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PDTC对MPTP帕金森病小鼠黑质中NF-κB表达影响的实验研究

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PDTC对MPTP帕金森病小鼠黑质中NF-κB表达影响的实验研究

作者：裴正斌重庆医科大学

学位级别：硕士

目的 (1)观察用神经毒素 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6 tetrahydropyridine , MPTP)制作的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)鼠模型中是否有核因子-κB(nuclear factor-κappaB,NF-κB)的表达和活化。 (2)观察用神经毒素 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶制作的帕金森病鼠模型中核因子-κB 对鼠 PD 发生和发展的影响。 (3)观察在每次注射神经毒素 MPTP 制作帕金森病鼠模型前,使用核因子 - κ B 抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷 ( pyrrolidine dithiocarbamate, PDTC)对黑质致密部(SNpc)多巴胺能神经元的影响。方法采用 60 只正常健康的 8～12 周龄,雄性 C57/BL 小鼠,随机分成 4个实验组(test group, TG),4 个预防组(prevention group, PG),4个正常组(normal group, NG) ,每组 5 只,均同期同等喂养:4 个实验组用 MPTP 30mg/kg/d(用 0.9%生理盐水配制)鼠腹膜内注射,分别持续处理共 1,3,7,14 天,每天一次(间隔 24 小时),为帕金森病鼠模型重庆医科大学硕士研究生学位论文 3 组;4 个预防组用 PDTC 40mg/kg/d(用 0.9%生理盐水配制)鼠腹膜内注射,半小时后 MPTP 30mg/kg/d 鼠腹膜内注射,分别持续处理共 1,3,7,14 天,每天一次(间隔 24 小时);4 个正常组用等量的 0.9%生理盐水鼠腹膜内注射,分别持续处理共 1,3,7,14 天,每天一次(间隔 24 小时)。处理前采用行为学方法了解 C57/BL 小鼠的爬杆时间,观察是否出现帕金森病样异常行为,各组小鼠处理后仍采用行为学方法了解 C57/BL 小鼠的爬杆时间,观察是否出现帕金森病样异常行为,采用链霉卵白素- 生物素-过氧化物酶复合法,即 SABC 免疫组织化学法原位检测了解黑质区 NF-κB p65 蛋白的表达、NF-κB p65 阳性细胞数、NF-κB 核转位现象、酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性神经元及神经纤维计数,并在形态学上采用 Pischingert 氏亚甲基蓝染色法(尼氏体染色)及 HE 染色(神经病理)等方法观察黑质细胞丢失现象,从黑质 NF-κB p65 蛋白质表达,NF-κB p65 阳性细胞数,NF-κB 核转位现象,TH 阳性神经元及神经纤维计数,以及行为学、形态学方法等多层次,多角度来了解 NF-κB 与帕金森病的可能关系。结果 (1)行为学观察结果:实验组、预防组及正常组之间各组小鼠爬杆时间差在处理第一次后均无显著性差异(p>0.05),各组小鼠均未出现前肢抬举、震颤、动作迟缓等帕金森病样异常行为。在处理第三次,七次,十四次后,实验组小鼠爬杆时间差比相应的预防组及正常组小鼠均显著增加,具有显著性差异(p正常组小鼠相比均无显著性差异(p>0.05),预防组及正常组小鼠均未出现帕金森病样异常行为。 (2)SABC 免疫组化法结果:①NF-kB 免疫组化结果: 在处理第一次后,实验组、预防组及正常组三组黑质区均有 NF-κB 表达,NF-κB 蛋白阳性表达定位于细胞浆,呈黄褐色,强阳性者细胞核内也有表达, 但预防组及正常组仅有极少数阳性细胞,无明显核转位现象。实验组有较多的阳性细胞,胞浆呈黄褐色,并且有核转位现象,表现为核亦呈黄褐色,苏木素不能复染。实验组平均光密度值(MOD)、积分光密度值(IOD)、阳性细胞数(CPC)及 NF-kB 核细胞转位数(CDN)分别与正常组、预防组相比均有显著性差异(p正常组小鼠亦均有 NF-κB 表达,但正常组仅有极少数阳性细胞,无核转位现象,实验组有较多的阳性细胞, 并且有明显核转位现象。预防组阳性细胞比实验组显著减少,有少量核转位现象。经统计学检验实验组 NF-κB 蛋白 MOD、IOD、CPC 及 CDN 分别与相应的正常组、预防组相比也均有极其显著性差异(p<0.01)。实验组小鼠随着处理次数增加,小鼠黑质区 NF-kappaB 蛋白表达也随之增加。预防组小鼠随着

关键词： 1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP) 帕金森病核因子-κB(NF-κB)

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小胶质细胞在帕金森病中的双重作用

中国临床康复 2004年第1期8卷 130-132页

作者：裴正斌彭国光重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市400016

帕金森病是一种与年龄相关的神经系统退行性疾病,是由黑质致密部多巴胺能神经元变性、坏死引起。目前认为氧化应激、兴奋性毒素介导的细胞损害和线粒体功能障碍是导致帕金森病发病的3大主要因素。研究证实,氧化应激在帕金森病的发病机... 详细信息

帕金森病是一种与年龄相关的神经系统退行性疾病,是由黑质致密部多巴胺能神经元变性、坏死引起。目前认为氧化应激、兴奋性毒素介导的细胞损害和线粒体功能障碍是导致帕金森病发病的3大主要因素。研究证实,氧化应激在帕金森病的发病机制中起着重要的作用。许多因素可激活小胶质细胞产生自由基、超氧化物阴离子、细胞因子、一氧化氮、神经生长因子等,小胶质细胞在帕金森病中可能起着重要的双重作用。因此,调节小胶质细胞功能的药物可能具有神经保护作用。

关键词：小胶质细胞帕金森病神经生长因子中枢神经系统

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急性脑卒中病灶发生部位与患者的睡眠障碍

中国临床康复 2005年第20期9卷 80-81页

作者：蒋安杰裴正斌重庆医科大学附属北碚医院神经内科重庆市400016 重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市400016

目的:应用SPIEGEL量表对急性脑卒中患者进行睡眠质量调查,并结合头颅CT或MRI结果分析与脑卒中发生部位的关系。方法:选择2003-09/2004-03重庆医科大学附属第一医院神经内科收治的首次发生急性脑卒中患者60例,其中出血性脑卒中29例,缺血... 详细信息

目的:应用SPIEGEL量表对急性脑卒中患者进行睡眠质量调查,并结合头颅CT或MRI结果分析与脑卒中发生部位的关系。方法:选择2003-09/2004-03重庆医科大学附属第一医院神经内科收治的首次发生急性脑卒中患者60例,其中出血性脑卒中29例,缺血性脑卒中31例。进行头颅CT或MRI分析,并用SPIEGEL量表问卷对睡眠情况进行调查,评分≥12分为无睡眠障碍。结果:60例脑卒中患者均进入结果分析。①睡眠障碍发生率:60例患者中发生睡眠障碍62%(37/60)。29例出血性脑卒中发生睡眠障碍患者68%(20/29),31例缺血性脑卒中发生睡眠障碍54%(17/31)。②出血和缺血性脑卒中患者头颅CT或MRI检查结果与睡眠障碍的关系:发生在额叶皮质,脑干部位的缺血性脑卒中患者的睡眠障碍发生率高于发生在相同部位的出血性脑卒中患者犤29%(5/17),10%(2/20);12%(2/17),5%(1/20),P<0.05犦,发生在基底节部位的缺血性脑卒中患者睡眠发生率低于出血性脑卒中患者犤59%(10/17),85%(17/20),P<0.05犦。结论:急性脑卒中患者在出血或梗死部位面积相等的条件下,发生在基底节区、额叶皮质、脑干等部位时睡眠障碍的发生率高。

关键词：脑血管意外急性病睡眠障碍

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脑梗死后癫痫30例诊治体会

中风与神经疾病杂志 2008年第6期25卷 742-743页

作者：朱金生裴正斌重庆九龙坡区第三人民医院神经科重庆400080

脑梗死是临床常见病、多发病,是老年人癫痫的最常见病因之一。脑梗死后两周内发作为早发癫痫,超过两周者为迟发癫痫。我们于2004年6月至2007年6月经头部CT或MRI扫描证实脑梗死患者360例,继发癫痫30例的临床资料、脑电图、影像学资料及... 详细信息

脑梗死是临床常见病、多发病,是老年人癫痫的最常见病因之一。脑梗死后两周内发作为早发癫痫,超过两周者为迟发癫痫。我们于2004年6月至2007年6月经头部CT或MRI扫描证实脑梗死患者360例,继发癫痫30例的临床资料、脑电图、影像学资料及临床治疗结果进行回顾性分析。1临床资料1.1一般资料本组30例,其中男16例,女14例,年龄50~87岁,癫痫发生率为8.3%。全部病例均符合脑梗死的诊断标准,其中确诊为动脉硬化性血栓性脑梗死21例,占全部病例70%;脑栓塞3例,占10%;腔隙性梗死6例,占20%。所有患者病前均无癫痫病史,同时全部排除脑肿瘤、颅内感染和肝、肾、肺性脑病及代谢中毒性脑病所致的癫痫发作。癫痫的诊断标准按1989年国际癫痫联盟分类进行。全部病例均行脑电图检查。1.2方法对360例脑梗死患者进行回顾性临床分析。1.3统计学方法采用χ2检验。

关键词：脑梗死患者早发癫痫死后诊治常见病因临床资料 MRI扫描影像学资料

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出血性脑梗死的相关因素分析

中国医疗设备 2016年第B12期31卷 219-220页

作者：裴正斌重庆九龙坡区中医院重庆400080

目的探讨急性脑梗死患者出血性转化的相关危险因素.方法回顾分析我院１３５例急性脑梗死患者的临床资料,分析比较相关数据与发生出血性转化是否相关性.结果两组患者心房颤动、大面积脑梗死、高血糖、高血压尤其收缩压未有效控制、脉... 详细信息

目的探讨急性脑梗死患者出血性转化的相关危险因素.方法回顾分析我院１３５例急性脑梗死患者的临床资料,分析比较相关数据与发生出血性转化是否相关性.结果两组患者心房颤动、大面积脑梗死、高血糖、高血压尤其收缩压未有效控制、脉压值、纤维蛋白原、低密度脂蛋白胆固醇及抗凝等具有显著性差异(P＜０??０５).结论心房颤动、大面积脑梗死、高血糖、高血压尤其收缩压未有效控制、脉压大、高纤维蛋白原及低密度脂蛋白胆固醇、抗凝治疗是急性脑梗死出血性转化的高危险因素.

关键词：脑梗死出血性转化危险因素

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误诊为高血压性头痛的低颅压综合征1例分析

中国误诊学杂志 2007年第4期7卷 781-782页

作者：裴正斌重庆市垫江县人民医院神经内科 408300

对误诊为高血压性头痛的低颅压综合征1例分析如下.1 病历摘要女,40岁.既往体健,否认高血压等病史.以持续性头部昏胀痛3 d来诊.3 d前患者不明原因出现头部昏胀痛,非爆裂样,呈持续性阵发性加重,尤其在卧床侧翻身及站立行走时加重,伴肢体乏... 详细信息

对误诊为高血压性头痛的低颅压综合征1例分析如下.1 病历摘要女,40岁.既往体健,否认高血压等病史.以持续性头部昏胀痛3 d来诊.3 d前患者不明原因出现头部昏胀痛,非爆裂样,呈持续性阵发性加重,尤其在卧床侧翻身及站立行走时加重,伴肢体乏力,站立不稳,恶心,非喷射性呕吐,无视物旋转,无耳鸣、耳聋,无四肢麻木,无心慌、心悸,无发热、畏寒、咳嗽等,在当地卫生院就诊,血压高并输液治疗1 d无明显缓解,我院120医生测血压为160/94 mm Hg(1 mm Hg＝0.133 kPa),以'原发性高血压,高血压性头痛'收入我科治疗.

关键词：颅内低压/诊断高血压/病理生理学头痛/诊断误诊

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恩必普治疗急性脑梗死的疗效评价

中国城乡企业卫生 2009年第4期24卷 22-23页

作者：魏有东裴正斌重庆医科大学附属第一医院神经内科重庆市神经病学重点实验室 400016

目的观察恩必普对急性脑梗死的治疗效果。方法将60例急性脑梗死患者随机分成治疗组和对照组,治疗组在常规治疗基础上,给予恩必普治疗;在治疗前及后分别对治疗组和对照组进行神经功能缺损评分及疗效评定。结果治疗组疗效高于对照组。结... 详细信息

目的观察恩必普对急性脑梗死的治疗效果。方法将60例急性脑梗死患者随机分成治疗组和对照组,治疗组在常规治疗基础上,给予恩必普治疗;在治疗前及后分别对治疗组和对照组进行神经功能缺损评分及疗效评定。结果治疗组疗效高于对照组。结论恩必普对急性脑梗死的治疗具有肯定的作用。

关键词：恩必普急性脑梗死疗效

鼠神经生长因子联合蕲蛇酶注射液治疗急性脑梗死的临床疗效

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中国现代应用药学 2015年第12期32卷 1502-1505页

作者：裴正斌重庆市九龙坡区中医院重庆400080

目的探讨鼠神经生长因子联合蕲蛇酶注射液治疗急性脑梗死的临床疗效。方法急性脑梗死136例患者按入院时间随机分为治疗组(n=68)和对照组(n=68),2组均采用常规治疗,包括口服阿司匹林,合理控制血压、血糖,调脂,降低颅压及其合并症和有关... 详细信息

目的探讨鼠神经生长因子联合蕲蛇酶注射液治疗急性脑梗死的临床疗效。方法急性脑梗死136例患者按入院时间随机分为治疗组(n=68)和对照组(n=68),2组均采用常规治疗,包括口服阿司匹林,合理控制血压、血糖,调脂,降低颅压及其合并症和有关并发症的处理;对照组采用血栓通600 mg及蕲蛇酶注射液0.75 U分别加入0.9%氯化钠注射液250 m L中静脉滴注,每日1次,连用14 d;治疗组在对照组基础上应用鼠神经生长因子18μg,肌肉注射,每日1次,连用14 d;比较2组患者住院期间美国国立卫生研究院卒中量表(national institutes of health stroke scale,NIHSS)评分和牛津残障评分(Oxford disability score,OHS)的变化、治疗显效率及总有效率,观察2组患者不良反应的发生情况。结果治疗组疗效明显优于对照组(P<0.05),治疗前治疗组和对照组NIHSS评分及OHS评分比较,差异均无统计学意义;疗程第21天,治疗组NIHSS评分及OHS评分均显著优于对照组(P<0.05),治疗组显效率和总有效率(72.1%和94.1%)显著高于对照组(58.8%和86.8%)(P<0.05)。结论鼠神经生长因子联合蕲蛇酶注射液可有效改善急性脑梗死患者的神经功能,且效果优于单用蕲蛇酶注射液。

关键词：鼠神经生长因子蕲蛇酶注射液脑梗死疗效

中医医院应用综合性医疗模式治疗脑卒中的优越性

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中国中西医结合杂志 2012年第5期32卷 616-619页

作者：裴正斌朱金生何荣彬杨岸森彭芝莲张雪锋夏杰蔡春天重庆市九龙坡区第一中医医院脑病科重庆400080

目的观察中西医结合综合性医疗模式治疗脑卒中的临床疗效。方法将236例脑卒中住院患者随机分为综合性治疗组(试验组,121例)和常规治疗组(对照组,115例),试验组采用规范化综合性治疗管理模式,并在康复治疗中结合中药或针刺治疗;对照组按... 详细信息

目的观察中西医结合综合性医疗模式治疗脑卒中的临床疗效。方法将236例脑卒中住院患者随机分为综合性治疗组(试验组,121例)和常规治疗组(对照组,115例),试验组采用规范化综合性治疗管理模式,并在康复治疗中结合中药或针刺治疗;对照组按照传统的单纯基础药物治疗方法,也可非系统化地开展针对患者和家属的健康教育。比较两组患者住院期间病死率、并发症发生率、短期临床疗效,以及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、日常生活活动能力Barthel指数(Barthelindex,BI)和牛津残障评分(OHS)。结果治疗前两组NIHSS评分、BI及OHS评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗第21、90天时,两组患者NIHSS评分、BI及OHS评分比较,差异均有统计学意义(P0.05)。结论中医医院应用中西医结合综合性医疗模式治疗脑卒中患者,效果优于单纯基础药物的常规治疗方法,中医学治疗脑卒中具有优势。

关键词：脑卒中综合性医疗模式中西医结合