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用基于TaqMan探针的Real-time PCR技术定量检测副溶血弧菌

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微生物学报 2005年第4期45卷 638-642页

作者：蔡潭溪蒋鲁岩黄克和南京农业大学动物医学院南京210095 江苏省出入境检验检疫局南京210001

副溶血弧菌是一种引起食源性疾病的重要病原菌,传统的鉴定方法费时费力且容易出现假阴性,建立一种定量检测副溶血弧菌基因的方法尤为重要。根据GenBank公布的副溶血弧菌的gyrB基因序列设计一对引物和TaqMan探针,建立了基于TaqMan探针的R... 详细信息

副溶血弧菌是一种引起食源性疾病的重要病原菌,传统的鉴定方法费时费力且容易出现假阴性,建立一种定量检测副溶血弧菌基因的方法尤为重要。根据GenBank公布的副溶血弧菌的gyrB基因序列设计一对引物和TaqMan探针,建立了基于TaqMan探针的RealtimePCR方法。通过对9种细菌(12株菌株)的DNA进行扩增,结果所有4株副溶血弧菌均可产生扩增曲线,其他8株非副溶血弧菌均不产生扩增曲线,证明了引物和探针具有很高的特异性。细菌纯培养物品和人工布菌的检测敏感度分别为1CFUPCR反应体系和10CFUPCR反应体系,相关系数均为0.99(r2=0.99),整个试验可在1h内完成。建立的方法可用于海产品中副溶血弧菌的快速定量检测。

关键词： TaqMan探针,Real-time PCR,副溶血弧菌gyrB基因,定量检测

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利用噬菌体快速鉴定沙门氏菌的研究

微生物学通报 2007年第6期34卷 1138-1141页

作者：姜琴蒋鲁岩黄克和南京农业大学动物医学院南京210095 江苏省出入境检验检疫局南京210000

用肠杆菌科7个组合噬菌体对培养不同时间的60株肠杆菌科细菌进行平板法和液体法裂解,观察其裂解效果,并与生化鉴定进行比较。结果表明:平板法裂解培养2h、6h、10h和≥18h的沙门氏菌(生化鉴定为45株)裂解率分别为91.1%、93.3%、97.8%和88... 详细信息

用肠杆菌科7个组合噬菌体对培养不同时间的60株肠杆菌科细菌进行平板法和液体法裂解,观察其裂解效果,并与生化鉴定进行比较。结果表明:平板法裂解培养2h、6h、10h和≥18h的沙门氏菌(生化鉴定为45株)裂解率分别为91.1%、93.3%、97.8%和88.9%,其余菌株几乎不被沙门氏菌特异噬菌体裂解;液体法裂解培养10h的菌液效果较佳。对150份食品样品检测也获得相似结果。说明肠杆菌科7个组合噬菌体对培养10h的沙门氏菌有较高的敏感性和特异性,这对实现沙门氏菌实时、快速而准确的检测有重要意义。

关键词：沙门氏菌噬菌体鉴定

用荧光标记O-I噬菌体快速检测食品源沙门氏菌

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微生物学报 2009年第3期49卷 372-377页

作者：蒋鲁岩姜琴黄克和张常印唐泰山江苏省出入境检验检疫局江苏南京210001 南京农业大学动物医学院江苏南京210095

【目的】利用O-I噬菌体几乎可裂解沙门氏菌属细菌的特性建立快速检测食品中沙门氏菌的方法。【方法】用核酸荧光染料SYBRR○gold染料标记O-I噬菌体侵染100株试验菌及120份食品样品菌,荧光显微镜鉴定沙门氏菌;并测灵敏度。【结果】100株... 详细信息

【目的】利用O-I噬菌体几乎可裂解沙门氏菌属细菌的特性建立快速检测食品中沙门氏菌的方法。【方法】用核酸荧光染料SYBRR○gold染料标记O-I噬菌体侵染100株试验菌及120份食品样品菌,荧光显微镜鉴定沙门氏菌;并测灵敏度。【结果】100株试验菌中40株沙门氏菌可见杆状荧光,而10株变形杆菌、20株志贺氏菌、20株大肠杆菌和10株葡萄球菌均无荧光;沙门氏菌检测灵敏度达10 CFU/100μL;120份食品样品中沙门氏菌的O-I噬菌体检测与生化鉴定结果的阳性率分别为9.17 %和10 %,符合率为91.7 %。【结论】试验表明用荧光标记的O-I噬菌体可以快速、直观、准确、大量地检测食品中沙门氏菌。

关键词： O-I噬菌体荧光标记沙门氏菌

用复合PCR同步检测食品中霍乱弧菌、副溶血弧菌及创伤弧菌

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检验检疫科学 2000年第6期10卷 5-7,4页

作者：蒋鲁岩江苏检验检疫局

猪链球菌2型的Real-time PCR定量检测研究

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中国人兽共患病学报 2006年第9期22卷 843-845,850页

作者：蒋鲁岩蔡潭溪陈国强江苏出入境检验检疫局南京200001 南京农业大学

目的建立了基于TaqMan探针的Real-time PCR方法，实时、定量检测猪链球菌2型。针对GenBank公布的猪链球菌2型的csp2J基因序列设计一对引物和TaqMan探针，建立了Real-time PCR检测方法，制作标准曲线，定量检测猪链球菌2型。通过对6种... 详细信息

目的建立了基于TaqMan探针的Real-time PCR方法，实时、定量检测猪链球菌2型。针对GenBank公布的猪链球菌2型的csp2J基因序列设计一对引物和TaqMan探针，建立了Real-time PCR检测方法，制作标准曲线，定量检测猪链球菌2型。通过对6种细菌（9株菌株）的DNA进行扩增。结果所有4株猪链球菌2型均可产生扩增曲线，其他5株非猪链球菌2型均不产生扩增曲线。细菌纯培养物的检测敏感度为6～8CFU／PCR反应体系，相关系数均为0．99（r^2=0．99），整个试验可在1．5h内完成。建立的方法可用于猪链球菌2型的快速、定量检测。

关键词： TaqMan探针 Real-Time PCR 猪链球菌csp2J基因定量检测

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副溶血弧菌基因分型和检测的研究进展

中国预防兽医学报 2006年第2期28卷 235-237页

作者：蔡潭溪蒋鲁岩黄克和南京农业大学动物医学院江苏南京210095 江苏省出入境检验检疫局江苏南京210000

副溶血弧菌（Vibrio Parabaemolyticus，VP）是一种革兰氏阴性嗜盐杆菌，是引起食源性疾病的重要病原之一，可导致患者腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐、发烧等典型胃肠炎反应。1998年以来的资料显示，副溶血弧菌引发的食物中毒的发生规模及... 详细信息

副溶血弧菌（Vibrio Parabaemolyticus，VP）是一种革兰氏阴性嗜盐杆菌，是引起食源性疾病的重要病原之一，可导致患者腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐、发烧等典型胃肠炎反应。1998年以来的资料显示，副溶血弧菌引发的食物中毒的发生规模及人群暴露规模呈明显上升趋势，均已超过沙门氏菌食物中毒，跃居首位。为了便于进行临床诊断、流行病学调查、食品中微生物检测及医院感染监控，微生物的分型与诊断技术是必不可少的工具。随着分子生物学技术的发展，基因分型与诊断方法以其敏感性高、特异性强、分型率和分辨率佳的优点，逐渐取代传统的表型分型技术，在微生物的分型与诊断中发挥巨大的作用。本文就近年来国内外在副溶血弧菌的基因分型与检测方法上的研究作一综述。

关键词：微生物检测副溶血弧菌基因分型分子生物学技术流行病学调查食物中毒临床诊断诊断技术革兰氏阴性食源性疾病

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红色文化资源保护利用的“释-织”路径

西安建筑科技大学学报（自然科学版） 2024年第3期56卷 322-328页

作者：陈晓键鲁岩刘欣怡西安建筑科技大学建筑学院陕西西安710055

红色文化资源是我国历史文化资源的重要组成部分,阐释并赓续革命精神.研究基于红色文化资源呈现的物质实体、场景、体系等方面的保护困境,基于叙事和场域理论,建构保护利用的“释-织”分析框架,进行红色文化资源价值意义、空间关联、事... 详细信息

红色文化资源是我国历史文化资源的重要组成部分,阐释并赓续革命精神.研究基于红色文化资源呈现的物质实体、场景、体系等方面的保护困境,基于叙事和场域理论,建构保护利用的“释-织”分析框架,进行红色文化资源价值意义、空间关联、事件脉络等保护传承要素阐释,从织点、织面、织脉等方面,提出锚定关键节点,凸显价值意义;突破本体尺度,联动空间层级;紧扣发展脉络,厘清叙事结构等保护利用路径.

关键词：红色文化资源保护利用路径关系场域

基于氮化物结构与加氢行为关系设计重油加氢脱氮催化剂

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化工进展 2024年第5期43卷 2436-2448页

作者：丁思佳蒋淑娇杨占林彭绍忠蒋乾民中石化(大连)石油化工研究院辽宁大连116045 中国石油大学(北京)化学工程与环境学院北京102249

氮化物分子的结构随着油品馏程增加呈规律性变化,氮化物结构与加氢行为之间的关系是重油加氢脱氮催化剂设计的重要指导理论。本文采用量子化学理论计算的方法研究碱性氮化物和非碱性氮化物的理化性质与反应行为随氮化物结构的变化规律... 详细信息

氮化物分子的结构随着油品馏程增加呈规律性变化,氮化物结构与加氢行为之间的关系是重油加氢脱氮催化剂设计的重要指导理论。本文采用量子化学理论计算的方法研究碱性氮化物和非碱性氮化物的理化性质与反应行为随氮化物结构的变化规律。研究发现,随着氮化物中共轭芳环数目的增加:氮化物吸附能力增强,且吸附过程中电荷转移能力也随之增强,氮化物的平躺吸附逐渐占优势;C—N键通过低活化能的消去路径断裂的难度增加,只能通过高活化能的取代反应路径实现断裂,这就要求与氮化物相邻芳环在C—N键断裂前必须充分得到加氢饱和。高氢解能力催化剂加氢产物中剩余氮化物以含有多环芳烃的氮化物为主,而高加氢饱和能力催化剂加氢产物剩余氮化物中含有更多的双环氮化物,加氢实验结果说明了具有高氢解能力的加氢催化剂更有利于轻质油品中氮化物的脱除,而具有高加氢饱和能力的催化剂更有利于重质油品中氮化物的加氢脱除。

关键词：重油加氢氮化物结构量子化学催化剂

应用地高辛标记的寡聚核酸探针检测副溶血弧菌

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检验检疫科学 2002年第4期12卷 11-12页

作者：蒋鲁岩陈光哲祝长青秦敏张常印江苏检验检疫局

1前言副溶血弧菌是引起人类肠道急性传染病的肠道病原菌之一,也是国际水产品检验检疫的重要菌株.它通过受污染的鱼、贝类等感染人类从而引起以水样腹泻、呕吐及发热等为主要临床症状的疾病.目前,检验检疫部门对此菌株的检验标准为经典方... 详细信息

1前言副溶血弧菌是引起人类肠道急性传染病的肠道病原菌之一,也是国际水产品检验检疫的重要菌株.它通过受污染的鱼、贝类等感染人类从而引起以水样腹泻、呕吐及发热等为主要临床症状的疾病.目前,检验检疫部门对此菌株的检验标准为经典方法,检验周期长,一般需7天左右才能出结果,步骤繁琐且检验精度低.

关键词：地高辛标记寡聚核酸探针检测副溶血弧菌肠道急性传染病肠道病原菌水产品检验检疫