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普通高等教育食品质量与安全专业十三五部委级规划教材食品毒理学

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普通高等教育食品质量与安全专业十三五部委级规划教材食品毒理...

基于HRP标记抗体的黄曲霉毒素M1的直接竞争-ELISA快速检测方法

2021年

作者：裴世春作

本书共12章，其内容大体包括食品毒理学的基本理论、基本概念、基本研究方法、食品中各类有害物质的毒性、食品毒理学安全性评价、食品安全风险评估等内容，可作为食品毒理学教学的教材，也可供从事食品安全的科研、管理人员阅读参考使用。

ISBN: (纸本)9787518081608

关键词：食品毒理学高等学校教材

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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食品科学 2011年第18期32卷 221-224页

作者：裴世春肖理文齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 上海优你生物科技股份有限公司上海201616

为构建快速检测乳制品中黄曲霉毒素M1(AFM1)的直接竞争-酶联免疫吸附(dc-ELISA)体系,将辣根过氧化物酶(HRP)与高纯度抗AFM1单克隆抗体进行偶联后对其与AFM1竞争性反应条件进行优化,并利用AFM1污染标准物质ERMI-BD282(0)、ERMI-BD 283(0... 详细信息

为构建快速检测乳制品中黄曲霉毒素M1(AFM1)的直接竞争-酶联免疫吸附(dc-ELISA)体系,将辣根过氧化物酶(HRP)与高纯度抗AFM1单克隆抗体进行偶联后对其与AFM1竞争性反应条件进行优化,并利用AFM1污染标准物质ERMI-BD282(0)、ERMI-BD 283(0.11μg/kg)、ERMI-BD 284(0.44μg/kg)等对检测体系的灵敏度和精确性进行验证。结果当AFM1-BSA包被质量浓度0.25μg/L、抗AFM1 mAb-HRP稀释2000倍时dc-ELISA检测AFM1的IC50为0.75μg/L,检测范围为0.015～4.05μg/L,添加AFM1至0.45μg/L的鲜奶样品中检测回收率平均为80%,dc-ELISA可满足鲜乳中AFM1国家残留限量标准0.5μg/kg的检测要求。该体系可应用于鲜奶制品中AFM 1大于0.5μg/kg污染样品的快速初筛。

关键词：直接竞争-酶联免疫法(dc-ELISA) 黄曲霉毒素M1(AFM1) 乳品检测

利用dc-ELISA筛选玉米赤霉烯酮产毒菌的研究

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食品科技 2009年第7期34卷 18-21页

作者：裴世春孙丽敏黑龙江八一农垦大学食品学院大庆163319 齐齐哈尔林业学校齐齐哈尔161006

应用实验室制备的抗玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)单克隆抗体建立了直接竞争ELISA方法(direct competitive ELISA),并利用该方法探讨了ZEN产毒菌的筛选可能性。实验结果表明该方法快速、灵敏,添加回收率为99.3%～152.3%,用该法检测产ZE... 详细信息

应用实验室制备的抗玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)单克隆抗体建立了直接竞争ELISA方法(direct competitive ELISA),并利用该方法探讨了ZEN产毒菌的筛选可能性。实验结果表明该方法快速、灵敏,添加回收率为99.3%～152.3%,用该法检测产ZEN菌株,可为保障粮食安全提供有效检测方法。

关键词：玉米赤霉烯酮单克隆抗体产毒菌

应用HTS-ELISA筛选方法制备抗黄曲霉毒素M1单抗

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微生物学报 2010年第10期50卷 1406-1411页

作者：裴世春何娜张立军陆梅生齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江八一农垦大学食品学院大庆麦伯康生物技术有限公司上海麦柏星生物科技有限公司

【目的】确立基于高通量酶联免疫(HTS-ELISA)筛选方法制备高亲和力抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的方法体系。【方法】采用AFM1-BSA(Aflatoxin M1-bovine serum albumin)免疫Balb/C小鼠,利用HTS-ELISA方法筛选分泌抗黄曲霉毒素M1单抗的杂交... 详细信息

【目的】确立基于高通量酶联免疫(HTS-ELISA)筛选方法制备高亲和力抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的方法体系。【方法】采用AFM1-BSA(Aflatoxin M1-bovine serum albumin)免疫Balb/C小鼠,利用HTS-ELISA方法筛选分泌抗黄曲霉毒素M1单抗的杂交瘤细胞株,并分析抗体的特性。【结果】筛选到14株具有分泌高活性抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,纯化的最佳抗体的亲和力为5.5×10-10 mol/L。与黄曲霉毒素M1及其结构类似物黄曲霉毒素M2、B1、B2、G1、G2以及其他物质脱氧雪腐镰刀菌烯醇和BSA的交叉反应率分别为100%、4.5%、21.5%、1.0%、16.6%、1.0%、0%、0%。间接竞争ELISA检测最低检测限可达0.01μg/L,线性范围为0.1-10μg/L,竞争性抑制抗体反应50%的抑制浓度IC50为0.82μg/L,添加0.25-5μg/L黄曲霉毒素的牛奶间接竞争ELISA检测回收率在60.3%-152.8%之间。【结论】HTS-ELISA方法可以制备具有高亲和力的抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体,可为黄曲霉毒素M1免疫检测体系的建立提供优质抗体材料。

关键词：黄曲霉毒素M1 高通量酶联免疫法单克隆抗体

抗黄曲霉毒素B1重链IgG2b亚型单克隆抗体的制备及应用

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中国生物制品学杂志 2009年第6期22卷 602-604页

作者：裴世春李玉花张园园才琳东北林业大学哈尔滨150040 黑龙江八一农垦大学黑龙江大庆163319

目的制备抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的重链IgG2b亚型单克隆抗体,并建立黄曲霉毒素B1的间接竞争ELISA检测方法。方法采用AFB1-BSA偶联物为免疫抗原,AFB1-STI偶联物为检测抗原,利用间接竞争ELISA筛选分泌抗AFB1单抗的细胞株,并对抗体进行鉴定... 详细信息

目的制备抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的重链IgG2b亚型单克隆抗体,并建立黄曲霉毒素B1的间接竞争ELISA检测方法。方法采用AFB1-BSA偶联物为免疫抗原,AFB1-STI偶联物为检测抗原,利用间接竞争ELISA筛选分泌抗AFB1单抗的细胞株,并对抗体进行鉴定。结果筛选到1株能分泌特异性抗AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其染色体数目为(90±10)条;所分泌的单抗亚类重链为IgG2b,轻链为λ;间接ELISA检测该株杂交瘤细胞分泌上清效价在1∶12800～1∶25600,纯化腹水效价为1∶105～1∶106。传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定;建立的间接竞争ELISA检测方法的最低检出限为0.001ng/ml,校正曲线的线性范围为0.005～5ng/ml,IC50为0.01ng/ml;与AFB1的结构类似物AFM1和化学结构有差异的脱氧雪腐镰刀菌烯醇的交叉反应率分别为1.4%和<1%。结论所制备的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体具有高度特异性和稳定性,可应用于间接竞争ELISA检测方法。

关键词：黄曲霉毒素B1 重链IgG2b亚型单克隆抗体酶联免疫试验

ELISA和UPLC-MS/MS联合检测粮食中玉米赤霉烯酮残留

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食品科学 2016年第16期37卷 229-234页

作者：李妍裴世春王岩高建伟甄玉萍马明欣张品谢铁志齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 岛津企业管理(中国)有限公司沈阳分公司辽宁沈阳110016 泰来县绿洲食品加工有限责任公司黑龙江齐齐哈尔162400

建立酶联免疫吸附分析(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和超高效液相色谱-串联质谱(ultra performance liquid chromatograph-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)联合测定粮食中玉米赤霉烯酮的快速检测方法。样品经乙腈-水-乙酸(70∶29∶1,V/V)溶液提取,采用ELISA筛选出阳性样品后利用UPLC-MS/MS进行验证。实验探讨了ELISA和UPLC-MS/MS联合检测法的有效性和测定中存在的问题及其矫正方法,并且研究了UPLC-MS/MS中样品净化与未净化的回收率。结果表明,本实验建立的ELISA和UPLC-MS/MS联合检测方法快速、高效,适用于大批量粮食样品中玉米赤霉烯酮残留量的快速评估。

关键词：玉米赤霉烯酮酶联免疫分析法超高效液相色谱-串联质谱联用仪粮食检测

抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立

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抗黄曲霉毒素M1单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立

不同培养条件对禾谷镰刀菌产玉米赤霉烯酮的影响

第十届中国科协年会

作者：裴世春黑龙江八一农垦大学食品学院

采用Aflatoxin M1-bovine serum albumin(BSA)conjugate免疫8周齢Balb/C小鼠,4次免疫后,使小鼠产生较强免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得一株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系。其染色体平均计数为90... 详细信息

采用Aflatoxin M1-bovine serum albumin(BSA)conjugate免疫8周齢Balb/C小鼠,4次免疫后,使小鼠产生较强免疫应答,取其脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合、筛选,最终获得一株能稳定分泌抗黄曲霉毒素M1的杂交瘤细胞株系。其染色体平均计数为90±10对,间接ELISA检测该株系培养上清的效价为1:6400,纯化腹水效价为5000×27,与黄曲霉毒素M1(AflatoxinM1,AFM1)及其结构类似物黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)和脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),统一的交叉反应率分别为100%、7%、0%。经传代30代后,抗体效价稳定。并在此基础上建立了间接竞争ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度是0.08ng/mL,校正曲线的线性范围为0.08～5ng/mL,线性回归方程为y=-8.0064X+83.403(R2=0.9976)。该方法的加标回收率为80.0%～128.3%。

关键词：黄曲霉毒素M1 酶联免疫吸附测定单克隆抗体

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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食品科学 2015年第21期36卷 168-174页

作者：甄玉萍裴世春高建伟王岩蒋媛媛齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

研究不同培养条件对禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)产玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)能力的影响。选取不同的培养基配比、培养时间、培养温度、摇床转速及光暗反应对禾谷镰刀菌进行培养。在单因素试验的基础上,分别采用正交试验设计... 详细信息

研究不同培养条件对禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)产玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)能力的影响。选取不同的培养基配比、培养时间、培养温度、摇床转速及光暗反应对禾谷镰刀菌进行培养。在单因素试验的基础上,分别采用正交试验设计和响应面设计的方法进行统计学分析。结果表明:禾谷镰刀菌的最适培养基为每升超纯水含葡萄糖60 g、KNO3 1.5 g、酵母浸出膏1.0 g、蛋白胨20 g、NaNO3 6.0 g、MgSO4 0.5 g、K2HPO4·3H2O 1.0 g、KCl 0.5 g、Fe2(SO4)3 0.025 g;当摇床转速为92 r/min、照明时间为10 h/d、培养温度为22.9℃时,20 d毒素质量浓度可达到249.80μg/L。

关键词：禾谷镰刀菌玉米赤霉烯酮酶联免疫吸附分析法真菌毒素

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采收期谷物中真菌毒素产毒菌的筛选鉴定

食品科学 2018年第10期39卷 312-317页

作者：裴世春李妍高建伟王岩王琳韩基东通化师范学院食品科学与工程学院吉林通化134032 齐齐哈尔大学食品与生物工程学院黑龙江齐齐哈尔161006 普菲特益斯生物科技(北京)有限公司北京101111 岭南大学生命应用科学学院韩国大邱38541

为筛选东北地区采收期小麦、玉米和水稻中的真菌毒素产毒菌,以酶联免疫吸附测定、超高效液相色谱-串联质谱联用技术和聚合酶链式反应为分析工具,通过真菌分离、液体培养、产毒菌初筛、产毒性定性分析和分离菌的基因序列比对,筛选出产玉... 详细信息

为筛选东北地区采收期小麦、玉米和水稻中的真菌毒素产毒菌,以酶联免疫吸附测定、超高效液相色谱-串联质谱联用技术和聚合酶链式反应为分析工具,通过真菌分离、液体培养、产毒菌初筛、产毒性定性分析和分离菌的基因序列比对,筛选出产玉米赤霉烯酮、呕吐毒素和伏马毒素的产毒菌6株,经DNA分析鉴定,分别属于Fusarium asiaticum、***、***和*** 4种真菌。本实验结果为我国针对性的防控粮食中产毒性真菌污染提供了基础性实验数据。

关键词：真菌毒素产毒菌分离鉴定脱氧核糖核酸序列镰刀菌属