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凡纳滨对虾低温差减文库构建及低温诱导基因LvTSPAN8的克隆与鉴定

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凡纳滨对虾低温差减文库构建及低温诱导基因LvTSPAN8的克隆与鉴定

作者：蒋小珍广西大学

学位级别：硕士

本研究采用抑制性差减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)技术构建了低温胁迫下凡纳滨对虾肝胰腺差减cDNA文库,通过斑点杂交、EST测序、RQ-PCR等手段对差减结果进行验证并对正库中丰度最高的四跨膜蛋白基因进行了克隆与... 详细信息

本研究采用抑制性差减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)技术构建了低温胁迫下凡纳滨对虾肝胰腺差减cDNA文库,通过斑点杂交、EST测序、RQ-PCR等手段对差减结果进行验证并对正库中丰度最高的四跨膜蛋白基因进行了克隆与鉴定。研究结果如下:1.低温胁迫下凡纳滨对虾肝胰腺差减cDNA文库构建及差异ESTs分析构建了以低温处理和常温对虾肝胰腺cDNA差减文库各1个,分别为正库和负库。斑点杂交实验结果表明,正、负文库768个克隆呈高表达的克隆分别为152个、331个,即前者为低温高表达,后者为常温高表达克隆。正文库100个克隆测序后拼接获得ESTs同源群39个,已知基因29个;负文库50个克隆拼接获得ESTs同源群18个,已知基因17个。2.部分基因的低温诱导差异表达验证采用RQ-PCR法对对差减获得的耐寒相关功能基因进行验证。实验结果显示,挑选的四个基因(TSPAN8、HSPB1、NGT4和NGT7)在18℃低温胁迫时均呈显著上调表达,验证了这四个基因是低温诱导差异表达基因。NGT7、HSPB1和TSPAN8的表达峰值在15℃,NGT4表达峰值在13℃。温度降至1 1℃时,这四个基因表达量均有所下降,但仍显著高于常温表达量。进一步对正文库中丰度最高的TSPAN8基因在常温组和低温处理组(13℃)对虾不同组织的差异表达进行评估,发现LvTSPAN8基因在低温处理组对虾(13℃)心脏、鳃和肝胰腺组织中呈低温上调表达;在肌肉中呈低温下调表达。***8基因克隆及生物信息学分析LvTSPAN8基因含有一个720bp的开放阅读框(ORF),共编码239个氨基酸,预测LvTSPAN8基因相对分子质量大小为25.61 KDa。通过Blast进行同源比对发现,凡纳滨对虾中分离的四跨膜蛋白与之前报道的中国明对虾(Fenneropenaeus Chinensis)四跨膜蛋白 TSPAN8、青蟹(Scylla paramamosain)四跨膜蛋白TSPAN8和CD53相似性分别为83.7%、52.7%和48.5%,并通过多序列比对发现四跨膜超家族中存在22个保守的氨基酸序列,暗示该家族基因在功能上的保守性。不同物种四跨膜蛋白的系统发育树分析显示,凡纳滨对虾TSPAN8和*** TSPAN8属于相同的进化枝,经TMHMM软件预测,LvTSPAN8蛋白有一个保守的四跨跨膜区,N-端和C-端位于细胞膜内,保守的CCG序列和半胱氨酸残基出现在TSPAN的外环区域。

关键词：凡纳滨对虾肝胰腺低温胁迫抑制性差减杂交四跨膜蛋白

岩溶地下工程地质环境影响区范围划定初步研究——以深圳市龙岗区基坑降水为例

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中国岩溶 2022年第5期41卷 825-837页

作者：吴晟堂蒋小珍马骁汤振中国地质科学院岩溶地质研究所/中国地质调查局岩溶塌陷防治重点实验室广西桂林541004 中国地质大学(北京) 北京100083

在大量建设城市地下轨道交通及城市更新工程的背景之下,我国城市岩溶地质灾害日趋严重。文章以深圳市3个岩溶地面塌陷事件为例,开展岩溶地下工程地质环境影响区的划定研究。首先运用高频岩溶地下水气压力监测技术对工程影响实际范围进... 详细信息

在大量建设城市地下轨道交通及城市更新工程的背景之下,我国城市岩溶地质灾害日趋严重。文章以深圳市3个岩溶地面塌陷事件为例,开展岩溶地下工程地质环境影响区的划定研究。首先运用高频岩溶地下水气压力监测技术对工程影响实际范围进行监测分析,然后结合工程施工参数、岩溶塌陷主要影响因素与水文地质试验参数,采用定性分析和量化计算的综合研究方法,推导出岩溶地下工程地质环境影响范围理论计算经验公式。结果表明:岩溶地下工程影响范围主要与渗透系数、工程深度成正比,与土层厚度成反比,推导的半定量理论公式适用于岩溶承压水条件下,可快速为缺乏地下水监测资料的岩溶地区地下工程安全建设及城市防灾减灾工作提供依据。

关键词：岩溶地下工程岩溶地下水气压力监测工程影响区抽水试验经验公式

地理信息系统（GIS）在岩溶塌陷评价中的运用

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中国岩溶 1994年第4期13卷 351-356页

作者：雷明堂蒋小珍李瑜地矿部岩溶地质研究所

本文采取多学科的系统分析方法，应用地理信息系统（ＧＩＳ）这一计算机新技术，通过对典型塌陷危害区各影响因素进行空间分析，试图建立一套综合的、系统的岩溶塌陷预测评价体系和方法。

关键词：地理信息系统岩溶塌陷地质灾害

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极危物种巨无齿繁育研究概况

水产科技情报 2014年第5期41卷 264-267页

作者：蒋小珍张盛叶香尘广西大学动物科学技术学院南宁530021 广西水产引育种中心南宁530005

巨无齿鱼芒生长快、肉质鲜美、经济价值高,但过度捕捞和自然环境的变化影响了其洄游繁殖,致使该物种的数量在最近几十年中急剧下降,目前已被列为极危物种。文章概述了目前国内外巨无齿鱼芒繁育技术的研究状况,以期为我国人工繁育巨无齿... 详细信息

巨无齿鱼芒生长快、肉质鲜美、经济价值高,但过度捕捞和自然环境的变化影响了其洄游繁殖,致使该物种的数量在最近几十年中急剧下降,目前已被列为极危物种。文章概述了目前国内外巨无齿鱼芒繁育技术的研究状况,以期为我国人工繁育巨无齿鱼芒提供理论依据,同时为我国其它濒危鱼芒科鱼类的人工繁育提供借鉴。

关键词：巨无齿鱼芒繁育鱼芒科极危物种

岩溶塌陷灾害的岩溶地下水气压力监测技术及应用

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中国岩溶 2018年第5期37卷 786-791页

作者：蒋小珍雷明堂中国地质科学院岩溶地质研究所/中国地质调查局岩溶塌陷防治重点实验室广西桂林541004

文章系统、全面地介绍了岩溶地下水气压力监测技术及其应用成果。该技术在监测成孔、孔口的密封及监测频率等方面创新性地提出了相关的工艺方法,能真实、及时且充分地反映出岩溶管道裂隙系统中的地下水气压力变化特点,可为岩溶塌陷的机... 详细信息

文章系统、全面地介绍了岩溶地下水气压力监测技术及其应用成果。该技术在监测成孔、孔口的密封及监测频率等方面创新性地提出了相关的工艺方法,能真实、及时且充分地反映出岩溶管道裂隙系统中的地下水气压力变化特点,可为岩溶塌陷的机理研究、监测和预警提供科学依据。岩溶地下水气压力监测技术工艺简单、操作方便、成本低廉,经过20多年的改进,已成功应用于全国11个典型岩溶塌陷区,服务于高铁、水源地、油气管线、市政建设等潜在岩溶塌陷风险性评价、安全降深、监测预警等方面,取得了很好的效果。

关键词：岩溶塌陷岩溶地下水气压力监测技术监测预警监测频率

岩溶塌陷灾害的水动力条件危险性评价指标——以广西贵港青云村为例

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地下空间与工程学报 2012年第6期8卷 1316-1321页

作者：蒋小珍雷明堂管振德中国地质科学院岩溶地质研究所广西桂林541004

针对广西贵港覃塘镇青云村岩溶塌陷问题,开展该区岩溶塌陷水动力条件的危险性评价指标研究工作。通过实时、高分辨率的自动化监测设备对该区的岩溶地下水进行了监测。结果表明,岩溶地下水的变化是该地区岩溶塌陷发生的主要诱发因素。通... 详细信息

针对广西贵港覃塘镇青云村岩溶塌陷问题,开展该区岩溶塌陷水动力条件的危险性评价指标研究工作。通过实时、高分辨率的自动化监测设备对该区的岩溶地下水进行了监测。结果表明,岩溶地下水的变化是该地区岩溶塌陷发生的主要诱发因素。通过对比抽水活动强烈,无岩溶塌陷事件发生地区的地下水动态监测资料,综合分析提炼出岩溶塌陷水动力条件危险性评价指标,即:岩溶水日波动最大幅度及水位恢复时间、岩溶水位瞬时最大下降速度。该指标可应用于评价工程活动对地下水的影响,实时获取工程活动对地下水的影响程度,判断岩溶塌陷的可能性,反过来也可指导工程活动,减少灾害的发生及损失。

关键词：岩溶塌陷地下水监测危险性评价

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磺胺嘧啶与苯醌类试剂荷移反应的研究

北京大学学报（自然科学版） 1993年第2期29卷 144-148页

作者：周旭光蒋小珍冯建章北京大学化学系

本文研究了磺胺嘧啶与苯醌和四氯苯醌之间的荷移反应。实验表明:磺胺嘧啶与苯醌反应是在酸性介质中进行;与四氯苯醌反应则在碱性介质中进行。络合物最大吸收波长分别在500nm和356nm,表观摩尔吸光系数分别是4.6×10~3和5.0×10~3L·mol^(... 详细信息

本文研究了磺胺嘧啶与苯醌和四氯苯醌之间的荷移反应。实验表明:磺胺嘧啶与苯醌反应是在酸性介质中进行;与四氯苯醌反应则在碱性介质中进行。络合物最大吸收波长分别在500nm和356nm,表观摩尔吸光系数分别是4.6×10~3和5.0×10~3L·mol^(-1)·cm^(-1),络合物组成比是1:1,比尔定律的线性范围分别为5～60μg/mL和5～20μg/mL。应用拟定的方法测定磺胺嘧啶片剂含量,结果令人满意。

关键词：荷移反应苯醌磺胺嘧啶