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CK20单克隆抗体研制及鉴定

中国免疫学杂志 2005年第10期21卷 781-783,785页

作者：刘彦慧罗春丽吴小候蔡晓钟重庆医科大学检验系重庆400016 重庆医科大学附一院泌尿外科重庆400016

目的:研制CK20单克隆抗体.方法:采用CK20抗原免疫小鼠,用免疫的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞通过PEG4000融合,以HT培养基选择培养,间接ELISA法筛选阳性孔和有限稀释法克隆细胞后,接种小鼠腹腔制备腹水抗体,抗体纯化采用以SPA-Sepharose CL-4... 详细信息

目的:研制CK20单克隆抗体.方法:采用CK20抗原免疫小鼠,用免疫的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞通过PEG4000融合,以HT培养基选择培养,间接ELISA法筛选阳性孔和有限稀释法克隆细胞后,接种小鼠腹腔制备腹水抗体,抗体纯化采用以SPA-Sepharose CL-4B为固定相的亲和层析法,最后用双向琼脂扩散法、Western blot和间接ELISA法鉴定抗体的特异性、Ig亚型和效价.结果:获得一株稳定分泌抗CK20单克隆抗体的杂交瘤细胞,染色体众数为101(99～103),其腹水抗体和纯化的抗体效价均为1:106,属IgG1亚型.结论:成功获得了CK20单克隆抗体,命名为L20031030,其特异性强,效价高.

关键词：抗CK20单克隆抗体 SPA—Sepharose 杂交瘤技术 Western blot ELISA

心血管疾病易感基因SNPs在中国汉族人原发性高血压患者中的分布

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第四军医大学学报 2009年第19期30卷 1993-1995页

作者：唐敏戴勇蔡晓钟田小园重庆医科大学临床检验诊断学重庆400016 深圳市人民医院临床研究中心广东深圳518020 深圳市孙逸仙心血管医院心内科广东深圳518020

目的:了解中国人群中16个原发性高血压(Essen-tial hypertension,EHT)候选基因的基因型和单体型分布情况及与EHT的关系.方法:采用基因芯片技术和Phase v2.1单体型分析软件,检测和分析140例EHT患者和400例健康对照者16个心血管疾病易感... 详细信息

目的:了解中国人群中16个原发性高血压(Essen-tial hypertension,EHT)候选基因的基因型和单体型分布情况及与EHT的关系.方法:采用基因芯片技术和Phase v2.1单体型分析软件,检测和分析140例EHT患者和400例健康对照者16个心血管疾病易感基因的基因型和单体型.结果:EHT组和健康对照组间的AGT235,ApoBXalI和ACEAlu等位基因频率差异显著(P<0.05),且ACEAlu在不同等级的高血压中的分布亦具有显著差异(P<0.05).人群中共有918种单体型,单体型MIEG+-C3CC在两组间分布差异分析,P=0.052.结论:AGT235M,ACEAluD和ApoBXalI+可能与中国汉族人群原发性高血压有关.

关键词：单核苷酸多态性基因芯片单体型原发性高血压

心血管疾病易感基因SNPs对中国汉族男性人群血脂的影响分析

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重庆医科大学学报 2011年第1期36卷 35-37页

作者：蔡晓钟唐晓君戴勇唐敏重庆医科大学医学检验系实验诊断教研室重庆4000162 重庆医科大学公共卫生学院流行病学教研室重庆400016 深圳市人民医院临床研究中心深圳518020

目的:了解中国汉族男性人群中16个心血管疾病易感基因SNPs与血脂的关系。方法:采用基因芯片技术和单因素方差、多元线性逐步回归方法,分析409例男性体检者16个SNPs的基因型,同时测定其血浆总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Tri... 详细信息

目的:了解中国汉族男性人群中16个心血管疾病易感基因SNPs与血脂的关系。方法:采用基因芯片技术和单因素方差、多元线性逐步回归方法,分析409例男性体检者16个SNPs的基因型,同时测定其血浆总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein,LDL)和高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)水平。结果:在中国汉族男性人群中,ANP2238C、NPRC-55C、ApoBEcorⅠ+、ApoC33206T和ApoE112,158的E3E4,Serpina3rs4943 AG有升高TC趋势;ApoC33206T和MTHFR677C亦可能与TG增高相关;ANP2238C、ET-2985G和ApoE112,158E3E4则与LDL水平增高有一定联系;ET-2985A则可能使HDL增高。结论:内皮系统相关的ANP2 238、NPRC-55和ET-2985,载脂蛋白基因中的ApoBEcorⅠ、ApoC33175、ApoC33206和ApoE112,158,以及MTHFR677和SerpinA3rs4934等9个SNPs可能与中国汉族男性的血脂调控有关。

关键词：单核苷酸多态性基因芯片血浆脂蛋白

利用数值进制的方法快速预测事件发生的模型及其应用

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数学的实践与认识 2005年第6期35卷 1-4页

作者：向华曾照芳蔡晓钟重庆医科大学医学检验系重庆400016

通过对影响事件发生的因素的分析,提出了因素数字化的简单方法,利用数值进制的方法建立了因素与事件发生的快速预测模型,可以在社会各个领域得到广泛的应用.

关键词：数值进制事件预测预测模型数据库

尿脱落细胞HE、Ao、AgNOR染色联合检查对泌尿系肿瘤诊断价值探讨

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临床检验杂志 1999年第5期17卷 311-312页

作者：罗春丽蔡晓钟谢国燕陈宏础吴小候重庆医科大学检验系重庆400016 重庆医科大学附一院泌尿科

寡核苷酸微阵列法检测冠心病患者心血管易感基因SNPs

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第三军医大学学报 2007年第17期29卷 1727-1728页

作者：唐敏戴勇蔡晓钟唐晓君吕天羽涂植光重庆医科大学医学检验系实验诊断教研室重庆400016 广东省深圳市人民医院临床研究中心深圳518020 重庆医科大学预防医学系流行病学教研室重庆400016

目的研究13个心血管易感基因中17个SNPs与冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heartdisease,CHD)的关系。方法采用寡核苷酸微阵列技术检测并分析32例冠心病患者和30例健康对照者,涉及RAAS和内皮功能相关基因、载脂蛋白... 详细信息

目的研究13个心血管易感基因中17个SNPs与冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heartdisease,CHD)的关系。方法采用寡核苷酸微阵列技术检测并分析32例冠心病患者和30例健康对照者,涉及RAAS和内皮功能相关基因、载脂蛋白等13个基因17个SNPs的基因型频率。结果病例组中ACEAlu和NOS3298偏离Hardy-Weinberg平衡(χ2分别为11.2和28.0)。ANP2238C、ApoBEcor1(-)和KCNQ1140G在中国人群中的分布频率小于5%。NPRC-55在病例组和对照组中的基因频率分布的差异具有统计学意义(P<0.05)。其他SNPs的频率分布差异未检验出。结论RAAS中的血管紧张素转换酶(ACE)的Alu插入与缺失变异和与内皮系统功能相关的内皮型一氧化氮合成酶(NOS3)的E298D以及C型尿钠肽受体(natriuretic peptide receptor C,NPRC)基因调控区域的-55位A的突变可能是导致中国人群冠心病发病的危险因素。

关键词：冠状动脉粥样硬化性心脏病单核苷酸多态性微阵列 C型尿钠肽受体

新基因hepaCAM对膀胱癌细胞体外生物学影响

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重庆医科大学学报 2009年第8期34卷 1032-1035页

作者：王磊吴小候罗春丽蔡晓钟吴绮思重庆医科大学附属第一医院泌尿外科重庆医科大学医学检验系重庆医科大学临床医学2003级七年制临床二系重庆400016

目的:研究肝细胞粘附分子(Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)对人类膀胱癌T24细胞体外生物学影响。方法:脂质体法转染pEGFP-N2-hepaCAM质粒入T24细胞,激光共聚焦显微镜检测其蛋白定位;筛选稳定表达细胞株;Western blot检测蛋... 详细信息

目的:研究肝细胞粘附分子(Hepatocyte cell adhesion molecule,hepaCAM)对人类膀胱癌T24细胞体外生物学影响。方法:脂质体法转染pEGFP-N2-hepaCAM质粒入T24细胞,激光共聚焦显微镜检测其蛋白定位;筛选稳定表达细胞株;Western blot检测蛋白表达。细胞粘附、基质胶侵袭实验及MTT实验研究该基因对细胞粘附力、活动力及增殖力的影响。结果:hepaCAM在单个细胞中分布在细胞核周边区域;相互连接细胞中主要分布于细胞间相互接触区域。获得稳定表达hepaCAM基因的T24细胞。体外粘附实验、基质胶侵袭实验证明实验组细胞粘附力及活动力明显高于空白组及阴性对照组。MTT法检测转染hepaCAM基因细胞增殖力明显低于空白组及阴性对照组。结论:hepaCAM基因可显著抑制人类膀胱癌T24细胞恶性行为,可能是通过增强细胞-基质间粘附及抑制细胞增殖力从而影响肿瘤细胞的浸润和转移。

关键词：膀胱移行细胞癌 hepaCAM基因细胞粘附

HepaCAM基因对人膀胱癌细胞增殖的抑制作用研究

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重庆医科大学学报 2009年第9期34卷 1157-1161页

作者：杨超吴小候罗春丽蔡晓钟吴绮思重庆医科大学附属第一医院泌尿外科重庆400016 重庆医科大学检验系重庆400016 重庆医科大学2004级七年制重庆400016

目的:研究hepaCAM基因对人膀胱癌T24细胞增殖的影响。方法:运用脂质体转染方法,将pEGFP-N2-hepaCAM质粒转入T24细胞株,经G418筛选获得稳定表达的细胞株;RT-PCR及Westernblot方法检测目的基因和蛋白表达;MTT法及克隆形成实验研究hepaCAM... 详细信息

目的:研究hepaCAM基因对人膀胱癌T24细胞增殖的影响。方法:运用脂质体转染方法,将pEGFP-N2-hepaCAM质粒转入T24细胞株,经G418筛选获得稳定表达的细胞株;RT-PCR及Westernblot方法检测目的基因和蛋白表达;MTT法及克隆形成实验研究hepaCAM基因对T24细胞体外生长的作用;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR技术测定周期调控蛋白CyclinD1的mRNA表达变化。结果:RT-PCR和Westernblot方法分别检测到hepaCAM的基因表达和蛋白表达,MTT检测转染hepaCAM基因的细胞生长速度较对照组和空载体组明显减慢(P<0.01),克隆形成率明显小于对照组和空载体组(P<0.01)。细胞周期中G0/G1期比例明显增高(P<0.05),而S期比例减少;CyclinD1 mRNA表达明显下调(P<0.05)。结论:HepaCAM基因通过阻滞细胞于G0/G1期,减少CyclinD1 mRNA表达,抑制T24细胞的增殖。

关键词：膀胱癌 hepaCAM基因 T24细胞转染抑癌基因

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实验教学中尿液标本有形成分的保存

实用医技杂志 2003年第12期10卷 1349-1350页

作者：蔡晓钟重庆医科大学重庆400016

在医学实验教学中 ,形态学标本来源很特殊 ,它不能人工制造 ,病理性标本只能从病人处取得 ,然而所需病人不是经常有 ,因此 ,研究实验教学标本的收集与保存的方法 ,十分必要。本文即是对实验诊断学实验教学中 ,尿液标本中有形成分的保存... 详细信息

在医学实验教学中 ,形态学标本来源很特殊 ,它不能人工制造 ,病理性标本只能从病人处取得 ,然而所需病人不是经常有 ,因此 ,研究实验教学标本的收集与保存的方法 ,十分必要。本文即是对实验诊断学实验教学中 ,尿液标本中有形成分的保存方法。

关键词：实验教学尿液标本标本保存实验诊断学