μmol·L^(-1);与紫草素(9μmol·L^(-1))联用时,顺铂对SK-OV-3细胞的IC50为14.00μmol·L^(-1)。(2)与NC-Nrf2组比较,OE-Nrf2组SK-OV-3细胞的Nrf2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。与对照组比较,顺铂组SK-OV-3细胞的Nrf2 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),Keap1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);顺铂组、顺铂+紫草素组SK-OV-3细胞的增殖抑制率明显升高(P<0.05),CyclinD1、PCNA蛋白表达明显下调(P<0.05);单个视野细胞侵袭数目及N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);细胞的红色荧光自噬囊泡明显增多,Beclin-1、LC3II/I、ULK1、p62蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。与顺铂组比较,顺铂+紫草素组SK-OV-3细胞的Nrf2 mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Keap1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);细胞的增殖抑制率明显升高(P<0.05),CyclinD1、PCNA蛋白表达明显下调(P<0.05);单个视野细胞侵袭数目及N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);细胞的红色荧光自噬囊泡减少,Beclin-1、LC3II/I、ULK1、p62蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与顺铂+紫草素+NC-Nrf2组比较,顺铂+紫草素+OE-Nrf2组SK-OV-3细胞的增殖抑制率明显降低(P<0.05),CyclinD1、PCNA蛋白表达明显上调(P<0.05);单个视野细胞侵袭数目及N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平明显升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);细胞的红色荧光自噬囊泡增多,Beclin-1、LC3II/I、ULK1、p62蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论紫草素可降低顺铂对卵巢癌SK-OV-3细胞的IC50,提高其对顺铂的敏感性,并抑制其增殖、侵袭能力,可能与其抑制Keap1/Nrf2通路介导的自噬有关。

关键词：卵巢癌 SK-OV-3细胞顺铂紫草素 Keap1/Nrf2通路自噬

毛白杨巯基蛋白酶抑制剂基因cDNA的克隆及序列分析

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北京林业大学学报 2007年第6期29卷 23-28页

作者：张星耀覃庆锋贺伟梁军刘会香中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林生态学与森林保护学重点实验室国家林业局植树造林司北京林业大学林学院山东农业大学植物保护学院

为了发掘我国乡土树种毛白杨巯基蛋白酶抑制剂（CPI）基因资源,该研究在对已知植物巯基蛋白酶抑制剂氨基酸序列保守性和杨树表达序列标签（EST）序列分析的基础上,设计了1对简并引物和1对杨树特异性CPI引物,应用RT-PCR技术在毛白杨形成... 详细信息

为了发掘我国乡土树种毛白杨巯基蛋白酶抑制剂（CPI）基因资源,该研究在对已知植物巯基蛋白酶抑制剂氨基酸序列保守性和杨树表达序列标签（EST）序列分析的基础上,设计了1对简并引物和1对杨树特异性CPI引物,应用RT-PCR技术在毛白杨形成层中扩增出了一个696 bp的cDNA片段,将此片段连接到pGEM-T Easy载体上并测序.结果表明,该片段含有一个417 bp的开放阅读框,编码138个氨基酸残基.进一步对氨基酸序列分析表明,该氨基酸具有典型植物巯基蛋白酶抑制剂的保守区段,即靠近氨基端具有甘氨酸（G）残基和[LVI]-[AGT]-[RKE]-[FY]-[AS]-[VI]-x-[EDQV]-[HYFQ]序列,羧基端具有与酶活性有关的QXVXG结构和PW残基,说明毛白杨形成层中存在CPI基因并能够有效表达.氨基酸序列同源性分析表明,该基因与其他林木CPI的同源性在47%～68%之间.

关键词：毛白杨巯基蛋白酶抑制剂 cDNA 克隆序列分析

筑牢重点区域生态安全屏障——“长、珠、海、太、平”防护林工程建设综述

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国土绿化 2016年第1期 36-39页

作者：刘道平曾宪芷覃庆锋国家林业局造林绿化管理司

长江流域、珠江流域、沿海防护林体系以及太行山、平原绿化建设工程是针对我国重点区域设立的国家级防护林建设工程,更是林业生态建设与修复的重要组成部分,对构筑我国＂江、河、山、海、原＂重点地域生态安全屏障,改善生态环境,促进城... 详细信息

长江流域、珠江流域、沿海防护林体系以及太行山、平原绿化建设工程是针对我国重点区域设立的国家级防护林建设工程,更是林业生态建设与修复的重要组成部分,对构筑我国＂江、河、山、海、原＂重点地域生态安全屏障,改善生态环境,促进城乡经济社会协调发展具有重大战略意义。＂长、珠、海、太、平＂五项工程分别启动实施于上世纪80年代末90年代初,先后经历了试点示范、一期、二期、三期工程建设。

关键词：防护林工程安全屏障区域生态沿海防护林体系综述林业生态建设三期工程建设建设工程

低危型妊娠滋养细胞肿瘤患者化疗后再次妊娠影响因素分析

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名医 2023年第2期 18-20页

作者：方堃覃庆锋邱芳丁娅妮邓丹妮贵州省人民医院

目的：调查低危型妊娠滋养细胞肿瘤患者经化疗治疗痊愈后再次妊娠的影响因素。方法：选取本院2009年1月至2016年12月行单药化疗治愈的62例低危型妊娠滋养细胞肿瘤患者为研究对象，将患者按照化疗后妊娠情况分成妊娠组29例（宫内妊娠、... 详细信息

目的：调查低危型妊娠滋养细胞肿瘤患者经化疗治疗痊愈后再次妊娠的影响因素。方法：选取本院2009年1月至2016年12月行单药化疗治愈的62例低危型妊娠滋养细胞肿瘤患者为研究对象，将患者按照化疗后妊娠情况分成妊娠组29例（宫内妊娠、输卵管异位妊娠）和未妊娠组33例（未妊娠或再次滋养细胞疾病），比较两组患者病史特点、治疗关键点，并对影响低危型妊娠滋养细胞肿瘤单药化疗后再次妊娠因素进行Logistic回归分析。结果：在62例患者中，29例在化疗后随访期间妊娠成功，其中27例宫内妊娠，2例输卵管异位妊娠；33例未妊娠，其中1例再次发生葡萄胎。通过多因素Logistic回归分析，妊娠组较未妊娠组年轻（P6次均是妊娠滋养细胞肿瘤患者化疗后妊娠的独立危险因素（P6次均会降低患者妊娠率。

关键词：妊娠滋养细胞肿瘤化疗妊娠

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当归四逆汤治疗寒湿凝滞型痛经40例

中国中医药现代远程教育 2017年第10期15卷 91-93页

作者：卞莹张喆覃庆锋贵州省贵阳护理职业学院医疗服务中心贵阳550081 贵州省人民医院妇科贵阳550002

目的观察当归四逆汤治疗寒湿凝滞型痛经的疗效。方法随机将76例原发性痛经患者分成治疗组(40例)和对照组(36例)。治疗组给予当归四逆汤治疗,对照组给予颠茄片口服治疗,2组均治疗3个月经周期后评定疗效。结果治疗组总有效率90%,对照组总... 详细信息

目的观察当归四逆汤治疗寒湿凝滞型痛经的疗效。方法随机将76例原发性痛经患者分成治疗组(40例)和对照组(36例)。治疗组给予当归四逆汤治疗,对照组给予颠茄片口服治疗,2组均治疗3个月经周期后评定疗效。结果治疗组总有效率90%,对照组总有效率33.3%。2组疗效相互比较具有显著性差异(P<0.01)。结论当归四逆汤治疗寒湿凝滞型痛经的疗效明显。

关键词：痛经寒湿凝滞型当归四逆汤经方中医药疗法