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Gnb2敲除小鼠制备及神经发育相关表型分析

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Gnb2敲除小鼠制备及神经发育相关表型分析

作者：裴晴晴东北师范大学

学位级别：硕士

G蛋白(guanine nucleotide-binding proteins),又称为GTP结合蛋白,是具有GTP水解酶活性的一类信号转导蛋白,定位于细胞质膜内侧。三聚体G蛋白(Heterotrimeric G protein)是由α、β、γ三种亚基组合形成,每种亚基又有多种亚型,不同亚型... 详细信息

G蛋白(guanine nucleotide-binding proteins),又称为GTP结合蛋白,是具有GTP水解酶活性的一类信号转导蛋白,定位于细胞质膜内侧。三聚体G蛋白(Heterotrimeric G protein)是由α、β、γ三种亚基组合形成,每种亚基又有多种亚型,不同亚型间的组合及其下游效应决定了G蛋白功能的多样性。在5种Gβ亚基中,Gβ2在发育中的大脑皮质中高度表达。我们实验室前期研究结果表明,Gβ2的表达在分化的神经元中显著上调,Gβ2表达受到干扰时,会影响迁移神经元。Gβ2由Gnb2基因编码,为了更好的研究Gβ2在发育中的作用,我们利用CRISPR/Cas9技术,构建Gnb2基因敲除小鼠。针对Gnb2的2号,5号和7号外显子区域设计了三个guide RNA(g RNA),体外转录获得g RNA后,与Cas9蛋白混合注射到受精卵的原核区域。对获得的子代鼠通过PCR筛选和DNA序列分析,我鉴定得到了两种不同Gnb2基因片段缺失的小鼠。这两种基因片段的缺失情况均导致基因的移码突变,表现为纯合突变基因型(Gnb2)Gβ2蛋白表达缺失。同时两种小鼠的基因型可以稳定遗传给子代,实现Gnb2基因敲除鼠的构建,我们选取了其中一种用于后续表型的分析。通过BrdU标记分析,发现Gβ2敲除鼠皮层深层神经元增多,ERK1/2磷酸化降低。在P7和P56小鼠鼠脑中,我们没有检测到鼠脑整体结构,皮层结构的明显区别,说明Gβ2缺失造成的迁移阻滞是暂时性效应,没有影响大脑皮层的构筑。同时,Gnb2基因敲除鼠中未见成熟神经元和胶质细胞标志物的表达异常。接下来主要围绕皮层锥体神经元的发育过程开展了研究工作。通过Thy1-YFP标记手段,统计分析了P56小鼠皮层锥体神经元的树突形态,结果显示Gβ2敲除没有影响皮层锥体神经元树突发育。进一步利用Thy1-YFP标记和高尔基染色技术,统计分析了P56锥体神经元的树突棘密度,两种方法均显示,Gβ2敲除导致皮层2-3层及5层锥体神经元的树突棘密度减低。通过电生理手段记录离体培养的神经元电活动情况,结果发现神经元细胞的膜通透性有明显改变。

关键词：大脑皮层 Gnb2 锥体神经元树突棘 G蛋白偶联受体

超声引导下腹横肌平面阻滞用于肝脏手术的临床应用观察

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超声引导下腹横肌平面阻滞用于肝脏手术的临床应用观察

作者：裴晴晴浙江大学

学位级别：硕士

第一部分：超声引导下腹横肌平面阻滞在肝脏手术临床应用的有效性和安全性观察目的：探讨超声引导下腹横肌平面阻滞在肝脏手术应用的有效性和安全性。方法：选择择期开腹肝脏手术患者80例,年龄在40-60岁,ASA I-III级,随机分为对照组(C组... 详细信息

第一部分：超声引导下腹横肌平面阻滞在肝脏手术临床应用的有效性和安全性观察目的：探讨超声引导下腹横肌平面阻滞在肝脏手术应用的有效性和安全性。方法：选择择期开腹肝脏手术患者80例,年龄在40-60岁,ASA I-III级,随机分为对照组(C组)和观察组(T组),术前分别对两组患者进行超声引导下双侧肋缘下腹横肌平面(TAP)阻滞。对照组用0.9%生理盐水,观察组用0.375%罗哌卡因,两侧各20ml。记录术中、术后阿片类药物的用量,同时进行术后随访观察记录患者的VAS评分,NRS评分,RAMSAY评分,恶心呕吐评分,PCIA泵的按压次数及恶心呕吐、瘙痒、呼吸抑制等不良反应的发生情况。结果：与对照组相比,观察组切皮后3min(T2)、5min(T3)血压波动较小(P0.05),观察组Ramsay镇静评分更稳定,两组差异有统计学意义(P17.1μmol/L,A组)。术前分别对两组患者进行超声引导下双侧肋缘下腹横肌平面阻滞。术中采集不同观察时间点血液标本,术后离心、分离后保存,集齐标本后统一送检测定血浆罗哌卡因浓度。同时记录术中液体的出入量以及阻滞后有无中毒相关不良反应。结果：两组患者TAP阻滞后,罗哌卡因的血药浓度变化相似。与基础值(TAP阻滞前)相比,血药浓度逐渐升高,在阻滞后30min时达到血药浓度峰值,随后呈逐渐降低趋势。两组相比,相同时间点血药浓度差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者液体净输入量在不同时间点上变化趋势相同,净入量随着时间延长而增加。两组相比,相同时间点,净输液量差异无统计学意义(P>0.05)。两组患者均未出现达到或高于文献报道中毒剂量的血药浓度,均未观察到可能与局麻药中毒相关的临床征象。结论：超声引导0.375%罗哌卡因双侧TAP阻滞用于黄疸期的肝脏手术患者,药物代谢无明显减慢,血药浓度趋势与正常肝功能患者相似,无局麻药相关毒性反应。可安全用于黄疸患者临床镇痛。

关键词：腹横肌平面阻滞镇痛罗哌卡因肝脏血药浓度

柔性SnO_2/ZnO复合光阳极的制备及其在染料敏化太阳能电池中的应用

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功能材料 2018年第1期49卷 1022-1025页

作者：陈增徐炳华李胜军李卓裴晴晴河南大学河南省光伏材料重点实验室河南开封475004

通过简单易行的方法制备了SnO_2/ZnO复合纳米颗粒,利用XRD对SnO_2/ZnO结构进行表征。使用电泳技术制备无裂纹SnO_2/ZnO复合薄膜,考察了ZnCl2添加量对SnO_2/ZnO复合薄膜光阳极性能的影响,通过机械压膜方法对柔性导电衬底(ITO/PEN衬底)上... 详细信息

通过简单易行的方法制备了SnO_2/ZnO复合纳米颗粒,利用XRD对SnO_2/ZnO结构进行表征。使用电泳技术制备无裂纹SnO_2/ZnO复合薄膜,考察了ZnCl2添加量对SnO_2/ZnO复合薄膜光阳极性能的影响,通过机械压膜方法对柔性导电衬底(ITO/PEN衬底)上的SnO_2/ZnO复合薄膜进行后处理,扫描电镜结果表明机械压膜处理使SnO_2/ZnO复合薄膜变得更加平滑,SnO_2/ZnO复合纳米颗粒之间的连接性能增强,光电测试结果表明机械压膜处理可以显著提高SnO_2/ZnO复合光阳极的光电性能,电池的开路光电压和短路光电流均得到明显提高,优化后柔性SnO_2/ZnO复合光阳极组装的染料敏化太阳能电池的光电转换效率(η)达到了3.95%,短路光电流密度(JSC)、开路光电压(VOC)和填充因子(FF)分别为16.43mA/cm2、0.493V和0.49。

关键词：染料敏化太阳能电池柔性光阳极 SnO2/ZnO复合薄膜电泳沉积

同命不同价——死亡赔偿金的合理计算标准探究

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法制博览 2016年第25期 207-207页

作者：裴晴晴上海海事大学

关于"同命不同价"的争论一直存在,众多学者在道德、法律等多个层面批判其不合理性,但"同命同价"也未必合理。本文通过分析死亡赔偿金性质和相关法律法规确定的死亡赔偿金计算标准,探究现行法律下死亡赔偿金计算标准的合理性,并对此提出... 详细信息

关于"同命不同价"的争论一直存在,众多学者在道德、法律等多个层面批判其不合理性,但"同命同价"也未必合理。本文通过分析死亡赔偿金性质和相关法律法规确定的死亡赔偿金计算标准,探究现行法律下死亡赔偿金计算标准的合理性,并对此提出完善该项规定的建议。

关键词：死亡赔偿金计算标准

超声引导神经阻滞复合全身麻醉应用于胫骨骨折手术中的价值研究

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浙江创伤外科 2018年第3期23卷 598-599页

作者：陈忠裴晴晴浙江省宁波市北仑区人民医院宁波315800

目的对超声引导神经阻滞复合全身麻醉应用于胫骨骨折手术中的价值进行分析以及探讨。方法抽取本院于2016年4月至2017年5月实施胫骨骨折切开复位内固定手术的72例患者作为实验的对象,分成试验组与对照组两个组。试验组予以超声引导神经... 详细信息

目的对超声引导神经阻滞复合全身麻醉应用于胫骨骨折手术中的价值进行分析以及探讨。方法抽取本院于2016年4月至2017年5月实施胫骨骨折切开复位内固定手术的72例患者作为实验的对象,分成试验组与对照组两个组。试验组予以超声引导神经阻滞复合全身麻醉的方法,对照组则给予全身麻醉的方法。比较两组的结果。结果试验组病人的苏醒时间、拔管时间以及使用的丙泊酚量与对照组相比明显偏短,P0.05;在拔管之后30分钟试验组患者的VAS评分与对照组相比明显偏低,P0.05。结论在胫骨骨折手术中实施超声引导神经阻滞复合全身麻醉的方法,临床取得的效果较好,可显著缩短患者的苏醒时间、拔管时间以及使用的丙泊酚量,并且可以有效的镇痛与镇静,值得推广。

关键词：超声神经阻滞全身麻醉胫骨骨折

不同剂量瑞芬太尼喉罩通气麻醉对老年患者全髋关节置换术的影响

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中国医师进修杂志 2013年第6期36卷 24-26页

作者：裴晴晴宁波市北仑区人民医院麻醉科 315800

目的观察并比较老年患者双腔型喉罩麻醉下行全髋关节置换术中应用不同剂量瑞芬太尼的临床效果。方法选择择期行全髋关节置换术的老年患者60例，ASA分级Ⅰ～Ⅱ级，根据瑞芬太尼的不同剂量，分为0．2μg／（kg·min）组、***／（kg·min... 详细信息

目的观察并比较老年患者双腔型喉罩麻醉下行全髋关节置换术中应用不同剂量瑞芬太尼的临床效果。方法选择择期行全髋关节置换术的老年患者60例，ASA分级Ⅰ～Ⅱ级，根据瑞芬太尼的不同剂量，分为0．2μg／（kg·min）组、***／（kg·min）组与0．4μg／（kg·min）组，每组20例。记录三组患者麻醉诱导前、麻醉诱导后即刻、置喉罩后即刻、手术开始、术中15min、停麻醉药的平均动脉压（MAP）和心率，以及术中用药、体动发生率与苏醒时间。结果所有患者均顺利完成手术，无术中知晓发生。0．2μg／（kg·min）组术中心率、MAP波动大，体动发生率高（45．0％，9／20），丙泊酚使用量最多[（82．4±21．6）mg]；0．3μg／（kg·min）组术中心率、MAP波动较小，术后患者苏醒较快；O．4μg／（kg·min）组术中心率、MAP抑制作用明显，麻黄碱使用量最大[（5．2±4．3）mg]，术后拔喉罩时间长[（5．2±1．3）min]。结论0.3μg／（kg·min）瑞芬太尼复合丙泊酚行双腔型喉罩通气可用于全髋关节置换术老年患者的全凭静脉麻醉，血流动力学稳定，并发症少，通气可靠。

关键词：关节成形术,置换,髋老年人瑞芬太尼喉罩

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泰山文化与品牌联名发展可行性研究

天工 2021年第7期 38-39页

作者：裴晴晴陈钧锴南京工业大学艺术设计学院

泰山具有神圣崇高的地位以及深厚的文化底蕴,是中华文化的主要象征之一,应该积极弘扬和宣传。品牌联名是指品牌之间合作,通过各自元素、功能、价值等的相互融合从而推出新的产品,获得更大的消费市场。文化与品牌联名可以拓宽文化的宣传... 详细信息

泰山具有神圣崇高的地位以及深厚的文化底蕴,是中华文化的主要象征之一,应该积极弘扬和宣传。品牌联名是指品牌之间合作,通过各自元素、功能、价值等的相互融合从而推出新的产品,获得更大的消费市场。文化与品牌联名可以拓宽文化的宣传路径,提升品牌的文化价值并使其年轻化发展。通过文化与品牌的信息整合与联想、情感迁移以及联名产品的设计呈现来探究泰山文化与品牌联名发展的可行性。

关键词：泰山文化品牌联名文化价值可行性方法路径

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靶控输注丙泊酚在内镜诊治胆道疾病中的应用

海峡药学 2013年第3期25卷 154-155页

作者：裴晴晴占伟建浙江宁波市北仑区人民医院麻醉科宁波315800

目的探讨靶控输注丙泊酚应用于内镜诊断治疗胆道疾病的效果及安全性。方法选择择期进行ERCP或EST术的住院患者42例,随机分为靶控输注组(T组)和恒速输注组(V组),分别记录两组诱导时间、术毕苏醒时间、术中体动次数;注药前、诱导时、术毕... 详细信息

目的探讨靶控输注丙泊酚应用于内镜诊断治疗胆道疾病的效果及安全性。方法选择择期进行ERCP或EST术的住院患者42例,随机分为靶控输注组(T组)和恒速输注组(V组),分别记录两组诱导时间、术毕苏醒时间、术中体动次数;注药前、诱导时、术毕、清醒时的BP、HR、SpO2,比较不同用药方法下的麻醉效果及安全性。结果 42例患者均安全完成诊疗,与V组比较,T组麻醉诱导期用药量少,术中血压下降及呼吸抑制发生率低,术后恢复时间短,给药方法简单。结论靶控输注丙泊酚能更安全的满足临床ERCP或EST的需要,操作简单,是一种值得推广的技术。

关键词：丙泊酚靶控输注内镜胆道疾病

帕瑞昔布联合腰方肌阻滞对老年结肠癌患者术后认知功能的影响

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中国新药与临床杂志 2020年第11期39卷 670-674页

作者：梅雨柳朱曼华曹云飞裴晴晴宁波市北仑区人民医院麻醉科浙江宁波315800 宁波市医疗中心李惠利医院麻醉科浙江宁波315040

目的评价帕瑞昔布联合腰方肌阻滞对老年结肠癌患者术后认知功能的影响。方法选择择期全麻下行结肠癌手术的老年患者129例,随机均分为3组。帕瑞昔布联合腰方肌阻滞组(PQ组)于麻醉前30 min静脉注射帕瑞昔布40 mg(共5 mL),全麻组(G组)和腰... 详细信息

目的评价帕瑞昔布联合腰方肌阻滞对老年结肠癌患者术后认知功能的影响。方法选择择期全麻下行结肠癌手术的老年患者129例,随机均分为3组。帕瑞昔布联合腰方肌阻滞组(PQ组)于麻醉前30 min静脉注射帕瑞昔布40 mg(共5 mL),全麻组(G组)和腰方肌阻滞组(Q组)于麻醉前30 min静脉注射氯化钠注射液5 mL。3组均在麻醉诱导前于超声引导下行双侧后路腰方肌阻滞,Q组和PQ组双侧注射0.25%罗哌卡因25 mL,G组双侧注射氯化钠注射液25 mL。3组均采用静脉麻醉,术后均予以静脉自控镇痛。记录麻醉前、切皮后15 min及术毕患者的平均动脉压(MAP)和心率(HR),术中丙泊酚和瑞芬太尼用量,术后24 h舒芬太尼用量,评估术后6、12、24、48 h疼痛视觉模拟量表(VAS)评分。检测术前、术毕、术后12 h血浆皮质醇(Cor)水平,并通过简易精神状态检查(MMSE)评估术前1 d、术后第3日患者的认知情况。观察并记录不良反应发生情况。结果3组丙泊酚用量无显著差异(P>0.05),Q组和PQ组术中瑞芬太尼用量低于G组(P0.05)。切皮后15 min G组MAP、HR较术前升高(P<0.05),且高于同时点Q组和PQ组(P<0.05)。与G组相比,Q组和PQ组术后24 h舒芬太尼用量减少(P<0.05),且PQ组少于Q组(P<0.05)。术后6 h,PQ组和Q组VAS评分均低于G组(P<0.05);术后12 h,PQ组VAS评分低于G组(P<0.05)。PQ组术毕及术后12 h的血浆Cor水平低于G组(P<0.05),Q组术后12 h的血浆Cor水平低于G组(P<0.05)。术后第3日,PQ组MMSE评分高于G组和Q组(P<0.05)。所有患者均未发生呼吸抑制,PQ组术后恶心呕吐、苏醒期躁动发生率低于G组(P<0.05)。结论帕瑞昔布联合腰方肌阻滞可减少老年结肠癌手术患者阿片类药物的用量,且对术后认知功能的影响小,患者术中血流动力学稳定,术后镇痛效果好,应激反应减轻。

关键词：帕瑞昔布认知结肠肿瘤结直肠外科手术腰方肌阻滞