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p16影响乙肝病毒相关性肝细胞肝癌的发生

中华肿瘤杂志 2003年第4期25卷 356-358页

作者：王兆文彭志海李克裘国强张益顾炜上海市第一人民医院普外科 200080

目的　探讨乙肝病毒 (HBV)基因整合和p16基因表达改变及其与肝细胞肝癌发生发展的关系。方法　 35例肝癌及癌旁肝组织为标本 ,采用聚合酶链式反应 (PCR)及Southernblot检测HBVX基因整合 ,以单链构象多态性分析确定p16基因突变 ,以RT PC... 详细信息

目的　探讨乙肝病毒 (HBV)基因整合和p16基因表达改变及其与肝细胞肝癌发生发展的关系。方法　 35例肝癌及癌旁肝组织为标本 ,采用聚合酶链式反应 (PCR)及Southernblot检测HBVX基因整合 ,以单链构象多态性分析确定p16基因突变 ,以RT PCR检测p16mRNA ,以Westernblot检测p16蛋白。结果　肝癌中X基因整合与p16mRNA及蛋白表达相关 (P <0 .0 5 ) ,肝癌及癌旁肝组织中p16蛋白表达缺失率分别为 6 2 .9%和 4 0 .0 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;癌组织中p16蛋白表达缺失与肝癌分化程度、癌细胞浸润有相关性 (P <0 .0 5 )。结论　X基因整合与p16蛋白缺陷有关 ,p16改变在肝细胞癌变各阶段发挥重要作用 ,并与肝癌的演进和侵袭有关。

关键词：乙肝病毒肝细胞癌 p16基因 X基因整合

p16/Rb蛋白表达及核因子-κB活性在肝细胞肝癌中的意义

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中华医学杂志 2004年第3期84卷 225-228页

作者：王兆文彭志海唐华美裘国强邢同海杨明智上海交通大学附属第一人民医院普外科 200080 上海交通大学附属第一人民医院病理科 200080

目的　探讨 p16和Rb蛋白 (pRb)以及核因子 κB(NF κB)活性在肝细胞肝癌 (HCC)发生中的相互关系及作用。方法　以Western印迹检测 35例HCC及癌旁组织 (距肿瘤至少 3cm)中p16蛋白和 pRb表达 ;以凝胶电泳迁移实验 (EMSA)和竞争实验检测... 详细信息

目的　探讨 p16和Rb蛋白 (pRb)以及核因子 κB(NF κB)活性在肝细胞肝癌 (HCC)发生中的相互关系及作用。方法　以Western印迹检测 35例HCC及癌旁组织 (距肿瘤至少 3cm)中p16蛋白和 pRb表达 ;以凝胶电泳迁移实验 (EMSA)和竞争实验检测组织中NF κB转录活性。结果HCC及癌旁组织 p16蛋白表达率分别为 37% (13/ 35 )和 4 8% (17/ 35 ) ;pRb表达率分别为 34%(12 / 35 )和 74 % (2 6 / 35 ) ,两组间差异有显著性 (P 0 0 5 )。结论　p16功能缺失在HCC发生过程中是早期事件 ,Rb功能缺失出现较晚 ;p16蛋白和Rb蛋白表达呈正相关关系 ;p16或Rb蛋白表达缺失 ,除影响细胞周期 ,还通过影响NF κB活性而抑制肝细胞凋亡 ,在HCC发生发展中发挥重要作用。

关键词： p16蛋白 Rb蛋白核因子-κB 肝细胞肝癌细胞周期抑癌基因

乙型肝炎后肝硬化肝移植乙型肝炎病毒再感染检测

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中华实验外科杂志 2005年第12期22卷 1464-1466页

作者：裘国强唐华美邓贵龙彭志海上海交通大学附属第一人民医院普外科 200080 上海交通大学附属第一人民医院病理科 200080

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA、YMDD变异及血清标志物在乙型肝炎肝硬化患者肝移植后HBV再感染检测的临床意义。方法定量聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA; HBV PCR产物限制性片段长度多态性分析检测YMDD变异;酶联免疫检测HBV血清标志物;... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)DNA、YMDD变异及血清标志物在乙型肝炎肝硬化患者肝移植后HBV再感染检测的临床意义。方法定量聚合酶链反应(PCR)检测HBV DNA; HBV PCR产物限制性片段长度多态性分析检测YMDD变异;酶联免疫检测HBV血清标志物;分析乙型肝炎患者肝移植后YMDD变异、HBV DNA及血清标志物检测结果。结果乙型肝炎肝硬化患者肝移植术后HBV再感染率为8．9％(17／189);YMDD变异病例达HBV再感染病例58．8％ (10／17);HBV DNA定量检测有较高的灵敏度,能早期诊断HBV的再感染,有利于临床治疗;对 HBV DNA阴性但HBsAg阳性病例,PreS1和HBeAg血清标志物可用于病毒复制的补充检测。结论乙型肝炎肝硬化患者肝移植后预防乙型肝炎复发应采用HBV DNA、YMDD变异及血清标志物联合检测。

关键词：肝移植肝炎病毒乙型肝炎肝硬化病毒感染

肝移植术后应用前列地尔对血清内皮素和肾脏血流的影响

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中华器官移植杂志 2007年第8期28卷 451-453页

作者：戚晓升彭志海裘国强杜联芳上海交通大学附属第一人民医院普外科上海市器官移植中心 200080 上海交通大学附属第一人民医院超声科上海市器官移植中心 200080

目的研究肝移植术后静脉应用前列地尔(PGE_1)对患者血清内皮素和肾脏血流的影响。方法将肝移植术后的患者分为治疗组(38例)及对照组(18例)。治疗组术后持续静脉泵入PGE_1,连续应用10d,对照组不应用PGE_1。检测围手术期两组患者的血清内... 详细信息

目的研究肝移植术后静脉应用前列地尔(PGE_1)对患者血清内皮素和肾脏血流的影响。方法将肝移植术后的患者分为治疗组(38例)及对照组(18例)。治疗组术后持续静脉泵入PGE_1,连续应用10d,对照组不应用PGE_1。检测围手术期两组患者的血清内皮素含量及肾脏血流指数。结果肝移植术前和术后当天治疗组和对照组血清内皮素含量均高于正常,但两组问差异无统计学意义(P>0.05);术后10d时,两组的血清内皮素均显著下降,但治疗组明显低于对照组(P0.05);术后10d时肾脏血管阻力指数下降,而治疗组要明显低于对照组(P<0.01)。术后10d时治疗组血清肌酐也明显低于对照组(P<0.01)。结论肝移植术后应用PGE_1能够明显改善肾功能;其主要作用机制为降低血清内皮素含量,扩张肾脏血管,增加其有效灌注量。

关键词：肝移植前列地尔肾功能

散发性结直肠癌染色体10q23～24区域杂合缺失分析

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中华医学杂志 2005年第30期85卷 2124-2127页

作者：郑海涛彭志海周崇治王兆文裘国强张放贺林山东大学山东省立医院普外科济南250012 上海交通大学上海第一人民医院普外科中科院上海生命科学院营养所

目的抑癌基因的杂合缺失(LOH)被认为是结直肠癌形成的通路之一,本实验拟通过对染色体10q23～24区的LOH分析,发现高频杂合缺失区域并筛查与结直肠癌相关的抑癌基因。方法7个荧光标记的微卫星引物(围绕D10S185位点)与83例结直肠癌的肿瘤... 详细信息

目的抑癌基因的杂合缺失(LOH)被认为是结直肠癌形成的通路之一,本实验拟通过对染色体10q23～24区的LOH分析,发现高频杂合缺失区域并筛查与结直肠癌相关的抑癌基因。方法7个荧光标记的微卫星引物(围绕D10S185位点)与83例结直肠癌的肿瘤和正常组织进行聚合酶链反应(PCR)反应。产物在ABIPrism377自动荧光测序仪进行电泳,以GeneScan3.1和Genotyper2.1软件进行扫描以及杂合缺失分析LOH。与临床病理因素之间的关系比较采用χ2检验。结果7个位点平均杂合缺失率为36.11%,以D10S583位点最高,达54.84%;最低是D10S205,21.3%。发现两个高频杂合缺失区域:一个在D10S583和D10S185之间,大约0.9cM(10q23.33)的距离;另一个在D10S1709和D10S1265位点之间,大约1.5cM(10q24.2～24.31)的距离。D10S1265位点的杂合缺失与Dukes分期显著相关,其余位点与临床病理因素均无显著相关。结论在散发性结直肠癌10q2324发现了两个高频LOH区域:10q23.33和10q24.2～24.31。除对磷脂酶同族蛋白(PTEN)基因外,10q上可能存在与散发性结直肠癌相关的其他抑癌基因。

关键词：结肿瘤直肠肿瘤杂合缺失染色体抑癌基因

激光捕获显微切割和基因芯片技术用于肿瘤实质细胞转录组的构建

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肿瘤 2008年第9期28卷 802-804页

作者：孙昱皓樊军卫裘国强周崇治彭志海上海交通大学附属第一人民医院普外科上海200080

目的：联合应用激光捕获显微切割和基因芯片技术构建纯化肿瘤实质细胞转录组。方法：应用激光捕获显微切割技术从肿瘤组织冰冻切片中获取纯化肿瘤实质细胞，提取RNA并对其进行线性扩增得到aRNA，合成cRNA探针后与全基因组基因芯片Affyme... 详细信息

目的：联合应用激光捕获显微切割和基因芯片技术构建纯化肿瘤实质细胞转录组。方法：应用激光捕获显微切割技术从肿瘤组织冰冻切片中获取纯化肿瘤实质细胞，提取RNA并对其进行线性扩增得到aRNA，合成cRNA探针后与全基因组基因芯片Affymetrix HG—U133．Plus 2．0 Gene—Chip杂交构建全基因组表达谱。结果：从5例结肠癌组织样本中各获取了3mm。细胞，抽提获得RNA118．4～300．3ng，混合后取100ng进行线性扩增获得aRNA 7ug。基因芯片各项质控标准符合基因表达谱芯片操作指南，共有18205条转录本表达，代表15276个基因。结论：联合应用激光捕获显微切割和全基因组基因芯片技术可构建纯化肿瘤实质细胞转录组。

关键词：结肠肿瘤激光显微切割分子探针技术

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散发性结直肠癌患者5号染色体杂合缺失分析

中华肿瘤杂志 2002年第5期24卷 458-460页

作者：张放周崇治凌云裘国强柏邵春刘万清贺林彭志海上海市第一人民医院普外科 200080 上海交通大学生命科学院分子遗传学实验室

目的　探讨散发性结直肠癌患者 5号染色体上与抑癌基因相关的杂合缺失 (LOH)情况 ,并探索新的抑癌基因位点。方法　对 83例散发性结直肠癌患者基因组DNA ,以 15个不同荧光标记的高度多态性微卫星引物 (平均遗传距离 12 .6 7cm)扩增相应... 详细信息

目的　探讨散发性结直肠癌患者 5号染色体上与抑癌基因相关的杂合缺失 (LOH)情况 ,并探索新的抑癌基因位点。方法　对 83例散发性结直肠癌患者基因组DNA ,以 15个不同荧光标记的高度多态性微卫星引物 (平均遗传距离 12 .6 7cm)扩增相应的微卫星位点 ,用ABIPRISM 377测序仪进行基因扫描 ,统计各位点杂合缺失率。结果　在 15个微卫星位点中 ,平均杂合缺失率为2 5 .80 %。5p中最高为D5S4 16 ,占 4 8.15 % ;5q中最高为D5S4 71,占 38.71%。D5S4 71周围的 3个位点(D5S4 2 8、D5S2 0 2 7和D5S2 115 )也存在高频的杂合缺失 (>30 .0 0 % )。结论　 5号染色体上存在着高频的杂合缺失 ,其中 5q13.3～ 31.1区域中 ,有与结直肠癌发生密切相关的APC、MCC、CTNNA1及IL家族等基因 ;而在 5p15 .1上的D5S4 16的杂合缺失率高达 4 8.15 % ,此区域至今尚未发现与结直肠癌相关的基因位点。

关键词：散发性结直肠癌 5号染色体染色体缺失肿瘤抑制基因微卫星位点

散发性结直肠癌22号染色体等位基因杂合缺失

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中华消化杂志 2003年第12期23卷 731-734页

作者：周崇治裘国强张放贺林彭志海上海交通大学第一人民医院普外科 200080 中国科学院上海生理研究所

目的　抑癌基因的杂合缺失是结直肠癌形成的关键步骤之一 ,一个等位基因已经异常的抑癌基因杂合缺失 (LOH)可导致肿瘤的形成。本实验研究结直肠癌 2 2号染色体杂合缺失情况并探讨其意义。方法　对 83例结直肠癌肿瘤患者与正常组织抽提的... 详细信息

目的　抑癌基因的杂合缺失是结直肠癌形成的关键步骤之一 ,一个等位基因已经异常的抑癌基因杂合缺失 (LOH)可导致肿瘤的形成。本实验研究结直肠癌 2 2号染色体杂合缺失情况并探讨其意义。方法　对 83例结直肠癌肿瘤患者与正常组织抽提的DNA用 6对荧光标记的微卫星标记引物行PCR反应。产物在ABIPrism 377自动荧光测序仪进行电泳 ,以GeneScan3.1和Genotyper 2 .1软件进行基因分型。LOH与临床病理参数之间的关系比较采用 χ2 检验。结果　 2 2号染色体平均杂合缺失率为 2 7.2 7% ,D2 2S2 80至D2 2S2 74 (2 2 q12 .2 -q13.33)区域表现出很高的杂合缺失率 ,以D2 2S2 80(2 2q12 .2 - q12 .3)和D2 2S2 74 (2 2 q13.32 -q13.33)两个位点最高 ,分别为 35 .0 9%和 34.0 4 %。在D2 2S2 74位点直肠癌的杂合缺失率为 5 0 % (9/ 18) ,高于近端结肠癌的 12 % (2 / 17) ,差异有显著性 (P =0 .0 18)。远端结肠癌的杂合缺失率为 4 2 % (5 / 12 ) ,较近端结肠的杂合缺失率高 ,但差异无显著性 ;远端结肠、直肠癌的杂合缺失率 (14 / 30 ,4 7% )高于近端结肠癌 (2 / 15 ,13% ,P =0 .0 15 ) ,提示远端结肠、直肠癌与近端结肠癌发生机制可能有所不同。结论　在 2 2号染色体长臂上可能存在与结直肠癌发生相关的抑癌基因。

关键词：散发性结肠癌散发性直肠癌 22号染色体等位基因杂合缺失抑癌基因

83例散发性结直肠癌D22S274位点杂合缺失分析

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肿瘤 2004年第1期24卷 18-20页

作者：周崇治裘国强张放贺林彭志海上海交通大学附属第一人民医院普外科上海200080 中科院上海生理所

目的　抑癌基因的杂合缺失 (LOH)被认为是结直肠癌形成的关键步骤之一 ,当一条等位基因已经异常的抑癌基因发生杂合缺失可导致肿瘤的形成。本实验通过对 83例散发性结直肠癌D2 2S2 74位点杂合缺失情况作一研究 ,并探讨其意义。方法　微... 详细信息

目的　抑癌基因的杂合缺失 (LOH)被认为是结直肠癌形成的关键步骤之一 ,当一条等位基因已经异常的抑癌基因发生杂合缺失可导致肿瘤的形成。本实验通过对 83例散发性结直肠癌D2 2S2 74位点杂合缺失情况作一研究 ,并探讨其意义。方法　微卫星DNA标记D2 2S2 74与 83例结直肠癌病例的肿瘤和正常组织进行PCR反应。 83例散发性结直肠癌 ,男 4 0例 ,女4 3例 ,年龄 31至 84岁 ,中位年龄 6 6岁。PCR产物在ABIPrism 377自动荧光测序仪进行电泳 3小时 ,以GeneScan3.1和Genotyper 2 .1软件进行遗传位点扫描以及杂合缺失分析。LOH与临床病理参数之间的关系比较采用 χ2 检验 ,P <0 .0 5被视为有统计学意义。结果　D2 2S2 74 (2 2 q13.32 13.33)位点的杂合缺失率 34.0 4 %。直肠癌的杂合缺失率为 5 0 % (9/ 18) ,高于近端结肠癌的 12 % (2 / 17) (P =0 .0 18) ,远端结肠癌的杂合缺失率为 4 2 % (5 / 12 )较近端结肠的杂合缺失率高 ,但无统计学差异 ,然而将远端结肠、直肠一起考虑 ,它们的杂合缺失率 (14 / 30 ,4 7% )高于近端结肠 (2 / 15 ,13% ) (P =0 .0 15 ) ,提示远端结肠、直肠癌与近端结肠癌发生机制可能有所不同。结论　 2 2 q13.32 13.33区域可能存在与结直肠癌发生相关的抑癌基因。

关键词：散发性结直肠癌 D22S274位点杂合缺失分析微卫星杂合缺失