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CD4和CD8分子在细胞免疫中的作用及其与PRRSV感染的关系

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 151-152页

作者：孙庆申蔡雪晖童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

CD4和CD8是T细胞的两个重要的细胞表面标志。

关键词： CD4 CD8 细胞免疫 PRRSV 分子结构细胞免疫感染机理

检测禽白血病/肉瘤病毒ELISA双抗体法的研究

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中国畜禽传染病 1996年第4期18卷 37-40页

作者：蔡雪晖何兆忠中国农科院哈尔滨兽医研究所

用差速离心和非线性蔗糖密度梯度离心法提纯了感染雏鸡血浆中禽成髓细胞性白血病病毒(AMV),并用SDS-PAGE法提取了AMV的结构蛋白P_(27)^(838)。以纯化的P_(27)^(838)高免家兔,制备了兔抗P_(27)^(838)的禽白血病/肉瘤病毒群特异性抗体。... 详细信息

用差速离心和非线性蔗糖密度梯度离心法提纯了感染雏鸡血浆中禽成髓细胞性白血病病毒(AMV),并用SDS-PAGE法提取了AMV的结构蛋白P_(27)^(838)。以纯化的P_(27)^(838)高免家兔,制备了兔抗P_(27)^(838)的禽白血病/肉瘤病毒群特异性抗体。选用兔抗P_(27)^(838)IgG作为包被抗体,该抗体与辣根过氧化物酶的结合物作为酶标抗体,以聚苯乙烯微量板为固相载体,建立了监测禽白血病的ELISA双抗体法,经试验证明该方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点。

关键词：禽病白血病肉瘤病毒 ELISA 双抗体法

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猪繁殖与呼吸综合征病毒的持续感染

中国预防兽医学报 2002年第4期24卷 316-318页

作者：刘光清仇华吉蔡雪晖童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PPRS)是由PRRSV引起的以繁殖母猪的生殖障碍和仔猪的呼吸道症状为特征的病毒性传染病。该病虽然是一种新发现的传染病，但却已给养猪业造成了严重的经济损失。目前... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome, PPRS)是由PRRSV引起的以繁殖母猪的生殖障碍和仔猪的呼吸道症状为特征的病毒性传染病。该病虽然是一种新发现的传染病，但却已给养猪业造成了严重的经济损失。目前，对该病的防制一直不尽人意，因为PRRSV可在猪群中持续存在并感染，很难彻底消灭。更有甚者，当猪群的群体免疫水平低下，还会造成PRRS的再度发和流行。

关键词：猪繁殖呼吸综合症病毒持续感染

猪生殖-呼吸道综合征病毒(PRRSV)分离鉴定及其与欧、美PRRSV抗原的比较

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中国畜禽传染病 1998年第4期20卷 193-195页

作者：刘文兴蔡雪晖郭宝清中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明，ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应；... 详细信息

在我国吉林省某地猪生殖－呼吸道综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）抗体阳性猪群的４头２日龄弱仔猪实质脏器中分离到２株ＰＲＲＳＶ。间接荧光抗体试验（ＩＦＡ）结果表明，ＰＲＲＳＶ（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）抗血清与２个分离株呈阳性反应；分离到病毒的弱仔猪血清与参考株（ＬＶ．ＶＲ－２３３２）也呈阳性反应；而分离株与ＨＣＶ、ＰｒＶ、ＰＰＶ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ和ＨＥＶ无交叉抗原。以上试验证明，我们已成功地分离到２株地方性ＰＲＲＳＶ。进一步用六种ＰＲＲＳＶ单抗（Ａ～Ｆ）进行ＩＦＡ试验，结果２个分离株与ＶＲ－２３３２的荧光反应谱相同。说明它们之间在抗原结构上具有同源性。

关键词：病毒分离猪生殖-呼吸道 PRRSV 综合征 IFA

PRRSVSD株和DQ株ORF 2～6基因的克隆和序列分析

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黑龙江畜牧兽医 2008年第7期 14-17页

作者：孙庆申蔡雪晖赵凯黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150080 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

为了弄清我国不同地区猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的来源及其遗传学背景，为疫苗学研究提供理论根据，在获得CH-1a株完整的基因组以后，从流行于我国山东（SD）和黑龙江大庆（DQ）地区疑似PRRS的猪体内分离到PRRSV，在Marc-145细... 详细信息

为了弄清我国不同地区猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）的来源及其遗传学背景，为疫苗学研究提供理论根据，在获得CH-1a株完整的基因组以后，从流行于我国山东（SD）和黑龙江大庆（DQ）地区疑似PRRS的猪体内分离到PRRSV，在Marc-145细胞上盲传5～6代，细胞出现明显病变以后收获病毒液，提纯并提取全病毒RNA，经过反转录、PCR扩增获得结构基因ORF2～6的目的基因片段，然后与pMD—T载体连接，转化，得到阳性质粒后进行测序，并将其与CH—1a株进行比较分析，同时对这两个毒株的结构基因组的理化性质进行分析。结果表明：流行于我国山东和大庆地区的PRRSV结构基因ORF2～6与CH—1a株核苷酸的同源性均在94％～99％之间，氨基酸的同源性也在90％以上，但从DQ和SD株结构基因编码的蛋白来看，这两个毒株与CH—1a株的结构基因所编码的蛋白在氨基酸组成以及等电点方面还有一定的差异，表明流行于我国的PRRSV毒株均属于美洲型。

关键词： PRRSV 分子克隆序列分析

猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪外周血CD4、CD8分子动态变化研究

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黑龙江畜牧兽医 2008年第4期 14-15页

作者：孙庆申霍庆莉蔡雪晖童光志黑龙江大学生命科学学院微生物黑龙江省高校重点实验室黑龙江哈尔滨150080 哈尔滨市道外区永源镇畜牧站黑龙江哈尔滨150331 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

研究利用流式细胞仪对猪感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后不同时期的CD4和CD8分子动态变化进行分析。结果表明:猪感染PRRSV后的第3天,CD4+和CD8+的数量开始急剧下降,在第12天达到最低水平;以后逐渐升高,CD4+的数量到第26天赶上并超... 详细信息

研究利用流式细胞仪对猪感染猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后不同时期的CD4和CD8分子动态变化进行分析。结果表明:猪感染PRRSV后的第3天,CD4+和CD8+的数量开始急剧下降,在第12天达到最低水平;以后逐渐升高,CD4+的数量到第26天赶上并超过感染前的水平,在第33天又有所下降;而CD8+的数量在第19天就升高到感染前的水平。

关键词： PRRSV CD4 CD8 外周血

猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株非结构基因的分子克隆及其基因特征的研究

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中国预防兽医学报 2002年第2期24卷 81-87页

作者：刘光清薛强仇华吉蔡雪晖童光志郭宝清中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;... 详细信息

对猪繁殖与呼吸综合征病毒的非结构基因 (ORF1)和非编码区分别进行了克隆和测序 ,并对其基因特征作了分析。结果表明 ,CH_1a株ORF1全长 11882nt,其中ORF1a长 75 12nt、ORF1b长 4374nt。它们与VR2 332株的核苷酸同源性分别为 89%、92 % ;与LV株的核苷酸同源性分别为 5 4%、6 3.3%。ORF1编码两个聚合蛋白 ,其中ORF1a编码的聚合蛋白经裂解后产生 6个成熟的非结构蛋白 (Nsp1α、Nsp1β、Nsp2_5 ) ,以Nsp2的变异性最为显著 ,它与LV株的氨基酸同源性为 41%。ORF1b编码的聚合蛋白经裂解后 ,产生 4个成熟的非结构蛋白 (RdRpCP2_4) ,其中RdRp为病毒的复制酶 ,CP4表现出较大的变异性 ,与LV株的氨基酸同源性为 48%。在ORF1a_ORF1b的衔接区有保守的庚核苷酸滑动序列和拟节结构 ,它们是核糖体移码翻译所必需的结构。在基因组末端存在非编码区 ,其中 5’NCR长 190nt,比LV株 5’NCR短 31nt,其核苷酸同源性为 6 1%。 3’NCR长 15 1nt,比LV株 3’NCR长 37nt,保守性稍高 ,其与VR2 332株和LV株的核苷酸同源性分别为 95 .4%和 78.2 %。在 3’NCR末端有一个poly(A)尾巴 ,长 2 0nt。在Poly(A)尾上游有保守的八核苷酸序列 ,是复制酶识别并结合的区域。

关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒 CH-1a株非结构基因分子克隆基因特征序列分析非结构蛋白编码区

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猪繁殖与呼吸综合征的研究进展

中国预防兽医学报 2001年第1期23卷 72-76页

作者：刘光清蔡雪晖仇华吉郭宝清童光志中国农业科学院哈尔滨兽医研究所哈尔滨150001

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种新发现的传染病。主要引起怀孕母猪的早产、流产、死胎及仔猪的呼吸系统症状。1987年美国首先报道了该病的发生1］，随后加拿大、德国、荷兰等一些国家... 详细信息

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是一种新发现的传染病。主要引起怀孕母猪的早产、流产、死胎及仔猪的呼吸系统症状。1987年美国首先报道了该病的发生1］，随后加拿大、德国、荷兰等一些国家也先后暴发了该病2～5］。1991年初，我国台湾地区出现此病6］。1996年，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所首次从国内疑似PRRS病例中分离到PRRS病毒7］，从而证实了本病在我国的存在。最初，人们由于不能确定其病因，故称其为，“猪神秘病”(Mystery swine disease)、“猪不育和呼吸道综合征”(Swine infertility and respiratory syndrome,SIRS)、“猪蓝耳病”(Blue ear disease)等。1991年、荷兰科学家Wensvoort博士在感染猪体内分离到Lelystad病毒8］，随后德国和美国学者也相继从本国病猪体内分离到相似的病毒。通过对这种病毒的形态、结构和抗原性等的研究，证明其为一种新发现的病毒。1992年，欧共体将该病统一命名为“猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)9］”。本文拟对该病的研究进展作一概述。

关键词：猪繁殖呼吸综合征 PRRS 病毒流行病学防制

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猪痢疾研究进展

国外兽医学（畜禽传染病） 1996年第3期16卷 1-5页

作者： Hu.,AHM 蔡雪晖