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胰岛局部肾素-血管紧张素系统在糖尿病及胰岛移植中的作用

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广东医学 2006年第11期27卷 1753-1755页

作者：鲁辛蔡德鸿南方医科大学珠江医院内分泌科广州510282

肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)产生的血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)除有收缩血管的功能外,还可刺激和抑制细胞分化,诱导凋亡,产生活性氧簇(reative oxygen species,ROS),调节激素释放,促炎症反应和促纤维化.... 详细信息

肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)产生的血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)除有收缩血管的功能外,还可刺激和抑制细胞分化,诱导凋亡,产生活性氧簇(reative oxygen species,ROS),调节激素释放,促炎症反应和促纤维化.近年来,人们研究发现机体多个组织器官如心脏、肾脏、肾上腺、脑及胰腺等独立存在局部的RAS.胰腺组织局部RAS不仅参与胰腺内、外分泌功能的调节,而且还与某些胰腺疾病如急性胰腺炎、糖尿病等有关.业已证实胰岛细胞亦存在局部RAS,并在抑制葡萄糖刺激下的胰岛素释放及损伤胰岛细胞结构和功能中起到了重要的作用.本文就胰岛RAS及其在2型糖尿病和胰岛移植后的可能作用作一综述.

关键词：血管紧张素系统局部肾素胰岛移植糖尿病局部RAS 血管紧张素Ⅱ 胰腺组织促炎症反应

妊娠期糖尿病妇女外周血miR-29、miR-375的表达及临床意义

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南京医科大学学报（自然科学版） 2014年第3期34卷 334-336页

作者：李伟蔡德鸿南方医科大学研究生院广东广州510505 南方医科大学珠江医院内分泌科广东广州510507

目的：探讨广东省汉族妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）患者外周血miR-29、miR-375的表达情况及临床意义。方法：选取2012年12月~2013年5月在武警广东省总队医院就诊的90例GDM患者和糖耐量正常的孕妇,分别作为GDM组... 详细信息

目的：探讨广东省汉族妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus,GDM）患者外周血miR-29、miR-375的表达情况及临床意义。方法：选取2012年12月~2013年5月在武警广东省总队医院就诊的90例GDM患者和糖耐量正常的孕妇,分别作为GDM组和对照组,检测血浆空腹胰岛素（fast insulin,FINS）及其外周血miR-29、miR-375的表达情况。结果：①GDM组及对照组的FINS分别为（15.67±5.75）mIU/L和（26.23±10.89）mIU/L（P〈0.01）;②GDM组外周血miR-29表达量（25.16±10.05）低于对照组（75.26±13.43）（P〈0.05）;③GDM组外周血miR-375的表达量（65.18±22.08）显著高于对照组（21.31±9.56）（P〈0.05）。结论：GDM患者中miR-29、miR-375的异常表达与GDM易感性有一定相关。

关键词：妊娠期糖尿病外周血 miR-29 miR-375

高糖对肾小管上皮细胞表达CTGF的影响及P38MAPK通路在其中的作用

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南方医科大学学报 2009年第1期29卷 50-53页

作者：汤珣章俊蔡德鸿曾莉南方医科大学珠江医院肾内科广东广州510280 南方医科大学珠江医院内分泌科广东广州510280 南方医科大学公共卫生与热带医学学院广东广州510515

目的探讨高糖对人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA及蛋白表达的影响,以及p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号途径在其中的作用。方法以高糖刺激体外培养的人肾小管上皮细胞株HKC,应用RT-PCR,免疫组化、间接免疫荧光、Western... 详细信息

目的探讨高糖对人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)mRNA及蛋白表达的影响,以及p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号途径在其中的作用。方法以高糖刺激体外培养的人肾小管上皮细胞株HKC,应用RT-PCR,免疫组化、间接免疫荧光、Western blotting等分析技术,检测高糖刺激24、48、72、96h,以及20d时HKC表达CTGFmRNA及蛋白的影响,并观察以SB203580特异性阻断p38MAPK信号传导途径后上述过程的变化。结果体外培养HKC的CTGFmRNA与蛋白含量极低,高糖刺激48h后HKC表达CTGFmRNA水平达峰值,以后逐渐下降,96h时接近正常水平,但长期(20d)高糖刺激的HKC,其表达CTGFmRNA水平稳定高于正常对照组2倍。而随高糖刺激时间的延长,HKC细胞表达CTGF蛋白水平进行性升高,长期(20d)持续高糖刺激可使CTGF蛋白表达水平达到正常组的5倍左右。SB203580能显著抑制高糖引起的CTGFmRNA及蛋白的高表达。结论持续高糖刺激可以引起体外培养的人肾小管上皮细胞表达CTGF显著升高,提示CTGF高表达是糖尿病肾病肾小管间质纤维化发生的重要环节,而p38MAPK信号途径可能参与了这一过程。

关键词：结缔组织生长因子人肾小管上皮细胞高糖 P38丝裂原激活蛋白激酶

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1,25(OH)_2D_3对骨代谢的影响

广东医学 2007年第1期28卷 152-154页

作者：孙平蔡德鸿黄震南方医科大学珠江医院内分泌科广州510282 南方医科大学外科学教研室广州510282

维生素D代谢物1，25-二羟维生素D3[1，25（OH）_2D_3]是体内生物活性最强的维生素D活性形式，通过对成骨细胞和破骨细胞的作用，参与骨形成和骨吸收的代谢调节。维生素D受体（VDR）是一种核受体超家族的成员，其主要介导维生素D对靶细... 详细信息

维生素D代谢物1，25-二羟维生素D3[1，25（OH）_2D_3]是体内生物活性最强的维生素D活性形式，通过对成骨细胞和破骨细胞的作用，参与骨形成和骨吸收的代谢调节。维生素D受体（VDR）是一种核受体超家族的成员，其主要介导维生素D对靶细胞的生物效用。VDR不仅分布于与骨、钙代谢有关的小肠、肾和骨等组织。还存在于脑、肝、皮肤、牙齿等器官；同时促进其对钙、磷的吸收。1，25（OH）_2D_3与受体结舍激活基因组时先由雏生素D结合蛋白（DBP）将其转运到各靶器官组织，与靶器官及组织中的VDR结合，再与视黄醛x受体（RXR）形成杂二聚体，后与雏生素D反应元件（VDRE）结合，对靶基因的转录和翻译进行调控，且只调节舍有VDRE的基因，进而实现其生物学功能。

关键词：骨代谢维生素D受体体内生物活性受体超家族器官组织 VDRE 代谢调节二羟维生素

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超抗原SEB体外诱导胸腺细胞凋亡的研究

中国免疫学杂志 2005年第2期21卷 121-123页

作者：丁丽蔡德鸿蒋定文第一军医大学附属珠江医院内分泌科广州510515 第一军医大学免疫学教研室广州510515

目的 :观察超抗原SEB能否在APC的辅助下体外诱导胸腺细胞凋亡 ,并研究其机制。方法 :SEB作用于与APC混合培养的胸腺细胞 ,用DNA凝胶电泳、DNA片段测定等判定胸腺细胞凋亡并作定量分析 ;用间接免疫荧光法标记并以流式细胞仪检测Fas、Fas... 详细信息

目的 :观察超抗原SEB能否在APC的辅助下体外诱导胸腺细胞凋亡 ,并研究其机制。方法 :SEB作用于与APC混合培养的胸腺细胞 ,用DNA凝胶电泳、DNA片段测定等判定胸腺细胞凋亡并作定量分析 ;用间接免疫荧光法标记并以流式细胞仪检测Fas、FasL的表达。结果 :SEB处理组胸腺细胞有凋亡表现且凋亡率明显高于对照组 ,Fas、FasL的表达明显高于对照组。结论 :SEB可以于体外在APC辅助下诱导胸腺细胞凋亡 ,Fas、FasL的高表达可能在凋亡中起重要作用。

关键词：超抗原胸腺细胞细胞凋亡

大鼠胰岛微血管内皮细胞分离、纯化与培养的改进

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中国病理生理杂志 2008年第7期24卷 1454-1456页

作者：孙嘉张桦蔡德鸿南方医科大学附属珠江医院内分泌科广东广州510282

目的:建立稳定可靠的大鼠胰岛微血管内皮细胞分离培养方法。方法:分离纯化大鼠胰岛后进行内皮细胞选择性培养,使用UEA-1包被的免疫磁珠对胰岛微血管内皮细胞进行纯化。免疫荧光法检测经典的内皮细胞标志物第Ⅷ因子相关抗原(vWF)和CD34... 详细信息

目的:建立稳定可靠的大鼠胰岛微血管内皮细胞分离培养方法。方法:分离纯化大鼠胰岛后进行内皮细胞选择性培养,使用UEA-1包被的免疫磁珠对胰岛微血管内皮细胞进行纯化。免疫荧光法检测经典的内皮细胞标志物第Ⅷ因子相关抗原(vWF)和CD34的表达和吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(Dil-Ac-LDL)能力。结果:胰岛培养4-5d后,可见内皮细胞从贴壁的胰岛内爬出,通过UEA-1包被的免疫磁珠筛选出胰岛微血管内皮细胞接种后24h细胞开始贴壁。该细胞具有单层生长、接触抑制的特性。大鼠胰岛微血管内皮细胞表达vWF和CD34,可摄取Dil-Ac-LDL。结论:本研究方法是一种较为高效的分离、纯化和培养大鼠胰岛微血管内皮细胞的方法。

关键词：胰岛内皮细胞细胞培养

补肾壮骨中药对模拟失重雌性大鼠骨代谢的研究

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南方医科大学学报 2007年第2期27卷 212-214页

作者：孙平黄震蔡德鸿何雷南方医科大学珠江医院内分泌科广东广州510282 南方医科大学珠江医院外科学教研室广东广州510282

目的研究补肾壮骨中药(主要由淫羊藿、续断、补骨脂等组成)对模拟失重雌性大鼠骨丢失的影响。方法SPF级雌性SD大鼠36只,随机平均分为3组:A组为自由活动对照组,B组和C组为尾吊模拟失重组,C组大鼠给予补肾壮骨中药灌胃,其它2组灌胃等量生... 详细信息

目的研究补肾壮骨中药(主要由淫羊藿、续断、补骨脂等组成)对模拟失重雌性大鼠骨丢失的影响。方法SPF级雌性SD大鼠36只,随机平均分为3组:A组为自由活动对照组,B组和C组为尾吊模拟失重组,C组大鼠给予补肾壮骨中药灌胃,其它2组灌胃等量生理盐水,实验期28d。采用生化和放免法检测大鼠性激素和骨代谢指标,DEXA测定大鼠右侧股骨的骨密度。结果B组大鼠血清中骨钙素、碱性磷酸酶、性激素、骨密度水平显著低于A组大鼠相应的指标(P<0.01,P<0.05),但血清钙浓度显著高于A组(P<0.01);C组大鼠骨钙素、碱性磷酸酶、性激素、骨密度,水平均显著性高于B组大鼠(P<0.01,P<0.05);而血清钙浓度显著低于B组(P<0.01)。结论补肾壮骨中药能明显降低模拟失重雌性大鼠的骨丢失。

关键词：模拟失重中药生化指标骨密度性激素

钙非依赖型磷脂酶A_2对过氧化氢诱导胰岛微血管内皮细胞凋亡的影响

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中国糖尿病杂志 2009年第3期17卷 222-224页

作者：孙嘉张桦陈宏蔡德鸿南方医科大学附属珠江医院内分泌科广州510282

目的用过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠胰岛微血管内皮细胞(IMECs)凋亡,观察钙非依赖型磷脂酶A_2(iPLA_2)对其凋亡的影响。方法 siRNA技术抑制IMECs iPLA_2表达,DNA ladder法检测H_2O2诱导后的DNA片段,Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡率,... 详细信息

目的用过氧化氢(H_2O_2)诱导大鼠胰岛微血管内皮细胞(IMECs)凋亡,观察钙非依赖型磷脂酶A_2(iPLA_2)对其凋亡的影响。方法 siRNA技术抑制IMECs iPLA_2表达,DNA ladder法检测H_2O2诱导后的DNA片段,Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡率,DIOC_6(3)染色检测细胞线粒体膜电位。结果 (1)siRNA-iPLA_2可明显抑制IMECs内iPLA_2 mRNA的表达。(2)H_2O_2诱导后细胞DNA片段化程度随诱导时间的增加而增多,抑制iPLA_2表达后细胞的梯状条带明显增亮。(3)干扰组和未干扰组、干扰阴性对照组相比凋亡率明显升高(P均<0.01)。(4)与未干扰组比较,干扰组细胞线粒体膜电位明显下降(P<0.1)。结论抑制iPLA_2表达可促进H_2O_2诱导的IMECs凋亡。

关键词：胰岛内皮细胞,微血管磷脂酶A2,钙非依赖型过氧化氢

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叙利亚金黄地鼠胰岛的分离、纯化与功能鉴定

南方医科大学学报 2009年第9期29卷 1809-1811页

作者：孙侃孙嘉陈宏张桦蔡德鸿南方医科大学珠江医院内分泌科广东广州510282

目的构建成年叙利亚金黄地鼠胰岛的分离、纯化及功能鉴定的方法。方法胶原酶V灌注分离成年叙利亚金黄地鼠胰腺,不连续密度梯度法纯化胰岛。经DTZ染色后于倒置显微镜下测定胰岛细胞的数量和纯度。通过胰岛素释放试验检测胰岛细胞的功能... 详细信息

目的构建成年叙利亚金黄地鼠胰岛的分离、纯化及功能鉴定的方法。方法胶原酶V灌注分离成年叙利亚金黄地鼠胰腺,不连续密度梯度法纯化胰岛。经DTZ染色后于倒置显微镜下测定胰岛细胞的数量和纯度。通过胰岛素释放试验检测胰岛细胞的功能。结果纯化后每只地鼠胰腺可获得(359±35)胰岛细胞当量,胰岛纯度>90%,胰岛活率>90%。在低糖和高糖刺激下,胰岛细胞体外培养液中胰岛素含量的浓度分别为(3.29±0.32)mU/L和(11.12±0.57)mU/L。高糖刺激后胰岛素释放量为低糖的3.38倍。体外培养1周生长状况良好。结论成功获取了高纯度、高活率的金黄地鼠胰岛细胞。

关键词：叙利亚金黄地鼠胰岛纯化