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T淋巴细胞相关协同刺激分子在重症肺炎发病机制中的作用研究

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T淋巴细胞相关协同刺激分子在重症肺炎发病机制中的作用研究

作者：蒋明彦广州医学院

学位级别：硕士

背景重症肺炎目前具体的发病机制不详。研究发现重症肺炎患者淋巴细胞显著减少,并与患者的预后密切相关。是什么导致重症肺炎淋巴细胞减少?研究表明重症肺炎患者外周血中协同刺激分子表达异常,可能导致T淋巴细胞处于“免疫无能(anergy... 详细信息

背景重症肺炎目前具体的发病机制不详。研究发现重症肺炎患者淋巴细胞显著减少,并与患者的预后密切相关。是什么导致重症肺炎淋巴细胞减少?研究表明重症肺炎患者外周血中协同刺激分子表达异常,可能导致T淋巴细胞处于“免疫无能(anergy)”状态。其中是因为T淋巴细胞相关的协同刺激分子CD28,CD152及CD86等的表达异常,还是因为CD28/CD152这对相互拮抗的信号分子的比例异常导致了T淋巴细胞处于“免疫无能”状态?目前尚不清楚。研究发现胸腺肽-α1(Tα1)在机体免疫应答过程中起着重要的作用,并认为其可能是通过增强T淋巴细胞功能而调节免疫系统的。研究观察到胸腺肽a1可以改善脓毒性休克患者的T淋巴细胞增殖,调节机体的细胞免疫功能。可见,胸腺肽a1有调节机体免疫异常的功能,是否通过调控协同刺激信号来影响T淋巴细胞的增殖?尚待进一步的研究。目的在蛋白水平上研究重症肺炎T细胞相关协同刺激分子与其细胞增殖能力的关系,以探讨该病的发病机制;在此基础上,观察胸腺肽-α1对重症肺炎T淋巴细胞协同刺激分子及其细胞增殖能力的影响,并进一步探讨T淋巴细胞协同刺激分子在重症肺炎免疫异常中的可能作用。资料和方法 1标本来源 2007年8月一2008年06月入住广州市第一人民医院呼吸科的重症肺炎患者,均符合美国胸科学会(ATS)于2007年制定的重症肺炎诊断标准。健康对照组来自同期门诊健康体检者。经本人及家属知情同意后抽取外周静脉血。重症肺炎患者21例,抽血2mL,EDTA-K3抗凝;其中11例多抽血13mL,肝素抗凝;另外其中11例于住院治疗后10天再次抽血2mL(其中28天患者预后为8例好转、3例死亡)。健康人12名抽血2mL,EDTA-K3抗凝;其中10名多抽血8mL肝素抗凝。 2方法 2.1 T淋巴细胞相关协同刺激分子的检测:取EDTA-K3抗凝血标本。设测定管及同型对照管。检测T淋巴细胞上的四个表位(CD4, CD8, CD28, CD152)及相关的单核细胞的两个表位(CD86,HLA-DR)。用FITC、PE、PC5、APC和APCcy7荧光素直接标记单克隆抗体。检测前校准流式细胞仪的光路和液路。将光路调整至最佳,检测阴性对照,调整电压和颜色补偿。利用FACScan及CELLQuest软件收集分析数据。使用前向角散射光侧向角散射光双参数设门。收集10000个细胞。以百分率表示每群细胞的表达。 2.2 T淋巴细胞的增殖试验 2.2.1人外周血单个核细胞(PBMC)提取:密度梯度离心法提取重症肺炎病人及健康人的外周血标本(PBMC)。立即使用或冻存,用前溶解。 2.2.2单个核细胞(PBMC)PKH26染色及培养:参考PKH26染料说明书对PBMC进行染色。重悬成1×106 / ml的浓度,接种于24孔培养板孔中。实验分为4组:①空白对照组PBS+PKH26染色后PBMC;②阳性对照组PHA+PKH26染色后PBMC;③胸腺肽-α1+内毒素+PKH26染色后PBMC;④内毒素PKH26+染色后PBMC。每孔终体积约0.6 ml浓度1×106 / ml,在37℃、5 %CO2条件下培养5天。 2.2.3 T淋巴细胞增殖的检测:取出培养5天后的PKH26染色细胞,分两管,每管0.3ml ,离心洗涤,加入荧光素标记的PC5—CD3 1μg/ 106细胞,混匀后室温暗处孵育,洗涤后,用2 g/L多聚甲醛固定,利用流式细胞仪检测及数据用CELLQuest软件和ModFitTM软件分析得到T淋巴细胞的增殖指数(PF)及增殖细胞的前体频率(PI)。 2.2.4体外培养T淋巴细胞及协同分子的检测:取未染色的单个核细胞,重悬成1×106 / ml的浓度,接种于24孔培养板孔中。实验分为4分组:①空白对照组PBS+未染色PBMC;②阳性对照组PHA+未染色PBMC;③胸腺肽-α1+内毒素+未染色PBMC;④内毒素+未染色PBMC。每孔终体积约0.6 ml,浓度1×106 / ml,在37℃、5 %CO 2条件下培养5天。取出培养5天后未染色的细胞,分两管,每管0.3ml ,离心洗涤,加入荧光素标记的FITC—CD28/PE—CD152/PC5—CD3各1μg/ 106细胞,混匀后室温暗处孵育,洗涤后,用2 g/L多聚甲醛固定,利用流式细胞仪检测及数据用CELLQuest软件分析协同刺激分子CD28、CD152的表达。 2.3统计学方法:所有实验数据均用SPSS 11.5软件分析,计量资料以均数士标准差(士S)表示,两组均数比较采用t检验。随机区组设计资料采用方差分析,用LSD法进行数据间的多重比较,取P<0.05差异有统计学意义。结果 1重症肺炎T淋巴细胞、亚群及相关协同刺激分子:21例重症肺炎患者CD3、CD4、CD86、HLA-DR、CD28/ CD1

关键词：重症肺炎免疫无能协同刺激分子胸腺肽-α1

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多媒体在小学数学低年级教学中的妙用

中国多媒体与网络教学学报（电子版） 2018年第9期 71-72页

作者：蒋明彦德惠市菜园子镇中心小学

科技在发展,社会在进步,现代信息化技术给小学数学低年级的教学注入了新的活力,。近年来,随着教育部对教学投资力度的加大,我国各级地区的学校都购置了多媒体电子设备进行辅助教学,这一教学技术在探索实践中发挥了独特的作用,它不仅激... 详细信息

科技在发展,社会在进步,现代信息化技术给小学数学低年级的教学注入了新的活力,。近年来,随着教育部对教学投资力度的加大,我国各级地区的学校都购置了多媒体电子设备进行辅助教学,这一教学技术在探索实践中发挥了独特的作用,它不仅激发了学生的学习积极性,更从根本上提高了小学低年级教学中数学学科的教学质量。文章就在小学数学低年级教学中如何巧妙应用多媒体提出了一些建议,以期为数学学科教学的完善提供参考依据。

关键词：多媒体小学数学低年级教学妙用

CD_(28):CTLA-4/B7协同刺激分子在脓毒症发病机制中的作用

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医学综述 2008年第7期14卷 995-997页

作者：蒋明彦赵子文广州医学院附属广州市第一人民医院呼吸内科广州510180

脓毒症发病机制非常复杂,内容涉及感染、炎症、免疫、凝血及组织损害等一系列基本问题,并与机体多系统、多器官病理生理改变密切相关。T细胞功能失调与脓毒症发病密切相关。CD28:CTLA-4/B7是T细胞重要的协同刺激分子,对调节免疫具有非... 详细信息

脓毒症发病机制非常复杂,内容涉及感染、炎症、免疫、凝血及组织损害等一系列基本问题,并与机体多系统、多器官病理生理改变密切相关。T细胞功能失调与脓毒症发病密切相关。CD28:CTLA-4/B7是T细胞重要的协同刺激分子,对调节免疫具有非常重要的作用,可能在脓毒症发生和发展中起着关键作用。

关键词：脓毒症 CD28 细胞毒T细胞相关抗原4

卷曲霉素、左氧氟沙星及对氨基水杨酸钠联合方案治疗耐多药和可疑耐多药肺结核疗效分析

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中国感染控制杂志 2009年第5期8卷 311-314页

作者：尹怡平蒋明彦郴州市第二人民医院湖南郴州423000 广州医学院附属广州市第一人民医院广东广州510000

目的评价卷曲霉素、左氧氟沙星及对氨基水杨酸钠联合化疗方案在耐多药肺结核（MDR-PTB）治疗中的效果。方法将120例MDR-PTB患者分为治疗组和对照组各60例。治疗方案：治疗组以卷曲霉素、左氧氟沙星及对氨基水杨酸钠为主，联合利福喷丁... 详细信息

目的评价卷曲霉素、左氧氟沙星及对氨基水杨酸钠联合化疗方案在耐多药肺结核（MDR-PTB）治疗中的效果。方法将120例MDR-PTB患者分为治疗组和对照组各60例。治疗方案：治疗组以卷曲霉素、左氧氟沙星及对氨基水杨酸钠为主，联合利福喷丁、异烟肼、吡嗪酰胺治疗；对照组用阿米卡星、乙胺丁醇，联合用药同治疗组，疗程均为16个月。结果120例患者均完成化疗疗程，治疗组痰菌阴转率为83．33％，明显高于对照组的65．00％（X2=5．26，P=0．02）；治疗组病灶吸收率为90．00％，空洞闭合率为71．43％，显著高于对照组的病灶吸收率66．67％，空洞闭合率31．25％（分别X2=9．62，P=0．00；X2=10．82，P=0．00）；治疗组药物不良反应率为35．00％，对照组为33．33％，两组差异无显著性（X2=0．04，P=0．85）。结论卷曲霉素、左氧氟沙星及对氨基水杨酸钠的联合化疗方案治疗MDR-PTB，痰菌阴转和病灶吸收好转较优，药物不良反应并未增加，值得临床推广应用。

关键词：结核肺耐多药肺结核卷曲霉素左氧氟沙星对氨基水杨酸钠化疗方案抗药性微生物

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重症肺炎患者外周血细胞计数与预后

中国医师杂志 2008年第10期10卷 1386-1388页

作者：蒋明彦赵子文钟维农马为赵祝香魏树全广州医学院附属广州市第一人民医院呼吸内科广东广州510180

目的探讨外周血细胞计数对重症肺炎患者预后的影响。方法对呼吸内科78例重症肺炎患者根据预后分为死亡组和存活组，比较2组外周血细胞计数；采用Logistic回归模型对外周血细胞计数与重症肺炎住院病死率相关性进行分析。结果外周血白细... 详细信息

目的探讨外周血细胞计数对重症肺炎患者预后的影响。方法对呼吸内科78例重症肺炎患者根据预后分为死亡组和存活组，比较2组外周血细胞计数；采用Logistic回归模型对外周血细胞计数与重症肺炎住院病死率相关性进行分析。结果外周血白细胞数，淋巴细胞数及血小板数与预后相关（P〈0．05）；用Logistic回归方程对78例重症肺炎病例进行回顾性验证，结合外周血白细胞数、淋巴细胞数及血小板数对重症肺炎预后死亡判断的总正确率为82．1％。验证重症肺炎死亡预后的总正确率为82．1％，该方程的敏感性为69．4％，特异性为92．9％。结论外周血白细胞数、淋巴细胞数及血小板数结合分析能提高对重症肺炎患者预后预测的准确性。

关键词：肺炎血细胞计数预后

嗜酸细胞趋化因子在哮喘、嗜酸细胞性支气管炎患者诱导痰中的表达及其与气道炎症的关系

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临床肺科杂志 2011年第1期16卷 33-34页

作者：付杰伟蒋明彦欧阳繁湘潭市中心医院呼吸内科湖南湘潭411100

目的探讨嗜酸细胞趋化因子(eotaxin)在支气管哮喘、嗜酸细胞性支气管炎患者气道炎症发生中的作用以及在两者间的区别。方法分别收集支气管哮喘(A组)、嗜酸细胞性支气管炎(EB组)、单纯慢性支气管炎(CB组)缓解期/稳定期患者13例、11例、1... 详细信息

目的探讨嗜酸细胞趋化因子(eotaxin)在支气管哮喘、嗜酸细胞性支气管炎患者气道炎症发生中的作用以及在两者间的区别。方法分别收集支气管哮喘(A组)、嗜酸细胞性支气管炎(EB组)、单纯慢性支气管炎(CB组)缓解期/稳定期患者13例、11例、12例和健康对照者(C组)9例。诱导痰并经处理后进行分类细胞记数,并用夹心法酶联免疫吸附测定(ELISA)其诱导痰上清液中eotaxin浓度。结果诱导痰嗜酸细胞占白细胞百分比(Eos/Leu%)、eotaxin浓度A组[(19.2±9.7)%;(0.251±0.118)g/L]、EB组[(11.4±6.1)%;(0.146±0.079)g/L]分别与CB组[(0.9±0.6)%;(0.043±0.036)g/L]、C组[(0.8±0.4)%;(0.031±0.013)g/L]比较,差异有显著性(P均<0.05);A组Eos/Leu%、eotaxin浓度与EB组比较,差异也有显著性(P均<0.05)。结论 eotaxin可能通过对Eos的选择性趋化作用参与了支气管哮喘和嗜酸细胞性支气管炎患者气道炎症的发生机制,这种作用机制对于支气管哮喘和嗜酸细胞性支气管炎在程度上可能是不同的。

关键词：支气管哮喘嗜酸细胞性支气管炎诱导痰气道炎症嗜酸细胞趋化因子

电子支气管镜代替胸腔镜在不明原因胸腔积液中的诊断价值

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医学临床研究 2010年第5期27卷 914-915页

作者：贺志文刘国平蒋明彦成建钊湖南省湘潭市中心医院呼吸内科湖南湘潭411100

[目的]探讨电子支气管镜（电支镜）代替胸腔镜在不明原因胸腔积液中的诊断价值.[方法]对胸片、胸部C T及胸部B超同时诊断为胸腔积液的109例患者行电支镜代替胸腔镜做胸膜活检,并对其病因、镜下特点、部位及年龄分布等进行分析.[结果]检... 详细信息

[目的]探讨电子支气管镜（电支镜）代替胸腔镜在不明原因胸腔积液中的诊断价值.[方法]对胸片、胸部C T及胸部B超同时诊断为胸腔积液的109例患者行电支镜代替胸腔镜做胸膜活检,并对其病因、镜下特点、部位及年龄分布等进行分析.[结果]检查明确诊断89例,确诊率为81.65%,确诊病例中,以恶性肿瘤最多,共46例（51.69%）,良性疾病共43例（48.31%）.[结论]电支镜检查是确定胸腔积液病因最主要的手段,具有诊断率高、操作安全简便、损伤及并发症少等优点,对原因不明的胸腔积液有重要的应用价值.

关键词：胸腔积液/诊断支气管镜检查

国产替加环素治疗泛耐药鲍曼不动杆菌肺炎的临床疗效

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包头医学院学报 2016年第10期32卷 26-28页

作者：蒋明彦刘国平刘中华贺志文湘潭市中心医院呼吸与危重症医学科湖南湘潭411100

目的:探讨国产替加环素治疗泛耐药鲍曼不动杆菌(extensively drug resistant ***,XDRAB)肺炎的临床疗效。方法:选择XDRAB肺炎患者21例,采用国产替加环素治疗,观察治疗效果。结果:治疗后,患者的临床症状得到改善(P<0.05);白细胞计数及中... 详细信息

目的:探讨国产替加环素治疗泛耐药鲍曼不动杆菌(extensively drug resistant ***,XDRAB)肺炎的临床疗效。方法:选择XDRAB肺炎患者21例,采用国产替加环素治疗,观察治疗效果。结果:治疗后,患者的临床症状得到改善(P<0.05);白细胞计数及中性粒细胞比值、C-反应蛋白、降钙素原(procalcitonin,PCT)等炎症指标以及急性生理与慢性健康评分Ⅱ(acute physiology and chronic health evaluationⅡ,APACHEⅡ)均有所下降(P<0.05)。21例患者中病原菌清除者13例,清除率为61.9%;治疗总有效率71.4%;28 d存活率85.7%。结论:国产替加环素对XDRAB肺炎具有较好的临床疗效,可结合实际情况选择性应用。

关键词：替加环素泛耐药鲍曼不动杆菌

胸腺肽-α_1通过调节CD_(28)/CD_(152)协同刺激因子促进重症脓毒血症患者外周血T淋巴细胞增殖

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广州医药 2014年第4期45卷 4-6页

作者：钟维农蒋明彦赵祝香黄晓梅赵子文广州市第一人民医院呼吸内科广州510180 湖南省湘潭市中心医院湘潭411100

目的探讨胸腺肽-α1对重症脓毒血症患者外周血T淋巴细胞增殖的影响及其机制。方法采用细胞膜染料PKH26和荧光标记的特异抗体与流式细胞术结合检测胸腺肽-α1对重症脓毒血症患者外周血T淋巴细胞增殖及CD28/CD152协同刺激因子的表达。结... 详细信息

目的探讨胸腺肽-α1对重症脓毒血症患者外周血T淋巴细胞增殖的影响及其机制。方法采用细胞膜染料PKH26和荧光标记的特异抗体与流式细胞术结合检测胸腺肽-α1对重症脓毒血症患者外周血T淋巴细胞增殖及CD28/CD152协同刺激因子的表达。结果胸腺肽-α1可促进重症脓毒血症患者外周血T淋巴细胞增殖(P=0.002);可上调CD28+/CD3+的表达及下调CD152+/CD3+的表达。结论胸腺肽-α1通过调节CD28/CD152协同刺激因子促进重症脓毒血症患者外周血T淋巴细胞增殖。

关键词：重症脓毒血症胸腺肽-α1 细胞增殖协同刺激分子