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拟南芥V-ATPase亚基C参与自噬的机制探究

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拟南芥V-ATPase亚基C参与自噬的机制探究

作者：蔺姗兰州大学

学位级别：硕士

细胞自噬是一类依赖于溶酶体和液泡的降解途径,在真核生物中高度保守。植物细胞自噬发生时,首先在自噬相关蛋白的催化作用下,细胞内形成包裹靶物质的双层膜结构的自噬小体,再进一步将自噬小体运送到液泡内进行降解,产生新的小分子以供... 详细信息

细胞自噬是一类依赖于溶酶体和液泡的降解途径,在真核生物中高度保守。植物细胞自噬发生时,首先在自噬相关蛋白的催化作用下,细胞内形成包裹靶物质的双层膜结构的自噬小体,再进一步将自噬小体运送到液泡内进行降解,产生新的小分子以供机体重新利用。在营养物质缺乏、干旱、高盐等非生物胁迫以及病原菌入侵等生物胁迫下,植物可以通过自噬这一高度精细复杂的降解机制回收细胞内的大分子物质和损坏的细胞器以维持自身的正常生长、发育和生存。自噬能诱导酵母细胞液泡酸化,以维持自噬小体降解所需水解酶的活性。与酵母类似,植物囊泡H-ATPase(V-ATPase)是一类定位在液泡膜和分泌膜系统上的质子泵,其主要功能是利用催化ATP水解产生的能量向液泡内转运氢离子,使液泡酸化。研究表明,V-ATPase特异性抑制剂ConcanamycinA(ConcA)能抑制内吞转运、分泌途径以及自噬小体的降解,暗示了V-ATPase在植物自噬过程中起着非常重要的作用。拟南芥V-ATPase是由12个亚基组成的复合体,但目前对于单个亚基在自噬中的生理生化功能仍不清楚。拟南芥V-ATPase亚基C(AtVHA-C)由单基因编码,其点突变体det3-1的TGN/EE酸化能力变弱,TGN到液泡的转运速率变缓,但高尔基体和液泡的酸化能力不受影响。我们前期的研究发现,AtVHA-C缺陷型突变体det3-1可能也是一个自噬缺陷型突变体。因此,本文系统研究了AtVHA-C的组织表达模式、亚细胞定位,以及突变体det3-1在碳饥饿和氮饥饿环境下的生理功能和作用机理,旨在揭示V-ATPase亚基C参与植物自噬的功能,并获得以下结果:***-PCR和GUS组织定位染色结果表明,AtVHA-C在拟南芥幼苗、下胚轴、叶片、花以及果荚中普遍表达。烟草叶片细胞瞬时表达结果显示,AtVHA-C主要定位在膜、微丝、细胞核。2.与野生型相比,突变体对于氮饥饿和碳饥饿更加敏感。氮饥饿处理后,det3-1叶片细胞死亡严重,叶片中ROS积累;碳饥饿处理后,det3-1全部死亡,det3-1四周龄苗黑暗处理3 d时ROS开始积累。3.与野生型相比,突变体中自噬小体的形成和转运过程被显著影响。蛋白质免疫印迹(Western Blot)结果显示,氮饥饿处理后,det3-1中ATG8蛋白呈先增后减趋势。氮饥饿处理16 h后,用转盘式激光共聚焦活细胞成像系统(Spin Disc)检测ATG8e-GFP/det3-1中自噬小体的形成情况,结果表明det3-1根成熟区自噬小体数目与野生型中接近,但是加入ConcA后det3-1根成熟区自噬小体比野生型中少。将ATG8e-GFP/det3-1氮饥饿处理0 d、1 d、2 d后,Western Blot检测ATG8e-GFP融合蛋白和游离GFP蛋白的变化情况,结果显示,氮饥饿处理后det3-1中游离GFP蛋白含量基本保持不变。碳饥饿处理后,det3-1根成熟区中自噬小体的数目是野生型中的0.5倍,加入ConcA后det3-1根成熟区自噬小体数目与野生型中的接近。黑暗处理后det3-1中ATG8蛋白含量变化趋势与野生型接近。4.突变体中自噬相关基因和潜在的自噬通路相关基因表达量被显著改变。将det3-1氮饥饿处理0 d、2 d后提取RNA,反转录后进行qRT-PCR检测自噬相关基因以及一些可能与自噬通路相关基因的表达情况,发现氮饥饿除了影响自噬相关基因ATG2、ATG8a、ATG18a的表达,乙烯合成相关基因ACS2、ACS8和ABA相关基因SAG113的表达也受到影响。用外源脱落酸(ABA)和乙烯合成前体物质ACC处理,结果显示det3-1子叶绿化受到ABA影响,但ACC对det3-1的萌发,子叶绿化和根长都没有影响。综上所述,本研究利用细胞生物学、分子生物学的方法,探究了氮饥饿和碳饥饿对拟南芥det3-1突变体蛋白水平和转录水平的影响,确定det3-1为自噬缺陷型突变体。为后期深入研究V-ATPase亚基C参与自噬的分子机制奠定了基础,为全面认知自噬机制和V-ATPase的生理功能提供了新思路与理论依据。

关键词：植物自噬 V-ATPase C亚基非生物胁迫囊泡转运

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广播电视发射天线技术的应用探微

中国新通信 2016年第3期18卷 79-80页

作者：蔺晓姗德宏州广播电视台

随着中国传媒业的兴起,广播电视发射天线技术开始广泛应用于广播、电视领域中,提高了信号传输效率,使得信号接收更为稳定而不易受到干扰。广播电视发射天线技术实现了低消耗、低故障率、高质量的媒体传播,推动了广播电视业快速发展。本... 详细信息

随着中国传媒业的兴起,广播电视发射天线技术开始广泛应用于广播、电视领域中,提高了信号传输效率,使得信号接收更为稳定而不易受到干扰。广播电视发射天线技术实现了低消耗、低故障率、高质量的媒体传播,推动了广播电视业快速发展。本论文针对广播电视发射天线技术的应用进行探究。

关键词：广播电视发射天线发射天线原理技术特征应用

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数字音频技术在广播电视中的应用

中国有线电视 2016年第1期 76-78页

作者：蔺晓姗德宏州广播电视台云南德宏678400

广播电视技术的发展带动了数字音频技术的进步,数字音频技术与高清视频信号结合,使高清电视达到"声情并茂"的完美效果,成为数字广播电视不可或缺的技术支撑。介绍数字音频技术的基本原理,探讨音频信号嵌入技术的应用及其发展。

关键词：数字音频嵌入技术广播电视采样率量化数模转化原理

广播电视系统网络安全问题分析及其预防对策探讨

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西部广播电视 2018年第2期39卷 254-256页

作者：蔺晓姗邵宗平德宏广播电视台德宏芒市公安局

随着信息技术的蓬勃发展,许多传统媒体都受到网络技术革命带来的冲击,广播电台拥有丰富的节目资源,通过网络技术将这些资源与网络融合,可以大大拓展收看范围。然而,在信息互通的互联网模式下,网络连接的信息安全问题也不断涌现,影响广... 详细信息

随着信息技术的蓬勃发展,许多传统媒体都受到网络技术革命带来的冲击,广播电台拥有丰富的节目资源,通过网络技术将这些资源与网络融合,可以大大拓展收看范围。然而,在信息互通的互联网模式下,网络连接的信息安全问题也不断涌现,影响广播电视系统的正常运行,为更好地保证广播电视的安全、高效、顺利播出,需要深入研究网络安全防护技术,保证广播电视网络的安全。本文仅从技术安全角度对广播电台的网络系统的安全设计进行论述与探讨。

关键词：广播电视网络安全技术措施

硫酸盐侵蚀下混杂纤维/橡胶混凝土力学性能及微观结构

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复合材料学报 2024年第4期41卷 2055-2064页

作者：刘雨姗庞建勇安徽理工大学土木建筑学院淮南232001

为研究混杂纤维/橡胶混凝土(HF/RC)的抗硫酸盐侵蚀性能,对比分析硫酸盐环境下干湿循环240次内,普通混凝土(NC)和HF/RC的表观现象、质量损失、超声参数、抗压强度损失等性能指标劣化过程,采用SEM及XRD微观表征手段分析硫酸盐/干湿循环前... 详细信息

为研究混杂纤维/橡胶混凝土(HF/RC)的抗硫酸盐侵蚀性能,对比分析硫酸盐环境下干湿循环240次内,普通混凝土(NC)和HF/RC的表观现象、质量损失、超声参数、抗压强度损失等性能指标劣化过程,采用SEM及XRD微观表征手段分析硫酸盐/干湿循环前后试件微观形貌及物相组成。结果表明:随硫酸盐/干湿循环次数增加,NC、HF/RC试件的质量、抗压强度呈先增后减的趋势,超声参数与抗压强度、耐蚀系数具有密切相关性;侵蚀初期SO_(4)^(2−)与胶凝物质反应填充原生孔隙,基体密实度提高。侵蚀过程胶凝材料不断被消耗,基体在硫酸钠反复结晶的物理侵蚀及硫酸盐化学侵蚀的共同作用下出现空隙和孔洞。但橡胶颗粒和混杂纤维可阻断裂缝扩展继而减缓SO_(4)^(2−)扩散,抑制膨胀性产物生成,延缓结晶应力诱发的表层裂纹发育。硫酸盐侵蚀各阶段HF/RC的劣化程度均优于NC,经240次硫酸盐/干湿循环后,NC、HF/RC的耐蚀系数分别为69.00%、78.87%。

关键词：硫酸盐环境橡胶混凝土玄武岩纤维聚乙烯醇纤维干湿循环微观结构

作为社会情绪的“同情”——郁达夫文学实践的情感主义路径

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中国现代文学研究丛刊 2024年第7期 142-159页

作者：孙慈姗北京大学中文系 100086

在郁达夫的文学观念中,情感始终是文艺活动的动力机制与旨归。郁达夫借鉴心理学理论将情感区分为“情绪”与“情操”两大类型,这其中作为“社会情绪”的“同情”被视为情绪与情操的连通媒介,也是文学情感发挥社会功能的通路。而对同情... 详细信息

在郁达夫的文学观念中,情感始终是文艺活动的动力机制与旨归。郁达夫借鉴心理学理论将情感区分为“情绪”与“情操”两大类型,这其中作为“社会情绪”的“同情”被视为情绪与情操的连通媒介,也是文学情感发挥社会功能的通路。而对同情这一情感要素的表现和分析也在郁达夫的文学实践中占据关键位置,并连带着更为宏观的时代文化议题。具体而言,郁达夫和他的批评者们对于“血泪文学”的识别与批判体现出文学者对同情之感伤倾向的警惕,使得同情成为反思性情感。在此意识下,郁达夫《春风沉醉的晚上》等作品于叙事层面展开的情感分析则从同情发生学的角度对这类情感的特性及其与文学语言的内在关系进行了更为细致的分梳。这样的情感分析也影响了郁达夫在时代巨变中对自身文学方向的调整。在革命文学的潮流下,郁达夫以“人化的自然”为形式要素,通过人与自然的关联结构将同情转化为一种“审美的情操”,并以这种文学情感为基底塑造出自身独特的文学路径。

关键词：郁达夫同情感伤《春风沉醉的晚上》审美情操

增长联盟视角下的中心城区存量国有资产更新——以上海市长宁区为例

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城市规划 2024年第10期 74-82页

作者：彭姗妮翟宇琦上海市长宁区城市更新和低碳项目管理中心同济大学建筑与城市规划学院

我国城市更新具有增长联盟的结构性特征，而存量国有资产更新中的增长联盟兼具典型性和独特性。上海长宁以愚园路和武夷路作为实践区域，为存量国有资产更新提供了不同模式的样本。愚园路案例中，以商铺型区属国有资产为主要载体，地方... 详细信息

我国城市更新具有增长联盟的结构性特征，而存量国有资产更新中的增长联盟兼具典型性和独特性。上海长宁以愚园路和武夷路作为实践区域，为存量国有资产更新提供了不同模式的样本。愚园路案例中，以商铺型区属国有资产为主要载体，地方政府与民营企业形成了相互塑造的政企合作模式，合作关系一定程度上具有非正式特征；武夷路案例中，园区型国有资产在复杂权属关系下产生了各异的使用权获得路径，经历了曲折的联盟组建过程，促成了多层次多面向的政企联合体，在政府更强的统筹力度下体现出多元价值特征。在增长联盟的理论框架和上海长宁的实践基础上，从内部关系、构建过程和多重价值3个补充视角提出中心城区存量国有资产更新需关注的挑战和路径建议。

关键词：城市更新存量国有资产增长联盟中心城区上海长宁

人的个体性与社会性相统一的解决方案——兼论马克思与黑格尔解决“市民社会问题”的不同思路

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山东社会科学 2024年第7期 53-62页

作者：蔺庆春中国政法大学马克思主义学院中国政法大学马克思主义基本原理研究所

近代以来,随着现代世界转型,市民社会与政治国家分离。市民社会取得纯粹的经济内涵,是人的自私性和自然法充分发挥作用的物质领域;政治国家作为法的理念的现实化,是人的政治精神、共同体本质凝结的抽象领域。二者根本对立所带来的深层... 详细信息

近代以来,随着现代世界转型,市民社会与政治国家分离。市民社会取得纯粹的经济内涵,是人的自私性和自然法充分发挥作用的物质领域;政治国家作为法的理念的现实化,是人的政治精神、共同体本质凝结的抽象领域。二者根本对立所带来的深层次问题是人的个体性与社会性的分离。面对这一时代问题,黑格尔和马克思给出了各自不同的解决方案。黑格尔立足国家决定市民社会,主张通过以等级和行政权为中介的教化和陶冶方式,实现私人(市民)到公民的转变,进而在现代国家中实现人的个体性与社会性的实体性统一。马克思则立足市民社会决定国家,主张物质力量只能通过物质力量来摧毁,实现人的个体性与社会性的真正统一,需要通过无产阶级革命,消解市民社会中的物质生产关系,推翻资本主义政治体制,建立真正的人类社会。

关键词：市民社会问题个人社会黑格尔马克思

“新”“旧”文学互动下的“情感学习”——沈祖棻20世纪三四十年代的文学实践

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文艺研究 2024年第8期 94-106页

作者：孙慈姗北京大学中国语言文学系

在现代中国文学的发展过程中,“新”与“旧”两种文学形制及文化心态都深切作用于时代情感的生成。于20世纪三四十年代从事各体裁文学创作的沈祖棻,或可成为观照这一过程的微观个案。以个体成长经历为标尺,沈祖棻创作初始阶段的“情感... 详细信息

在现代中国文学的发展过程中,“新”与“旧”两种文学形制及文化心态都深切作用于时代情感的生成。于20世纪三四十年代从事各体裁文学创作的沈祖棻,或可成为观照这一过程的微观个案。以个体成长经历为标尺,沈祖棻创作初始阶段的“情感学习”主要表现为在文坛与高校环境中对各类文体写作的尝试;随着战争经验对文学实践日益深化的影响,沈祖棻选择动用“旧形式”因应时局,并为一己之情寻找妥帖的安置方式,这在《涉江词》的写作中得到集中体现。在这些词作中,比兴作为一种渊源有自的修辞形态在情感与道统间建构了紧密关联,而程千帆对《涉江词》的笺注又将与“情”构成张力关系的“事”带入古典文体,使其生长出一定的现代性。最终,沈祖棻的文学实践呈现出新旧各种文体与文学要素对时代情感的形塑过程。

关键词：沈祖棻渊源有自文学要素文化心态文学实践现代中国文学程千帆高校环境