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低分子量热激蛋白Bmhsp19.9基因的表达

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农业生物技术学报 2005年第2期13卷 195-201页

作者：李斌夏庆友藤井博伴野丰鲁成西南农业大学农业部蚕桑学重点开放实验室西南农业大学农业部蚕桑学重点开放实验室重庆400716 日本九州大学基因资源开发研究中心九州812-8581

利用RT-PCR技术,对家蚕(Bombyxmori)低分子量热激蛋白Bmhsp19.9基因进行了定量表达分析。Bmhsp19.9在各组织中均有一定量的表达,但不同组织间的表达差异达10多倍,表达量丰富的组织是生长发育旺盛的组织,如精巢和卵巢,然后是丝腺、蛹等... 详细信息

利用RT-PCR技术,对家蚕(Bombyxmori)低分子量热激蛋白Bmhsp19.9基因进行了定量表达分析。Bmhsp19.9在各组织中均有一定量的表达,但不同组织间的表达差异达10多倍,表达量丰富的组织是生长发育旺盛的组织,如精巢和卵巢,然后是丝腺、蛹等组织。其应激表达模式可分为3类,以其在精巢、后部丝腺和脂肪体中的强应激表达模式为主,经热刺激处理后其表达量有显著增加。经刺激诱导2h后其表达量达到最高,随后逐渐降低,在热刺激诱导12h后是未刺激的2￣3倍,而此时Bmhsp19.9在脂肪体中的应激表达是其对照的10多倍。根据Bmhsp19.9在不同组织中的基本表达量、应激表达量和应激表达的持续时间各不相同,显示其与细胞分裂与分化等生命活动有一定联系。并认为其在后部丝腺、脂肪体、精巢、卵巢与血液中作用方式不一样,推测其作为分子伴侣在组织间的作用对象与作用效应也应有所差异。

关键词：家蚕低分子量热激蛋白 Bmhsp19.9基因应激表达

家蚕不同品种与个体的血液胰凝乳蛋白酶抑制剂差异研究

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蚕业科学 2003年第4期29卷 349-354页

作者：赵萍夏庆友藤井博伴野丰农业部蚕桑学重点开放实验室日本九州大学基因资源开发中心

胰凝乳蛋白酶抑制剂 (Chymotrypsininhibitor,CI)是家蚕血液中主要的蛋白酶抑制因子 ,为其正常生长发育所不可缺少 ,研究CI对阐明家蚕正常生理以及害虫防治等都具有重要意义。采用pH 8 3、4 0聚丙烯酰胺凝胶电泳和CI活性染色法 ,对 6... 详细信息

胰凝乳蛋白酶抑制剂 (Chymotrypsininhibitor,CI)是家蚕血液中主要的蛋白酶抑制因子 ,为其正常生长发育所不可缺少 ,研究CI对阐明家蚕正常生理以及害虫防治等都具有重要意义。采用pH 8 3、4 0聚丙烯酰胺凝胶电泳和CI活性染色法 ,对 6个家蚕品种血液中的蛋白质含量和CI活性进行了测定 ,并对各品种CI活性的个体差异性进行了分析。结果表明 :结合pH 8 3和pH 4 0的电泳条件 ,可检测出Ict D ,Ict E ,Ict A ,Ict B ,Ict H基因所支配的 15种CI;6个品种中有 3个具有CI个体差异性 ,而且Ict E和Ict B在有的品种或个体无活性。

关键词：家蚕品种个体差异血液胰凝乳蛋白酶抑制剂 CI 蛋白酶抑制因子生长发育生理害虫防治蛋白质含量活性

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中国野桑蚕和日本野桑蚕的RAPD研究

蚕业科学 2002年第1期28卷 17-21页

作者：鲁成程道军向仲怀伴野丰藤井博西南农业大学蚕桑丝绸学院农业部蚕桑学重点开放实验室重庆400716 日本九州大学基因资源开发研究中心

用RAPD PCR技术初步研究了中国野桑蚕与日本福冈野桑蚕之间的DNA多态性。结果表明 ,不同地域中国野桑蚕个体之间及其与日本福冈野桑蚕个体之间均呈现出丰富的DNA多态性。中国野桑蚕同家蚕共有带率达 3 5 5 % ,同日本福冈野桑蚕为 4 5 1... 详细信息

用RAPD PCR技术初步研究了中国野桑蚕与日本福冈野桑蚕之间的DNA多态性。结果表明 ,不同地域中国野桑蚕个体之间及其与日本福冈野桑蚕个体之间均呈现出丰富的DNA多态性。中国野桑蚕同家蚕共有带率达 3 5 5 % ,同日本福冈野桑蚕为 4 5 1% ,而日本福冈野桑蚕同家蚕为 3 2 % ;中国野桑蚕与家蚕的平均遗传距离为0 5 2 ,日本野桑蚕与家蚕的平均遗传距离为 0 6 3,与中国野桑蚕的为 0 5 8,而且与中国沈阳地区野桑蚕之间的遗传距离最近 ,为 0 4 8,以此创建了它们的系统进化树。

关键词：中国野桑蚕 RAPD 遗传距离日本野桑蚕

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双向电泳法在家蚕蛋白质分离中的应用

昆虫知识 2006年第6期43卷 873-876页

作者：易发平张平波常平安宋方洲李斌藤井博重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室日本九州大学遗传资源中心重庆邮电学院生物信息学院重庆400065 西南大学农业部蚕桑学重点实验室重庆400716

家蚕Bombyxmori(L.)既是重要的经济昆虫,又是鳞翅目昆虫研究的典型模式生物。开展家蚕蛋白质组研究,将有助于阐明家蚕绢丝蛋白的分泌机理,也是研究鳞翅目昆虫及其他生物生命本质的需要。双向电泳是蛋白质分离的关键技术。为探讨适宜家... 详细信息

家蚕Bombyxmori(L.)既是重要的经济昆虫,又是鳞翅目昆虫研究的典型模式生物。开展家蚕蛋白质组研究,将有助于阐明家蚕绢丝蛋白的分泌机理,也是研究鳞翅目昆虫及其他生物生命本质的需要。双向电泳是蛋白质分离的关键技术。为探讨适宜家蚕蛋白质组研究的双向电泳条件,以家蚕丝腺、丝腺内容物、蚕卵和血液为材料,在不同条件下进行双向电泳,并对分离的蛋白点进行质谱分析。结果表明:通过改进的蛋白质裂解液辅以超声破碎制备的蛋白质,双向电泳后能够得到较好的2-DE图,也能满足进行MALDI-TOFMS分析的需要。因此本研究方法适用于家蚕不同组织中蛋白质的提取和双向电泳。

关键词：家蚕双向电泳蛋白质组

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低分子量热激蛋白的进化研究

蚕业科学 2004年第3期30卷 260-265页

作者：李斌夏庆友藤井博伴野丰鲁成农业部蚕桑学重点开放实验室西南农业大学蚕学与生物技术学院重庆400716 日本九州大学基因资源开发研究中心

不同物种的低分子量热激蛋白 (sHSP)具有高度保守性 ,sHSP基因的保守性可以为生物进化提供一定的科学依据。对 6 2个低分子量热激蛋白基因 (shsps)与α晶体蛋白进行系统进化分析 ,在系统演化上形成两大分支 ,表明存在共同祖先。而α 晶... 详细信息

不同物种的低分子量热激蛋白 (sHSP)具有高度保守性 ,sHSP基因的保守性可以为生物进化提供一定的科学依据。对 6 2个低分子量热激蛋白基因 (shsps)与α晶体蛋白进行系统进化分析 ,在系统演化上形成两大分支 ,表明存在共同祖先。而α 晶体蛋白分支又由α 晶体蛋白A与α 晶体蛋白B两个分支构成 ,它们的演化顺序分别为鱼类 (AmalphaA ,OlalphaA) ,两栖类 (XlatphaA ,RcalphaA) ,然后是哺乳类动物与鸟类并行演化 ,与经典的形态系统分类基本一致。但进化树显示两栖类的hsp30 ,血吸虫的卵抗原smp4 0 ,人类hshsp2 5与Bmhsp2 1 4在演化地位中具有独特的作用 ,推测它们在人类与家蚕等物种的演化分析中具有重要地位。同时进化的多样性表明昆虫、鱼、鸟及哺乳动物的shsps以直源进化关系为主。

关键词：低分子量热激蛋白 α-晶体蛋白进化

家蚕丝心蛋白H链基因的荧光原位杂交(FISH)

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中国科学（C辑） 2002年第4期32卷 361-365,T001页

作者：宋方洲易发平张平波易发平鲁成张平波洪锡钧伴野丰藤井博古贺克已重庆医科大学基础医学院重庆400016 西南农业大学蚕桑学农业部重点实验室重庆400716 西南师范大学生命科学学院重庆400715 九州大学农学部

蚕丝业在国民经济中占有极为重要的地位.家蚕作为重要的模式生物和生物反应器,历来为人们所关注.有关蚕丝基因的结构、表达调控和分子进化都已有较详细的研究和报道,但关于蚕丝结构基因的分子细胞遗传学基因定位的研究,几乎尚无报道.经... 详细信息

蚕丝业在国民经济中占有极为重要的地位.家蚕作为重要的模式生物和生物反应器,历来为人们所关注.有关蚕丝基因的结构、表达调控和分子进化都已有较详细的研究和报道,但关于蚕丝结构基因的分子细胞遗传学基因定位的研究,几乎尚无报道.经用荧光原位杂交技术（fluorescence　in　situ　hybridization,FISH）对家蚕丝心蛋白H链基因（Fib-H）的分子细胞遗传学定位研究结果,初步将家蚕丝心蛋白H链基因定位在了分子细胞遗传学第25连锁群染色体的端部,即25～0.0的位置,从而解决了该基因迄今尚未定位的问题,并证实了丝心蛋白H链基因在染色体位置上为单一座位.

关键词： H链基因家蚕丝心蛋白基因荧光原位杂交基因定位 FISH 分子细胞遗传学染色体位点

朱熹的“知”与阳明的“知”──心性论脉络的“格物致知”诠释

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中山大学学报（社会科学版） 2024年第2期64卷 186-197页

作者： [日]藤井伦明日本九州大学人文科学研究院

历来学界对朱熹“格物致知”论的理解并不一致。有“认识论”脉络的诠释,也有“心性论”脉络的诠释。在朱熹“格物致知”论中,“格物”的第一阶段是以外在事物为对象而究明“所当然之则”的工夫,所以确实可以从“认识论”脉络解读它;但... 详细信息

历来学界对朱熹“格物致知”论的理解并不一致。有“认识论”脉络的诠释,也有“心性论”脉络的诠释。在朱熹“格物致知”论中,“格物”的第一阶段是以外在事物为对象而究明“所当然之则”的工夫,所以确实可以从“认识论”脉络解读它;但到了究明“所以然之故”的第二阶段,外物之理与内心之理相通,“格物”成为“知性”,因此无法单纯地将它规定为现代认识论脉络的“求知”活动。关于“致知”,其工夫的对象、舞台不是外在物理,而是内在心理,因此无法从认识论脉络解读它。朱熹所理解的“知”是人心先天具有的本体之性(理)展现为作用之情的灵妙机能,换言之,即“明德”或“良知”。因此,关于“知”的基本意涵以及“知至”的境界,可以说朱熹与阳明的理解是一致的。吾人不能轻易地将朱熹脉络的“格物致知”与阳明脉络的“致良知”视为完全对立、矛盾的工夫。

关键词：朱熹王阳明格物致知认识论知识心性论理

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家蚕肾形卵的荧光差异显示分析

蚕业科学 2003年第1期29卷 47-50页

作者：李斌夏庆友藤井博伴野丰鲁成农业部蚕桑学重点开放实验室日本九州大学基因资源开发研究中心

Liang等建立的mRNA的荧光差异显示法 (flourescentdifferentialdisplay,FDD)具有高效、安全、有用信息多等特点。利用这一方法在mRNA水平上探讨了肾形卵 (ki)与正常卵在初期胚胎阶段的基因表达 ,回收了差异片段 10条 ,并对其差异进行了... 详细信息

Liang等建立的mRNA的荧光差异显示法 (flourescentdifferentialdisplay,FDD)具有高效、安全、有用信息多等特点。利用这一方法在mRNA水平上探讨了肾形卵 (ki)与正常卵在初期胚胎阶段的基因表达 ,回收了差异片段 10条 ,并对其差异进行了验证。其中之一的片段序列分析表明为低分子量热激蛋白基因 (smallheatshockgene)。

关键词：家蚕肾脏形卵荧光差异显示

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野桑蚕、蓖麻蚕及家蚕基因组的RFLP分析

昆虫知识 2005年第6期42卷 635-638页

作者：常平安宋方洲易发平鲁成刘运强伴野丰藤井博重庆邮电学院生物信息学院重庆400065 重庆医科大学分子生物学教研室重庆400016 西南农业大学蚕丝学院农业部蚕桑学重点开放实验室重庆400716 日本九州大学农学部

以家蚕Bombyx mori丝素重链基因、丝胶基因1和胰凝乳蛋白酶抑制因子13基因为探针,对野桑蚕***、蓖麻蚕Philosamia cynthia ricini和家蚕***基因组DNA进行限制性片段长度多态性分析。结果发现,在野桑蚕、蓖麻蚕基因组中存在着家蚕丝素重... 详细信息

以家蚕Bombyx mori丝素重链基因、丝胶基因1和胰凝乳蛋白酶抑制因子13基因为探针,对野桑蚕***、蓖麻蚕Philosamia cynthia ricini和家蚕***基因组DNA进行限制性片段长度多态性分析。结果发现,在野桑蚕、蓖麻蚕基因组中存在着家蚕丝素重链基因、丝胶基因1的同源序列,而在中日野桑蚕以及蓖麻蚕品种间存在着限制性酶切位点差异;丝胶基因1在中国野桑蚕基因组的EcoRⅠ酶切图谱较日本野桑蚕与家蚕更为一致,表明家蚕与中国野桑蚕亲缘关系更近。此外,在野桑蚕基因组中发现了家蚕胰凝乳蛋白酶抑制因子13基因的同源序列,并且在家蚕品种间以及中日野桑蚕之间也存在着多态性。这些结果表明不同绢丝昆虫在适应生存环境的进化过程中,基因组发生了结构改变。

关键词：野桑蚕蓖麻蚕家蚕限制性片段长度多态性进化