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椎间孔内注射阿霉素对SNI大鼠行为学和DRG的作用观察

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椎间孔内注射阿霉素对SNI大鼠行为学和DRG的作用观察

作者：薄存菊天津医科大学

学位级别：硕士

背根神经节是躯干、四肢痛觉的初级传入神经元,是机体内外环境与脊髓连接的纽带,具有传输和调节机体的各种感觉,接受和传递各种伤害性感受的功能,其在神经病理性疼痛的发生与维持中起着重要作用。阿霉素(adriamycin,ADM)是一种环蒽类抗... 详细信息

背根神经节是躯干、四肢痛觉的初级传入神经元,是机体内外环境与脊髓连接的纽带,具有传输和调节机体的各种感觉,接受和传递各种伤害性感受的功能,其在神经病理性疼痛的发生与维持中起着重要作用。阿霉素(adriamycin,ADM)是一种环蒽类抗生素类广谱抗肿瘤药物,具有自发荧光特性。抗肿瘤剂量具有明显的神经毒性和心脏毒性。近年来的研究证实,静脉内注射阿霉素可以选择性破坏外周感觉神经节,同时它可引起背根神经节细胞坏死而非凋亡。并且阿霉素具有对背根神经节高度亲和性的特点,可以引起周围神经变性,所以在动物实验中也将它作为经典的神经毒物,临床上应用它来损毁背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)细胞作疼痛治疗,即选择性感觉神经节化学切除术以治疗难治性疼痛。以往的实验中亦证实在正常大鼠或家兔椎间孔内注射高浓度的阿霉素可以引起背根神经节细胞死亡,并可导致背根神经节相应支配区域的皮肤感觉及运动功能的改变。目的:建立选择性坐骨神经损伤大鼠神经病理性疼痛模型,在SNI大鼠椎间孔内注射0.25%、0.5%、0.75%、1%的阿霉素后,应用免疫荧光双重标记的方法观察药物对同侧背根神经节细胞病理方面的影响,以及药物对大鼠的痛觉行为学方面的影响,以进一步明确各浓度阿霉素组SNI大鼠背根神经节细胞的死亡性质,为临床应用感觉神经节化学切除术以治疗神经病理性疼痛提供科学依据。方法:成年雄性SD大鼠100只,体重200g左右,参照Decosterd方法,成功建立选择性坐骨神经损伤模型后,将大鼠随机分为五组:生理盐水对照组(n=20),0.25%阿霉素组(n=20),0.5%阿霉素组(n=20),0.75%阿霉素组(n=20),1.0%阿霉素组(n=20)。大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.3ml/100g)麻醉,无菌条件下暴露大鼠左侧L4、L5、L6椎间孔外缘,在各组注射相应浓度阿霉素溶液5μl。分别在术后及给药后每周对各组大鼠进行一次对痛觉行为学测试,包括热辐射缩足潜伏期、丙酮试验、针刺试验。在测试完毕后,分别在给药后3、7、14、28天随机取3只大鼠左侧的L4背根神经节做成标本制成石蜡切片,进行HE染色,L5背根神经节制作成冰冻切片,进行荧光双重标记染色,分别在光学显微镜及激光共聚焦显微镜下观察阿霉素椎间孔内注射后,相对应的背根神经节组织学变化。结果一.给药前大鼠痛觉行为学的改变所有受试大鼠神经损伤同侧的后肢均表现出明显的感觉敏感性增高现象,这一现象在术后3天开始出现,并在术后14天达高峰,并在测试过程中持续存在。SNI大鼠为分担受损侧后肢承重能力而出现姿势改变,即足外翻,所有受试大鼠中有11例大鼠观察到明显的足外翻现象。大部分SNI大鼠在行走时出现跨阈步态,不论在休息还是运动时,若无意中碰触到受损侧后肢,则大鼠立即停止活动并出现较长时间的后肢屈曲。而所有受试大鼠在坐骨神经选择性损伤后未观察到明显的运动功能障碍及自噬现象,体重无明显减轻。二:给药后SNI大鼠痛觉行为学变化与正常生理盐水对照组相比较,从给药后第3天开始,不同浓度阿霉素组大鼠出现痛觉行为的逆转,表现为热痛阈(大鼠缩足潜伏期)的增加以及对冷刺激及机械性刺激后缩足持续时间的降低。0.25%浓度组、0.5%浓度组大鼠更长时间的的行为学测试结果提示,0.25%浓度组大鼠在给药后3周左右对冷热刺激及机械性刺激反应恢复至与术前相当水平,4周时未发现其行为学进一步的改变。而0.5%浓度组大鼠行为学较早恢复至术前水平,在4周时出现轻度的痛觉失敏现象,即热痛阈值较正常大鼠轻度增加、对冷刺激及机械性刺激无反应。高浓度组(1%、0.75%)从第3天起其行为学测试结果便恢复到术前测试水平,而更长时间的行为学测试结果显示,大鼠出现痛觉失敏现象,从给药后2周开始,较高浓度组大鼠出现对冷热刺激及机械性刺激反应性降低或无反应。在本实验中,1%浓度组大鼠未观察到明显的运动功能障碍及肢体瘫痪状况。三:组织病理变化1.石蜡切片组织病理变化0.25%浓度组2周时,可见背根神经节细胞肿胀、尼氏小体减少或消失;4周时,可见神经细胞核固缩胞浆均质化和细胞坏死。0.5%浓度组的大鼠在2周时已可见神经细胞普遍变性,胞浆皱缩,尼氏小体不清晰;可见神经细胞核固缩以及细胞坏死。4周可见大量神经细胞核固缩和核溶解;并见卫星现象和嗜神经节现象。0.75%及1%浓度组的大鼠2周时在相应的DRG细胞中已经能见到部分细胞核固缩、核碎裂等细胞坏死的病理改变。4周可见大量神经细胞坏死,明显胶质细胞及结缔组织明显增生取代坏死的DRG细胞。生理盐水对照组可见少量细胞变性。2.免疫荧光双重标记染色在激光共聚焦扫描显微镜下,我们观察到不同浓度阿霉素组SNI大鼠背根神经节细胞均有Bcl-2或Bax阳性神经元

关键词：阿霉素背根神经节选择性坐骨神经损伤椎间孔注射免疫荧光双重标记

椎旁注射阿霉素毁损背根神经节对带状疱疹后神经痛患者的疗效

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中华麻醉学杂志 2008年第11期28卷 1050-1051页

作者：史可梅郑宝森薄存菊邓迢封天津医科大学第二医院麻醉科疼痛诊疗中心 300211

带状疱疹是由潜伏于脊髓背根神经节（DRG）的水痘一带状疱疹病毒引起的一种疼痛性皮肤疾病，带状疱疹后神经痛（PHN）是其常见的后遗症。PHN与病毒侵犯脊髓DRG、引起神经组织炎性水肿、出血甚至坏死、神经纤维粘连及瘢痕形成等有关，为... 详细信息

带状疱疹是由潜伏于脊髓背根神经节（DRG）的水痘一带状疱疹病毒引起的一种疼痛性皮肤疾病，带状疱疹后神经痛（PHN）是其常见的后遗症。PHN与病毒侵犯脊髓DRG、引起神经组织炎性水肿、出血甚至坏死、神经纤维粘连及瘢痕形成等有关，为感受性疼痛。于外周感觉神经干内注射阿霉素，利用其逆行性轴突运输和对感觉神经元的破坏作用，毁损DRG可缓解PHN。本研究拟评价椎旁注射阿霉素毁损DGR对PHN患者的疗效，为临床提供参考。

关键词：带状疱疹后神经痛脊髓背根神经节椎旁注射阿霉素毁损疗效带状疱疹病毒感觉神经元

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腰交感神经节阻滞

实用疼痛学杂志 2008年第1期4卷 40-47页

作者：薄存菊郑宝森天津医科大学麻醉学教研室

腰交感神经节阻滞技术在临床治疗中应用十分广泛,能够十分有效地缓解患者下肢疼痛,本文就该技术的解剖学基础、适应证、操作方法以及应用进展作一介绍。

关键词：交感神经节阻滞解剖学操作技术

盘外泵注胶原酶治疗脱垂型腰椎间盘突出症的临床研究

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中国疼痛医学杂志 2014年第9期20卷 646-649页

作者：薄存菊卢振和陈金生黄乔东刘晓明刘少颜广州医科大学附属第二医院疼痛科广州510260

目的：回顾性分析本院2008年以来应用微量注射泵泵注胶原酶,盘外溶解治疗脱垂型腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：经磁共振确认为L4~5和/或L5~S1间盘突出的36名患者,在DSA引导下经骶裂孔置入导管至腰椎间盘突出物所在的硬膜外腔,经导管... 详细信息

目的：回顾性分析本院2008年以来应用微量注射泵泵注胶原酶,盘外溶解治疗脱垂型腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：经磁共振确认为L4~5和/或L5~S1间盘突出的36名患者,在DSA引导下经骶裂孔置入导管至腰椎间盘突出物所在的硬膜外腔,经导管推注3 ml造影剂证明位置正确。微量泵恒速泵注胶原酶,术后绝对卧床4周,采用视觉模拟评分法（visual analogue score,VAS）和改良Macnab评分判定治疗效果。结果：术后无1例发生突出物脱落;术后所有患者疼痛均有明显改善,3个月时优良率91.6%;复查腰椎MR显示突出物均有明显缩小。结论：经骶裂孔置入硬膜外导管恒速泵注胶原酶治疗腰椎间盘突出症有利于药物积聚于突出物周围,提高治疗的长期效果。

关键词：椎管内造影腰椎间盘突出症胶原酶注射方法

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背根节脉冲射频治疗神经根型颈椎病的效果

实用医学杂志 2018年第19期34卷 3224-3226页

作者：黄乔东宫庆娟刘晓明薄存菊卢振和高崇荣广州医科大学附属第二医院广州510260

目的观察背根节脉冲射频治疗神经根型颈椎病的疗效及安全性。方法 60例神经根型颈椎病患者,随机分为A、B两组,每组30例:A组于数字减影血管造影机(DSA)引导下行选择性神经根阻滞;B组在DSA引导下行背根节脉冲射频治疗。观察两组术前和术后... 详细信息

目的观察背根节脉冲射频治疗神经根型颈椎病的疗效及安全性。方法 60例神经根型颈椎病患者,随机分为A、B两组,每组30例:A组于数字减影血管造影机(DSA)引导下行选择性神经根阻滞;B组在DSA引导下行背根节脉冲射频治疗。观察两组术前和术后1、7 d及术后1、3、6个月时患者的视觉模拟评分(VAS),术后1、3、6个月随访Odom评分的优良率以及手术相关并发症。结果两组患者术后疼痛VAS评分均迅速降低,同术前相比差异均有统计学意义(P <0.05);B组患者VAS评分术后3、6个月随访时仍维持在较低水平,与A组相比,差异有统计学意义(P <0.05);同时,两组Odom评分优良率在术后3、6个月随访时差异有统计学意义(P <0.05);两组均未见严重手术相关并发症。结论背根节脉冲射频能快速减轻神经根型颈椎病患者的症状,并且能维持较长时间,未见明显手术并发症,是治疗神经根型颈椎病的一种快速、安全、有效的方法。

关键词：颈椎病神经痛脉冲射频背根节

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痛点注射美洛昔康治疗跟痛症的临床观察

中国实用医药 2012年第18期7卷 11-12页

作者：薄存菊卢振和广州医学院第二附属医院疼痛科 510260

目的观察美洛昔康注射液(Boehringer Ingelheim France,15mg/ml)局部痛点注射用于跟痛症的疗效,并与醋酸泼尼松(浙江仙琚制药股份有限公司制造,25mg/ml)进行疗效对比。方法选择门诊跟痛症患者50例,采用随机单盲的方法,将患者分为美洛昔... 详细信息

目的观察美洛昔康注射液(Boehringer Ingelheim France,15mg/ml)局部痛点注射用于跟痛症的疗效,并与醋酸泼尼松(浙江仙琚制药股份有限公司制造,25mg/ml)进行疗效对比。方法选择门诊跟痛症患者50例,采用随机单盲的方法,将患者分为美洛昔康组和醋酸泼尼松组,分别于足跟痛点分别注射美洛昔康注射液15mg及醋酸泼尼松25mg,每隔3d注射一次,连续注射3次。治疗后随访3个月,对美洛昔康和醋酸泼尼松在疗效和不良反应上进行对比观察。结果美洛昔康组受试者注射后有效病例(包括显效和有效病例数)20例,优良率80%;醋酸泼尼松组受试者注射后有效病例21例,优良率84%。两组患者注药后疼痛缓解优良率比较,无明显统计学意义(P>0.05)。结论美洛昔康注射液局部注射用于跟痛症患者可与醋酸泼尼松取得相似的疗效,其安全性及不良反应均优于醋酸泼尼松。

关键词：跟痛症美洛昔康注射液醋酸泼尼松痛点注射

关节腔三氧联合透明质酸钠注射治疗膝骨性关节炎报告

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实用疼痛学杂志 2011年第1期7卷 26-28页

作者：王兴高陈金生薄存菊广东省东莞市长安医院麻醉科 523843 广州医学院第二附属医院疼痛科 510260

目的观察三氧联合透明质酸钠关节腔注射治疗膝骨性关节炎的临床疗效.方法选取确诊的膝骨性关节炎患者69例.按就诊顺序随机分为两组,即三氧联合透明质酸钠组（O3SH组）与透明质酸钠组（SH组）.SH组34例关节腔内注入透明质酸钠,O3SH组3... 详细信息

目的观察三氧联合透明质酸钠关节腔注射治疗膝骨性关节炎的临床疗效.方法选取确诊的膝骨性关节炎患者69例.按就诊顺序随机分为两组,即三氧联合透明质酸钠组（O3SH组）与透明质酸钠组（SH组）.SH组34例关节腔内注入透明质酸钠,O3SH组35例先注三氧后再注入透明质酸钠治疗,观察两组患者治疗后疼痛症状、日常活动、骨摩擦音、晨僵现象进行比较.结果 SH组优25例（73.5%）,良4例（11.8%）,差5例（14.7%） O3SH组优31例（88.6%）,良3例（8.6%）,差1例（2.8%）.两组相比优率、差率、优良率P＜0.05,差异具有统计学意义,O3SH组优于SH组.结论三氧联合透明质酸钠关节腔内注射术治疗膝骨性关节炎临床效果良好,疗效优于单纯透明质酸钠关节腔内注入法.

关键词：骨性关节炎,膝三氧注射,关节内透明质酸钠

椎间孔注射多柔比星对神经病理性痛大鼠痛行为学及背根神经节神经元超微结构的影响

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中华麻醉学杂志 2012年第6期32卷 665-669页

作者：刘靖芷薄存菊李全波史可梅马文庭郑宝森天津医科大学第二医院疼痛治疗中心 300211

目的评价椎间孔注射多柔比星对神经病理性痛大鼠痛行为学和背根神经节（DRG）神经元超微结构的影响。方法健康雄性SD大鼠100只，体重200～250g，3月龄，采用坐骨神经分支选择性损伤（SNI）的方法建立大鼠神经病理性痛模型，采用随机数... 详细信息

目的评价椎间孔注射多柔比星对神经病理性痛大鼠痛行为学和背根神经节（DRG）神经元超微结构的影响。方法健康雄性SD大鼠100只，体重200～250g，3月龄，采用坐骨神经分支选择性损伤（SNI）的方法建立大鼠神经病理性痛模型，采用随机数字表法，将大鼠随机分为5组（n=20）：SNI组和不同浓度多柔比星组（A1组、A2组、气组和A4组），于模型建立2周后，L4-5和L5-6椎间孔分别注射生理盐水、0．25％、0．50％、0．75％和1．00％多柔比星5μl。于给药前及给药后1～28d测定热辐射缩足潜伏期及冷刺激缩足持续时间，于给药后28d取3只大鼠，取DRG，电镜下观察大、小神经元超微结构。结果与SNI组比较，A1组、A2组、A3组及A4组热辐射缩足潜伏期延长，冷刺激缩足持续时间缩短，呈浓度依赖性（P〈0．05）。电镜下SNI组DRG神经元超微结构未见异常，A1组、A2组、A1组和凡组DRG小神经元细胞核固缩、线粒体肿胀、溶酶体增多、染色质边集、细胞间质纤维化和细胞坏死，而大神经元线粒体肿胀及纤维增多，多数大神经元存活。结论椎间孔注射多柔比星可减轻大鼠神经病理性痛，可导致DRG大、小神经元损伤，小神经元的损伤更明显。

关键词：多柔比星注射脊髓神经节脊神经痛神经元

背根神经节脉冲射频联合复方倍他米松注射治疗老年退行性腰椎管狭窄症的疗效观察

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中华生物医学工程杂志 2017年第1期23卷 46-50页

作者：薄存菊陈金生宫庆娟卢振和广州医科大学附属第二医院疼痛科广州510260

目的探讨背根神经节脉冲射频联合复方倍他米松注射治疗老年退行性腰椎管狭窄症的临床疗效.方法收集本科室2014年12月至2015年6月收治的经保守治疗无效的老年退行性腰椎管狭窄症患者18例,均行背根神经节脉冲射频联合复方倍他米松注射治... 详细信息

目的探讨背根神经节脉冲射频联合复方倍他米松注射治疗老年退行性腰椎管狭窄症的临床疗效.方法收集本科室2014年12月至2015年6月收治的经保守治疗无效的老年退行性腰椎管狭窄症患者18例,均行背根神经节脉冲射频联合复方倍他米松注射治疗.记录治疗前及治疗后1 d、3 d、1周、1个月、6个月患者的疼痛视觉模拟评分（VAS）和Oswestry功能障碍指数（ODI）并进行比较.结果 18例患者均顺利完成手术,无术中及术后并发症发生.术前患者VAS评分为（6.5±0.7）分,术后1 d、3 d、1周、1个月、6个月VAS评分分别为（2.7±1.2）分、（2.5±1.4）分、（2.3±1.1）分、（2.4±1.9）分、（2.5±1.3）分.术前患者ODI为（55.0±6.0）%,术后1 d、3 d、1周、1个月、6个月ODI分别为（15.0±6.0）%、（13.0±4.0）%,（12.0±3.0）%,（13.0±6.0）%,（14.0±5.0）%.与术前比较,术后各时点患者VAS评分、ODI均显著降低（均P〈0.05）;而术后各时点患者的VAS评分、ODI比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）.结论背根神经节脉冲射频联合复方倍他米松注射治疗老年退行性腰椎管狭窄症疗效较好.

关键词：腰椎管狭窄症背根神经节脉冲射频倍他米松