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思政教育融入医学生物化学课程的研究与实践

农垦医学 2024年第2期46卷 178-180页

作者：冯苗苗袁武梅张云华石河子大学医学院学生工作办公室新疆石河子832002 石河子大学新疆地方与民族高发病教育部重点实验室/医学院生化教研室新疆石河子832002

思政教育是高等教育中的重要组成部分,也是医学生物化学教学中不可或缺的一环。本文旨在探讨如何将思政教育融入医学生物化学教学中,以提高医学生的思想道德素质和专业知识水平。首先,本文介绍了思政教育的基本概念和重要意义,以及医学... 详细信息

思政教育是高等教育中的重要组成部分,也是医学生物化学教学中不可或缺的一环。本文旨在探讨如何将思政教育融入医学生物化学教学中,以提高医学生的思想道德素质和专业知识水平。首先,本文介绍了思政教育的基本概念和重要意义,以及医学生物化学教学的特点和现状;然后分析了思政教育与医学生物化学教学的相互关系,并提出了将思政教育融入医学生物化学教学的具体方法和策略;以实践案例为例,探讨了思政教育融入医学生物化学教学的效果和体会,指出了今后进一步推进思政教育融入医学生物化学教学的方向和重点。

关键词：思政教育医学生物化学教学融合教育实践

卡波氏肉瘤组织中差异表达miRNA靶基因预测及生物信息学分析

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病毒学报 2022年第4期38卷 880-888页

作者：罗婷赵娟潘洋洋袁武梅曾妍石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832000

卡波氏肉瘤(Kaposi sarcoma,KS)在全球范围内是人免疫缺陷病毒感染者第二易患的肿瘤。本研究旨在确定KS中差异表达的关键微小RNA(microRNA,miRNA)及其靶基因和相关途径,为深入了解该疾病的分子机制提供理论基础。本研究通过测序获得KS... 详细信息

卡波氏肉瘤(Kaposi sarcoma,KS)在全球范围内是人免疫缺陷病毒感染者第二易患的肿瘤。本研究旨在确定KS中差异表达的关键微小RNA(microRNA,miRNA)及其靶基因和相关途径,为深入了解该疾病的分子机制提供理论基础。本研究通过测序获得KS组织及瘤旁组织中的差异miRNA,借助starBase数据库预测差异表达miRNA的靶基因,同时用基因本体论(Gene Ontology,GO)数据库、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)、Reactome通路富集和转录因子注释分析差异miRNA的靶基因,最后用实时荧光定量PCR(Quantitative Real⁃time PCR,qRT⁃PCR)验证下调最明显的三个miRNA。结果显示,上、下调差异miRNA分别为39个和67个。GO和KEGG富集分析显示,上调的差异miRNA靶基因主要富集在组蛋白修饰、核染色质、DNA−结合转录激活因子活性等生物学功能,主要通过cAMP信号通路和长时程增效等通路参与KS的疾病进程;下调的差异miRNA主要与组蛋白修饰、细胞前沿和蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶的活性有关,主要通过FoxO及Hippo等信号通路参与KS的疾病进程。Reactome富集显示,差异miRNA多集中在受体酪氨酸激酶信号、信号转导疾病和PI3K⁃Akt等信号通路。转录因子注释结果显示,肿瘤蛋白P53(Tumor Protein P53,TP53)、叉头框转录因子O亚族1(Forkhead Box Protein O1,FOXO1)和叉头框转录因子O亚族3(Forkhead Box Protein O3,FOXO3)等转录因子可能和KS的发生发展密切相关。qRT⁃PCR结果显示,测序中下调最明显的三个miRNA在KSHV感染细胞中均显著下调。总之,本研究筛选出了KS组织中差异表达的miRNA,对其靶基因进行了一系列生物信息学分析,并初步发现miR⁃651⁃3p,miR⁃223⁃3p及miR⁃186⁃5p通过Hippo、FoxO及PI3K⁃AKT信号通路可能在KS的疾病进程中发挥重要作用。这些研究均为探寻KS的发病机制和靶向干预提供了有力的理论基础。

关键词：卡波氏肉瘤(KS) 肿瘤差异表达 miRNA 靶基因生物信息学

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中国皮肤性病学杂志 2022年第11期36卷 1232-1239页

作者：潘洋洋赵娟罗婷袁武梅曾妍新疆地方与民族高发病重点实验室新疆石河子832002

目的研究miR-485-5p在卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma, KS)和卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染患者血清及KSHV感染细胞中的表达及其对细胞生物学功能的影响。方法 dbDEMC数据库分析miR-485-5p在肉瘤组织中的表达。qRT-PCR分别检测miR-4... 详细信息

目的研究miR-485-5p在卡波西肉瘤(Kaposi′s sarcoma, KS)和卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)感染患者血清及KSHV感染细胞中的表达及其对细胞生物学功能的影响。方法 dbDEMC数据库分析miR-485-5p在肉瘤组织中的表达。qRT-PCR分别检测miR-485-5p在KS和KSHV感染患者血清及KSHV感染细胞中的表达水平。miR-485-5p模拟物(miR-485-5p mimic)、miR-485-5p抑制剂(miR-485-5p inhibitor)及对照分别转染到iSLK-219细胞中,CCK-8法和平板克隆检测细胞增殖能力,划痕愈合及transwell实验检测细胞迁移侵袭能力。同时通过Western blot检测EMT(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白的表达。结果 miR-485-5p在KS和KSHV感染患者血清及KSHV感染细胞中均高表达(P<0.05)。iSLK-219细胞中转染miR-485-5p模拟物后细胞的增殖及迁移侵袭能力增强,而转染miR-485-5p抑制剂后细胞的增殖及迁移侵袭能力减弱(P<0.05)。iSLK-219细胞中转染miR-485-5p模拟物后可促进EMT标志物分子的表达,而转染miR-485-5p抑制剂后可抑制EMT标志物分子的表达(P<0.05)。结论 miR-485-5p在KS和KSHV感染患者血清及KSHV感染细胞中均高表达,且可促进细胞的增殖、迁移侵袭及EMT进程,其有可能作为KSHV感染相关疾病的潜在临床诊治靶点。

关键词： miR-485-5p 卡波西肉瘤相关疱疹病毒(KSHV) 迁移侵袭上皮-间质转化

乳腺癌患者外周血中颗粒酶B和穿孔素的表达及意义

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实用医学杂志 2023年第22期39卷 2872-2877页

作者：庄赵为袁武梅任作东李上飞陈明贵曾妍石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002 广东医科大学附属湛江中心医院精准医学检验实验室广东湛江524037

目的分析乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达对乳腺癌的诊断价值,明确颗粒酶B和穿孔素的表达与乳腺癌分子分型、肿瘤分期等临床病理特征的相关性及其对乳腺癌治疗效果的评价。方法应用流式细胞术检测108例乳腺癌... 详细信息

目的分析乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达对乳腺癌的诊断价值,明确颗粒酶B和穿孔素的表达与乳腺癌分子分型、肿瘤分期等临床病理特征的相关性及其对乳腺癌治疗效果的评价。方法应用流式细胞术检测108例乳腺癌和70例乳腺良性疾病患者样本中CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞及NK细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达;采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各指标对乳腺癌的诊断效能,比较不同临床病理特征乳腺癌患者颗粒酶B和穿孔素的表达及治疗前后各指标的变化。结果乳腺癌患者T淋巴细胞亚群与NK细胞中颗粒酶B和穿孔素表达均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞及NK细胞中颗粒酶B和穿孔素阳性率的曲线下面积(AUC)大于0.5。CD3^(+)T细胞中颗粒酶B和穿孔素的表达与乳腺癌肿瘤大小及临床分期呈正相关(P<0.05),CD8^(+)T细胞中颗粒酶B也与乳腺癌肿瘤大小及临床分期呈正相关(P<0.05)。乳腺癌患者淋巴结转移组中CD3^(+)T细胞中颗粒酶B和穿孔素表达明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。乳腺癌患者治疗后外周血T淋巴细胞中颗粒酶B和穿孔素表达高于治疗前(P<0.05)。结论外周血CD3^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和NK细胞中颗粒酶B及穿孔素的表达对于诊断乳腺癌有一定的参考价值,且与肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期有关,可辅助临床上乳腺癌的早期筛查、诊断及治疗效果评价。

关键词：乳腺癌 T淋巴细胞 NK细胞颗粒酶B 穿孔素分子分型

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孕妇血清中早孕因子的分离纯化及鉴定

孕妇血清中早孕因子的分离纯化及鉴定

作者：袁武梅新疆医科大学

学位级别：硕士

目的：采用离子交换层析、亲和层析和反相高效液相色谱（HPLC，High Performance Liquid Chromatography）技术，从人早孕血清中分离纯化早孕因子（EPF，Early Pregnancy Factor）。建立一条稳定高效的分离纯化EPF的技术路线，以获得充... 详细信息

目的：采用离子交换层析、亲和层析和反相高效液相色谱（HPLC，High Performance Liquid Chromatography）技术，从人早孕血清中分离纯化早孕因子（EPF，Early Pregnancy Factor）。建立一条稳定高效的分离纯化EPF的技术路线，以获得充足高纯度的EPF作为抗原，为进一步制备抗-EPF单克隆抗体作准备。方法：人早孕血清依次经过DEAE52阴离子交换层析，SP Sepharose F．F阳离子交换层析，ConA Sepharose4B和Heparin Sepharose Cl 6B亲和层析分离纯化，早孕因子活性采用经典的活性玫瑰花环抑制实验（Ea-RIT）检测，得到具有早孕因子活性的Hep-Ⅱ组分，利用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定纯化物。进一步采用反相HPLC纯化Hep-Ⅱ组分。结果：经离子交换层析、亲和层析分离纯化人早孕血清730ml，得到Hep-Ⅱ组分2.34mg，经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳显示两条带，相对分子量分别为46.30kDa和10.71kDa。Hep-Ⅱ组分经过反相HPLC纯化后得到两个吸收峰，经Ea-RIT检测第二个峰具有EPF活性，蛋白质定量检测后确定得到1.17mg早孕因子。结论：本课题建立了一条通过离子交换层析、亲和层析和反相HPLC从人早孕血清中分离纯化EPF的技术路线，并成功从730ml人早孕血清中分离得到1.17mg活性较强的EPF。

关键词：孕血清早孕因子纯化鉴定

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长效重组人干扰素的研究进展

中华实验和临床病毒学杂志 2013年第2期27卷 150-152页

作者：袁武梅郑丽舒中国疾病预防控制中心卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京100052

干扰素（interferon，IFN）是机体在细菌或病毒刺激下产生的一类细胞因子，是由单核细胞、淋巴细胞以及体细胞所产生的一类糖蛋白，是机体防御体系重要的组成部分。根据细胞来源和受体的不同，干扰素可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ型。

关键词：重组人干扰素细胞因子单核细胞淋巴细胞防御体系细胞来源糖蛋白体细胞

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干扰素λ1在CHO细胞中的表达

中华实验和临床病毒学杂志 2013年第3期27卷 190-192页

作者：袁武梅麻粉莲张骞郑文芝郑丽舒新疆医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室 830011 中国疾病预防控制中心卫生部医学病毒和病毒病重点实验室

目的构建干扰素λ1表达载体PCI-dhfr-λ1和连接增强子SP163的表达载体PCI-dhfr-SP163-λ1,并在CHO（dhfr-）细胞中表达.方法在合成的干扰素λ1基因中引入相应酶切位点,并通过融合PCR获得连接增强子SP163-λ1基因,测序正确后将该基因... 详细信息

目的构建干扰素λ1表达载体PCI-dhfr-λ1和连接增强子SP163的表达载体PCI-dhfr-SP163-λ1,并在CHO（dhfr-）细胞中表达.方法在合成的干扰素λ1基因中引入相应酶切位点,并通过融合PCR获得连接增强子SP163-λ1基因,测序正确后将该基因插入表达载体PCI-dhfr,构建重组表达载体PCI-dhfr-λ1和PCI-dhfr-SP163-λ1.将所构建的重组表达载体用脂质体法转入CHO（dhfr-）细胞,通过间接免疫荧光法和Western Blot鉴定了λ1蛋白的表达,应用细胞病变抑制法初步鉴定了λ1蛋白的抗病毒活性.结果成功构建了干扰素λ1真核表达载体PCI-dhff-λ1和PCI-dhfr-SP163-λ1.免疫荧光结果显示分别转染了两种表达载体的CHO（dhfr-）细胞均能表达干扰素λ1蛋白,SP163增强子明显增强了干扰素λ1蛋白的表达,Western Blot结果显示转染SP163的CHO（dhfr-）细胞表达干扰素λ1蛋白.通过细胞病变抑制实验,在转染细胞48h后的细胞培养液中检测到了干扰素λ1的抗病毒活性.结论本研究成功的在CHO（dhfr-）细胞中表达了干扰素λ1,表达的蛋白具有抗病毒活性,为进一步建立稳定表达干扰素λ1的细胞系提供了条件.

关键词：干扰素类细胞,培训的增强子元件(遗传学)

JY佐剂对人乳头瘤病毒18型L1蛋白病毒样颗粒黏膜免疫效果的影响

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中国生物制品学杂志 2013年第5期26卷 585-589页

作者：麻粉莲袁武梅张骞郑文芝赵智慧郑丽舒中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京102206 新疆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室新疆乌鲁木齐830011

目的探讨JY佐剂对人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)18型L1蛋白病毒样颗粒(Virus-like parti-cle,VLP)黏膜免疫效果的影响,并观察鼻腔反复免疫后与HPV58、11和6型的免疫交叉反应。方法用含或不含JY佐剂的HPV18 L1 VLP分别经肌肉... 详细信息

目的探讨JY佐剂对人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)18型L1蛋白病毒样颗粒(Virus-like parti-cle,VLP)黏膜免疫效果的影响,并观察鼻腔反复免疫后与HPV58、11和6型的免疫交叉反应。方法用含或不含JY佐剂的HPV18 L1 VLP分别经肌肉和鼻腔免疫BALB/c小鼠,并设PBS对照组,于第0、3、6周各免疫1次,免疫后第2、5、8周采血,ELISA法检测血清IgG抗体滴度;于第8周分离脾淋巴细胞并收集呼吸道灌洗液,采用IFNγELISPOT试剂盒检测细胞免疫效果,ELISA法检测黏膜免疫效果;鼻腔免疫各组取5只小鼠,继续免疫10次,每次间隔3周,收集第14、20、26、32和38周的血清,ELISA法检测HPV18 L1蛋白与HPV58、11和6型的免疫交叉反应。结果免疫3次后,不含或含有佐剂的HPV18 L1蛋白经肌肉免疫后的血清IgG抗体滴度(均为104.6)高于经鼻腔免疫后的血清IgG抗体滴度(分别为101.9和102.8)。含有佐剂的HPV18 L1蛋白经鼻腔免疫后呼吸道灌洗液中sIgA抗体浓度(30.06μg/ml)明显高于不含佐剂的HPV18 L1蛋白鼻腔免疫组(23.47μg/ml)(P0.05)。HPV18 L1免疫小鼠后的血清与HPV58、11和6型之间均有交叉反应,在第32周血清特异性IgG抗体滴度最高。结论 HPV18 L1 VLP经肌肉免疫后,其血清抗体水平高于鼻腔免疫组,但该蛋白鼻腔免疫后细胞免疫反应和黏膜sIgA抗体水平均高于肌肉免疫组;JY佐剂能增强HPV18 L1蛋白经鼻腔免疫后的小鼠细胞反应及黏膜sIgA抗体应答,但肌肉免疫组佐剂作用不明显;HPV18 L1蛋白反复鼻腔免疫后,可拓宽抗原保护谱。

关键词： JY佐剂人乳头瘤病毒18 L1蛋白病毒样颗粒黏膜免疫

人多瘤病毒KI和WU PCR检测方法的建立及应用

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中华实验和临床病毒学杂志 2015年第3期29卷 266-269页

作者：张骞郑文芝袁武梅麻粉莲郑丽舒中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所卫生部医学病毒和病毒病重点实验室北京100052

目的针对人多瘤病毒KI株和WU株,建立一种快速、特异、灵敏的标准SOP,并初步应用于200例北京地区呼吸道感染儿童的NPA（Nasopharyngea Aspirates）的检测.方法设计巢式PCR和实时荧光定量PCR方法,检测KIPyV和WUPyV基因,并对扩增产物进... 详细信息

目的针对人多瘤病毒KI株和WU株,建立一种快速、特异、灵敏的标准SOP,并初步应用于200例北京地区呼吸道感染儿童的NPA（Nasopharyngea Aspirates）的检测.方法设计巢式PCR和实时荧光定量PCR方法,检测KIPyV和WUPyV基因,并对扩增产物进行序列分析,比较其应用于儿童NPA的检测效果.结果 KIPyV和WUPyV的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测灵敏性分别为10拷贝/μl和1拷贝/μl,高于巢式PCR（500拷贝/μl）,两种检测方法中均无其他呼吸道病毒阳性扩增.TaqMan探针实时荧光定量PCR可重复性检测中KIPyV和WUPyV的CV值分别小于2.9％和1.95％.应用巢式PCR KIPyV和WUPyV阳性检出率为1.5％和8％,TaqMan探针实时荧光定量PCR检测检出率为12％、14％.结论本研究建立了一种灵敏性、可重复性好、特异性高的快速核酸检测方法,其在临床上有较好的应用前景。

关键词：多病病毒属逆转录聚合酶链反应