检索结果-南通市图书馆

生物化学与生物物理进展 1990年第5期17卷 350-355页

作者：蔡仕英马贤凯军事医学科学院基础医学研究所北京100850

本文先简述了IL-1的来源及生物功能,接着对不同生物的IL-1α、IL-1β前体蛋白进行了同源性比较和分析,然后就人类IL-1β分子前结构与功能的关系及空间结构进行了探讨。

关键词：白细胞介素生物活性结构功能

人白细胞介素-1β基因片段的DNA序列分析

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军事医学科学院院刊 1990年第2期14卷 145-148页

作者：蔡仕英马贤凯军事医学科学院基础医学研究所

本文先对 pIL-1β质粒进行了系统的酶切鉴定,肯定该质粒的 PstI 位点插入有一大小约 460bp 的外源基因片段,然后利用 M13序列分析体系通过对该外源基因片段进行序列分析,证实了该片段系人白细胞介素-1β基因片段。弄清了该片段两端的 DN... 详细信息

本文先对 pIL-1β质粒进行了系统的酶切鉴定,肯定该质粒的 PstI 位点插入有一大小约 460bp 的外源基因片段,然后利用 M13序列分析体系通过对该外源基因片段进行序列分析,证实了该片段系人白细胞介素-1β基因片段。弄清了该片段两端的 DNA结构情况,了解到作为人的成熟的 IL-1β,该基因片段是不完整的,在 N-末端缺少十三个氨基酸的碱基密码。这对于研究 IL-1β基因重组、探针制备以及高效表达都具有重要的意义。

关键词：白细胞介素-1 DNA序列基因

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电泳的原理、应用及进展(下)

色谱 1992年第5期10卷 265-268页

作者：蔡仕英姚志建军事医学科学院基础医学研究所北京100850

三、核酸电泳核酸(包括DNA和RNA)是一类带负电荷的生物大分子,在电场作用下可由负极向正极移动,因此可用电泳的方法进行分离、鉴定和纯化。核酸电泳根据所用凝胶介质的不同可以分两类,即琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。琼脂糖电... 详细信息

三、核酸电泳核酸(包括DNA和RNA)是一类带负电荷的生物大分子,在电场作用下可由负极向正极移动,因此可用电泳的方法进行分离、鉴定和纯化。核酸电泳根据所用凝胶介质的不同可以分两类,即琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。琼脂糖电泳几乎都在水平板上进行,操作简单,快速有效;聚丙烯酰胺电泳多在垂直板中进行,主要用于某些特殊需要,如DNA序列分析电泳、寡核苷酸的分离鉴定。根据外加电场的不同,核酸电泳又分为恒定电场的常规电泳和脉冲场电泳。

关键词：核酸电泳

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电泳的原理、应用及进展(上)

色谱 1992年第4期10卷 207-210页

作者：蔡仕英姚志建军事医学科学院基础医学研究所北京100850

一、概述电泳（Electrophoresis）是一种带电粒子在电场中泳动的现象。早在1808年就已发现这一现象,但直到1937年瑞典的Tiselius建立了“自由电泳法”,成功地将血清蛋白分成5个主要成分,即清蛋白、α1-、α2-、β-和γ球蛋白,才使电泳... 详细信息

一、概述电泳（Electrophoresis）是一种带电粒子在电场中泳动的现象。早在1808年就已发现这一现象,但直到1937年瑞典的Tiselius建立了“自由电泳法”,成功地将血清蛋白分成5个主要成分,即清蛋白、α1-、α2-、β-和γ球蛋白,才使电泳技术在生化分析中得到应用。经过不断地努力,特别是近30年的发展。

关键词：电泳原理应用进展

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人工构建的新型细菌Fc受体蛋白

中国科学（B辑） 1993年第4期23卷 403-409页

作者：蔡仕英王园园姚志建军事医学科学院基础医学研究所北京100850

本文构建了5个基于链球菌G蛋白(SpG)及金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)的新型Fc受体蛋白,它们分别含有1—6个免疫球蛋白Fc段结合区结构域,且在结构形式上亦不同于天然SpG或SpA。在大肠杆菌中,经热诱导它们的表达量占菌体总蛋白的17—30％。免... 详细信息

本文构建了5个基于链球菌G蛋白(SpG)及金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)的新型Fc受体蛋白,它们分别含有1—6个免疫球蛋白Fc段结合区结构域,且在结构形式上亦不同于天然SpG或SpA。在大肠杆菌中,经热诱导它们的表达量占菌体总蛋白的17—30％。免疫双扩散及酶联实验结果表明,这种人工构建的由SpG C3结构域组成的Protein TG(184 AA)比天然SpG能更广谱、更有效地与人、羊、兔等IgG结合,且最佳结合pH也由SpG的pH5变为pH5—8;而由Protein TG与SpA的A,B,C 3个结构域融合的Protein TGA(357 AA)则兼并了SpG及SpA的结合谱。

关键词： Fc受体蛋白人工构建基因表达

重组蛋白G Fc结合区单结构域的纯化及理化性质

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生物化学与生物物理进展 1993年第1期20卷 71-73页

作者：王园园蔡仕英姚志建军事医学科学院基础医学研究所北京100850

蛋白 G 是存在于链球菌 C 群和 G 群胞膜上的一种分子量为65kD 的膜蛋白,完整的蛋白 G 分子主要由四部分组成,其中第三部分能与许多动物的 IgG Fc段特异结合。近年来,蛋白 G 的应用研究已展示出广阔前景,它一方面可与多种标记物(如酶、... 详细信息

蛋白 G 是存在于链球菌 C 群和 G 群胞膜上的一种分子量为65kD 的膜蛋白,完整的蛋白 G 分子主要由四部分组成,其中第三部分能与许多动物的 IgG Fc段特异结合。近年来,蛋白 G 的应用研究已展示出广阔前景,它一方面可与多种标记物(如酶、放射性同位素、胶体金等)连接,用于免疫分析;另一方面,可用作纯化单克隆抗体及多克隆抗体的亲和配基。但是有关蛋白 G 的空间结构及其与 IgG Fc

关键词：蛋白G 重组蛋白

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便于产物纯化的融合表达载体的构建

遗传 1994年第5期16卷 40-42页

作者：蔡仕英王园园姚志建军事医学科学院基础医学研究所北京100850

本文构建了便于目的产物纯化的融合表达载体pBG－2，即在pBV220质粒的PRPL启动子下游插入链球菌荡白G的IgGFc结合区基因片段（编码60个氨基酸），该插入片段下游仍保留多克隆位点并引入剪切融合蛋白的特异位点．SDS－PAGE显示，在大肠... 详细信息

本文构建了便于目的产物纯化的融合表达载体pBG－2，即在pBV220质粒的PRPL启动子下游插入链球菌荡白G的IgGFc结合区基因片段（编码60个氨基酸），该插入片段下游仍保留多克隆位点并引入剪切融合蛋白的特异位点．SDS－PAGE显示，在大肠杆菌中融合基因片段能表达到占菌体总蛋白的30％的水平。Western—blot结果表明，表达产物能很好地与IgG结合．

关键词：融合表达载体提纯遗传工程

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几种制备感受态细胞及质粒转化方法的比较

军事医学科学院院刊 1991年第2期15卷 152-155页

作者：王园园蔡仕英姚志建军事医学科学院基础医学研究所

制备感受态细胞并进行质粒转化实验是重组 DNA 工作中的重要环节。本文就几种制备感受态细胞的方法进行了比较,对有些操作步骤做了改进,对一些影响质粒转化的因素进行了初步探讨。

关键词：感受态细胞质料DNA 转化

Protein G中Fc段结合区的结构分析

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中国科学（B辑） 1991年第12期 1284-1288页

作者：蔡仕英王园园姚志建军事医学科学院基础医学研究所北京100850

通过对用PCR技术从链球菌染色体中扩增出的Protein G中IgG Fc段结合区基因片段(191bP)的序列分析,我们发现其中有一个碱基与国外文献报道不同,由此导致一个氨基酸发生变化,即该结构域内Ala^(19)→Thr^(19),但这一变化并不影响其与IgG F... 详细信息

通过对用PCR技术从链球菌染色体中扩增出的Protein G中IgG Fc段结合区基因片段(191bP)的序列分析,我们发现其中有一个碱基与国外文献报道不同,由此导致一个氨基酸发生变化,即该结构域内Ala^(19)→Thr^(19),但这一变化并不影响其与IgG Fc段的结合。同时,我们还制备出一定量的由大肠杆菌表达的该活性多肽纯品,用圆二色谱仪测定了其二级结构组成,并用计算机做了进一步的预测分析,还同Protein A中相关结构域进行了比较,提出了Protein G与IgG Fc段相结合的可能机制。

关键词： Protein-G Fc段结合区蛋白

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金黄色葡萄球菌A蛋白基因的克隆及序列分析

生物化学杂志 1992年第3期8卷 368-373页

作者：蔡仕英姚志建刘亚霞强伯勤军事医学科学院基础医学研究所北京100850 中国医学科学院基础医学研究所

我们构建了金黄色葡萄球菌Cowan1株(CMCC26111)的染色体文库,转化大肠杆菌后筛选出一株protein A的阳性克隆。SDS-PAGE及Western-blot结果显示该克隆株表达的重组protein A的分子量为30 000,较天然protein A的小。该克隆中的protein A... 详细信息

我们构建了金黄色葡萄球菌Cowan1株(CMCC26111)的染色体文库,转化大肠杆菌后筛选出一株protein A的阳性克隆。SDS-PAGE及Western-blot结果显示该克隆株表达的重组protein A的分子量为30 000,较天然protein A的小。该克隆中的protein A基因片段的序列分析表明,它含有天然protein A基因的启动子、信号肽以及至少四个与IgGFc段结合的结构域,而不含天然protein A的胞壁结合区,并发现其中有24个碱基对与Uhlen报告的protein A基因不同,由此导致三个编码的氨基酸发生变化,但这些差异并不影响该重组protein A与IgG Fc段的特异结合。

关键词：基因克隆葡萄球菌 A蛋白