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柴胡皂苷D对胃癌细胞糖酵解代谢及YAP1/c-Myc表达的影响

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中国老年学杂志 2024年第19期 4717-4722页

作者：朱艳秋刘春宏钱薇张飞刘杰民褚明亮贵州中医药大学第一附属医院检验科贵州中医药大学研究生院贵州省人民医院内镜中心

目的研究柴胡皂苷D对胃癌细胞糖酵解代谢及其肿瘤生物学特性的影响。方法采用不同浓度的柴胡皂苷D(0.0,0.5,1.0,2.0μmol/L)处理胃癌细胞AGS及MGC803;CCK8实验检测药物处理后胃癌细胞的增殖活力、划痕实验检测胃癌细胞迁徙能力、Trans... 详细信息

目的研究柴胡皂苷D对胃癌细胞糖酵解代谢及其肿瘤生物学特性的影响。方法采用不同浓度的柴胡皂苷D(0.0,0.5,1.0,2.0μmol/L)处理胃癌细胞AGS及MGC803;CCK8实验检测药物处理后胃癌细胞的增殖活力、划痕实验检测胃癌细胞迁徙能力、Transwell实验检测胃癌细胞侵袭能力；采用乳酸试剂盒检测胃癌细胞糖酵解代谢终产物乳酸的代谢水平；通过GEPIA在线分析TCGA和GTEx数据库中原癌基因(YAP1、c-Myc)在胃癌中表达；Western印迹检测胃癌细胞YAP1、c-Myc蛋白表达。结果柴胡皂苷D显著抑制胃癌细胞AGS及MGC803增殖、迁移及侵袭(均P<0.05);显著抑制胃癌细胞糖酵解代谢终产物乳酸的生成水平(P<0.05)。生物信息数据库统计显示，YAP1、c-Myc在胃癌组织中表达显著高于胃正常组织(均P<0.05),柴胡皂苷D显著抑制AGS及MGC803中YAP1、c-Myc蛋白表达(均P<0.05)。结论柴胡皂苷D能够抑制胃癌细胞部分肿瘤生物学表型，其机制可能与其抑制了胃癌细胞糖酵解代谢及癌基因YAP1、c-Myc蛋白表达相关。

关键词：柴胡皂苷D 胃癌细胞糖酵解代谢原癌基因YAP1 原癌基因c-Myc

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肿瘤细胞氨基酸代谢的研究进展

中国当代医药 2024年第6期31卷 189-192页

作者：钟旺佶褚明亮刘杰民贵州中医药大学研究生院贵州贵阳550025 贵州中医药大学第一附属医院检验科贵州贵阳550001 贵州省人民医院消化内镜科贵州贵阳550002

能量代谢重编程是肿瘤细胞最显著的特征之一,其赋予了肿瘤细胞快速增殖的能力,主要体现在“三大营养物质”,即葡萄糖、氨基酸及脂肪酸的代谢异常。其中,氨基酸作为细胞内部仅次于葡萄糖的营养和能量来源,是蛋白质合成的底物。丰富的氨... 详细信息

能量代谢重编程是肿瘤细胞最显著的特征之一,其赋予了肿瘤细胞快速增殖的能力,主要体现在“三大营养物质”,即葡萄糖、氨基酸及脂肪酸的代谢异常。其中,氨基酸作为细胞内部仅次于葡萄糖的营养和能量来源,是蛋白质合成的底物。丰富的氨基酸供应为肿瘤的快速增殖提供了持续的动力。氨基酸异常代谢过程中的部分关键物质影响着肿瘤细胞的发生发展,参与了癌基因激活、免疫逃逸和相关蛋白表达等多个方面,在临床中也被作为肿瘤诊断和治疗的标志物之一,而肿瘤细胞对不同氨基酸的依赖偏重各有不同,在特定氨基酸缺乏的肿瘤中尤为明显。因此,特定氨基酸缺失或对肿瘤的发生、发展和治疗、预后具有重要影响。本文围绕近年氨基酸代谢重编程在肿瘤发生发展中的进展作一综述,以期为抗癌的后续科学研究及肿瘤临床诊断、治疗与预后提供新思路。

关键词：肿瘤氨基酸代谢研究进展综述

大黄素抑制胃癌AGS细胞YAP1、FOXD1基因表达及相关机制

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实用医学杂志 2024年第1期40卷 59-64,71页

作者：顾天刘春宏张飞钱薇朱艳秋褚明亮刘杰民贵州中医药大学第一附属医院检验科贵阳550001 贵州中医药大学第一附属医院研究生院贵阳550002 贵州省人民医院内镜中心贵阳550002

目的探讨大黄素抑制胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭及癌基因YAP1、FOXD1基因表达的可能机制。方法培养胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS,使用不同浓度大黄素进行干预。通过CCK8实验、划痕实验、Transwell小室实验验证大黄素处理后AGS细... 详细信息

目的探讨大黄素抑制胃癌AGS细胞增殖、迁移、侵袭及癌基因YAP1、FOXD1基因表达的可能机制。方法培养胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS,使用不同浓度大黄素进行干预。通过CCK8实验、划痕实验、Transwell小室实验验证大黄素处理后AGS细胞的生物学表型变化。使用在线软件分析TCGA数据库中糖酵解代谢关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1在胃癌组织及正常组织中的表达情况。印迹法验证大黄素对AGS中糖酵解代谢关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1蛋白的影响变化。添加外源性糖酵解代谢产物丙酮酸,增强糖酵解代谢活性,验证癌基因YAP1和FOXD1的相应变化。结果胃正常上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS在不同浓度大黄素干预后,发现GES-1的大黄素半数致死量浓度明显高于AGS(P<0.05)。进一步的CCK8增殖实验、划痕实验、Transwell小室实验结果均发现大黄素可以明显抑制AGS的增殖、迁移、侵袭等肿瘤生物学能力(P<0.05)。TCGA生物信息数据库分析发现糖酵解途径关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1在胃癌组织中的表达明显高于胃正常组织的表达(P<0.05)。大黄素可以明显抑制糖酵解关键酶HK2和癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达(P<0.05)。补充外源性糖酵解代谢产物丙酮酸后,癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论大黄素对胃癌AGS细胞有显著的药理抑制作用,可以明显抑制其肿瘤生物学表型。大黄素在显著抑制糖酵解代谢关键酶HK2的同时,也显著抑制癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达。当添加外源性丙酮酸增强糖酵解代谢通路后,癌基因YAP1、FOXD1的蛋白表达显著升高。以上提示YAP1、FOXD1和糖酵解代谢的密切相关性,大黄素可能通过抑制胃癌AGS细胞糖酵解代谢,抑制癌基因YAP1和FOXD1。

关键词：大黄素胃癌 HK2 YAP1 FOXD1 糖酵解代谢

奶牛乳房炎链球菌的分离鉴定及抗原基因的克隆和表达

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奶牛乳房炎链球菌的分离鉴定及抗原基因的克隆和表达

作者：褚明亮石河子大学

学位级别：硕士

奶牛乳房炎是由各种病因引起的乳房炎症,它造成的经济损失非常巨大。尽管各国兽医工作者多年来对该病的预防与治疗研究付出了极大的努力,但仍无满意的结果,至今仍以抗生素治疗为主。由于抗生素残留和耐药菌株的出现造成奶品质下降和治... 详细信息

奶牛乳房炎是由各种病因引起的乳房炎症,它造成的经济损失非常巨大。尽管各国兽医工作者多年来对该病的预防与治疗研究付出了极大的努力,但仍无满意的结果,至今仍以抗生素治疗为主。由于抗生素残留和耐药菌株的出现造成奶品质下降和治疗困难,所以迫切需要研究新的预防与治疗方法。病原学调查表明,无乳链球菌、停乳链球菌和乳房链球菌是奶牛乳房炎的常见病原菌,但有关疫苗却少见报道且效果不理想,部分原因是因为链球菌血清型多缺乏共同保守性抗原。近几年,链球菌的一些保守性抗原被陆续发现,分别是停乳链球菌的MIG基因,无乳链球菌的SIP基因和无乳链球菌、停乳链球菌和乳房链球菌的GAPC基因,并认为它们可作为基因工程疫苗的候选抗原基因。本文克隆并表达了这些保守性抗原基因,为开发链球菌基因工程疫苗奠定基础。方法:本实验首先运用THB(Todd-Hewitt Broth)固体选择性培养基和色素试验培养基快速分离无乳链球菌和乳房链球菌,并结合生物梅里埃开发的VITEK全自动细菌鉴定仪进行准确鉴定。然后用PCR的方法分别从停乳链球菌、无乳链球菌和乳房链球菌的基因组DNA中扩增出MIG、SIP和各自的GAPC基因,并构建原核表达载体pET32a(+)-MIG、pET32a(+)-SIP和各自的pET32a(+)-GAPC。用BL21(DE3)/pET系统表达Trix-MIG、Trix-SIP和各自的Trix-GAPC融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果:(1)分离鉴定到一株无乳链球菌和一株乳房链球菌。(2)PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中MIG基因(AF354651)、和SIP基困(DQ650634)和无乳链球菌(CP000114)/停乳链球菌(AF375662)/乳房链球菌(AF421900)的GAPC基因序列同源性都在99%左右。SDS-PAGE显示,MIG、SIP和GAPC融合蛋白分别为89kDa、71kDa和55kDa。Western blot分析显示,MIG、SIP和GAPC融合蛋白可分别与停乳链球菌、无乳链球菌和乳房链球菌的多克隆抗血清发生特异性反应。结论:成功分离到一株无乳链球菌和一株乳房链球菌并克隆和表达了停乳链球菌MIG基因、无乳链球菌SIP基因和无乳链球菌/停乳链球菌/乳房链球菌GAPC基因,为基因工程疫苗的研制奠定一定的基础。

关键词：奶牛乳房炎链球菌抗原基因克隆与表达免疫蛋白印迹

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病理骨组织脱钙时间对结核PCR的影响

临床与实验病理学杂志 2018年第7期34卷 805-806页

作者：涂贵兰褚明亮易韦何常贵州医科大学附属人民医院病理科贵阳550002 贵州医科大学附属医院病理科贵阳550004

结核分枝杆菌可侵入机体的各个器官，骨关节结核是由于结核分枝杆菌侵入骨、关节、滑膜和脊柱引起的，大多发生在脊椎和关节。本文收集73例经临床诊断为结核的手术或穿刺活检病理骨组织标本（剔除干酪坏死、肉芽组织不需脱钙处理的病灶... 详细信息

结核分枝杆菌可侵入机体的各个器官，骨关节结核是由于结核分枝杆菌侵入骨、关节、滑膜和脊柱引起的，大多发生在脊椎和关节。本文收集73例经临床诊断为结核的手术或穿刺活检病理骨组织标本（剔除干酪坏死、肉芽组织不需脱钙处理的病灶组织）用不同脱钙时间处理后，采用结核PCR检测，分析阳性率，为寻找合适的病理骨组织脱钙时间提供依据。

关键词：骨组织脱钙时间结核PCR

盐酸化伊红溶液在病理小标本包埋操作中的应用

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临床与实验病理学杂志 2016年第7期32卷 829-830页

作者：曹莉王礼鑫曹颖褚明亮贵州省水城矿业集团总医院病理科六盘水553001 贵州省人民医院病理科贵阳550002 金湖县人民医院病理科金湖211600

病理科H常工作中经常会遇到各种小标本，如内镜活检及穿刺活检组织的病理标本制作。由于标本体积小，经过脱水处理后体积更小，易遗漏给后期病理标本制作带来一定的困难，目前取材时多采用小标本伊红滴染法，使组织在包埋过程中易于识... 详细信息

病理科H常工作中经常会遇到各种小标本，如内镜活检及穿刺活检组织的病理标本制作。由于标本体积小，经过脱水处理后体积更小，易遗漏给后期病理标本制作带来一定的困难，目前取材时多采用小标本伊红滴染法，使组织在包埋过程中易于识别，提高包埋速度和质量。作者在实际工作中发现，水溶性和醇溶性伊红滴染小标本脱水后仍出现着色过淡现象，这给小组织包埋和后续切片带来一定的影响。作者参照胥维勇等方法，配置盐酸化伊红溶液滴染小组织，获得理想效果，现介绍如下。

关键词：盐酸化伊红小标本包埋

CD146、IgM、尿酸及肌酐在不同性别原发性IgA肾病患者中的差异表达及意义

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实用医学杂志 2016年第10期32卷 1644-1646页

作者：易韦谢欣褚明亮沈和德查艳贵州省人民医院(贵州医科大学附属人民医院)病理科贵阳市550002

目的:探讨不同性别成人原发性IgA肾病临床病理指标的差异性。方法:应用免疫组化法检测143例IgA肾病肾穿刺活检组织中白细胞分化抗原146(CD146)的表达情况,并按照不同性别收集发病年龄、24 h尿蛋白、肌酐、尿酸、血清白蛋白、胆固醇、甘... 详细信息

目的:探讨不同性别成人原发性IgA肾病临床病理指标的差异性。方法:应用免疫组化法检测143例IgA肾病肾穿刺活检组织中白细胞分化抗原146(CD146)的表达情况,并按照不同性别收集发病年龄、24 h尿蛋白、肌酐、尿酸、血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯、IgA、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、补体3(C3)、补体4(C4)等临床指标。结果 :不同性别原发性IgA肾病患者的发病年龄、24 h尿蛋白、血清白蛋白、胆固醇、甘油三酯、IgA、IgG、C3、C4蛋白水平差异无统计学意义(均P>0.05);男性患者的肌酐和尿酸水平明显高于女性(t=-3.31,P0.05)。结论:不同性别IgA肾病患者临床病理指标差异的多样性,提示我们在临床中需要去考虑性别因素在原发性IgA肾病中的影响。

关键词： CD146 IgM 尿酸肌酐 IgA肾病性别

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奶样中无乳链球菌和乳房链球菌的分离与鉴定

黑龙江畜牧兽医 2009年第9期 86-88页

作者：邵雪花陈创夫乔军褚明亮石河子大学动物科技学院新疆地方与民族高发病省部共建教育部重点实验室新疆石河子832003 石河子大学生命科学学院

奶牛乳房炎是奶牛最常见的疾病之一.该病主要由细菌引起,在牛群中广泛存在,其中无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)和乳房链球菌(Streptococcus uberis)是奶牛乳房炎主要的致病性链球菌.试... 详细信息

奶牛乳房炎是奶牛最常见的疾病之一.该病主要由细菌引起,在牛群中广泛存在,其中无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)、停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)和乳房链球菌(Streptococcus uberis)是奶牛乳房炎主要的致病性链球菌.试验采用THB(Todd-Hewitt Broth)固体选择性培养基和色素试验培养基快速分离无乳链球菌和乳房链球菌,并结合生物梅里埃开发的VITEK全自动细菌鉴定仪进行准确鉴定,从而建立一种从奶样中快速分离无乳链球菌和乳房链球菌的常规方法.

关键词：乳房链球菌无乳链球菌快速分离鉴定仪选择性培养基奶牛乳房炎奶样致病性

乳腺癌组织学特征与其FISH检测中酶消化时间的相关研究

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基因组学与应用生物学 2021年第11期40卷 3818-3823页

作者：褚明亮胡建军侯净张学贵州中医药大学第一附属医院检验科贵阳550001 贵州省人民医院病理科贵阳550002 贵州省人民医院乳腺外科贵阳550002

乳腺癌荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测中酶的消化时间似乎受到组织学特征的影响,但具体的相关规律尚不清楚,也未见报道。因此本研究回顾了2015年12月至2017年10月,贵州省人民医院病理科的乳腺癌FISH检测标... 详细信息

乳腺癌荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测中酶的消化时间似乎受到组织学特征的影响,但具体的相关规律尚不清楚,也未见报道。因此本研究回顾了2015年12月至2017年10月,贵州省人民医院病理科的乳腺癌FISH检测标本。每例标本都应用胃蛋白酶进行15、30、50 min消化,然后根据其消化程度评估出最佳消化时间。所有标本的组织学特征均按照1997年舟山乳腺病理学会议的共识进行再分类。发现如下规律:伴髓样特征类型的癌,最佳消化时间较短(15 min);而具有硬癌特征类型的癌,最佳消化时间较长(50 min);伴有其余特征类型的癌,包括一般型腺癌、单纯癌和小叶癌,最佳消化时间居中(30 min)。因此,在进行FISH检测中,组织学特征可以作为确定酶消化时间的一个参考。

关键词：荧光原位杂交乳腺癌组织学特征酶消化时间