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兽医大学学报 1989年第3期9卷 270-274页

作者：李爱民袁鸿锦兽医大学兽医公共卫生系

本实验应用生化萃取技术和体外人工培养技术,制备了肌旋毛虫匀浆(HO)抗原和排泄—分泌物(ES)抗原,并对两种不同来源抗原的部分生化特性和免疫学特性进行了比较。HO抗原通过SephadexG—200又分为第一峰(FP)和第二峰(SP)。在5～20％的聚... 详细信息

本实验应用生化萃取技术和体外人工培养技术,制备了肌旋毛虫匀浆(HO)抗原和排泄—分泌物(ES)抗原,并对两种不同来源抗原的部分生化特性和免疫学特性进行了比较。HO抗原通过SephadexG—200又分为第一峰(FP)和第二峰(SP)。在5～20％的聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳上,ES和FP抗原出现许多条电泳区带。ES、FP和HO抗原对小鼠的保护力(肌幼虫减少率)分别为78％,76％和46％。

关键词：旋毛虫旋毛虫病抗原免疫畜禽

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肌旋毛虫免疫亲和层析抗原的制备及其特性

兽医大学学报 1991年第4期11卷 369-373页

作者：刁有祥袁鸿锦陈贵连兽医大学公共卫生系

以Sepharose 4B为载体,兔抗旋毛虫多克隆抗体为配体,纯化了旋毛虫的S_3抗原,得到亲和层析抗原.本实验结果表明,存在于S_3抗原中的主要抗原成分,同样存在于亲和层析抗原中,亲和层析抗原的分子量范围在103000～40000 u之间,等电点范围在pH... 详细信息

以Sepharose 4B为载体,兔抗旋毛虫多克隆抗体为配体,纯化了旋毛虫的S_3抗原,得到亲和层析抗原.本实验结果表明,存在于S_3抗原中的主要抗原成分,同样存在于亲和层析抗原中,亲和层析抗原的分子量范围在103000～40000 u之间,等电点范围在pH4.7～8.8之间.亲和层析抗原经转印后,在硝酸纤维素膜上至少有7条显色带,其中分子量为48000 u,50000u,58000u和87000u的4种蛋白的抗原性较强,而以分子量为48000u的蛋白抗原性最强.

关键词：旋毛虫抗原亲和层析提取

抗旋毛虫单克隆抗体细胞林的建立及其特性鉴定

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兽医大学学报 1989年第2期9卷 159-163页

作者：王晓光袁鸿锦兽医大学卫生检验教研室

为筛选旋毛虫保护性抗原,建立了4株分泌抗旋毛虫McAb的细胞株。经连续培养30余代,仍稳定地分泌抗体。其中,2G3和2C10的靶抗原为旋毛虫幼虫表膜。免疫球蛋白型及亚鉴定表明,2G3和2C10为IgG_1,1D5为IgG_3,1C9为IgM。除2C10和IC9对伊氏... 详细信息

为筛选旋毛虫保护性抗原,建立了4株分泌抗旋毛虫McAb的细胞株。经连续培养30余代,仍稳定地分泌抗体。其中,2G3和2C10的靶抗原为旋毛虫幼虫表膜。免疫球蛋白型及亚鉴定表明,2G3和2C10为IgG_1,1D5为IgG_3,1C9为IgM。除2C10和IC9对伊氏锥虫可溶性抗原呈现阳性反应外,未见对猪圆线虫、猪囊尾蚴、伊氏锥虫表膜抗原和正常猪肉反应。经ELISA测定,2G3、2C10、1D5、1C9均可与施毛虫幼虫可溶性抗原作用,其腹水效价分别为1:50000、1:10000、1:1000、1:800。各McAb均与旋毛虫幼虫排泄分泌物抗原(ES抗原)作用,经ELISA测定表明,2G3腹水效价达1:320000。

关键词：旋毛虫单克隆抗体细胞株

应用生物素标记的DNA探针通过菌落杂交试验检测沙门氏菌

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中国人兽共患病杂志 1992年第6期8卷 23-25页

作者：刘纯杰周志江袁鸿锦中国人民解放军兽医大学公共卫生系

本实验应用Bio-11-dUTP标记的两个沙门氏菌属特异性核酸探针(Bio-8-0kb探针和Bio-3.4kb探针)成功地通过菌落杂交试验检测了60个血清型中的100株沙门氏菌。生长在硝酸纤维素滤膜上的菌落,经过溶菌酶,蛋白酶K、RNase及苯酚-氯仿严格的处... 详细信息

本实验应用Bio-11-dUTP标记的两个沙门氏菌属特异性核酸探针(Bio-8-0kb探针和Bio-3.4kb探针)成功地通过菌落杂交试验检测了60个血清型中的100株沙门氏菌。生长在硝酸纤维素滤膜上的菌落,经过溶菌酶,蛋白酶K、RNase及苯酚-氯仿严格的处理程序处理后,可以有效地消除内源性生物素、糖蛋白及生物素类似物等易与链亲和素结合产生非特异性反应的物质,从而获得了特异的杂交结果。此试验有利于使沙门氏菌核酸探针检测技术在基层得到推广应用。

关键词：菌落杂交试验沙门氏杆菌属

旋毛虫病的研究(第一报)——对肌旋毛虫包囊的形成、形态结构及其在肌组织中位置问题的研究

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中国兽医学报 1981年第1期 4-14页

作者：袁鸿锦兽医卫生检验教研室

旋毛虫病(Trichinellasis)是一种人畜共患的寄生虫病。世界各国均有流行。我国于一八八一年从动物(猪)中首次检出。人体旋毛虫病是于一九六四年自西藏地区首次报道。近年来,我国人、畜旋毛虫病的发病情况日趋严重。除云南、西藏边远地... 详细信息

旋毛虫病(Trichinellasis)是一种人畜共患的寄生虫病。世界各国均有流行。我国于一八八一年从动物(猪)中首次检出。人体旋毛虫病是于一九六四年自西藏地区首次报道。近年来,我国人、畜旋毛虫病的发病情况日趋严重。除云南、西藏边远地区多发之外,自75年以来,我们在吉林省(1975、1980)、辽宁省(1979)、黑龙江省(1980)以及河南省等地、先后确诊了人体感染旋毛虫病的事例廿余起,染病者200余例。证明我国内地城市“熟食地区”的居民也常有本病的发生。我国屠宰猪群中,旋毛虫病的检出率,一般为0.1～0.2％左右,近年来有所增长,某些地区报道,检出率达2.0～7.0％。一九七九年五月,在“全国旋毛虫检验技术座谈会议”过程中,进行现场检验和一九八○年一月,作者所进行的调查、统计,证明河南省南阳地区某县社屠宰猪群,旋毛虫检出率高达50％左右。多年来,在教学与生产实践中,遇到了很多有关旋毛虫的具体问题。为了解决这些问题,作者在对旋毛虫正常生活史进行了实验观察的基础上,着重地研究了旋毛虫包囊的形成、形态结构、存在位置以及旋毛虫的死亡转归等问题;研究了旋毛虫幼虫的“感染力”和肉眼对虫体的“可见度”、并对食肉卫生检验工作中的旋毛虫“目检法”评价的问题;研究了因吃羊肉引起人体旋毛虫病的病原问

关键词：旋毛虫病成肌细胞胞核人畜共患病包囊形成肌细胞膜肌组织肌肉组织形态结构

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脂肪酶产生菌的筛选、诱变及产酶条件的研究

兽医大学学报 1990年第4期10卷 318-322页

作者：张胜利袁鸿锦陈贵连兽医大学公共卫生系

从长春市油脂厂采集的土壤样品中分离到1株脂肪酶活力较高的白地霉1522(其发酵液酶活力为35U/mL)。以此为出发菌株,经紫外线、氯化锂、盐酸羟胺、亚硝基胍等诱变筛选后,获得1株高活力脂肪酶产生菌N79(其发酵液酶活力达80U/mL)。对诱变株... 详细信息

从长春市油脂厂采集的土壤样品中分离到1株脂肪酶活力较高的白地霉1522(其发酵液酶活力为35U/mL)。以此为出发菌株,经紫外线、氯化锂、盐酸羟胺、亚硝基胍等诱变筛选后,获得1株高活力脂肪酶产生菌N79(其发酵液酶活力达80U/mL)。对诱变株N79最适培养条件的研究表明,其最适培养基组成为:蛋白胨4%,山梨醇0.75%,橄榄油0.5%,MgSO4·7H2O 0.1%;产酶最适发酵条件是,培养液起始pH为6.0～6.5,发酵温度为26～30℃,通气量为每250mL三角烧瓶中盛培养液30mL,发醇时间为32～36h。在量适培养条件下,其发酵液酶活力可达到105-115U/mL。白地霉N79的发酵液经硫酸铵盐析制得脂肪酶粗制品,它在聚乙烯醇橄榄油乳化液系统中,水解橄榄油的最适pH为7.8,最适温度为42℃,在pH4-8、4℃下存放24h及pH7.5、40℃下保温15min,酶活力不变。

关键词：脂肪酶产生菌筛选诱变产酶条件

旋毛虫S_3抗原的提取及其抗独特型抗体制备

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兽医大学学报 1990年第4期10卷 332-335页

作者：刘明远袁鸿锦陈贵连兽医大学公共卫生系

通过匀浆、差速离心等方法提取旋毛虫肌幼虫S3抗原,并对其进行了琼脂双向双扩散、免疫电泳、聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、薄层等电聚焦电泳、肌幼虫孵化试验等免疫学和生化特性分析。以S3抗原免疫兔,再将其抗体免疫同种异体兔,经亲和层析... 详细信息

通过匀浆、差速离心等方法提取旋毛虫肌幼虫S3抗原,并对其进行了琼脂双向双扩散、免疫电泳、聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳、薄层等电聚焦电泳、肌幼虫孵化试验等免疫学和生化特性分析。以S3抗原免疫兔,再将其抗体免疫同种异体兔,经亲和层析共获得3株抗独特型抗体(R1、R2、R3)。固相放射免疫竞争抑制试验表明,随着抗独特型抗体浓度的升高,其对125I标记的S3抗原-兔Ab1系统及人Ab1系统抑制率均升高,其中R1株对以上两系统的最高抑制率分别达92%和68%。进而证实,3株抗独特型抗体可变区结构与旋毛虫肌幼虫S抗原的决定簇或其邻近结构是相似的,为种间交叉反应型抗独特型抗体。

关键词：旋毛虫抗原抗体抗独特型制备

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用抗旋毛虫单克隆抗体纯化抗原诊断旋毛虫病

细胞与分子免疫学杂志 1990年第2期 55-56页

作者：王晓光袁鸿锦张让堂兽医大学公共卫生系兽医大学公共卫生系长春 130062

旋毛虫病的血清学诊断方法很多,但假阳性反应未能完全排除。作者用旋毛虫单克隆抗体(McAb)免疫亲和层析法,对粗制抗原进行纯化,再用纯化抗原作ELISA,诊断旋毛虫病,提高了诊断的特异性。1 材料和方法制取纯净的裸肌旋毛虫幼虫,于0.01mol... 详细信息

旋毛虫病的血清学诊断方法很多,但假阳性反应未能完全排除。作者用旋毛虫单克隆抗体(McAb)免疫亲和层析法,对粗制抗原进行纯化,再用纯化抗原作ELISA,诊断旋毛虫病,提高了诊断的特异性。1 材料和方法制取纯净的裸肌旋毛虫幼虫,于0.01mol/L pH7.2 PBS中超声(15kHz,每次5min,共4次)匀浆,以7500r/min将匀浆离心10min,收集上清液,此即为旋毛虫可溶性粗制抗原。经分光光度计测

关键词：旋毛虫属抗原,蠕虫抗体,单克隆色谱法,亲和

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T-2毒素的生物鉴定、提取及对动物的毒性

兽医大学学报 1991年第2期11卷 152-157页

作者：赵君袁鸿锦邓旭明杨进生兽医大学公共卫生系军事医学科学院

用家兔皮肤毒性试验测得三线镰刀菌污染玉米中T—2毒素的含量约为1.8g/kg试验灵敏度为0.08μg.此霉玉米经提取纯化后得白色针状结晶,根据毒素结晶的熔点、C、H元素含量、红外光谱、质谱碎片峰及1H核磁共振谱确证为T-2毒素,纯度为95.84%... 详细信息

用家兔皮肤毒性试验测得三线镰刀菌污染玉米中T—2毒素的含量约为1.8g/kg试验灵敏度为0.08μg.此霉玉米经提取纯化后得白色针状结晶,根据毒素结晶的熔点、C、H元素含量、红外光谱、质谱碎片峰及1H核磁共振谱确证为T-2毒素,纯度为95.84%.毒素对锦鲤鱼苗72、96、120的LD_(50)分别为0.0847±0.0034ppm,0.0760±0.0053ppm,0.0705±0.0036ppm.每天连续口服毒素0.5～1mg/kg体重,可引起犬的出血性综合征,表现为呕吐、便血,尸检见肠道出血坏死,且充满大量的血液;组织学检查表明,肠粘膜广泛的出血坏死,牌小体萎缩和数量减少,骨髓造血细胞消失.将毒素给小鼠连续灌胃(2mg/kg体重),可引起骨髓核细胞数下降,但停毒后,逐渐恢复到正常水平.

关键词： T-2毒素生物鉴定毒性试验动物