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植物芪合酶及其基因转化研究进展

植物芪合酶及其基因转化研究进展

长臂光敏生物素标记葡萄扇叶病毒外壳蛋白基因cDNA探针的制备及其在检测上的应用

中国植物病理学会第七届代表大会暨学术研讨会

作者：胡小平蔡文启杨之为西北农林科技大学植保学院中国科学院微生物研究所植物生物技术实验室西北农林科技大学植保学院

＜正＞芪合酶是芪类物质合成的关键酶,它催化产生含二苯乙烯母核的芪类物质基本分子,再经修饰、聚合等作用形成不同的芪类物质。芪类物质的合成可被虫害、真菌侵染、臭氧刺激、紫外线照射、创伤等诱导。Schoppner等（1984）建立了一种...

＜正＞芪合酶是芪类物质合成的关键酶,它催化产生含二苯乙烯母核的芪类物质基本分子,再经修饰、聚合等作用形成不同的芪类物质。芪类物质的合成可被虫害、真菌侵染、臭氧刺激、紫外线照射、创伤等诱导。Schoppner等（1984）建立了一种花生细胞悬浮系,诱导后从中提取总蛋白,经硫酸铵多次分级沉淀、DEAE-纤维素柱层析、羟基磷灰石层析等方法首次纯化芪合酶蛋白。进一步研究表明,在花生植株体内具有催化活性的芪合酶是以90 kD的二聚体存在,等电点为4.8。经SDS变性处理后,得到45kD的亚单位。

关键词：

来源： cnki会议评论

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生物工程学报 1999年第1期15卷 109-112页

作者：曹肖真张玉满蔡文启管汉成莽克强中国科学院微生物研究所中国农业大学植物病理学系北京林业大学林果花卉良种繁育研究中心

由葡萄扇叶病毒（Ｇｒａｐｅｖｉｎｅｆａｎｌｅａｆｖｉｒｕｓ，ＧＦＬＶ）导致的葡萄扇叶病在世界各地葡萄园内均有发生，是最为普遍和严重的病毒病害之一，感病葡萄可减产２０％～８０％。近年来，许多国家开展了葡萄脱毒苗木的培育... 详细信息

由葡萄扇叶病毒（Ｇｒａｐｅｖｉｎｅｆａｎｌｅａｆｖｉｒｕｓ，ＧＦＬＶ）导致的葡萄扇叶病在世界各地葡萄园内均有发生，是最为普遍和严重的病毒病害之一，感病葡萄可减产２０％～８０％。近年来，许多国家开展了葡萄脱毒苗木的培育和推广工作，同时进行了葡萄扇叶病毒...

关键词：长臂光敏生物素 cDNA探针 GFLV 葡萄病毒外壳

感染土传小麦花叶病毒的小麦花叶病的电子显微镜研究

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植物病理学报 1984年第2期 87-89+129-130页

作者：徐绍华蔡文启彭学贤莽克强中国科学院微生物研究所中国科学院微生物研究所北京

经对山东省崂山地区获得的自然感病的小麦病叶进行了电镜的观察和研究。指出在早春时节小麦返青以后很快开始显示症状,沿叶脉出现短的褪绿色条纹,植株生长受阻,矮缩,黄化以至不能抽穗。该病毒粒子为细长的杆状,长度120～270nm,直径为18... 详细信息

经对山东省崂山地区获得的自然感病的小麦病叶进行了电镜的观察和研究。指出在早春时节小麦返青以后很快开始显示症状,沿叶脉出现短的褪绿色条纹,植株生长受阻,矮缩,黄化以至不能抽穗。该病毒粒子为细长的杆状,长度120～270nm,直径为18～20nm。值得注意的是在狭窄的胞质区可经常见到聚集的病毒颗粒,其中大部分病毒附着在膜结构上。当横切时病毒颗粒呈电子透明的空心,围绕这个空心周围是一个着色很深的直径约为10nm的核酸环,围绕这个核酸环周围是一个密度不大的蛋白外壳。病毒颗粒的聚集大多与很多弯曲的管状物的形成聚集相伴随着。也看到了完全由病毒颗粒所组成的晶体状聚集物。根据以上所述,该病原鉴定为土传小麦花叶病毒。

关键词：管状物病毒颗粒土传小麦花叶病毒电镜电子显微镜小麦麦类作物花叶病

新疆大麦条纹花叶病毒的研究 Ⅱ.病毒核酸cDAN的合成及克隆

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病毒学报 1985年第3期4卷 262-267页

作者：吴世宣孙祖同蔡文启赵淑珍莽克强中国科学院微生物研究所南京大学

本文采用改进的新技术从大麦条纹花叶病毒核酸合成互补脱氧核糖核酸,重组质粒及选择特异性克隆。由于技术的改进,简化了操作程序,提高了工作效率。我们以大麦条纹花叶病毒三个组分核酸混合物为模板,寡(dT)8为引物,合成cDNA第一条链,用Gu... 详细信息

本文采用改进的新技术从大麦条纹花叶病毒核酸合成互补脱氧核糖核酸,重组质粒及选择特异性克隆。由于技术的改进,简化了操作程序,提高了工作效率。我们以大麦条纹花叶病毒三个组分核酸混合物为模板,寡(dT)8为引物,合成cDNA第一条链,用Gubler和Hoffman缺口翻译法合成第二条链,采用加HindⅢ人工接头的方法将cDNA插入pUC 9质粒载体上,于大肠杆菌JM-103中进行克隆,并以克隆颜色变化表示有无β-半乳糖苷酶活性的直观法,选择含有外源DNA的克隆。再以克隆原位分子杂交法检查克隆对病毒RNA各组分的特异性。仅对RNA_1或RNA_2有特异性的克隆,分别称为pBV_1和pBV_2,另有相当数量的克隆既与RNA_2也与RNA_3杂交,所以称为pBV2+3。用HindⅢ内切酶对一部分RNA_3杂交阳性的PBV2+3进行分析表明,插入的外源基因长度在500～1,000碱基对之间。文中讨论了RNA_2与RNA_3存在同源的可能性。

关键词：大麦条纹花叶病毒互补DNA 重组DNA 分子克隆

香蕉束顶病毒中国漳州分离物DNA4编码区的克隆及在大肠杆菌中的表达

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西北农业学报 2002年第2期11卷 38-42页

作者：樊小雪孙德俊陈毓荃蔡文启西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 中国科学院微生物研究所植物生物技术开放实验室北京100080

利用 PCR方法克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物 (Banana bunchy top virus Chinese Zhangzhou,BBTV-ZZ) DNA 4编码区 ,序列分析结果表明 ,该编码区由 3 5 1个核苷酸组成 ,推测其编码一个含 1 1 6个氨基酸的蛋白质 (M.W.1 4.5 ku)。将 B... 详细信息

利用 PCR方法克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物 (Banana bunchy top virus Chinese Zhangzhou,BBTV-ZZ) DNA 4编码区 ,序列分析结果表明 ,该编码区由 3 5 1个核苷酸组成 ,推测其编码一个含 1 1 6个氨基酸的蛋白质 (M.W.1 4.5 ku)。将 BBTV DNA 4编码区克隆到原核表达载体 p TYB2上 ,构建了该基因的融合表达载体 p TYB-Β4。SDS-PAGE电泳分析表明 ,69ku的融合蛋白在大肠杆菌 ER2 5 66(DE3 )中正确表达。以含表达产物的凝胶为抗原 ,免疫家兔 ,制备了 BBTV DNA4编码蛋白的特异抗血清 ,Western blot显示 ,在Southern blot分析为阳性的转 BBTV DNA4编码区烟草中 ,1 4.5 ku的 BBTV DNA4编码区蛋白得到表达。这为进一步研究 BBTV DNA 4编码区蛋白在整个植株体内的功能奠定了基础。

关键词：中国漳州分离物 DNA4编码区克隆香蕉束顶病原核表达香蕉束顶病

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小白菜再生培养基中适宜激素浓度的筛选

西北农业学报 2002年第4期11卷 36-38页

作者：胡小平石仁才蔡文启杨之为西北农林科技大学植保学院陕西杨凌712100 中科院微生物研究所北京100080

以子叶盘和下胚轴切段为外植体,研究了小白菜再生培养基中不同激素及其浓度水平对外植体产生愈伤、不定芽和根的影响。结果表明,小白菜子叶盘的再生频率较下胚轴的高。较适宜的愈伤组织诱导培养基为MSB+2,4-D 0.1mp/L+AgNO_35.0mg/L,诱... 详细信息

以子叶盘和下胚轴切段为外植体,研究了小白菜再生培养基中不同激素及其浓度水平对外植体产生愈伤、不定芽和根的影响。结果表明,小白菜子叶盘的再生频率较下胚轴的高。较适宜的愈伤组织诱导培养基为MSB+2,4-D 0.1mp/L+AgNO_35.0mg/L,诱导频率为28.3％,较适宜的不定芽诱导培养基为MSB+6-BA4.0mg/L+IAA0.1mg/L+AgNO_35.0mg/L,诱导频率为94.1％,较适宜的生根培养基为MSB+IAA 0.15mg/L,生根率为95.O％。

关键词：小白菜再生培养基激素浓度筛选子叶下胚轴植株再生

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芪合酶基因转化小白菜

农业生物技术学报 2006年第2期14卷 231-234页

作者：胡小平商文静蔡文启韩青梅康振生西北农林科技大学植物保护学院中国科学院微生物研究所西北农林科技大学陕西省农业分子生物学重点实验室

利用质粒pBin438构建了含有NPTⅡ基因和葡萄芪合酶(RS)基因的芪合酶组成型植物表达载体EHA105/pBinRS。用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将RS基因导入纯合系小白菜(***)品种中,经Kan抗性筛选、PCR及RT-PCR检测,RS基因已整... 详细信息

利用质粒pBin438构建了含有NPTⅡ基因和葡萄芪合酶(RS)基因的芪合酶组成型植物表达载体EHA105/pBinRS。用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导法将RS基因导入纯合系小白菜(***)品种中,经Kan抗性筛选、PCR及RT-PCR检测,RS基因已整合到小白菜基因组中并得到了表达,共获得了7株转基因植株。

关键词：小白菜转基因植株芪合酶基因

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三亚礁区普哥滨珊瑚对海水悬浮物的生理适应

热带生物学报 2022年第3期13卷 203-211页

作者：蔡文启唐佳吴川良张开典周智海南大学海洋学院海口570228 三亚珊瑚礁生态研究所三亚572000

为了了解海水悬浮物质量浓度的升高对造礁石珊瑚的生存影响,于2020年5−9月期间,调查了三亚3个礁区(崖州湾、凤凰岛和西岛)的海水悬浮物质量浓度,测定了礁区中普哥滨珊瑚(Porites pukoensis)及其共生虫黄藻的生理指标,并筛选了敏感生物... 详细信息

为了了解海水悬浮物质量浓度的升高对造礁石珊瑚的生存影响,于2020年5−9月期间,调查了三亚3个礁区(崖州湾、凤凰岛和西岛)的海水悬浮物质量浓度,测定了礁区中普哥滨珊瑚(Porites pukoensis)及其共生虫黄藻的生理指标,并筛选了敏感生物标志物,用以评价悬浮物对普哥滨珊瑚的影响程度。结果表明,崖州湾礁区的海水悬浮物月均质量浓度为13.7~19.4 mg·L^(−1),其含量显著高于凤凰岛(1.9~8.8 mg·L^(−1))和西岛(0.7~5.3 mg·L^(−1))。相关性分析表明,海水悬浮物浓度与共生虫黄藻的密度(R=0.27,P凤凰岛>西岛的特征,与礁区悬浮物含量趋势相一致,提示IBR指数能够为珊瑚礁生态风险评估提供理论基础。

关键词：悬浮物普哥滨珊瑚共生虫黄藻环境适应

油乳剂对蚜虫传染非持久性植物病毒的抑制作用

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微生物学报 1976年第2期 142-147页

作者：张秀华赵淑珍蔡文启田波中国科学院微生物研究所

在温室实验中,带毒无翅桃蚜（Myzus persicae Sulz.）对芜菁花叶病毒（TpMV）和马铃薯Y-病毒（PYV）的传染可被油乳剂抑制,但不被2-硫尿嘧啶和8-杂氮鸟嘌呤抑制。除蓖麻油外,10种植物油都能阻止蚜虫传染PYV,而12种矿物油中只有2种有显... 详细信息

在温室实验中,带毒无翅桃蚜（Myzus persicae Sulz.）对芜菁花叶病毒（TpMV）和马铃薯Y-病毒（PYV）的传染可被油乳剂抑制,但不被2-硫尿嘧啶和8-杂氮鸟嘌呤抑制。除蓖麻油外,10种植物油都能阻止蚜虫传染PYV,而12种矿物油中只有2种有显著的抑制作用。玉米油不引起TpMV、PYV和烟花叶病毒机械接种产生的局部斑点数目的降低。在田间实验中,喷洒油和杀虫剂的混合乳剂使TpMV、PYV和黄瓜花叶病毒的传播减少50%左右。

关键词：蚜虫植物病毒黄瓜花叶病毒黄瓜病毒1号油乳剂玉米油玉米胚油食用油抑制作用基因互作持久性