检索结果-南通市图书馆

作者：袁久云南京农业大学

学位级别：硕士

布氏杆菌为胞内寄生菌,主要寄生于机体的单核细胞(主要是巨噬细胞)内,在细胞内的生存和复制是布氏杆菌的主要毒力特征。非编码小RNA(small nocoding RNA,sRNAs)是细菌代谢、毒力和适应环境压力的重要调节因子,在应对环境变化的基因表达... 详细信息

布氏杆菌为胞内寄生菌,主要寄生于机体的单核细胞(主要是巨噬细胞)内,在细胞内的生存和复制是布氏杆菌的主要毒力特征。非编码小RNA(small nocoding RNA,sRNAs)是细菌代谢、毒力和适应环境压力的重要调节因子,在应对环境变化的基因表达调控中发挥重要作用。细菌中的sRNA有两种形式:顺式编码sRNA和反式编码sRNA。反式编码sRNA与靶标基因的mRNA不完全碱基配对,调控mRNA的稳定性或是改变翻译机制,细菌中以这种非编码RNA为主。这类小RNA主要分布在蛋白编码序列之间,即基因间区。在革兰氏阴性菌中,Hfq可以辅助小RNA与靶标基因的互补配对。本实验室在前期的研究中通过生物信息学预测和Northern实验验证,在羊布鲁氏菌的两条染色体上共发现了 15个新的sRNA,BSR1141即为其中之一。本研究在前期研究的基础上,对BSR1141在布鲁氏菌在适应宿主内环境中的调控作用进行了深入的研究。试验Ⅰ布氏杆菌sRNA—BSR1141的预测及鉴定为了进一步验证sRNA—BSR1141的存在及分析其分子特征,本研究首先通过首先通过RACE方法寻找BSR1141的转录起点和终点,并通过MFOLD软件预测其二级结构。然后利用RT-PCR和Northern的方法,分析BSR1141RNA在各种条件下的转录水平。最后通过RT-PCR分析BSR1141与hfq的相关性。RACE结果表明BSR1141位于布氏杆菌Ⅰ号染色体BMEI1140和BMEI1141之间基因间区的正义链上,方向为←→←长73 nt。它的转录起点为1187396,转录终点为1187668。RT-PCR和Northern结果发现BSR1141在模拟巨噬细胞内环境的刺激条件下表达水平增加,提示BSR1141有可能在布鲁氏菌适应宿主细胞内环境压力中发挥作用;同时也表明BSR1141 是 hfq 依赖性 sRNA。试验Ⅱ布氏杆菌BSR1141突变株的构建及表型试验为了进一步确定BSR1141在布鲁氏菌适应宿主内环境和胞内生存中的作用,本论文构建了 BSR1141缺失突变株和过表达株,并对野生株、BSR1141缺失突变株及过表达株的胞内生存相关表型进行了比较,包括生长速度、体外模拟巨噬细胞内环境条件下的生存能力及小鼠毒力。结果显示:与野生株相比,BSR1141突变株和过表达株生长速度减慢、在体外刺激条件下的生存能力降低、小鼠感染后脾脏载菌数下降,证实BSR1141与布鲁氏菌的胞内生存和毒力密切相关。试验Ⅲ BSR1141通过靶标基因来介导布氏杆菌毒力及环境适应力由于sRNA主要通过靶标mRNA来发挥作用,为了从基因水平上进一步探讨BSR1141在胞内生存中如何发挥作用。本试验通过TargetRNA、RNAPredator、sTarPicker这3种常用的生物信息学软件对BSR1141的靶mRNA进行预测并通过RT-PCR进行验证。结果表明生物信息学预测得到了 43条靶mRNA,包括布氏杆菌毒力因子VirB2、外膜蛋白、转录调控因子(tetR、GntR)、热休克蛋白及一些代谢相关基因等,且BSR1141对大部分靶标基因表现为负调控,这提示BSR1141可能就是通过调控大量靶标基因,影响了菌体的毒力、代谢、生长能力以及对不利环境的抵抗力,从而导致表型上的改变。virB操纵子由同一启动子调控编码ⅣV型分泌系统(Type ⅣV secretion systems,T4SS),它是一个含有11个可跨越细菌被膜的多蛋白复合物,是病原菌的一个重要毒力武器,而virB2是T4SS成员之一,已有研究表明virB2缺失后,布氏杆菌毒力下降。GntR和tetR作为一种很广泛存在的转录调控因子,能够与相关基因的启动子区域相结合来实现对靶基因的调控作用。本试验在上述试验基础上选择毒力基因virB2及转录调控因子GntR和tetR进一步研究BSR1141对靶标基因的具体调控机制,首先通过在线预测软件sTarPicker预测出BSR1141与三个靶标可能的结合位点,然后通过双质粒系统试验进一步验证BSR1141于这3个靶mRNA的结合;最后结合qRT-PCR分析BSR1141对T48S整体的调控作用。结果表明:BSR1141分别与GntR mRNA的5’UTR和tetR mRNA的编码起始位点发生不完全互补配对,抑制GntR和tetR的翻译水平,这提示BSR1141可能通过下调GntR和tetR的蛋白表达水平,从而影响GntR和tetR作为一个转录调控因子的下游效应,进而呈级联放大效应,调控菌体的毒力、初级代谢、抗生素代谢及胞内生存能力。同时BSR1141通过靶基因virB2的5’UTR不完全互补配对,调控virB2的表达,而且这个过程需要分子伴侣Hfq的参与。然而qRT-PCR结果表明BSR1141对整个virB族基因转录水平存在影响,除virB2外,其余的10个virB基因均受BSR114

关键词：布氏杆菌sRNA BSR1141 胞内生存毒力

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基于二代测序分析4例组织学判定为多灶原发性肺癌的克隆性关系

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中华病理学杂志 2022年第10期51卷 1033-1035页

作者：朱栋麟陈汝蕾王晓丹袁久云吕京澴南京医科大学附属苏州医院/苏州市立医院胸外科苏州215002 南京医科大学附属苏州医院/苏州市立医院病理科苏州215002 南京世和基因生物技术股份有限公司南京210000

目的基于二代测序法,探讨经组织学诊断为同步多灶原发性肺癌(SMPLC)病例的分子病理学特征及克隆起源。方法对4例SMPLC的8个病灶进行全基因组外显子测序,并进行基因突变、基因组稳定性、克隆性关系及克隆演化的分析。结果突变分析显示例1... 详细信息

目的基于二代测序法,探讨经组织学诊断为同步多灶原发性肺癌(SMPLC)病例的分子病理学特征及克隆起源。方法对4例SMPLC的8个病灶进行全基因组外显子测序,并进行基因突变、基因组稳定性、克隆性关系及克隆演化的分析。结果突变分析显示例1、2及3的2个病灶间突变的一致性均为0,例4的一致性为3/(50+44)。例1的2个病灶基因组稳定性差别较大。例2的2个病灶基因组稳定性差别不大。例3、4的2个病灶基因组均稳定。用单核苷酸变异测试对样本突变信息进行分析,结果显示例1、2、3的2个病灶间相互独立。例4的2个病灶之间存在克隆关系。对样本拷贝数变异进行分析,认为例1、2的2个病灶彼此独立。对例4进行克隆演化分析,提示2个病灶来源于同一个克隆,可能为肺内转移。结论二代测序分析是对多灶肺癌组织学诊断的重要补充。不同组织学类型,或含原位癌病灶是判断SMPLC较可靠的依据。但不同组织学亚型诊断价值有限。为保证肿瘤分期和术后治疗的精准性,有必要对多灶肺癌的每一个病灶进行基因突变检测。

关键词：原发性肺癌组织学诊断克隆性克隆演化肿瘤分期组织学类型原位癌基因突变

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新庄煤矿采区煤仓施工作业方式与劳动组织探究

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中国西部科技 2013年第12期12卷 38-39页

作者：袁久云河南神火煤电公司新庄煤矿河南永城476600

本文详细介绍了新庄煤矿采区煤仓施工作业方式与劳动组织形式,该施工作业方式、劳动组织与传统煤仓施工作业方式、劳动组织进行分析比较,得出了"四六"作业法的劳动组织形式,并对"四六"作业法的施工作业方式、劳动组织提出了相关注意事项... 详细信息

本文详细介绍了新庄煤矿采区煤仓施工作业方式与劳动组织形式,该施工作业方式、劳动组织与传统煤仓施工作业方式、劳动组织进行分析比较,得出了"四六"作业法的劳动组织形式,并对"四六"作业法的施工作业方式、劳动组织提出了相关注意事项,该方法的提出和成功应用为其他煤仓施工提供了借鉴意义。

关键词：关键词采区煤仓作业方式劳动组织正规循环 "四六"作业法

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新庄煤矿巷道失稳机理分析及支护技术研究

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能源技术与管理 2013年第2期38卷 55-56,77页

作者：陈严袁久云克金奎河南神火煤电公司生产部河南永城476600 河南神火煤电公司新庄煤矿河南永城476600

近些年,新庄煤矿开采深度的日益加深和开采条件不断恶化,矿山压力显现强烈。针对新庄煤矿巷道的失稳机理,通过现场观察记录数据、分析上下煤层采动影响空间位置关系以及神火矿区地应力分布情况,对主要开拓准备巷道和煤巷工作面进行研究... 详细信息

近些年,新庄煤矿开采深度的日益加深和开采条件不断恶化,矿山压力显现强烈。针对新庄煤矿巷道的失稳机理,通过现场观察记录数据、分析上下煤层采动影响空间位置关系以及神火矿区地应力分布情况,对主要开拓准备巷道和煤巷工作面进行研究分析。通过研究,优化了采掘布置,改进了巷道支护方案,并取得了较好的实践成果,为矿井每年节约1 000万元左右的对失稳巷道的投入,并为矿井及公司的安全生产及支护技术做出了贡献。

关键词：失稳支护矿压显现开采

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环道离心机异常振动的仿真与试验研究

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化工设备与管道 2022年第1期59卷 50-56页

作者：袁晓云彭利果班久庆国家石油天然气大流量计量站成都分站成都610213 中国石油西南油气田分公司天然气研究院成都610299 中国石油集团公司天然气质量控制与能量计量重点实验室成都610299

环道标准表法气体流量标准装置是国内首套采用环道式工艺,以天然气为介质的高准确度气体流量标准装置,其中的环道离心机是输送天然气的重要动力装置。在其处于某些工况工作过程中发现离心机的振动烈度超过了安全值4 mm/s。为探究造成离... 详细信息

环道标准表法气体流量标准装置是国内首套采用环道式工艺,以天然气为介质的高准确度气体流量标准装置,其中的环道离心机是输送天然气的重要动力装置。在其处于某些工况工作过程中发现离心机的振动烈度超过了安全值4 mm/s。为探究造成离心机异常振动的原因并加以解决,针对该状况对离心机进行仿真与实验研究,模态分析结果显示,固有频率在838、1120、1373、1377、1387及1678 Hz处变形较大,通过实验与谐响应分析结果对比显示,在1.5 MPa,2800 r/min的工况下,离心机的振动放大来源于频率为831、1106、1347和1650 Hz的气体扰动;在1.8 MPa,2600 r/min的工况下离心机的振动放大来源于频率为831、1117、1393和1674 Hz的气体扰动。在离心机底座中心位置添加加强筋,测点的振动能量最大值从4.26降低到2.08,极大地减小了离心机的振动状况。

关键词：环道离心机模态分析谐响应分析异常振动

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新庄煤矿二2煤-700水平回采巷道支护设计优化

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科技创业家 2012年第17期 111-112页

作者：克金奎袁久云陈严河南神火煤电公司新庄煤矿河南神火煤电公司生产部

通过对新庄煤矿二2煤-700水平31011风巷顶板离层仪的观测研究,对原巷道支护设计进行了优化,最终确定了新的支护措施,为该矿二2煤深部工作面支护设计提供了宝贵经验。

关键词：顶板离层仪巷道支护

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FDM成型工艺对PEEK/CGF复合材料翘曲变形的影响

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工程塑料应用 2024年第1期52卷 64-69页

作者：李久振战丽李莞李云鹏袁勇超中国机械总院集团青岛分院有限公司山东青岛266300 中国机械总院集团北京机电研究所有限公司北京100083

为降低连续玻璃纤维增强聚醚醚酮复合材料增材制造样件的翘曲变形,优化增材制造基础工艺参数,通过单因素试验、Plackett-Burman Design试验与Box-Behnken Design试验,研究了打印过程中的热效应,即保温舱温度、层厚、成型平台温度、打印... 详细信息

为降低连续玻璃纤维增强聚醚醚酮复合材料增材制造样件的翘曲变形,优化增材制造基础工艺参数,通过单因素试验、Plackett-Burman Design试验与Box-Behnken Design试验,研究了打印过程中的热效应,即保温舱温度、层厚、成型平台温度、打印速度等工艺参数对连续玻璃纤维增强聚醚醚酮复合材料样件翘曲变形的影响规律,得出如下结论:研究发现打印工艺对翘曲度的影响程度是不同的,影响程度依次为B(层厚)>C(成型平台温度)>A(保温舱温度)。研究发现打印工艺参数之间是会对翘曲变形产生交互作用的,并且影响程度也较为显著(PB析因试验中大于t值),即B>C>A>AB>BC>D(打印速度)>BD。研究发现喷头温度440℃,成型平台温度100℃,保温舱温度90℃,层厚0.3 mm,道间距为0.5 mm,打印速度2 mm/s时,翘曲度可达到0.23%。

关键词：玻璃纤维聚醚醚酮增材制造工艺优化翘曲变形

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新庄煤矿立交巷道交叉点施工技术

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科技信息 2011年第35期 I0401-I0401页

作者：袁久云河南神火煤电股份有限公司新庄煤矿河南永城476600

针对新庄煤矿回采巷道与准备巷道交叉点施工问题，提出立交巷道交叉点施工改进方案，保证了立交点支护强度，有效缩短了施工工期。为相同条件下立交巷道立交点的施工提供了借鉴意义。

关键词：立交巷道立交点

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企业级通用小程序管理平台设计与实现

企业级通用小程序管理平台设计与实现

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作者：袁久琛大连理工大学

学位级别：硕士

随着云计算的兴起SaaS服务模式应运而生,小程序作为移动流量的一大入口,凭借其轻量便捷的特点已经成为SaaS应用的优秀载体。目前微信和支付宝小程序平台都允许第三方服务商为商户提供小程序代开发服务,包括小程序的创建申请以及开发管... 详细信息

随着云计算的兴起SaaS服务模式应运而生,小程序作为移动流量的一大入口,凭借其轻量便捷的特点已经成为SaaS应用的优秀载体。目前微信和支付宝小程序平台都允许第三方服务商为商户提供小程序代开发服务,包括小程序的创建申请以及开发管理。服务商在为众多商户提供小程序SaaS服务时往往会遇到审批流程繁琐、多项目并行时管理维护混乱、运营开发成本高等问题,本系统基于服务商的这些痛点进行设计实现。本系统应用了Nodejs技术,使用Eggjs框架进行搭建,前端交互展示使用了React技术与Ant-Design组件库、选用MySQL数据库以及Sequelize对象关系映射技术,通过调用微信小程序和支付宝小程序第三方平台提供的相关接口,对系统能力进行实现。在系统设计上兼容了微信和支付宝小程序审批流程与接口能力的差异,通过对小程序快速创建以及生命周期管理两大能力的实现,帮助服务商完成了小程序的批量孵化与批量管理,同时对管理系统其他必要功能加以实现,并利用Swagger接口文档生成工具保障了系统的开发过程与后期可维护性。最终帮助服务商实现小程序的一站式收束管理。本系统在开发完成通过测试后,目前已经上线使用,帮助服务商完成了多家企业的SaaS小程序开发,节约了大量的运营与开发投入,有效解决了多个商户小程序管理混乱的痛点。同时本系统目前的能力仍然有可以提升之处,对小程序运营数据的管理以及小程序线上异常状态的管理是下一步的升级目标。

关键词：小程序服务商 Nodejs 批量管理

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基于生物有效性的农田土壤磷素组分特征及其影响因素分析

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环境科学 2017年第4期38卷 1606-1612页

作者：蔡观胡亚军王婷婷袁红朝王久荣李巧云葛体达吴金水湖南农业大学生物科学技术学院长沙410128 中国科学院亚热带农业生态研究所公共技术服务中心长沙410125 中国科学院亚热带农业生态研究所农业生态系统过程重点实验室长沙410125

适宜的磷素分级方法是研究磷素组分特征与评价其有效性的关键.以磷素的化学与生物活化特点,采用改进的生物有效性的磷素分级方法,应用其研究不同土地利用方式下旱地土与水田土中磷素组分与有效磷(Olsen-P)的关系,并分析环境因子对磷组... 详细信息

适宜的磷素分级方法是研究磷素组分特征与评价其有效性的关键.以磷素的化学与生物活化特点,采用改进的生物有效性的磷素分级方法,应用其研究不同土地利用方式下旱地土与水田土中磷素组分与有效磷(Olsen-P)的关系,并分析环境因子对磷组分的影响.磷素分级方法将磷素分为4个组分:(1)自由扩散或根际截留的磷(CaCl_2-P);(2)有机酸活化和无机弱结合磷(Citrate-P);(3)系列酶矿化的有机磷(Enzyme-P);(4)潜在活化的无机磷库(HCl-P).结果表明,旱地土及水田土4种磷素组分含量均表现为:HCl-P>Citrate-P>Enzyme-P>CaCl_2-P,且旱地土各磷组分均显著高于水田土.Olsen-P与各磷素组分均呈显著正相关,表明各磷素组分对有效磷都有贡献.具体表现为:在旱地土中,Olsen-P与CaCl_2-P和Enzyme-P相关性较高(R^2=0.359;R^2=0.386);在水田土中,Olsen-P与Citrate-P相关性较高(R^2=0.788),说明旱地土中有效磷主要来自土壤自由扩散的无机磷和易矿化的有机磷部分,而水田土中有效磷主要来自弱酸活化的无机磷.冗余分析结果表明,磷素组分主要受土壤pH和黏粒含量的影响,指示在农业生产活动中,可通过调节土壤pH值,提高土壤有效磷含量.

关键词：磷素分级生物有效性环境因子旱地土水田土

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