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番茄枯萎病抗性砧木筛选及嫁接抗病机理研究

番茄枯萎病抗性砧木筛选及嫁接抗病机理研究

作者：褚新培河北农业大学

学位级别：硕士

番茄(Solanum lycopersicum L.)是茄科番茄属的一年生或多年生草本植物,随着设施栽培时间的延长,番茄枯萎病发生情况呈逐年上升趋势,而嫁接作为一种有效缓解土传病害的农艺技术被广泛用于瓜类及茄果类蔬菜的生产,但砧木的抗性存在差异,... 详细信息

番茄(Solanum lycopersicum L.)是茄科番茄属的一年生或多年生草本植物,随着设施栽培时间的延长,番茄枯萎病发生情况呈逐年上升趋势,而嫁接作为一种有效缓解土传病害的农艺技术被广泛用于瓜类及茄果类蔬菜的生产,但砧木的抗性存在差异,因此,筛选枯萎病抗性品种,明确与枯萎病抗性相关的代谢指标及嫁接番茄枯萎病抗性机理,对番茄的栽培和生产有着重要的理论和实践意义。本试验从番茄栽培面积较大的定兴(D菌株)和肥乡(F菌株)地区采集得到的枯萎病病株上分离纯化病菌,通过形态学和分子生物学等方法对病原菌进行鉴定,并把得到的D菌株和F菌株用浸根法接种到10个番茄砧木品种上,进行抗病性评价;以筛选获得的3个抗病砧木品种和3个感病栽培品种为试验材料,采用浸根法接种D菌株和F菌株,探究不同抗性品种在接种枯萎病不同菌株后植株抗性差异以及叶片活性氧代谢和苯丙烷代谢途径的变化规律,以得出番茄枯萎病抗性的相关指标;以抗性品种TMS150(R)和感病品种FUYOUⅡ(S)为试验材料,设置4个不同的嫁接组合,采用浸根法接种F菌株,明确接菌后嫁接植株抗性以及叶片中活性氧代谢和苯丙烷代谢途径的变化规律,探讨嫁接番茄枯萎病抗病机理。主要结果如下:(1)采用形态学和分子生物学方法鉴定分离得到的病菌,得出从定兴和肥乡分离到的菌株均为尖孢镰刀菌,采用尖孢镰刀菌生理小种特异性引物进行PCR扩增,证明定兴(D)和肥乡(F)两地从病菌都为尖孢镰刀菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f.***.lycopersici)生理小种3,并筛选得到了 3个高抗砧木品种,7个一般抗性砧木品种。(2)对3个抗病砧木品种和3个感病品种接种D、F病菌后,通过统计病情指数,测定活性氧代谢途径和苯丙烷代谢途径的相关指标,筛选得到了番茄枯萎病抗性相关的指标。研究表明,砧木品种枯萎病抗性均显著高于栽培品种;接种D、F枯萎病菌后,感病品种叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性虽有所降低,但不同品种与对照处理相比变化均不显著;感病品种过氧化物酶(POD)活性显著高于抗病品种,但抗病品种过氧化氢酶(CAT)活性显著高于感病品种;抗病品种超氧阴离子(O2·-)产生速率和过氧化氢(H2O2)含量有短暂升高又很快调整到正常水平,感病品种的速率和含量在后期依然较大;苯丙烷代谢途径中苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性和总酚、类黄酮含量接菌后各品种都无显著差异,但感病品种多酚氧化酶(PPO)活性显著高于抗病品种,木质素含量低于抗病品种。由此说明番茄砧木品种抗枯萎病能力均显著高于栽培品种,且抗性强弱与活性氧代谢途径和苯丙烷代谢途径密切相关,其中CAT活性、O2·-生速率、H2O2含量、PPO活性、木质素含量可作为抗性评价的关键指标。(3)以抗病性和感病性最为稳定的TMS150(R)和FUYOU Ⅱ(S)品种,设置不同嫁接组合(S/R、R/S、S/S、R/R),并接种病菌后,通过统计病情指数,测定活性氧代谢途径和苯丙烷代谢途径的相关指标,及徒手切片的观察,得出了嫁接番茄枯萎病抗性机理。结果得到,嫁接组合中以抗病品种为砧木的组合病情指数小于以感病品种为砧木的组合,抗性大小为R/R>S/R>R/S>S/S。各个嫁接组合叶片SOD活性与对照处理相比均无显著性变化;感病品种自嫁接组合POD活性高于正常嫁接组合,以抗病品种为砧木的嫁接组合CAT活性显著高于感病品种自嫁接;正常嫁接组合O2·-产生速率和H2O2含量有短暂升高又很快调整到正常水平,感病品种自嫁接的速率和含量在后期依然较大;苯丙烷代谢途径中除木质素含量外,其他指标与嫁接抗病性无明显联系。因此得到,嫁接后植株通过提高CAT活性,降低O2·-产生速率及H2O2含量,提高木质素含量来抵抗病原菌侵染,提高嫁接植株的枯萎病抗性。综上所述,从定兴和肥乡分离得到的病菌为尖孢镰刀菌番茄专化型生理小种3,并得到了 3个高抗砧木和7个抗性砧木,不同抗性番茄品种接菌后生理代谢变化存在差异,其中CAT活性、O2·-产生速率、H2O2含量、PPO活性、木质素含量5个指标在抗、感品种中存在显著差异,可作为番茄枯萎病抗病指标。嫁接显著提高了番茄感病品种的抗病性,抗性大小为R/R>S/R>R/S>S/S,且S/R组合能通过活性氧代谢和苯丙烷代谢途径,提高感病番茄品种抗病性。

关键词：番茄枯萎病抗性砧木指标筛选嫁接抗病机理

儿童免疫性血小板减少症复发危险因素的调查及其预测模型的构建

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基础医学与临床 2024年第1期44卷 84-91页

作者：沈晨涛夏亚林盛烨萍褚培培李建琴苏州市吴江区儿童医院(苏州大学附属儿童医院吴江院区)儿内科江苏苏州215200 苏州大学附属儿童医院血液科江苏苏州215000

目的调查儿童免疫性血小板减少症(ITP)复发情况,并建立其预测模型。方法选择2018年1月至2022年4月苏州市吴江区儿童医院(苏州大学附属儿童医院吴江院区)及苏州大学附属儿童医院接诊的ITP患儿288例进行研究。收集可能影响儿童ITP复发相... 详细信息

目的调查儿童免疫性血小板减少症(ITP)复发情况,并建立其预测模型。方法选择2018年1月至2022年4月苏州市吴江区儿童医院(苏州大学附属儿童医院吴江院区)及苏州大学附属儿童医院接诊的ITP患儿288例进行研究。收集可能影响儿童ITP复发相关因素,将模型组患儿根据有无复发分为2组,比较2组各指标,并以LASSO回归筛选出潜在影响因素后以Logstic回归分析筛选出儿童ITP患者复发的独立性影响因素,采用R语言构建列线图模型并进行验证。结果模型组201例患者中共有37例(18.47%)出现复发,复发组与未复发组患者年龄、血型、治疗前病程、前驱感染、出血情况、初始治疗方案、抗核抗体、初诊血小板计数、初诊平均血小板体积、初诊血小板分布宽度、初诊外周血淋巴细胞计数、治疗后血小板计数升至有效时间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。LASSO回归基础上行多因素Logistic回归分析:血型、治疗前病程、前驱感染、初始治疗方案、初诊外周血淋巴细胞计数、治疗后血小板计数升至有效时间为儿童咳嗽变异性哮喘转为典型哮喘的独立性影响因素。根据多因素分析结果,以R语言建立儿童ITP复发预测列线图模型。接受者操作特征曲线(ROC)分析结果显示,模型组列线图模型预测儿童ITP复发的AUC为0.867[95%CI(0.796,0.938)]灵敏度为84.2%,特异度为73.1%;验证组曲线下面积(AUC)为0.838[95%CI(0.765,0.911)]灵敏度为82.3%,特异度为78.4%。采用Bootstrap法重复抽样1000次,并以验证组进行验证,校准曲线结果显示:模型组与验证组预测曲线与标准曲线基本拟合,提示模型预测准确度较高。模型组决策曲线分析结果显示:当该列线图模型预测儿童ITP复发的概率阈值为0.15~0.75时,患者的净受益率大于0。结论儿童ITP复发主要受患者年龄、血型、治疗前病程等因素的影响,根据上述因素建立的列线图模型用于育儿儿童ITP复发具有较高的准确度与区分度。

关键词：儿童免疫性血小板减少症(ITP) 多因素分析列线图

综合形态与叶片叶绿素含量的番茄壮苗指数筛选

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农业工程学报 2019年第8期35卷 237-244页

作者：宫彬彬王宁章铁军吴晓蕾吕桂云褚新培高洪波河北农业大学园艺学院保定071001 河北农业大学现代教育技术中心保定071001

为建立最佳的番茄秧苗壮苗指数,提高秧苗评判的准确度,该文以四叶一心番茄秧苗为研究对象,在测定11项秧苗指标的基础上,利用模糊综合评判法建立番茄秧苗综合评价指数,使用主成分分析进行指标筛选并组合构成多个番茄壮苗指数,通过综合评... 详细信息

为建立最佳的番茄秧苗壮苗指数,提高秧苗评判的准确度,该文以四叶一心番茄秧苗为研究对象,在测定11项秧苗指标的基础上,利用模糊综合评判法建立番茄秧苗综合评价指数,使用主成分分析进行指标筛选并组合构成多个番茄壮苗指数,通过综合评价指数与壮苗指数的相关分析筛选出适宜的壮苗指数并验证。结果表明:对300株样本进行统计分析,番茄秧苗综合评价指数为0.26～0.79,可全面概括秧苗的整体素质,能客观、准确地评价秧苗健壮程度;通过秧苗单一指标的主成分分析将各指标划分为形态指标、色素指标和株高3个主成分,表明秧苗的质量必须从形态、叶绿素含量和株高这3方面进行评价。从主成分中各选一种指标进行完全随机排列组合成25种壮苗指数,并筛选出与综合评价指数相关性较高且具有代表性的4种壮苗指数;并用3种不同品种番茄秧苗对其进行稳定性验证,其中壮苗指数"(总叶绿素/株高)?全株干质量"与综合评价指数相关性最大为0.797且极显著(P<0.01),稳定性好、代表性强,可作为衡量番茄秧苗素质的推荐壮苗指数。以番茄秧苗的综合评价指数为分级依据,根据推荐壮苗指数将秧苗质量分为3个等级(等级Ⅰ(壮苗指数≥0.065)为优质苗,等级Ⅱ(壮苗指数:0.030～0.065)为合格苗,等级Ⅲ(壮苗指数≤0.030)为弱苗(幼苗或老苗)),各等级间差异显著,可以作为较好的判别指标。该研究表明可为番茄育苗生产提供参考,也可为其他蔬菜秧苗评判提供参考。

关键词：叶绿素形态番茄壮苗指数模糊综合评判主成分分析相关性分析

盐胁迫下番茄砧木对嫁接苗生物量、氨基酸含量和活性氧代谢的影响

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应用生态学报 2020年第9期31卷 3075-3084页

作者：贾邱颖吴晓蕾冀胜鑫褚新培刘慧兰宫彬彬李敬蕊高洪波河北农业大学园艺学院/河北省蔬菜种质创新与利用重点实验室/河北省蔬菜产业协同创新中心河北保定071001

为探讨砧木对提高番茄嫁接苗耐盐性的作用机理,以耐盐性较敏感的‘中杂9号’(S)为接穗,耐盐性较强的‘OZ-006’(R)为砧木,采用劈接法形成嫁接苗(RS)以及接穗自嫁接苗(SS)、砧木自嫁接苗(RR)3个试验材料,在175 mmol·L^(-1 )NaCl处理下... 详细信息

为探讨砧木对提高番茄嫁接苗耐盐性的作用机理,以耐盐性较敏感的‘中杂9号’(S)为接穗,耐盐性较强的‘OZ-006’(R)为砧木,采用劈接法形成嫁接苗(RS)以及接穗自嫁接苗(SS)、砧木自嫁接苗(RR)3个试验材料,在175 mmol·L^(-1 )NaCl处理下测定植株生长、Na^+积累、氨基酸含量和活性氧代谢的变化。结果表明:NaCl胁迫导致番茄幼苗的盐害指数和Na^+含量均显著提高,幼苗生长速率和叶绿素含量显著降低,但不同嫁接苗的类型差异显著,在盐害表型上表现为SS>RS>RR的规律。NaCl胁迫诱导嫁接苗的叶片和根系总氨基酸含量显著提高,其中RR、RS叶片有9种、根系有8种氨基酸含量显著高于对照,以脯氨酸含量变化最为显著,而SS叶片中仅有2种、根系中仅有4种氨基酸含量显著高于对照;幼苗间的氨基酸含量呈现RR>RS>SS的规律,RR、RS叶片的氨基酸含量分别比SS叶片上升了32.8%、16.6%,根系分别比SS上升了53.1%和32.5%。NaCl胁迫造成活性氧代谢的变化,幼苗叶片和根系的抗氧化酶活性、超氧阴离子产生速率、丙二醛含量均显著提高,以RR叶片和根系中抗氧化酶活性的增幅最大,其次为RS;SS和抗氧化酶活性的增幅最小,品种间活性氧水平表现为SS>RS>RR。综上,砧木通过抑制Na^+向上运输、提高氨基酸水平和抗氧化酶活性缓解了盐胁迫对嫁接苗的伤害,但不同砧穗组合的耐盐性差异较大,以RR的耐盐性最强,其次为RS,SS最弱。因此,番茄嫁接苗的耐盐性主要受砧木耐盐性的影响,其次为接穗,同时,其与番茄体内的氨基酸和活性氧代谢调控密切相关。

关键词：番茄砧木嫁接耐盐性 Na^+含量氨基酸含量抗氧化酶活性

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番茄枯萎病菌分离鉴定及嫁接砧木抗病性评价

中国蔬菜 2020年第6期 64-68页

作者：褚新培吕桂云鹿秀云贾邱颖梁垚高洪波河北农业大学园艺学院河北省蔬菜产业协同创新中心河北保定071001 河北省农林科学院植物保护研究所河北保定071000

从河北省番茄栽培面积较大的定兴和肥乡地区枯萎病病株中分离纯化菌株,通过形态学和分子生物学等方法对病原菌进行鉴定,并采用浸根法鉴定了10个番茄砧木的枯萎病抗性。结果表明,从定兴和肥乡分离到的菌株均为尖孢镰孢菌,采用尖孢镰孢菌... 详细信息

从河北省番茄栽培面积较大的定兴和肥乡地区枯萎病病株中分离纯化菌株,通过形态学和分子生物学等方法对病原菌进行鉴定,并采用浸根法鉴定了10个番茄砧木的枯萎病抗性。结果表明,从定兴和肥乡分离到的菌株均为尖孢镰孢菌,采用尖孢镰孢菌生理小种特异性引物进行PCR扩增,证明2个菌株都为尖孢镰孢菌番茄专化型(Fusarium oxysporum f.***.lycopersici)生理小种3;筛选得到了3个枯萎病高抗砧木品种,7个抗病砧木品种。

关键词：番茄枯萎病菌砧木抗病性

γ-氨基丁酸对番茄嫁接苗耐盐性的生理调控效应

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植物营养与肥料学报 2021年第1期27卷 122-134页

作者：贾邱颖吴晓蕾冀胜鑫褚新培赵峰宫彬彬李敬蕊高洪波河北农业大学园艺学院/河北省蔬菜种质创新与利用重点实验室/河北省蔬菜产业协同创新中心河北保定071001

[目的]γ-氨基丁酸(GABA)可增强作物品质和抗逆性,但其效果是否受植株根系耐盐性的影响尚不明确。因此,研究添加外源GABA对不同耐盐性番茄嫁接苗的生理调节机制及生长的影响,为小分子氨基酸在蔬菜生产中的应用提供理论依据。[方法]以耐... 详细信息

[目的]γ-氨基丁酸(GABA)可增强作物品质和抗逆性,但其效果是否受植株根系耐盐性的影响尚不明确。因此,研究添加外源GABA对不同耐盐性番茄嫁接苗的生理调节机制及生长的影响,为小分子氨基酸在蔬菜生产中的应用提供理论依据。[方法]以耐盐性较强的砧用番茄‘OZ-006’为砧木、对盐分较敏感的‘中杂9号’为接穗形成的嫁接苗(RS)为材料,以‘中杂9号’自嫁接苗(SS)为对照材料,进行无土营养液栽培试验。以Hoagland营养液为基础,以调节NaCl浓度至175 mmol/L形成的盐胁迫条件作为对照(CK),在CK基础上设置添加5 mmol/L GABA处理(+G)。从处理后3天起,测定了幼苗生长、Na^(+)积累、氨基酸含量及活性氧代谢指标。[结果]随着NaCl胁迫时间的延长,SS和RS幼苗均显著受到盐胁迫伤害,但RS幼苗盐害指数及Na+含量显著低于SS幼苗,其生长速率、叶绿素含量及氨基酸含量显著高于SS幼苗,其O2·-和MDA含量显著低于SS幼苗,表现为耐盐性显著高于SS幼苗。添加外源GABA后,SS和RS幼苗的鲜重、生长速率、叶绿素及氨基酸(GABA、谷氨酸和脯氨酸)含量、抗氧化酶(SOD、POD和CAT)活性均显著提高,根系和叶片内Na+含量、O2·-产生速率及MDA含量均显著降低,且SS幼苗耐盐性提高的效果大于RS幼苗。[结论]盐胁迫显著影响番茄幼苗的生长,尤其对耐盐性弱的品种生长抑制更加显著。γ-氨基丁酸(GABA)可有效提高番茄嫁接苗的耐盐性,主要原因在于GABA为幼苗提供了氮素营养,促进了盐胁迫下植物的生长和叶绿素的合成,同时GABA诱导细胞内多种氨基酸含量上升,叶片渗透调节能力增强,从而抑制了Na^(+)过量积累,缓解了细胞内活性氧积累带来的膜伤害。此外,GABA添加对耐盐性弱的番茄嫁接苗耐盐性的提升效果比对耐盐性强的番茄嫁接苗更加明显。因此,在盐胁迫条件下,施用外源小分子氨基酸(如GABA)可能是提高作物耐盐能力的有效措施。

关键词： γ-氨基丁酸(GABA) 盐胁迫番茄嫁接 Na^(+)累积氨基酸含量抗氧化酶活性

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妇科癌症术后感染病原体种类及耐药性分析

中国病原生物学杂志 2024年第7期19卷 842-845页

作者：吕佳杨红灵许东阳褚梦倩陈亚敏南阳医学高等专科学校第一附属医院妇科河南南阳473000

目的探索妇科癌症术后感染病原体种类、对抗菌药物的耐药性以及影响感染的独立因子。方法回顾性分析的305例妇科癌症手术患者均在2020年1月至2024年1月期间收集,采集术后感染标本培养,进行病原体分类统计和药敏分析,再经二元Logistic... 详细信息

目的探索妇科癌症术后感染病原体种类、对抗菌药物的耐药性以及影响感染的独立因子。方法回顾性分析的305例妇科癌症手术患者均在2020年1月至2024年1月期间收集,采集术后感染标本培养,进行病原体分类统计和药敏分析,再经二元Logistic回归分析影响术后感染的独立因素。结果 305例妇科癌症手术患者,合并尿路感染71例(23.28%),其中以革兰阴性菌最为常见,所占比67.60%,其次为革兰阳性菌,所占比29.58%。大肠埃希菌对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦有较高敏感率,分别为100.00%、100.00%、94.12%;肺炎克雷伯菌对阿米卡星、亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦有较高敏感率,分别为100.00%、100.00%、91.67%、91.67%;阴沟肠杆菌对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星、亚胺培南、左氧氟沙星有较高敏感率,均为100.00%;金黄色葡萄球菌对利奈唑烷、万古霉素、呋喃妥因、利福平有较高敏感率,分别为100.00%、100.00%、100.00%、90.00%;粪肠球菌对利奈唑烷、万古霉素、利福平有较高敏感率,分别为100.00%、100.00%、83.33%。经二元Logistic回归模型分析,结果显示,年龄>60岁(OR=2.494)、住院时间>10 d(OR=2.747)、留置导尿管(OR=3.256)、术后尿潴留(OR=2.183)是影响妇科癌症手术患者合并感染的独立危险因素。结论妇科癌症手术患者术后感染率较高,病原菌种类繁多,以革兰阴性菌最为常见,针对药敏试验结果,合理选择抗菌药物,且警惕住院时间过长、高龄、留置导尿管、术后尿潴留人群,加以预防,降低术后感染率。

关键词：妇科癌症感染病原体种类抗菌药物耐药性

某三甲医院住院医师规范化培训后岗位胜任力的调查分析

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中国卫生标准管理 2024年第10期15卷 41-45页

作者：褚玉晶吴锋蔡晗天津市胸科医院人事科天津300222

目的旨在通过某三甲医院住院医师规范化培训后分析住院医师的岗位胜任力、完成规范化培训后住院医生的规范化培训情况及对规范化培训的满意度、工作情况、意向和态度,为制定有针对性的工作能力培养方案奠定基础。方法对2013年1月—2023... 详细信息

目的旨在通过某三甲医院住院医师规范化培训后分析住院医师的岗位胜任力、完成规范化培训后住院医生的规范化培训情况及对规范化培训的满意度、工作情况、意向和态度,为制定有针对性的工作能力培养方案奠定基础。方法对2013年1月—2023年1月某三甲医院486名曾经参加规范化培训后的住院医师进行调查,筛选出符合要求的472名住院医师进行问卷调查。结果91.67%的住院医师获得了住院医师规范化培训证书,仅有39.96%的住院医师对培训期间的月收入感到满意。培训结束后回本单位工作或是入职到本单位人员,收入均较住培期间增加。性别是岗位胜任力临床基本能力、医生职业精神与素质、信息管理能力的影响因素(P培时学历是岗位胜任力临床基本能力、掌握与运用医学知识的影响因素(P培训正在逐步完善,为了培养更多的临床医生,提高他们工作意愿,需要制定和执行更好的住院医生住培政策,提高培训质量。同时应加强区域间医学教育的沟通与协作,以促进医学教育均衡发展。

关键词：三甲医院规范化培训住院医生岗位胜任力培养方案医学教育

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作者更正

基础医学与临床 2024年第7期44卷 1057-1057页

作者：沈晨涛夏亚林盛烨萍褚培培李建琴不详

由于作者疏忽,发表在《基础医学与临床》2024年1月第44卷第1期第84⁃91页的文章(沈晨涛等,儿童免疫性血小板减少症复发危险因素的调查及其预测模型的构建)中部分表述有误,现做如下更正:第84页摘要第9行、第87页右栏倒数第2行、第89页右... 详细信息

由于作者疏忽,发表在《基础医学与临床》2024年1月第44卷第1期第84⁃91页的文章(沈晨涛等,儿童免疫性血小板减少症复发危险因素的调查及其预测模型的构建)中部分表述有误,现做如下更正:第84页摘要第9行、第87页右栏倒数第2行、第89页右栏倒数第10行中“儿童咳嗽变异性哮喘转为典型哮喘的独立性影响因素”改为“儿童ITP复发的独立影响因素”。

关键词：免疫性血小板减少症儿童咳嗽变异性哮喘基础医学与临床复发危险因素典型哮喘独立影响因素更正独立性