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提高破伤风类毒素免疫原性的初步研究

提高破伤风类毒素免疫原性的初步研究

作者：蒋会婷西北农林科技大学

学位级别：硕士

破伤风梭菌产生的破伤风毒素,经0.4%甲醛灭活后,失去毒性而仍保留抗原性称之为破伤风类毒素。类毒素精制后,可作为疫苗对人和动物进行免疫接种。但机体感染后不能获得终身免疫力,且此免疫程序较长。为了减轻接种的副反应,提高免疫效果,... 详细信息

破伤风梭菌产生的破伤风毒素,经0.4%甲醛灭活后,失去毒性而仍保留抗原性称之为破伤风类毒素。类毒素精制后,可作为疫苗对人和动物进行免疫接种。但机体感染后不能获得终身免疫力,且此免疫程序较长。为了减轻接种的副反应,提高免疫效果,减少注射次数,提高接种覆盖率,本研究采用原核细胞表达具有高免疫原性的重组C蛋白,用于生产疫苗及免疫接种,以避免出现副作用;另外,用双功能交联剂戊二醛聚合破伤风毒素,使毒素分子之间进行交联,从而产生分子量较大的,表面决定簇多的聚合类毒素。该类毒素作为免疫的抗原,可以诱发较高的抗体水平,加强免疫记忆,延长保护机体免受破伤风的侵害的时间。 1.利用PCR技术从破伤风梭菌基因组DNA中扩增出1 356 bp的破伤风毒素C基因,将该基因片段插入到表达载体pET32a（+）中,转化宿主菌BL21（DE3）中,用IPTG诱导表达,观察各种条件下对重组菌蛋白表达的影响。对重组后蛋白用Ni-NAT亲和层析的技术纯化C融合蛋白,然后进行小鼠免疫实验并测定效价。研究显示:经SDS-PAGE分析,重组破伤风毒素C蛋白（rTTC）的表达量占可溶性蛋白的28.19%,纯化后得到蛋白纯度为96.92%。免疫印迹证实该重组蛋白是破伤风毒素C蛋白抗原,对小鼠免疫,三免后14 d rTTC组小鼠抗体效价仍能达到1∶16 000。所获得的重组蛋白具有良好的免疫原性。 2.经过厌氧培养的破伤风梭菌,产毒后进行脱毒、精制,在产毒期间进行毒力鉴定、解毒和毒性逆转实验。再由戊二醛聚合破伤风类毒素,经不同的聚合条件的优化,进行分子量和Lf的测定,然后免疫小鼠和兔子,并测定其免疫效价。培养的毒素可以作为制备类毒素使用,脱毒精制后的类毒素,经毒力鉴定试验、解毒试验和毒性逆转试验检测后均合格。用pH 7.2的PBS稀释类毒素,终浓度为0.1%、0.3%戊二醛置于室温中聚合稀释后的类毒素12 h,聚合类毒素中聚合的类毒素分子量为600 ku,含量占聚合物的43.82%,经ELISA检测抗原性,抗原与阳性血清呈阳性反应。免疫小鼠和兔子,平均效价在1∶2 0 000～1∶3 0 000。所得到的聚合类毒素具有抗原性及免疫原性。 3.最后将聚合类毒素和未聚合类毒素分别与重组抗原联合免疫马匹,未聚合类毒素的平均效价明显低于聚合类毒素组别,说明在联合免疫后,聚合类毒素可以提高马匹的血清效价。

关键词：破伤风类毒素聚合 C片段免疫原性破伤风梭状芽孢杆菌

知识产权保护对生物育种技术的技术转移和创新创业产生的影响

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分子植物育种 2024年第1期22卷 167-171页

作者：蒋帛婷铜陵学院铜陵244000

随着生物技术的快速发展,生物育种技术作为这一领域的核心部分,已经取得了突破性的进展。在这个过程中,知识产权保护起到了至关重要的作用。本研究深入探讨了知识产权保护对生物育种技术的技术转移和创新创业产生的影响。研究发现,适当... 详细信息

随着生物技术的快速发展,生物育种技术作为这一领域的核心部分,已经取得了突破性的进展。在这个过程中,知识产权保护起到了至关重要的作用。本研究深入探讨了知识产权保护对生物育种技术的技术转移和创新创业产生的影响。研究发现,适当的知识产权保护可以促进技术的传播、应用和商业化,为技术发明者提供了合理的回报,同时也为技术接受者创造了利用和进一步创新的机会。然而,过度或不恰当的知识产权保护可能会阻碍技术的传播和应用,导致技术垄断和市场失衡。因此,本研究在如何平衡知识产权保护与技术转移的关系,如何在创新创业中有效管理知识产权,以及如何为政府和政策制定者提供有针对性的建议,期望能为知识产权保护、技术转移和创新创业提供新的理论和实践启示。

关键词：知识产权保护生物育种技术技术转移创新创业政策建议

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两类样本方差总体β-期望容忍区间的设计

系统科学与数学 2024年

作者：蒋孝婷孙晋翾郭宝才浙江工商大学统计与数学学院浙江工商大学统计数据工程技术与应用协同创新中心

质量特征的方差反映了产品或过程的变异,方差增大说明产品或过程有所恶化,而方差减小则说明有所改进.为了合理评估产品或过程的表现,设计样本方差总体的双侧容忍区间便非常重要.对于样本方差总体的传统“等尾”β-期望容忍区间,当样本... 详细信息

质量特征的方差反映了产品或过程的变异,方差增大说明产品或过程有所恶化,而方差减小则说明有所改进.为了合理评估产品或过程的表现,设计样本方差总体的双侧容忍区间便非常重要.对于样本方差总体的传统“等尾”β-期望容忍区间,当样本子组数或样本容量特别小时,存在两大问题:1)忽视实际覆盖率变异导致实际工作人员间存在过大差异;2)容忍区间的精度过低,也就是说,为满足指定精度所需最小样本数过大.而在质量控制领域中由于时间或成本因素常常出现小样本情况.鉴于此,文章以提升精度为设计理念,基于实际覆盖率方差最小化和实际覆盖率集中化两种方法设计了新的样本方差总体的β-期望容忍区间.考虑到实际工作人员凭借历史数据或经验通常会掌握一定的先验信息,文章又引入贝叶斯方法设计相应的容忍区间.并利用精度和所需最小样本数对容忍区间的表现进行了评估与比较,结果显示:1)所提的两类新容忍区间表现明显优于传统“等尾”容忍区间;2)贝叶斯容忍区间的表现优于相应的频率容忍区间.最后,通过一个实例展示了所提β-期望容忍区间的设计及其优越性.

关键词： β-期望容忍区间样本方差频率和贝叶斯视角实际覆盖率

山西省水资源与种植结构耦合协调现状及驱动因素

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中国沙漠 2024年

作者：戴燕燕蒋依婷张鹏飞刘庚张蕾太原师范学院地理科学学院太原师范学院汾河流域地表过程与资源生态安全山西省重点实验室河南大学新闻与传播学院

梳理水资源系统与种植结构系统的耦合关系及其影响因素，对水资源短缺和粮食生产结构单调的山西省具有重要意义。在理论揭示山西省11个地市2007—2020年两系统的耦合作用机理的基础上，利用耦合协调度及地理探测器模型分析两系统耦合协... 详细信息

梳理水资源系统与种植结构系统的耦合关系及其影响因素，对水资源短缺和粮食生产结构单调的山西省具有重要意义。在理论揭示山西省11个地市2007—2020年两系统的耦合作用机理的基础上，利用耦合协调度及地理探测器模型分析两系统耦合协调的时空格局及其影响因素。结果表明：（1）山西省水资源与种植结构的综合水平还处于较低层次。复合系统综合发展指数呈现出晋中和晋东南高、晋北和晋南低的特点。（2）山西省水资源与种植结构耦合协调度趋好但总体水平较低，研究期内总体由濒临失调逐步发展到初级协调。空间上，耦合协调度阳泉市>太原市>吕梁市>晋城市>晋中市>忻州市>长治市>临汾市>朔州市>大同市>运城市。（3）山西省水资源与种植结构耦合协调度存在空间集聚特征，但集聚程度不强，研究期内集聚程度先升后降。耦合协调度高的地区对邻近地市的辐射能力较弱。（4）影响山西省水资源与种植结构耦合协调度的主导因子依次为农业机械化水平、第一产业用水占比、生态环境用水占比、生活用水占比、地下水供水占比和人均用水量等。另外，各因子与其他因子两两交互后，对耦合协调性的影响起到了双因子增强的效果。

关键词：水资源种植结构耦合协调度时空差异驱动因素

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破伤风疫苗的研究进展

安徽医药 2009年第4期13卷 420-421页

作者：蒋会婷北京市密云县疾病预防控制中心北京密云101500

破伤风是一种易被忽视的致死性疾病,对人类的生产生活构成了极大的威胁。自从破伤风类毒素开始用于免疫,取得了较好的免疫效果。以前一直沿用的疫苗都是甲醛处理毒素,需要经过多次免疫注射,存在接种次数多,过敏反应发生率高的缺点,不能... 详细信息

破伤风是一种易被忽视的致死性疾病,对人类的生产生活构成了极大的威胁。自从破伤风类毒素开始用于免疫,取得了较好的免疫效果。以前一直沿用的疫苗都是甲醛处理毒素,需要经过多次免疫注射,存在接种次数多,过敏反应发生率高的缺点,不能有效防治破伤风疾病的发生。现在的研究主要集中在从较少量的破伤风疫苗接种,获得较高效的免疫应答方面,以此更好地预防破伤风。本文对国内外破伤风类毒素疫苗主要研究进展和方向做一简要概述。

关键词：类毒素破伤风外毒素梭菌

奶牛乳房炎大肠杆菌基因缺失灭活疫苗的免疫保护效果研究

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中国兽医学报 2022年

作者：田崇瑜史伯昌李春和谭凌云蒋会婷李欣昱李华斌贺威刘媛郑源强闫芳范君文赵忠鹏山西农业大学动物医学学院内蒙古医科大学内蒙古自治区分子生物学重点实验室内蒙古大学生命科学学院内蒙古华希生物科技有限公司安徽医科大学基础医学院北京市密云区疾病预防控制中心检验科北京市动物疫病预防控制中心

以不同剂量疫苗免疫小鼠和奶牛,测定小鼠的血清抗体效价,评价其免疫原性;利用大肠杆菌强毒株(LZ06)攻击免疫后动物,测定其死亡率和保护率,评价其保护性;使用生物统计学方法解析小鼠血清抗体效价或者奶牛抗原使用剂量与攻毒保护的关系,... 详细信息

以不同剂量疫苗免疫小鼠和奶牛,测定小鼠的血清抗体效价,评价其免疫原性;利用大肠杆菌强毒株(LZ06)攻击免疫后动物,测定其死亡率和保护率,评价其保护性;使用生物统计学方法解析小鼠血清抗体效价或者奶牛抗原使用剂量与攻毒保护的关系,以找到临床试验研究时免疫保护效果的替代标准.结果显示,疫苗免疫的小鼠血清抗体效价与疫苗剂量有正相关关系;免疫奶牛的疫苗剂量与奶牛攻毒保护率有正相关关系;当大肠杆菌Ig G抗体ELISA效价为1∶6400时,小鼠85%及以上得到保护;当疫苗剂量含大肠杆菌大于等于1×1010菌时,奶牛达到4/5及以上的保护.结果表明,该灭活疫苗免疫小鼠和奶牛后均可产生有效的免疫保护,为奶牛乳房炎大肠杆菌基因缺失灭活疫苗(Z9株)临床试验研究奠定了坚实的理论和技术基础。

关键词：乳房炎大肠杆菌小鼠奶牛疫苗

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饮食动机评估工具的研究与应用进展

军事护理 2024年第4期41卷 85-87页

作者：伍丽娜陈曦宁红婷蒋电陈怡妃冯辉中南大学湘雅护理学院湖南长沙410013

饮食动机指人们出现、调节和维持饮食行为的内在或外在因素,包括生理、心理、社会和环境等因素,对个体的饮食习惯、健康和体质量管理起着重要的作用[1],用于探讨“为什么吃你所吃的”问题[2],以分析人们的饮食行为/模式。它是人们食物... 详细信息

饮食动机指人们出现、调节和维持饮食行为的内在或外在因素,包括生理、心理、社会和环境等因素,对个体的饮食习惯、健康和体质量管理起着重要的作用[1],用于探讨“为什么吃你所吃的”问题[2],以分析人们的饮食行为/模式。它是人们食物选择、进食等饮食行为的深层因素,影响个体饮食结构,最终影响营养健康状况[3]。不健康饮食是增加慢性病发生风险的重要因素,如心血管疾病、糖尿病和癌症等[4]。据《中国居民营养与慢性病状况报告》[5]显示,我国居民不健康饮食普遍存在,饮食结构不合理问题突出,慢性病导致的死亡总占比88.5%,且患病/发病率呈上升趋势,显著加重家庭和社会照护负担,亟需有效措施纠正居民不健康饮食现状。健康饮食的长期依从性差与个体饮食动机密切相关[6-7]。充分了解个体饮食动机特征,有助于后续纠正居民不健康饮食,提高长期依从性,以改善营养健康状况[8]。目前,国内有关饮食动机及其评估工具的研究较少。

关键词：饮食动机食物选择饮食行为评估工具

牛大肠杆菌基因缺失灭活疫苗（Z9株）临床试验研究

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中国兽医学报 2022年

作者：田崇瑜范君文常建华蒋会婷段越强李春和史伯昌谭凌云李欣昱李华斌贺威刘媛郑源强闫芳赵忠鹏山西农业大学动物医学学院北京市动物疫病预防控制中心内蒙古自治区农牧业科学院兽医研究所北京市密云区疾病预防控制中心内蒙古华希生物科技有限公司内蒙古大学生命科学学院内蒙古自治区分子生物学重点实验室内蒙古医科大学安徽医科大学基础医学院

根据临床试验研究批件（2014081）的要求，选择同一奶牛场的健康奶牛570头，分为3组：疫苗组接种400头，超剂量组20头，对照组150头。通过安全性试验、大肠杆菌IgG抗体ELISA效价测定试验、攻毒保护试验、临床型及隐性型乳房炎监测试验...

根据临床试验研究批件（2014081）的要求，选择同一奶牛场的健康奶牛570头，分为3组：疫苗组接种400头，超剂量组20头，对照组150头。通过安全性试验、大肠杆菌IgG抗体ELISA效价测定试验、攻毒保护试验、临床型及隐性型乳房炎监测试验进行疫苗的安全性和有效性评价。结果显示，400头奶牛疫苗免疫后均未出现任何局部及全身不良反应，日产奶量及牛奶品质正常；超剂量组也未出现不良反应。免疫奶牛后抗体效价明显上升，三免后14 d抗体达到高峰(均值约1∶8 128)，至三免后270 d抗体效价仍维持在较高水平(均值约1∶5 370)。免疫后270 d，对奶牛进行攻毒，保护率达90%以上，研究表明，抗体大于1∶3 200仍具有良好的免疫保护力。与对照组相比，疫苗组临床型、隐性型乳房炎的头发病率分别下降2.70%、14.80%，大肠杆菌引起的临床型、隐性型乳房炎的头发病率分别下降2.20%，5.84%。

关键词：

高职院校护理专业“岗课赛证”综合育人路径的探索与实践

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中华护理教育 2024年第7期21卷 834-840页

作者：王秀蓉王娜娜蒋会慧亳州职业技术学院安徽省亳州市236800 广州市老人院护理部广州市510550

“岗课赛证”融合育人是培养高素质技术技能人才的有效模式,是推进新时代职业教育高速高质量发展的重要举措。亳州职业技术学院立足地方特色、把握护理专业特点,深入探索“岗课赛证”综合育人内涵,通过思政引领育人、优化课程结构与资... 详细信息

“岗课赛证”融合育人是培养高素质技术技能人才的有效模式,是推进新时代职业教育高速高质量发展的重要举措。亳州职业技术学院立足地方特色、把握护理专业特点,深入探索“岗课赛证”综合育人内涵,通过思政引领育人、优化课程结构与资源、优化师资队伍建设、推进“岗课赛证”融通、实施多元综合考评,持续推进“岗课赛证”综合育人,可为“一专多能”的复合型护理人才培养提供借鉴。

关键词：职业教育 “岗课赛证”融通护理教育改革综合育人