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低双乙酰啤酒酵母菌种选育及其中试

厦门大学学报（自然科学版） 2003年第4期42卷 508-512页

作者：唐晓达张秀丽蔡车国魏文铃刘月英厦门大学生命科学学院福建厦门361005

以啤酒酵母FB作为出发菌株,通过紫外线诱变,并以发酵液中双乙酰含量为主要指标筛选获得一株优良啤酒酵母UB2。三角瓶低温发酵8d,其发酵液中双乙酰含量为0.088 5mg/L,比出发菌株FB降低38％;发酵液保持了亲株FB的优良风味和凝聚性,且部分... 详细信息

以啤酒酵母FB作为出发菌株,通过紫外线诱变,并以发酵液中双乙酰含量为主要指标筛选获得一株优良啤酒酵母UB2。三角瓶低温发酵8d,其发酵液中双乙酰含量为0.088 5mg/L,比出发菌株FB降低38％;发酵液保持了亲株FB的优良风味和凝聚性,且部分发酵性能有了较大的改善;在500L发酵罐中试实验中,UB2菌株发酵过程中的双乙酰峰值为0.17mg/L,比FB降低了45％;双乙酰还原速度较快,比FB提前1d达到质量标准,结束主酵;发酵得到的酒液经品评认为口感优于亲株。

关键词：啤酒酵母菌种选育双乙酰紫外线诱变中试实验发酵性能风味凝聚性

整合深圳人源H5N1禽流感病毒株血凝素蛋白的假型逆转录病毒的构建

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第1期29卷 53-57页

作者：张国良周伯平陈心春蔡车国陆坚杨桂林聂广周保罗武汉大学人民医院 430060 深圳市东湖医院 518020 中国科学院上海生命科学院

目的构建整合深圳人源H5N1禽流感病毒（avianinfluenzavirus，AIV）株血凝素（HA）的假型逆转录病毒。方法利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术扩增深圳人源H5N1禽流感病毒株HA基因，将扩增产物与pGEM-T载体连接，在经过酶切及测序... 详细信息

目的构建整合深圳人源H5N1禽流感病毒（avianinfluenzavirus，AIV）株血凝素（HA）的假型逆转录病毒。方法利用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术扩增深圳人源H5N1禽流感病毒株HA基因，将扩增产物与pGEM-T载体连接，在经过酶切及测序鉴定后，通过Sal Ⅰ与BamHⅠ酶切位点将HA基因克隆至真核表达载体CMV／R，然后协同转移载体pHR—Luc、包装载体pCMV＆8．2通过磷酸钙共沉淀法转染人胚肾细胞（293T），72h后收集假病毒上清，超速离心后通过Western blot鉴定假病毒颗粒HA、P24蛋白的表达，同时测定HIV—HA假病毒对犬肾传代细胞（MD-CK）、宫颈癌上皮细胞（HeLa）、中国仓鼠卵母细胞（CHO）和293T等4种不同细胞株的感染活性。结果深圳人源H5N1禽流感病毒株A／Shenzhen／406H／06属于subclade2．3，其HA基因开放读码框编码567个氨基酸，在GenBank登录号为EFl37706。经Sal Ⅰ与BamHⅠ双酶切鉴定HA基因成功克隆至真核表达载体CMV／R。将pHR—Luc、pCMV＆8．2、CMV—HA共转染293T细胞后，所收集的假病毒经Westernblot证实假病毒颗粒不仅含有HIV基质蛋白P24，还可以整合AIVHA蛋白，并且能够由前体蛋白HA。裂解为具有生物活性的HA，和HA：蛋白。HIV—HA假病毒可以感染MDCK、HeLa、CHO、293T等4种靶细胞，表明所构建的假病毒具有感染活力，且具有广泛的宿主范围。结论本研究成功构建整合A／Shenzherv／406H／06HA蛋白的假型逆转录病毒，并且HIV—HA假病毒具有良好的感染活性，从而为下一步筛选中和抗体及抗原表位分析奠定基础。

关键词： H5N1型禽流感病毒血凝素假病毒逆转录病毒

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低双乙酰啤酒酵母菌株BEZ112的选育

工业微生物 2003年第2期33卷 38-40,45页

作者：张秀丽唐晓达蔡车国刘月英魏文铃戴玉聪郑建山厦门大学生命科学学院厦门361005 福建雪津啤酒集团公司莆田351111

以啤酒酿造生产菌株啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FB作为出发菌株,用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,经分离筛选得到一株优良的啤酒酵母菌株BEZ112。该菌株的絮凝性、发酵度、酒精度、发酵液的总酯和总高级醇的含量等特性保持了亲株的优... 详细信息

以啤酒酿造生产菌株啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)FB作为出发菌株,用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,经分离筛选得到一株优良的啤酒酵母菌株BEZ112。该菌株的絮凝性、发酵度、酒精度、发酵液的总酯和总高级醇的含量等特性保持了亲株的优良性状。但以12°Bx麦芽汁为培养基用500mL三角瓶在12℃下发酵,该菌株发酵至第4d,发酵液中的双乙酰含量达到峰值(0.291mg/L),比出发菌株FB发酵4d的峰值降低了30％,发酵至第8d,BEZ112发酵液中的双乙酰含量比出发菌株FB的降低了23％。以12°Bx麦芽汁为培养基用500L罐在12℃下发酵8d,BEZ112发酵液中的双乙酰含量(0.091mg/L)比出发菌株FB的(0.124mg/L)降低了27％。发酵得到的啤酒口感纯正清爽。

关键词：双乙酰啤酒酵母选育诱变甲基磺酸乙酯

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优良啤酒酵母菌株UN_(41)的选育

厦门大学学报（自然科学版） 2005年第2期44卷 287-289页

作者：蔡车国戴玉聪全丽康星洋刘月英厦门大学生命科学学院福建厦门361005 福建雪津啤酒集团公司福建莆田351111

以啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W作为出发菌株,用亚硝酸和紫外线连续诱变,在含双乙酰 150μg/mL(亚硝酸诱变)或200μg/mL(紫外线诱变)的麦芽汁琼脂平板上分离抗双乙酰的菌株,通过三角瓶发酵筛选得到一株优良的啤酒酵母菌株UN41... 详细信息

以啤酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) W作为出发菌株,用亚硝酸和紫外线连续诱变,在含双乙酰 150μg/mL(亚硝酸诱变)或200μg/mL(紫外线诱变)的麦芽汁琼脂平板上分离抗双乙酰的菌株,通过三角瓶发酵筛选得到一株优良的啤酒酵母菌株UN41.该菌株在500 mL三角瓶装300 mL 12°Bx麦芽汁的培养基中,12℃下发酵8 d,发酵液的发酵度为65.0%;双乙酰、高级醇和乙醛的含量分别为0.076 8 mg/L、92.15 mg/L和9.33 mg/L,比出发菌株W的降低了37.6%、19.9%和27.6%.

关键词：啤酒酵母亚硝酸诱变紫外线诱变双乙酰发酵度麦芽汁亚硝酸

用原生质体融合法优化啤酒酵母的凝絮性和发酵性能

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第1期45卷 110-113页

作者：蔡车国刘月英戴玉聪全丽康星洋厦门大学生命科学学院福建厦门361005 福建雪津啤酒有限公司福建莆田351111

以发酵度较高、凝絮性较差的啤酒酵母菌株H38的原生质体为受体,以凝絮性较强、发酵度较低的啤酒酵母菌株N1热灭活的原生质体为供体进行融合.用正交试验法分别优化两亲株的原生质体制备和再生的条件以及原生质体融合的条件.用制霉菌素抗... 详细信息

以发酵度较高、凝絮性较差的啤酒酵母菌株H38的原生质体为受体,以凝絮性较强、发酵度较低的啤酒酵母菌株N1热灭活的原生质体为供体进行融合.用正交试验法分别优化两亲株的原生质体制备和再生的条件以及原生质体融合的条件.用制霉菌素抗性为遗传标记选择融合子.融合子初筛时以凝絮性为指标,复筛时以发酵度和发酵液中的主要风味物质的含量为指标.对得到的融合子进行了异核体和遗传稳定性的检验,结果得到两株凝絮性以及发酵特性较好的菌株HN31和HN40.

关键词：啤酒酵母抗性正交试验热灭活原生质体融合

啤酒酵母原生质体融合株HN31-6的啤酒酿造中试研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2006年第6期45卷 855-858页

作者：刘月英王芬由媛蔡车国戴玉聪全丽厦门大学生命科学学院福建厦门361005 福建雪津啤酒有限公司福建莆田351111

为了考察啤酒酵母融合株HN31-6的啤酒酿造生产性能,以12.5°Bx麦芽汁为培养基,用500 L发酵罐在12℃下发酵,发酵期间每天取样测定发酵液的发酵度和酒精度以及发酵液的双乙酰、乙醛、高级醇和酯类等挥发性物质的含量.结果表明:在上述条件... 详细信息

为了考察啤酒酵母融合株HN31-6的啤酒酿造生产性能,以12.5°Bx麦芽汁为培养基,用500 L发酵罐在12℃下发酵,发酵期间每天取样测定发酵液的发酵度和酒精度以及发酵液的双乙酰、乙醛、高级醇和酯类等挥发性物质的含量.结果表明:在上述条件下,发酵14 d,发酵液的发酵度和酒精度分别为69.9%和4.46%;双乙酰和乙醛的含量分别为0.036 4 mg/L和4.53 mg/L;异戊醇、异丁醇和正丙醇的含量分别为46.47、8.34和9.82 mg/L,总高级醇的含量为64.6mg/L;甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸异丁酯、乙酸异戊酯和己酸乙酯的含量分别为0.132、21.92、0.037、2.22和0.293 mg/L,总酯为24.6 mg/L;该菌株的发酵度以及发酵液的酒精、双乙酰、乙醛、总高级醇和一些酯类等的含量均达到国家优质啤酒的标准,啤酒口感良好.该融合株在啤酒酿造生产中具有很好的应用前景.

关键词：啤酒酵母原生质体融合株啤酒酿造中试

优良啤酒酵母原生质体融合株GR_5的构建及其发酵特性

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工业微生物 2006年第1期36卷 34-37,42页

作者：蔡车国张秀丽刘月英戴玉聪全丽康星洋厦门大学生命科学学院厦门361005 福建雪津啤酒集团公司莆田351111

以发酵度较高的非絮凝性的啤酒酵母菌株X6和发酵度较低、絮凝性较强的啤酒酵母菌株N1为亲本进行原生质体融合。用亚硝酸诱变原养型的菌株X6，经筛选得到一株需酪素水解物的营养缺陷型菌株X6～20。采用正交试验法分别优化菌株X6-20和N1... 详细信息

以发酵度较高的非絮凝性的啤酒酵母菌株X6和发酵度较低、絮凝性较强的啤酒酵母菌株N1为亲本进行原生质体融合。用亚硝酸诱变原养型的菌株X6，经筛选得到一株需酪素水解物的营养缺陷型菌株X6～20。采用正交试验法分别优化菌株X6-20和N1的原生质体形成和再生的条件。用X6-20菌株的原生质体作为受体和热灭活的N1菌株原生质体作为供体进行融合。融合株经三角瓶发酵筛选，得到一株较优良的融合株GR5该融合株的絮凝性较强（本斯值为2．7），以12°Bx麦芽汁为培养基，用500L的发酵罐在12℃下发酵，发酵至第8d菌株GR的发酵度为69．2％，发酵液中的双乙酰含量为0．0498mg/L、乙醛含量为6．34mg／L，总高级醇含量为74．4mg／L。融合株GR5具有双亲的优点，发酵的啤酒风味较好，是一株具有工业应用前景的啤酒酿造酵母菌株。

关键词：啤酒酵母原生质体融合絮凝性发酵度正交试验

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啤酒酵母融合株GR8发酵特性的初步研究

酿酒 2005年第4期32卷 60-62页

作者：蔡车国刘月英戴玉聪全丽康星洋厦门大学生命科学学院厦门361005 福建雪津啤酒集团公司莆田351111

研究了啤酒酵母原生质体融合株GR8的主要发酵特性。以12°Bx麦芽汁为三角瓶发酵培养基,在12℃下发酵8d,融合株GR8的发酵度为66.5%,凝絮性(本斯值)为3.0mL;发酵液中的双乙酰、乙醛、高级醇和乙酸乙酯等风味物质的含量分别为0.0583mg/L、9... 详细信息

研究了啤酒酵母原生质体融合株GR8的主要发酵特性。以12°Bx麦芽汁为三角瓶发酵培养基,在12℃下发酵8d,融合株GR8的发酵度为66.5%,凝絮性(本斯值)为3.0mL;发酵液中的双乙酰、乙醛、高级醇和乙酸乙酯等风味物质的含量分别为0.0583mg/L、9.66mg/L、91.20mg/L和22.8mg/L。从主要发酵特性的指标和口感品评以及遗传稳定性的结果表明,融合株GR8是一株具有工业应用前景的啤酒酿造酵母菌株。

关键词：啤酒酵母融合子发酵特性遗传稳定性

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多潜能乳腺干细胞的发现

中国细胞生物学学报 2015年第1期37卷 1-5页

作者：王代松蔡车国董小兵俞清张晓鸥杨力曾艺中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所细胞生物学国家重点实验室上海200031 中国科学院–德国马普学会计算生物学伙伴研究所中国科学院计算生物学重点实验室上海200031

小鼠乳腺由多种不同类型的上皮细胞构成。多潜能干细胞位于乳腺发育的顶端,是乳腺中所有分化细胞类型的来源。然而,这群多潜能乳腺干细胞此前尚未通过特定的标记基因得到鉴定,其存在性也备受争议。借助乳腺干细胞体外培养体系,从Wnt信... 详细信息

小鼠乳腺由多种不同类型的上皮细胞构成。多潜能干细胞位于乳腺发育的顶端,是乳腺中所有分化细胞类型的来源。然而,这群多潜能乳腺干细胞此前尚未通过特定的标记基因得到鉴定,其存在性也备受争议。借助乳腺干细胞体外培养体系,从Wnt信号通路入手,发现了蛋白C受体基因Procr。在乳腺中,Procr作为一个新的Wnt信号通路的靶基因,能够标记多潜能乳腺干细胞。Procr标记乳腺基底细胞中的一个亚群,这个亚群的细胞低表达基底细胞普遍表达的角蛋白,表现出上皮–间充质转化的特性。Procr阳性的细胞在移植实验中表现出最高的乳腺重建率,体内追踪Procr阳性细胞的后代,发现Procr阳性细胞能够在发育过程中分化形成乳腺上皮的所有细胞类型。多潜能乳腺干细胞的发现结束了乳腺中多潜能干细胞存在性的争议,对乳腺癌的诊断及靶向治疗具有重大意义。

关键词：乳腺干细胞多潜能性蛋白C受体