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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2017年第2期37卷 217-225页

作者：何磊袁发浒陈婷黄强王玉刘志国 Department of Blood Transfusion Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology School of Medicine Jianghan University School of Biology and Pharmaceutical Engineering Wuhan Polytechnic University Department of Biochemistry and Molecular Biology School of Basic MedicineTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology

Fibronectin containing extra domain A（EDA~＋ FN）,a functional glycoprotein participating in several cellular processes,correlates with chronic liver ***,we aim to investigate the expression and secretion of EDA~＋ FN from hepatocytes in nonalcoholic fatty liver disease（NAFLD） and the underlying *** levels of EDA~＋ FN were determined by ELISA in clinical *** blotting and flow cytometry were performed on L02 and Hep G2 cell lines to analyze whether the levels of EDA~＋ FN were associated with endoplasmic reticulum（ER） stress-related cell *** levels of EDA~＋ FN in NAFLD patients were significantly higher than those in control subjects,and positively related with severity of ultrasonographic steatosis *** cultured hepatocytes,palmitate up-regulated the expression of EDA~＋ FN in a dose-dependent ***,when the cells were pretreated with 4-phenylbutyrate,a specific inhibitor of ER stress,up-regulation of EDA~＋ FN could be ***,silencing CHOP by sh RNA enhanced the release of EDA~＋ FN from hepatocytes following palmitate treatment,which was involved in ER stress-related cell *** findings suggest that the up-regulated level of EDA~＋ FN is associated with liver damage in NAFLD,and ER stress-mediated cell damage contributes to the release of EDA~＋ FN from hepatocytes.

关键词： fibronectin ER stress nonalcoholic fatty liver disease necrosis

慢性阻塞性肺疾病中铁死亡相关特征基因的筛选及中药预测

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时珍国医国药 2023年第8期34卷 2044-2048页

作者：袁发浒王福燕江汉大学医学部湖北武汉430056

目的利用生物信息学分析识别慢性阻塞性肺疾病(COPD)与铁死亡相关的关键基因,并预测可作用于这些靶点的中药。方法从基因表达数据库(GEO)检索并下载COPD数据集(GSE151052),使用R软件包DESeq2计算筛选差异表达基因(DEG),并进一步进行基... 详细信息

目的利用生物信息学分析识别慢性阻塞性肺疾病(COPD)与铁死亡相关的关键基因,并预测可作用于这些靶点的中药。方法从基因表达数据库(GEO)检索并下载COPD数据集(GSE151052),使用R软件包DESeq2计算筛选差异表达基因(DEG),并进一步进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。采用WGCNA算法获得DEG关键模块,将关键模块中的基因集与铁死亡数据库(FerrDb v2)中的铁死亡相关基因取交集,得到差异表达的铁死亡相关核心基因(DE-FRG)。最后利用COREMINE数据库对DE-FRG进行中药预测。结果从COPD患者肺组织中筛选得到16个DE-FRG,功能富集分析显示这些基因主要集中在氧化应激通路;以DE-FRG为靶点预测出丹参、黄芪、五味子、茯苓等48种中药。结论丹参等中药的相关成分可能通过调控铁死亡相关基因的表达,影响肺组织的细胞铁死亡和炎症反应达到治疗慢性阻塞性肺病的作用。

关键词：慢性阻塞性肺疾病细胞铁死亡特征基因中药

D型Fmoc-苯丙氨酸/透明质酸复合双网络水凝胶的制备及应用

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复合材料学报 2021年第10期38卷 3443-3453页

作者：付成刘敏鲁望婷袁发浒李雯慧邓云江汉大学交叉学科研究院武汉430056 江汉大学医学院武汉430056

将N-芴甲氧羰基-D-苯丙氨酸(Fmoc-^(D)Phe)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(Glycidyl methacrylate,GMA)修饰的透明质酸(HA-GMA)在磷酸缓冲液中共混加热,冷却后Fmoc-^(D)Phe分子先自组装形成超分子水凝胶,超分子水凝胶中的HA-GMA再经光照引发交... 详细信息

将N-芴甲氧羰基-D-苯丙氨酸(Fmoc-^(D)Phe)和甲基丙烯酸缩水甘油酯(Glycidyl methacrylate,GMA)修饰的透明质酸(HA-GMA)在磷酸缓冲液中共混加热,冷却后Fmoc-^(D)Phe分子先自组装形成超分子水凝胶,超分子水凝胶中的HA-GMA再经光照引发交联制备双网络复合水凝胶。研究该双网络水凝胶的力学性能、光学性质、微观形貌、药物缓释能力和抑菌性能。研究结果表明,双网络水凝胶比HA-GMA单网络水凝胶的力学性能强一倍左右且HA-GMA网络存在于双网络水凝胶中;光学性质显示双网络水凝胶中存在Fmoc-^(D)Phe网络;微观形貌表明有两种水凝胶网络均存在于复合水凝胶中。当复合水凝胶包裹小分子模拟药物后,复合水凝胶达到模拟药物最大累积释放量的时间要比Fmoc-^(D)Phe单网络水凝胶的长6 h;针对革兰氏阳性细菌的抑菌能力研究显示,双网络水凝胶的抑菌效果也比Fmoc-^(D)Phe单网络水凝胶的更好。

关键词： D型Fmoc-苯丙氨酸透明质酸复合水凝胶药物释放抑菌性能

基于化学成分药理作用及网络药理学的菝葜质量标志物预测分析

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时珍国医国药 2022年第11期33卷 2805-2809页

作者：王福燕江丰范小龙袁发浒江汉大学医学院湖北武汉430056 湖北省食品质量安全监督检验研究院湖北武汉430040

目的基于中药质量标志物核心理论,通过网络药理学分析确立菝葜(Smilax china L.)的质量标志物。方法以中药菝葜为对象,通过收集整理菝葜的化学成分,归纳菝葜的药理作用,并利用网络药理学确立中药菝葜的成分-靶点-通路网络,再基于中医... 详细信息

目的基于中药质量标志物核心理论,通过网络药理学分析确立菝葜(Smilax china L.)的质量标志物。方法以中药菝葜为对象,通过收集整理菝葜的化学成分,归纳菝葜的药理作用,并利用网络药理学确立中药菝葜的成分-靶点-通路网络,再基于中医理论选择潜在的菝葜质量标志物。结果综合文献及多个数据库记录,共纳入48个活性成分进行分析,筛选出山柰素、柚皮素、4’,5,7-三甲氧基黄酮、薯蓣皂苷、甲基原薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、(2R,3S)-2-(3,5-二羟基苯基)色胺-3,5,7-三醇、花旗松素、maackoline、(+)-儿茶素等10个化合物作为候选质量标志物。结论以中药Q-marker“有效性”为核心的筛选策略可以作为菝葜质量标志物预测分析的实用方法,为制定评估菝葜的整体化学一致性质量控制标准提供参考。

关键词：菝葜化学成分药理作用网络药理学质量标志物

野芋提取物通过SFTA1P对肝癌细胞生物学行为的影响

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华中科技大学学报（医学版） 2022年第4期51卷 494-499页

作者：陈晓青袁发浒黄丹邱文洪江汉大学医学院医学实验中心武汉430056 江汉大学医学院基础医学部武汉430056

目的探讨野芋提取物对肝癌细胞生物行为的影响及分子机制。方法用浓度分别为5、10、15、20 mg/L的野芋提取物处理HCC9204肝癌细胞,作为不同剂量野芋提取物组;正常培养的HCC9204细胞作为对照组;将pcDNA3.1、pcDNA3.1-SFTA1P转染至HCC920... 详细信息

目的探讨野芋提取物对肝癌细胞生物行为的影响及分子机制。方法用浓度分别为5、10、15、20 mg/L的野芋提取物处理HCC9204肝癌细胞,作为不同剂量野芋提取物组;正常培养的HCC9204细胞作为对照组;将pcDNA3.1、pcDNA3.1-SFTA1P转染至HCC9204细胞中,记为pcDNA3.1组、pcDNA3.1-SFTA1P组;将si-NC、si-SFTA1P转染至HCC9204细胞后用20 mg/L的野芋提取物处理,记为野芋提取物+si-NC组,野芋提取物+si-SFTA1P组。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞存活率;流式细胞术检测细胞凋亡;克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SFTA1P和miR-665的表达水平;双荧光素酶报告实验检测SFTA1P和miR-665的靶向关系。结果野芋提取物处理的肝癌HCC9204细胞,细胞存活率显著降低,细胞凋亡率显著升高,克隆形成数显著减少,迁移细胞数显著减少(均P<0.05)。过表达SFTA1P可抑制肝癌HCC9204细胞存活、迁移,促进细胞凋亡。SFTA1P靶向调控miR-665。抑制SFTA1P表达可逆转野芋提取物对HCC9204细胞增殖、迁移和凋亡的影响。结论野芋提取物可通过调控SFTA1P/miR-665轴抑制肝癌HCC9204细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡。

关键词：野芋提取物 SFTA1P miR-665 肝癌增殖凋亡迁移

白藜芦醇诱导人胶质瘤细胞U251增殖抑制与凋亡的作用研究

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中华中医药学刊 2017年第5期35卷 1094-1096页

作者：郭培中杨小梅龚业莉袁发浒黄丽霞武汉市中西医结合医院肿瘤科湖北武汉430022 江汉大学医学院湖北武汉430056

目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链反... 详细信息

目的:探讨白藜芦醇对人胶质瘤细胞株U251的增殖抑制与凋亡的作用。方法:用不同浓度的白藜芦醇0、25、50、100、200μm/L处理对数生长期的U251细胞72 h,利用MTT比色法检测U251细胞增殖;流式细胞术检测U251细胞凋亡,采用逆转录聚合酶链反应法检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax mRNA水平。采用Western blotting检测Wnt、β-catenin、p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:白藜芦醇抑制U251细胞的增殖和Wnt、β-catenin、p53、p21和Bcl-2的表达,且呈浓度依赖性;促进U251细胞凋亡和Bax的表达。结论:白藜芦醇诱导U251细胞增殖抑制和凋亡与抑制Wnt/β-actin/p53信号通路激活相关。

关键词：白藜芦醇 U251 增殖凋亡 Wnt/β-catenin/p53

桑黄多糖缓解日本血吸虫感染小鼠氧化应激及肝纤维化的实验研究

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中国血吸虫病防治杂志 2019年第6期31卷 615-621页

作者：张珈宁瞿海燕张金梦冯金梅宋文剑袁发浒江汉大学医学院

目的探讨桑黄醇提多糖(PPI)对日本血吸虫感染小鼠氧化应激、肝肉芽肿和肝纤维化的改善作用。方法采用日本血吸虫尾蚴玻片贴腹感染法建立日本血吸虫肝病小鼠模型。设健康对照组(A组)、感染对照组(B组)、PPI单独治疗组(C组)、吡喹酮单独... 详细信息

目的探讨桑黄醇提多糖(PPI)对日本血吸虫感染小鼠氧化应激、肝肉芽肿和肝纤维化的改善作用。方法采用日本血吸虫尾蚴玻片贴腹感染法建立日本血吸虫肝病小鼠模型。设健康对照组(A组)、感染对照组(B组)、PPI单独治疗组(C组)、吡喹酮单独治疗组(D组)和PPI加吡喹酮混合治疗组(E组),每组各10只小鼠;除A组外,其他各组每只小鼠感染(30±2)条尾蚴。自感染后42 d开始,D、E组小鼠灌胃给予500 mg/kg吡喹酮,连续2 d;C、E组给予400 mg/kg PPI灌胃,连续给药30 d。HE染色观察小鼠肝组织病理学改变,测定小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)及小鼠肝组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、谷胱甘肽还原酶(GSH-R)、谷胱甘肽(GSH)含量,采用免疫组化技术检测小鼠肝组织中转化生长因子-β(TGF-β)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平,采用实时荧光定量PCR检测Nrf2、Gsta4基因表达水平。结果日本血吸虫感染但未予治疗小鼠出现典型血吸虫病肝病病理改变,PPI干预后能有效减轻小鼠肝虫卵肉芽肿及胶原沉积。血吸虫病肝病小鼠肝脏脂质过氧化加剧,诱导了氧化应激,小鼠血清中MDA含量增加,GSH和各种抗氧化酶含量下降。与B组相比,PPI治疗抑制了脂质过氧化,提高了GSH含量,恢复了抗氧化酶活性。此外,PPI治疗可抑制TGF-β信号通路,提升Nrf2、Gsta4基因表达水平。结论PPI在治疗血吸虫病肝纤维化方面发挥重要作用,其内在机制可能是通过上调Nrf2和Gsta4基因表达、改善氧化应激损伤,从而抑制肝脏虫卵肉芽肿形成和肝纤维化。

关键词：日本血吸虫桑黄多糖肝纤维化氧化应激

EGCG对日本血吸虫感染小鼠TIMP-1及α-SMA表达和肝纤维化的影响

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中国病原生物学杂志 2016年第5期11卷 428-433页

作者：袁发浒冯金梅刘锴胡松邱文洪张泽华 Stephen Hsu 宋文剑江汉大学医学院湖北武汉430056 奥斯股大学美国佐治亚州

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对日本血吸虫感染小鼠干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-13(IL-13)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨EGCG抑制小鼠日本血吸虫病肝纤维化的作用及机制。... 详细信息

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对日本血吸虫感染小鼠干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-13(IL-13)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响,探讨EGCG抑制小鼠日本血吸虫病肝纤维化的作用及机制。方法随机将小鼠分为感染组及对照组(A组)。感染组小鼠用腹部贴片法感染日本血吸虫尾蚴(30±5)条/只后,随机分为感染模型组(B组)、EGCG治疗高剂量[400mg/(kg·d)]组(C组)、治疗低剂量[40mg/(kg·d)]组(D组)、高剂量佐吡喹酮治疗组(E组)、低剂量佐吡喹酮治疗组(F组),溶剂+吡喹酮对照组(G组),灌胃溶剂对照组(H组),每组10只。在血吸虫尾蚴攻击感染后第28d,用EGCG对应灌胃治疗,1次/d,连续治疗8周。其中E、F、G组在感染后第42、43d加用吡喹酮[500mg/(kg·d)]灌胃。实验结束后处死小鼠,测算肝体指数。留取肝脏组织和血清,采用ELISA法测定血清中IFN-γ、IL-13及TIMP-1含量,采用苏木素-伊红(HE)和Masson胶原纤维染色观察小鼠肝组织变性、虫卵肉芽肿与胶原沉积等病理改变,采用免疫组化法观察肝组织中α-SMA的表达。结果与对照组相比,各实验组小鼠肝体指数均升高,肝脏有虫卵肉芽肿形成、胶原沉积及肝纤维化,血清中IL-13、TIMP-1含量升高(P<0.05),肝细胞内α-SMA表达升高(P<0.05)。与感染模型组相比,EGCG高、低剂量治疗组及其佐吡喹酮组IL-13和TIMP-1含量及肝体指数均显著降低(P<0.05),虫卵肉芽肿面积减小,胶原沉积减轻。结论 EGCG可抑制α-SMA表达及TIMP-1分泌,其抗纤维化机制与抑制肝星状细胞(HSC)活化相关,EGCG与吡喹酮伍用可增强其抗血吸虫病肝纤维化作用。

关键词： EGCG 血吸虫,日本肝纤维化 TIMP-1 α-SMA

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环状RNA检测方法研究进展

药物分析杂志 2024年第2期44卷 185-194页

作者：陈中强袁发浒李莹施璐曹晓琴刘巍刘亮江汉大学医学院武汉430026 武汉大学中南医院武汉430071

环状RNA(circRNA)是一大类内源性单链RNA,不同于其他线性RNA,circRNA通过外显子、内含子或2个外显子-内含子的反向剪接和融合形成共价闭环而产生,在高度分化的真核生物中普遍表达,并且与生物体的多种发育和代谢疾病过程密切相关。circRN... 详细信息

环状RNA(circRNA)是一大类内源性单链RNA,不同于其他线性RNA,circRNA通过外显子、内含子或2个外显子-内含子的反向剪接和融合形成共价闭环而产生,在高度分化的真核生物中普遍表达,并且与生物体的多种发育和代谢疾病过程密切相关。circRNA具有结构稳定、抗RNA酶降解、高度保守以及组织特异性表达等特点,是诊断和预后的理想生物标记物。传统方法如Northern印迹法、qRT-PCR和微阵列分析虽然提供了一定有用的信息,但是依旧受制于各自的缺点,无法在临床检验中大规模推广。近年来,为了解决这些问题,出现了一些新的检测方法。本文总结了目前circRNA检测方法的相关进展,阐述其优点和局限性,并讨论面临的挑战以及未来的发展方向。

关键词：环状RNA检测新方法生物标志物扩增优点和缺点

基于基因芯片的TNF-α诱导骨关节炎细胞模型生物信息学分析

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中国比较医学杂志 2019年第7期29卷 53-60页

作者：袁发浒胡松黄丽霞黄念芳宋文剑孙宾莲江汉大学

目的骨关节炎(osteoarthritis,OA)是最常见的退行性慢性关节疾病,然而其具体的基因机制至今尚不完全清楚,通过基因芯片检测OA细胞模型的基因表达谱变化,为深入研究OA发病机制提供更多生物学依据。方法胰酶结合胶原酶分离获得小鼠原代软... 详细信息

目的骨关节炎(osteoarthritis,OA)是最常见的退行性慢性关节疾病,然而其具体的基因机制至今尚不完全清楚,通过基因芯片检测OA细胞模型的基因表达谱变化,为深入研究OA发病机制提供更多生物学依据。方法胰酶结合胶原酶分离获得小鼠原代软骨细胞,以50 ng/mL的肿瘤坏死因子α(TNF-α)孵育原代软骨细胞24 h制备OA细胞模型。收获细胞提取总RNA用于基因芯片检测,以表达差异倍数(fold change,FC)>2且P<0.01为条件筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),利用生物信息学软件对差异表达结果进行基因功能分类体系(gene ontology,GO)、KEGG通路注释分析。结果原代软骨细胞经TNF-α处理后,共筛选获得8096个表达上调DEG和6413个表达下调DEG,其中有诸如基质金属蛋白酶、炎性因子、基因凋亡及成骨相关基因等已知的OA相关的差异表达基因。此外,还有Olfml1等olfactomedin超家族成员、Nf1等未见报道的与OA相关的基因,尤其发现大量细胞色素超家族成员基因的异常表达,提示线粒体相关功能基因及信号途径可能与OA进程有重要关联。结论项目从转录组水平整体分析了TNF-α诱导的OA软骨细胞模型基因表达谱变化,为进一步深入探究OA发病机制提供了新思路。

关键词：骨关节炎转录组软骨细胞基因芯片肿瘤坏死因子α 小鼠