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不同栽培模式下豫北沙化土壤微生物量和酶活性

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浙江农林大学学报 2019年第3期36卷 590-597页

作者：蔺芳新乡学院生命科学技术学院河南新乡453000

通过连续6 a定位试验,以沙化裸地为对照,研究紫花苜蓿Medicago sativa单播、无芒雀麦Bromus inermis单播、紫花苜蓿/无芒雀麦混播3种栽培模式对豫北沙化地区土壤微生物量碳、氮、磷以及土壤酶的影响,利用回归分析和通径分析对二者的关... 详细信息

通过连续6 a定位试验,以沙化裸地为对照,研究紫花苜蓿Medicago sativa单播、无芒雀麦Bromus inermis单播、紫花苜蓿/无芒雀麦混播3种栽培模式对豫北沙化地区土壤微生物量碳、氮、磷以及土壤酶的影响,利用回归分析和通径分析对二者的关系进行研究。结果表明:与沙化裸地相比, 0～40 cm土层3种栽培模式下土壤微生物量碳、氮、磷质量分数和土壤酶活性均不同程度增加,从大到小依次为紫花苜蓿/无芒雀麦混播、紫花苜蓿单播和无芒雀麦单播,且土壤微生物量碳、氮、磷质量分数和土壤酶活性均随土层的加深而降低,呈现表聚性特征。相关性分析表明:土壤微生物量碳、氮、磷与土壤7种酶均呈显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)相关;通径分析进一步表明:土壤酶对土壤微生物量碳的直接贡献效应从大到小依次为脲酶、淀粉酶、β-葡萄糖苷酶、蔗糖酶和蛋白酶,对土壤微生物量氮的直接贡献效应从大到小依次为脲酶、蔗糖酶、β-葡萄糖苷酶和碱性磷酸酶,对土壤微生物量磷的直接贡献效应从大到小依次为蔗糖酶、碱性磷酸酶、β-葡萄糖苷酶、过氧化氢酶和淀粉酶。由此认为,相对于沙化裸地,豫北地区经6 a人工草地建植,土壤微生物量碳、氮、磷以及土壤酶活性有效提高,土壤主要生物学性状优化,以紫花苜蓿/无芒雀麦混播为最佳的栽培模式。

关键词：土壤学紫花苜蓿无芒雀麦栽培模式微生物量土壤酶

硫酸铵浓度对疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原的影响

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东北农业大学学报 2012年第9期43卷 135-138页

作者：蔺芳新乡学院生命科学与生物技术系河南新乡453003

以表面抗原活性收率和纯度为考察指标,转化乙肝病毒preS2-S基因重组酵母株,经甘油培养基充分增殖,转移到甲醇培养基中诱导表达。破碎细胞收集细胞原液,离心15 000 r·min-1除去细胞碎片,超滤浓缩。结果表明,硫酸铵0.12、0.16 mol·L-1... 详细信息

以表面抗原活性收率和纯度为考察指标,转化乙肝病毒preS2-S基因重组酵母株,经甘油培养基充分增殖,转移到甲醇培养基中诱导表达。破碎细胞收集细胞原液,离心15 000 r·min-1除去细胞碎片,超滤浓缩。结果表明,硫酸铵0.12、0.16 mol·L-1时盐浓度低,HBsAg未结合到疏水介质上;硫酸铵0.24 mol·L-1时疏水性强,HBsAg不宜从介质上洗脱。表明0.20 mol·L-1硫酸铵更适合重组HBsAg纯化。

关键词：疏水作用层析纯化重组乙肝表面抗原硫酸铵

多重PCR检测猪伪狂犬、细小病毒和猪圆环病毒2型方法的建立和应用

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多重PCR检测猪伪狂犬、细小病毒和猪圆环病毒2型方法的建立和应用

作者：蔺芳甘肃农业大学

学位级别：硕士

1.以猪伪狂犬病毒(PRV)的基因组序列作为参考,设计了应用在同一个PCR反应体系的3对特异性扩增引物,建立了鉴别诊断PRV疫苗株和流行毒株的多重PCR方法(Multiplex PCR,Multi-PCR)。在相同的PCR扩增条件下,以PRV DNA作为模版,同时加入3对... 详细信息

1.以猪伪狂犬病毒(PRV)的基因组序列作为参考,设计了应用在同一个PCR反应体系的3对特异性扩增引物,建立了鉴别诊断PRV疫苗株和流行毒株的多重PCR方法(Multiplex PCR,Multi-PCR)。在相同的PCR扩增条件下,以PRV DNA作为模版,同时加入3对特异性引物,可同时扩增不同长度的PRV gB,gE和Tk基因序片段,其大小分别为427bp(gB),298bp(gE)和208bp(Tk)。利用建立的Multi-PCR方法,对商品化的四种不同基因缺失的PRV疫苗进行检测,其扩增结果与疫苗的基因缺失背景一致。试验结果表明,Multi-PCR可同时区分PRV流行毒株和疫苗毒株,且具有良好的敏感性和特异性,最低检出DNA含量为10-5(13.75pg/μl)。该方法可应用在PRV临床诊断和流行病学调查研究工作中。2.根据GenBank上猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒(PPV)的已发表序列分别设计并合成4对特异性扩增引物建立PRV,PCV2,PPV单项PCR检测方法。分别扩增出预期的657bp(PPV),490bp(PCV2),372 bp(PRV-gB)和298bp(PRV-gE)片段,在优化单项PCR反应条件基础上建立了PRV-PCV2-PPV复合PCR检测方法,为预防和控制上述3种病毒性传染病提供了一种快速、敏感、特异的检测方法,PPV、PCV2、PRV-gB、PRV-gE检测敏感性分别为10-5(17.4pg/μl),10-5(14.1pg/μl),10-5(11.7pg/μl),10-5(11.7pg/μl)。3.为促进PCR反应中猪伪狂犬病毒gB基因的扩增效率,研制了含有二甲基亚砜(DMSO)成份的针对gB基因的PCR缓冲液。结果表明:在DMSO作用下,增强了gB基因扩增特异性,4%～10%的DMSO可以获得最佳扩增效果。

关键词：猪伪狂犬病毒猪圆环病毒2型猪细小病毒多重PCR 检测方法

不同pH值和盐离子浓度对EV71疫苗纯化的影响研究

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湖北农业科学 2012年第17期51卷 3791-3793页

作者：蔺芳新乡学院生命科学与技术系河南新乡453003

为了考察肠道病毒71型(EV71)抗原(培养原液及层析液)在不同pH下的稳定性以及盐离子浓度可能对病毒粒子的聚集产生的影响,试验通过对EV71病毒培养原液的浓缩(即抗原的粗纯)和4FF层析后发现抗原在pH 3～9,2～8℃放置1周都很稳定,同时样品... 详细信息

为了考察肠道病毒71型(EV71)抗原(培养原液及层析液)在不同pH下的稳定性以及盐离子浓度可能对病毒粒子的聚集产生的影响,试验通过对EV71病毒培养原液的浓缩(即抗原的粗纯)和4FF层析后发现抗原在pH 3～9,2～8℃放置1周都很稳定,同时样品中不加NaCl,缓冲液中含0.1 mol/L NaCl可以提高抗原的收率。

关键词：肠道病毒71型(EV71) 纯化疫苗 pH值盐离子浓度

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陕西省初中生区域地理认知素养培养策略研究

陕西省初中生区域地理认知素养培养策略研究

作者：蔺芳陕西理工大学

学位级别：硕士

2014年教育部发布了《关于全面深化课程改革落实立德树人根本任务的意见》,明确提出要构建核心素养理念,初中地理课程标准要求将核心素养理念贯彻到教学实践及考试测评中,区域地理作为初中地理的主要内容,具有基础性、主导性作用,其所... 详细信息

2014年教育部发布了《关于全面深化课程改革落实立德树人根本任务的意见》,明确提出要构建核心素养理念,初中地理课程标准要求将核心素养理念贯彻到教学实践及考试测评中,区域地理作为初中地理的主要内容,具有基础性、主导性作用,其所体现的区域认知素养是指导地理教学研究和地理教学实践活动的根本思想。然而在实际的区域地理教学中存在着一些问题,导致学生不能系统的掌握区域地理学习方法,在某种程度上制约着初中生区域认知素养的发展。本文采用文献研究法、统计分析法、问卷调查法、访谈法及案例分析等方法对初中生区域认知素养的构成、培养现状及改进策略做了研究,得出以下结论:（1）通过问卷调查和教师访谈法了解了初中生区域认知素养培养现状,调查结论:部分教师对区域认知内涵的掌握程度较低;教学中对于区域认知的落实度不够,忽视基于核心素养的教学目标和教学活动设计;部分教师教学方式单一,缺少多样化教学;在教学内容上重位置重特征,忽视培养学生的区域对比和区域发展能力。学生区域认知存在的主要问题:认知能力整体较低;读图析图能力较弱,综合分析图上地理要素的能力较低;依赖课本和老师,学习方法未掌握;区域对比能力较弱,缺少空间感知;知识点零散,结构体系不完整。（2）本文依据地理课程标准要求,结合教育实际,提出以下建议性区域认知素养培养策略:加强理念渗透,构建素养课堂,提升教师的区域认知素养;多样化教学,激发学习兴趣;强化地图教学,提高地图素养;注重区域认知均衡教学,加强区域对比与发展;构建思维导图,搭建认知框架。（3）通过教学案例分析法,选取人教版七、八年级地理课本内容,设计两个教学活动案例,验证本文区域认知培养策略的可行性。得出实验结论:本文的培养策略较好的调动了学生的主动性和积极性,活动内容由浅入深,且具有启发性和探究性意义,符合学生的认知规律,有效的提高了课堂效率。

关键词：初中地理区域认知试题分析培养策略教学案例

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微波加工对农产品营养成分的影响

北方园艺 2012年第9期 198-200页

作者：蔺芳新乡学院生命科学与技术系河南新乡453003

微波技术是近年来广泛应用的先进技术,具有广阔的应用前景。经过微波处理的农产品较一些传统方法更有利于营养成分的保存。现重点阐述了微波技术对农产品中的维生素、蛋白质、脂类、碳水化合物等营养成分造成的影响,为该领域的进一步研... 详细信息

微波技术是近年来广泛应用的先进技术,具有广阔的应用前景。经过微波处理的农产品较一些传统方法更有利于营养成分的保存。现重点阐述了微波技术对农产品中的维生素、蛋白质、脂类、碳水化合物等营养成分造成的影响,为该领域的进一步研究及应用提供理论基础。

关键词：微波加工农产品营养成分

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微波技术在食品加工中的应用研究

中国调味品 2014年第7期39卷 138-140页

作者：蔺芳新乡学院生命科学与技术系河南新乡453003

随着公众对食品的安全卫生和质量要求日益严格,以及对健康营养食品的青睐,先进合理的食品加工技术也越来越多地被人们所关注和推崇。微波技术是近年来食品行业应用的先进技术。对微波技术在食品中的各种应用,如加热、干燥、萃取等及对... 详细信息

随着公众对食品的安全卫生和质量要求日益严格,以及对健康营养食品的青睐,先进合理的食品加工技术也越来越多地被人们所关注和推崇。微波技术是近年来食品行业应用的先进技术。对微波技术在食品中的各种应用,如加热、干燥、萃取等及对食品营养成分维生素、蛋白质等造成的影响做了综述。

关键词：微波技术食品加工应用

脂类代谢和运输涉及的基因与大鼠肝再生的相关性分析

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解剖学报 2008年第3期39卷 302-309页

作者：徐存拴蔺芳秦少伟河南师范大学生命科学学院河南省-科技部共建细胞分化调控重点实验室新乡453007

目的在基因转录水平了解脂类代谢和运输相关基因在大鼠肝再生（LR）中的表达变化和模式。方法用搜集网站资料和查阅相关论文等方法获得参与脂类代谢和运输基因,用大鼠基因组230 2.0芯片检测它们在大鼠再生肝中的表达情况,用比较手术和... 详细信息

目的在基因转录水平了解脂类代谢和运输相关基因在大鼠肝再生（LR）中的表达变化和模式。方法用搜集网站资料和查阅相关论文等方法获得参与脂类代谢和运输基因,用大鼠基因组230 2.0芯片检测它们在大鼠再生肝中的表达情况,用比较手术和假手术中基因表达的差异性确定肝再生相关基因。结果初步证实上述基因中193个基因与肝再生相关。肝再生早期[部分肝切除（PH）后0.5～4h]、前期（PH后6～12h）、中期（PH后12～66h）、后期（PH后72～168h）等4个阶段起始表达的基因数为113、20、66和1;基因的总表达次数为250、205、796和293。共上调852次,下调630次,分为27种表达方式。肝再生早期和前期胆汁酸代谢相关基因转录减弱;早期和后期糖皮质激素分解相关基因转录增强;前期和中期磷脂合成相关基因转录增强,磷脂分解相关基因转录减弱;中期脂肪酸、白三烯和鞘糖脂合成相关基因转录增强,甘油三酯和磷脂酰肌醇代谢相关基因转录增强,鞘糖脂分解相关基因转录减弱;中期和后期前列腺素合成和脂肪酸分解相关基因转录增强;几乎在整个肝再生中性激素、糖皮质激素和孕酮合成相关基因转录增强,鞘磷脂代谢相关基因转录增强,脂类运输相关基因转录增强,胆固醇代谢相关基因转录减弱。结论肝再生中脂类代谢和运输变化较大,与肝再生密切相关。

关键词：部分肝切除脂类代谢运输相关基因肝再生相关基因基因组2302.0芯片大鼠

阳离子—氯离子共转运体KCC2和NKCC1在PCPA致失眠模型大鼠脑干中的表达变化

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阳离子—氯离子共转运体KCC2和NKCC1在PCPA致失眠模型大鼠脑干中...

作者：蔺芳菊中南大学

学位级别：硕士

研究背景及目的失眠是最为常见的一种睡眠障碍,是多种躯体、精神和行为疾病所具有的常见临床表现,但其确切的发生机制至今仍不明了。对睡眠发生的相关解剖结构研究发现,觉醒与睡眠主要与脑干的网状结构有关,其有睡眠诱导功能的脑干网... 详细信息

研究背景及目的失眠是最为常见的一种睡眠障碍,是多种躯体、精神和行为疾病所具有的常见临床表现,但其确切的发生机制至今仍不明了。对睡眠发生的相关解剖结构研究发现,觉醒与睡眠主要与脑干的网状结构有关,其有睡眠诱导功能的脑干网状抑制系统(ascendingreticular inhibitory system,ARIS)。神经系统内阳离子-Cl共转运体(cation-chloride cotransporters,CCCs)是一个非常重要的影响和维持Cl浓度平衡的家族。目前报道的七种阳离子-Cl共转运体中,神经系统内仅表达KCC1、KCC2、KCC3和NKCC1四种,其中,K-Cl共转运体2(K-Clcotransporter 2,KCC2)负责将神经元内Cl向外转运,而Na,K-2Cl共转运体1(Na,K-2Clcotransporter1,NKCC1)则负责将胞外的Cl向胞内转运,二者构成一对平衡体,从而维持神经元内Cl浓度的稳定和平衡。阳离子-Cl共转运体的功能异常,可引起中枢神经系统的Cl的浓度异常,进而导致临床上多种神经系统疾病,如癫痫和持续性疼痛等,提示阳离子-Cl共转运体可能通过影响GABA能神经元,在神经兴奋/抑制的平衡中扮演了重要角色,而失眠正是一种神经兴奋/抑制功能失衡导致的临床疾病。作为经典的治疗失眠的药物,地西泮(安定)等属苯二氮卓受体激动剂,它们可通过促进GABA与GABA受体的结合而使Cl通道开放的频率增加,更多的Cl内流,引起突触膜超极化,产生快抑制性突触后电位(inhibitory postsynaptic potential,IPSP),而发挥神经抑制功能。而这个过程中,阳离子-Cl共转运体KCC2和NKCC1会发生什么同步变化呢?目前国内外尚未见相关报道。本研究拟采用腹腔注射PCPA制成大鼠失眠模型,并同步设立生理盐水对照组和地西泮干预组,分别检测各组大鼠脑干组织中KCC2mRNA和NKCC1 mRNA的表达变化,并检测细胞内氯离子浓度,以探讨其在失眠发病机制中的作用。方法 1.动物分组及处理:采用清洁级成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠为实验对象,随机分为3组,模型组:按照用量PCPA 300mg/Kg,用略碱性生理盐水(pH:7-8)溶解PCPA配制成混悬液,予以腹腔注射1ml/100g,每日1次,8:30-9:00 AM,连续2天,制作实验性失眠大鼠模型;对照组:与模型组同步对照,以生理盐水代替PCPA腹腔注射;干预组:自PCPA造模之后,按照地西泮片0.92mg/Kg的剂量,用蒸馏水溶解地西泮片配制成9.2%水溶液,予以灌胃,每日一次,9:00-9:30 AM,连续5天。 2.将各组受试动物于治疗后第6天断头处死,取大鼠脑干组织,液氮内保存。 ***-PCR法半定量检测大鼠脑干KCC2和NKCC1 mRNA的表达。 4.用氯离子荧光探针MQAE,结合激光共聚焦显微镜检测脑干组织细胞内Cl浓度及变化。结果 1.与对照组相比,模型组KCC2mRNA表达明显降低(P＜0.01),干预组较模型组表达增加(P＜0.01),但仍低于对照组(P＜0.01)。 2.与对照组相比,模型组NKCC1mRNA表达稍增加,但无显著性差异(P＞0.05),干预组较对照组和模型组均降低(P＜0.01)。 3.与对照组相比,模型组细胞内氯离子浓度升高(P＜0.01),干预组较模型组降低(P＜0.01),但仍较对照组高,差异无显著性(P＞0.05)。结论 1、脑干KCC2 mRNA表达下调及细胞内Cl浓度的升高可能与失眠的发病有关。 2、地西泮可能通过上调KCC2 mRNA和下调NKCC1 mRNA的表达,以及降低细胞内Cl浓度而发挥镇静催眠的作用。

关键词：失眠阳离子-Cl-共转运体(CCC) KCC2 NKCC1 脑干苯二氮卓类