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橄榄果实发育过程中莽草酸代谢相关基因克隆与表达分析

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橄榄果实发育过程中莽草酸代谢相关基因克隆与表达分析

作者：蔡净蓉福建农林大学

学位级别：硕士

橄榄[Canarium album(Lour.)Raeusch.]是福建省名优特色果树,果实富含多酚、黄酮等多种生理活性成分,是著名的药食两用果品。酚类物质是影响果实风味品质以及药理活性的重要指标,也是人们研究关注的热点。橄榄品种资源丰富,不同品种(系... 详细信息

橄榄[Canarium album(Lour.)Raeusch.]是福建省名优特色果树,果实富含多酚、黄酮等多种生理活性成分,是著名的药食两用果品。酚类物质是影响果实风味品质以及药理活性的重要指标,也是人们研究关注的热点。橄榄品种资源丰富,不同品种(系)间酚类物质代谢存在差异,莽草酸途径作为酚类物质代谢的必经之路,对酚类物质的合成具有重要作用,因此对不同品种(系)果实莽草酸代谢进行研究,可以进一步揭示橄榄果实酚类物质代谢机理,对橄榄果实风味形成的研究具有重要意义。本研究以‘檀香’、‘长营’、‘灵峰’的果实为试材,对成熟期果实总酚、总黄酮、木质素含量进行测定并结合成熟期果实广泛靶向代谢组数据进行分析,并测定生长发育期果实游离态与结合态酚类物质、奎尼酸及莽草酸含量变化;根据转录组数据筛选莽草酸代谢相关基因,克隆获得其完整的ORF序列并进行生物信息学分析,利用瞬时表达体系对部分基因进行亚细胞定位分析;测定果实发育过程中莽草酸代谢相关基因表达量以及关键酶SDH活性变化,分析酚类物质与莽草酸代谢相关基因的关系,筛选莽草酸代谢关键基因。从而探究不同品种(系)果实莽草酸代谢的差异,为橄榄果实莽草酸代谢以及不同品种(系)间酚类物质代谢差异形成的研究提供理论依据,对橄榄果实品质形成的研究具有重要意义。主要研究结果如下:1、3个品种(系)成熟期果实总酚、总黄酮以及木质素含量存在差异,‘檀香’总酚、总黄酮含量显著高于另外两个品种(系),‘灵峰’的总酚、总黄酮以及木质素含量均最低,而‘长营’的木质素含量很高,分别为‘檀香’的2.34倍,‘灵峰’的4.18倍。代谢组数据表明:黄酮类代谢物是3个品种(系)间最主要的差异代谢物,槲皮素类、山奈酚类、木犀草素类代谢物为黄酮类代谢物的主要类型,其中‘檀香’的大多数黄酮代谢物含量显著高于另外两个品种(系)。对3个品种(系)果实生长发育过程中酚类物质以及莽草酸、奎尼酸的含量进行测定,表明:橄榄果实中没食子酸、鞣花酸、槲皮素、山奈酚、木犀草素多以结合态的形式存在;不同品种(系)果实间(异)柯里拉京、结合态没食子酸、结合态槲皮素、结合态山奈酚、莽草酸含量变化呈现相同趋势;‘檀香’的(异)柯里拉京、鞣花酸、槲皮素类、山奈酚类等酚类物质含量相对较高,‘灵峰’的鞣花酸以及槲皮素类、山奈酚类等黄酮类物质含量相对较低。果实发育过程中奎尼酸含量较高,莽草酸含量较低,两者在品种(系)间差异比较小。3个品种(系)果实的酚类物质、木质素含量差异显著与其风味、质地表现相一致,是研究橄榄果实莽草酸代谢的优良材料。2、利用转录组数据筛选出DAHPS-1、DAHPS-2、DAHPS-3、DHQS、DHD/SDH-1、DHD/SDH-2、DHD/SDH-3、DHD/SDH-4、DHD/SDH-5、CS、CM-1、CM-2,克隆得到完整的ORF序列。生物信息学分析和DAHPSs、CMs的亚细胞定位结果表明:这12条基因的氨基酸残基个数介于771～1608之间,等电点范围为5.67～8.84,除DHD/SDH-1为疏水蛋白外,其余均为亲水蛋白。DAHPS-1、DAHPS-2、DAHPS-3定位于叶绿体;DAHPS-1的氨基酸序列与拟南芥的AtDAHPS2相似度较高,可能受到酪氨酸与色氨酸的调控,DAHPS-2、DAHPS-3分别与葡萄的VvDAHPS-1、VvDAHPS-2相似度较高,DAHPSs可能在莽草酸代谢中发挥不同的生理功能。DHD/SDHs可分为3种不同的类型,DHD/SDH-1与DHD/SDH-5属于QDH,DHD/SDH-5的氨基酸序列含有与辅酶Ⅰ(NAD)结合的基序,DHD/SDH-2与DHD/SDH-3属于与没食子酸合成有关的SDH,DHD/SDH-4则属于“典型”的DHD/SDH。CM-1定位于叶绿体,含有变构调节位点,其序列与拟南芥的AtCM1、AtCM3和矮牵牛的PhCM1相似度较高,可能受到芳香族氨基酸的变构调节;CM-2定位于细胞质,其序列与AtCM2和PhCM2相似度较高,通过位于胞质的苯丙酮酸途径参与苯丙氨酸的合成。3、通过测定3个品种(系)果实发育过程中12条莽草酸代谢相关基因的表达量与SDH活性,结果表明:DAHPS-1、DHQS、CS、CM-1都随着果实的成熟上调表达,DHD/SDH-5与CM-2随着果实成熟表达下调,DHD/SDH-2与DHD/SDH-3仅在花后50 d表达量较高;其他基因在果实发育过程中呈波动变化,品种(系)间差异较小。在果实发育过程中DAHPSs表达量变化趋势以及不同品种(系)中的表达水平存在差异,可能与其在莽草酸途径中调控不同合成方向的碳通量有关。DAHPS-1可能是影响橄榄果实酚类物质合成的关键基因,3个品种(系)的DAHPS-1表达水平的差异与其酚类物质含量上差异相符,‘灵峰’的DAHPS-1几乎不表达,与另外两个品种(系)间存在遗传性的差异。‘檀香’的DAHPSs中DAHPS-

关键词：橄榄发育与成熟酚类物质莽草酸途径基因表达

柑橘精油及壳聚糖复合处理对橄榄果实采后生理和耐贮性的影响

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热带亚热带植物学报 2023年第1期31卷 53-61页

作者：赵俊跃蔡净蓉徐成妍佘文琴福建农林大学园艺学院园艺产品贮运保鲜研究所福州350002

为探究柑橘精油(0.25%、0.75%、1.5%)和壳聚糖(0.25%、0.75%、1.5%)复合处理对橄榄(Canarium album)果实采后生理和耐贮性的影响,以鲜食橄榄品种(系)‘檀香’、‘梅埔2号’为材料,对采后贮藏期间的腐烂率、褐变指数、相对电导率、呼吸... 详细信息

为探究柑橘精油(0.25%、0.75%、1.5%)和壳聚糖(0.25%、0.75%、1.5%)复合处理对橄榄(Canarium album)果实采后生理和耐贮性的影响,以鲜食橄榄品种(系)‘檀香’、‘梅埔2号’为材料,对采后贮藏期间的腐烂率、褐变指数、相对电导率、呼吸强度、丙二醛含量、内源抗氧化物质谷胱甘肽含量、过氧化物酶(POD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性进行测定,筛选橄榄果实复合保鲜剂的最佳浓度组合。结果表明,与对照相比,所有柑橘精油和壳聚糖复合处理均可有效降低橄榄果实在贮藏期间腐烂率、褐变指数和丙二醛的积累,抑制呼吸作用,保持较高的内源抗氧化物质谷胱甘肽含量和POD、APX活性。因此柑橘精油及壳聚糖处理能够有效延长橄榄果实的保鲜时间,提高耐贮性,其中以1.5%柑橘精油和1.5%壳聚糖组合的保鲜效果最佳。

关键词：橄榄柑橘精油壳聚糖采后生理耐贮性

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振动对三角梅苞片脱落和乙烯合成的影响

热带亚热带植物学报 2023年

作者：马文吴榕榕孙宇晨蔡净蓉郭志雄佘文琴福建农林大学园艺学院园艺产品贮藏保鲜研究所

为探究振动对盆栽三角梅苞片脱落和乙烯生成的影响，对盆栽‘马尼拉小姐’三角梅(Bougainvillea×buttiana ‘Miss Manila’)在振动、密闭环境和振动+密闭环境下苞片的脱落率及处理后4～24 h的乙烯合成相关指标进行测定。结果表明，振动... 详细信息

为探究振动对盆栽三角梅苞片脱落和乙烯生成的影响，对盆栽‘马尼拉小姐’三角梅(Bougainvillea×buttiana ‘Miss Manila’)在振动、密闭环境和振动+密闭环境下苞片的脱落率及处理后4～24 h的乙烯合成相关指标进行测定。结果表明，振动+密闭环境和振动处理后7 d三角梅苞片脱落率显著高于对照(无处理)，苞径长0.5～1.4 cm的苞片(S1)和苞径长1.5～2.4 cm的苞片(S2)的乙烯释放量、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)含量、ACC合成酶(ACS)和ACC氧化酶(ACO)活性均显著高于对照，随着处理后时间的延长，总体呈先上升后下降的变化趋势。苞片S1和S2的BsSAMS、BsACS和BsACO基因相对表达量显著上升，与ACS活性和ACO活性的变化一致，总体呈先上升后下降的变化趋势。因此，盆栽三角梅在受到振动后苞片的脱落率、乙烯生成、乙烯生物合成关键酶活性、乙烯合成酶基因BsSAMS、BsACS、BsACO的相对表达量均显著上升，且密闭环境对振动的效应具有促进作用。

关键词：三角梅振动处理乙烯合成基因表达

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六月早柚果实常温贮藏期间糖酸含量变化

福建农业学报 2022年第6期37卷 765-773页

作者：徐成妍王乃玉蔡净蓉赵俊跃佘文琴福建农林大学园艺学院福建福州350002 福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所福建福州350002

【目的】探究六月早柚果实常温贮藏过程中糖酸组分含量变化与其风味品质的关系,为优化柚类品种结构提供理论和实践依据。【方法】以六月早柚为试验材料,琯溪蜜柚为对照,应用超高效液相色谱法测定并分析六月早柚果实贮藏期有机酸组分(柠... 详细信息

【目的】探究六月早柚果实常温贮藏过程中糖酸组分含量变化与其风味品质的关系,为优化柚类品种结构提供理论和实践依据。【方法】以六月早柚为试验材料,琯溪蜜柚为对照,应用超高效液相色谱法测定并分析六月早柚果实贮藏期有机酸组分(柠檬酸、苹果酸、奎尼酸、顺乌头酸、酒石酸、琥珀酸、α-酮戊二酸)和可溶性糖组分(葡萄糖、果糖、蔗糖)含量的变化。【结果】常温贮藏期间六月早柚汁胞总酸、柠檬酸和苹果酸含量增加,于贮藏35 d达到最大值,分别是同时期琯溪蜜柚的81.18%、84.17%和1.90倍;六月早柚葡萄糖和果糖含量先降低后增加,均在贮藏10 d出现最小值,分别为同时期琯溪蜜柚的1.30倍和1.47倍;蔗糖含量先增加后降低,在贮藏10 d出现最大值,仅为同时期琯溪蜜柚的84.45%;六月早柚糖酸比逐渐降低,贮藏35 d最小,是同时期琯溪蜜柚的1.27倍,且与苹果酸含量呈显著负相关(P<0.01)。【结论】常温贮藏期间六月早柚汁胞柠檬酸和蔗糖的含量较低,糖酸比及苹果酸、果糖和葡萄糖的含量较高,这可能是导致贮藏期六月早柚果实风味变化优于琯溪蜜柚的原因。

关键词：六月早柚常温贮藏可溶性糖有机酸

具身认知视角下小学数学“图形与几何”教学设计研究

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具身认知视角下小学数学“图形与几何”教学设计研究

作者：蔡俐蓉成都大学

学位级别：硕士

《义务教育数学课程标准(2022版)》提出以核心素养为导向的数学课程。“图形与几何”作为小学数学四大板块之一,所培养的量感、空间观念、几何直观和推理意识是核心素养中重要组成部分。同时,新课程改革和“双减”政策也对小学数学课堂... 详细信息

《义务教育数学课程标准(2022版)》提出以核心素养为导向的数学课程。“图形与几何”作为小学数学四大板块之一,所培养的量感、空间观念、几何直观和推理意识是核心素养中重要组成部分。同时,新课程改革和“双减”政策也对小学数学课堂效果提出了更高的要求,“减负增效”成为当今课堂的热门话题。然而,纵观如今的教学课堂,由于多种原因,教学效果差强人意。具身认知作为第二代认知科学,颠覆了传统的认知与心灵独立开来的认知观念,认为身体、心智与环境是动态交互的关系。在教学上强调学生多感官参与活动,获得良好的体验,并提出身体与环境的交互、学习活动经验对学习的重要影响。基于此,本研究尝试将具身认知理论与教学设计相结合,厘清具身认知理论指导教学设计的适切性和价值,探索“图形与几何”的具身教学设计的框架,设计教学案例进行实施,验证其有效性。首先,借鉴相关文献,厘清具身认知理论的概念内涵、源起、发展历程、进路模式以及发展现状,明确具身认知理论指导教学设计的内涵,探讨具身认知理论指导“图形与几何”教学设计的适切性,提出具身认知理论指导“图形与几何”教学设计的价值意义及设计特征。其次,设计“图形与几何”的具身教学设计现状调查问卷和访谈提纲,通过对77名一线教师问卷调查和6名教师访谈,探寻从具身认知视角出发,教师教学设计存在的主要问题是:理论知识浅显化;肢体动作随意化;课堂活动形式化;课后反思表面化。主要原因是:教师学习意识不够强烈;当前教学任务繁重;担心影响教学进度;课堂难以把控;增加了备课及课后评价的难度。再次,根据调查结果,结合具身认知及相关理论,从分析阶段、设计阶段和实施反思阶段入手,探寻出具身认知视角下“图形与几何”教学设计框架:学情分析,明确具身主体状态;拟订“四维”具身教学目标;创设“涉身性”具身教学环境;设计“交互式”具身教学过程;创设“多元化”具身教学评价;具身教学设计实施与反思。最后,以北师版小学数学五年级上册《轴对称和平移》第一,三课时为案例,根据“图形与几何”的具身教学设计框架,对学习者学习起点、特征、学习需求和教学内容前期分析基础上,设计了完整的教学设计案例,并选取实习学校两个班级作为对照班和实验班实施。根据实施过程性评价和结果性评价得出结论:验证了具身认知视角下“图形与几何”的教学设计框架的可实施性和有效性;具身教学设计增强了学生课堂体验感;提高了学生学习效果;促进了学生核心素养的养成。

关键词：具身认知小学数学图形与几何教学设计

福建太子参黑斑病病原菌鉴定及生物学特性研究

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中国中药杂志 2023年第10期48卷 2732-2738页

作者：张武君刘保财陈菁瑛黄颖桢赵云青蔡净蓉福建省农业科学院农业生物资源研究所福建福州350003 福建省农业科学院药用植物研究中心福建福州350003

福建省柘荣县太子参黑斑病常于每年4—6月份的多雨季节暴发,为太子参的主要叶部病害之一,对该药材的产量和质量造成严重影响。为明确太子参黑斑病的病原菌种类及其生物学特性,该研究依据柯赫法则对病原菌分离纯化,采用形态学特征观察及... 详细信息

福建省柘荣县太子参黑斑病常于每年4—6月份的多雨季节暴发,为太子参的主要叶部病害之一,对该药材的产量和质量造成严重影响。为明确太子参黑斑病的病原菌种类及其生物学特性,该研究依据柯赫法则对病原菌分离纯化,采用形态学特征观察及多基因序列分析进行鉴定,鉴定为链格孢属致病真菌并进行致病性测定及生物学特性测定。鉴定结果表明:引起该黑斑病的病原菌为梨黑斑链格孢Alternaria gaisen。其菌落形态、孢子特征以及产孢表型特征与梨黑斑链格孢A.gaisen类似,且由ITS、tef1、gapdh、endoPG、Alta1、OPA10-2和KOG1077这7个组成的串联序列在20个链格孢属真菌的系统发育树上与梨黑斑链格孢A.gaisen聚为一支,最大似然支持率为100%,贝叶斯后验概率1.00。生物学特性表明:梨黑斑链格孢A.gaisen的菌丝生长的最适温度为25℃,最适pH为5~8,最适培养方式为24 h暗培养,菌丝和孢子致死温度均为50℃处理10 min。由A.gaisen引起的太子参黑斑病为国内外首次报道,该研究结果可为太子参叶斑类病害的诊断及防控提供理论依据。

关键词：太子参黑斑病梨黑斑链格孢多基因序列分析生物学特性

成熟期不同橄榄品种(系)果实代谢组及其差异

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热带作物学报 2022年第11期43卷 2304-2315页

作者：蔡净蓉王杰赵俊跃潘腾飞郭志雄佘文琴福建农林大学园艺学院福建福州350002 福建农林大学园艺产品贮藏保鲜研究所福建福州350002

橄榄果实风味独特,富含多酚、黄酮、氨基酸等多种生理活性物质,这些物质与其风味品质关系密切。目前对橄榄果实代谢物进行系统研究的报道较少,为解析橄榄果实的主要代谢成分并对3个品质类型存在差异的品种(系)(‘长营’‘檀香’‘灵峰’... 详细信息

橄榄果实风味独特,富含多酚、黄酮、氨基酸等多种生理活性物质,这些物质与其风味品质关系密切。目前对橄榄果实代谢物进行系统研究的报道较少,为解析橄榄果实的主要代谢成分并对3个品质类型存在差异的品种(系)(‘长营’‘檀香’‘灵峰’)进行比较,以期为橄榄果实品质形成、优良品种选育等研究提供理论基础。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)的广泛靶向代谢组技术,测定3个橄榄品种(系)成熟期果实代谢物,并结合多元统计分析方法及3个品种(系)果实总酚、总黄酮、木质素含量数据进行分析,结果表明:‘檀香’总酚、总黄酮含量最高;‘灵峰’总酚、总黄酮及木质素含量最低;‘长营’总木质素含量则很高,与其化渣差的特点相吻合。利用广泛靶向代谢组学技术共检测出黄酮、酚酸类、氨基酸及其衍生物、有机酸、脂质、核苷酸及其衍生物、鞣质、糖及醇类、木质素和香豆素等13类524种代谢物,其中黄酮类代谢物数量最多,主要为槲皮素类、木犀草素类和山奈酚类。各品种(系)代谢物差异显著,主要的差异代谢物为黄酮类、酚酸类和氨基酸及其衍生物。‘长营’相比‘檀香’存在161种差异代谢物(上调代谢物116种、下调代谢物45种),‘檀香’相比‘灵峰’存在164种差异代谢物(上调代谢物51种、下调代谢物113种);‘长营’相比‘灵峰’存在146种差异代谢物(上调代谢物51种、下调代谢物95种)。差异代谢物KEGG通路富集分析发现,3个品种(系)中,‘檀香’的黄酮代谢及氨基酸代谢最为活跃,积累更多的槲皮素类、木犀草素类、山奈酚类、丙氨酸、丝氨酸、组氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸等黄酮及氨基酸类物质;‘灵峰’较‘长营’的黄酮代谢相对较弱,黄酮类物质积累相对较少,这可能是造成‘檀香’橄榄风味更为浓厚,而‘灵峰’橄榄风味较为清甜的原因之一。

关键词：橄榄成熟期代谢组学差异代谢物黄酮

数字化转型如何促进资本跨地域流动？——基于上市公司新增异地子公司的证据

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金融论坛 2024年第6期 47-58页

作者：王营崔楷净山东财经大学金融学院

本文在建设全国统一大市场、构建新发展格局的背景下，实证检验企业数字化转型对资本跨地域流动的影响及机制。研究发现，企业提高数字化水平可以显著促进资本跨地域流动，具体表现为新增异地子公司数量的提高，且能够在较长的时间序列... 详细信息

本文在建设全国统一大市场、构建新发展格局的背景下，实证检验企业数字化转型对资本跨地域流动的影响及机制。研究发现，企业提高数字化水平可以显著促进资本跨地域流动，具体表现为新增异地子公司数量的提高，且能够在较长的时间序列内形成具有叠加特征的促进作用，并呈现出结构异质性的特点。数字化水平提升对资本跨地域流动的促进作用主要通过提高全要素生产率和优化人力资本结构的渠道实现；以财政补贴为表现的政企关系负向影响企业数字化水平对资本跨地域流动的促进作用。

关键词：数字化转型资本跨地域流动异地子公司全要素生产率政企关系

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曼谷地区干旱灾害风险分布及变化趋势分析

热带地理 2024年第4期44卷 685-699页

作者：江净泓陈报章南京信息工程大学遥感与测绘工程学院南京210044 中国科学院地理科学与资源研究所资源与环境信息系统国家重点实验室北京100101 中国科学院大学资源与环境学院北京100049 江苏省地理信息资源开发与利用协同创新中心南京210023

基于自然灾害风险评估理论,依据致灾因子危险性、承灾体的脆弱性,综合评估曼谷节点地区的干旱灾害风险。进而分析2000—2020年曼谷干旱灾害危险性、脆弱性和风险的空间分布特征和变化趋势。结果表明:1)曼谷干旱危险性在地区间存在差异,... 详细信息

基于自然灾害风险评估理论,依据致灾因子危险性、承灾体的脆弱性,综合评估曼谷节点地区的干旱灾害风险。进而分析2000—2020年曼谷干旱灾害危险性、脆弱性和风险的空间分布特征和变化趋势。结果表明:1)曼谷干旱危险性在地区间存在差异,符合“北高南低”的规律。高脆弱性地区集中在曼谷都市区中部、佛统府西北部和沙没巴干府西部,与自然条件、人口和经济分布以及城市活动有关。曼谷干旱风险较高,中等及以上干旱灾害风险土地占总面积的41.64%,佛统府西北部和巴吞他尼府中部具有最高风险,同时具有较高的脆弱性和危险性。2)曼谷的风险性、脆弱性和危险性均呈线性上升趋势。巴吞他尼府和佛统府的危险性,佛统府西北部和曼谷中部城乡居民用地的脆弱性,以及佛统府西北部和、巴吞他尼府中部和曼谷都市区中部的干旱风险程度上升较快。3)M-K检验结果显示,曼谷危险性和风险均呈现“东升西降”的空间分布特征,但变化趋势均不显著。曼谷的脆弱性在大部分地区呈极显著上升趋势,沙没沙空府的脆弱性上升趋势最为显著,达到71.23%。4)曼谷的干旱灾害风险程度由危险性和脆弱性共同决定,一元线性线性回归分析结果与M-K检验分析结果在空间分布上存在明显差异,但都表明需采取措施降低脆弱性以降低城市干旱灾害风险。利用精细尺度的空间数据进行分析可以更准确反映该地区的资源管理能力,提高风险评估的合理性,为节点城市的灾害风险管理和风险分布研究提供有价值的参考。

关键词：干旱灾害自然灾害风险评估理论干旱风险空间分布变化趋势曼谷