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细胞凋亡——当前生命科学研究的热点课题

科学通报 1999年第18期44卷 1920-1928页

作者：蒋争凡翟中和北京大学生命科学学院北京100871

细胞凋亡是当前生命科学研究中最热门的领域之一 ,近几年的研究获得了许多重大突破 .对凋亡中的热点问题 ,包括细胞接受胞内外信号的刺激启动凋亡、胞内凋亡特异性蛋白酶caspases的活化、caspases对细胞结构的降解、线粒体及Bcl 2蛋白... 详细信息

细胞凋亡是当前生命科学研究中最热门的领域之一 ,近几年的研究获得了许多重大突破 .对凋亡中的热点问题 ,包括细胞接受胞内外信号的刺激启动凋亡、胞内凋亡特异性蛋白酶caspases的活化、caspases对细胞结构的降解、线粒体及Bcl 2蛋白家族对凋亡的调控等方面的许多令人瞩目的进展做了介绍 .此外 ,还专门介绍了非细胞体系对细胞凋亡研究的重要贡献及植物细胞凋亡的研究进展 .

关键词：细胞凋亡信号转导生命科学线粒体非细胞体系

爪蟾卵非细胞体系诱导凋亡与27kD凋亡相关核酸酶的发现

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北京大学学报（自然科学版） 1998年第2期34卷 324-331页

作者：蒋争凡朱山翟中和北京大学生命科学学院

通过向正常爪蟾卵提取物Ｓ－１５０中加入ｄＡＴＰ和细胞色素ｃ，得到能有效诱导外源细胞核凋亡的非细胞体系。温育在上述非细胞体系中的小鼠肝细胞核表现出明显的凋亡特征。细胞核的绝大部分染色质ＤＮＡ凝集并排出，只在核膜边缘残留... 详细信息

通过向正常爪蟾卵提取物Ｓ－１５０中加入ｄＡＴＰ和细胞色素ｃ，得到能有效诱导外源细胞核凋亡的非细胞体系。温育在上述非细胞体系中的小鼠肝细胞核表现出明显的凋亡特征。细胞核的绝大部分染色质ＤＮＡ凝集并排出，只在核膜边缘残留一些ＤＮＡ成分，而温育体系中充满高度凝集的凋亡小体。这种凋亡小体产生的过程以往工作未见描述。同时，小鼠肝细胞核在卵提取物中发生的形态变化伴随着染色质ＤＮＡ被降解成ＤＮＡｌａｄｄｅｒ。进一步研究发现，卵提取物经ｄＡＴＰ与细胞色素ｃ诱导后，表现出凋亡相关的核酸酶活性，并确认该核酸酶为一２７ｋＤ的蛋白。研究表明，利用爪蟾卵提取物研究细胞核凋亡是一个很好的实验模式。

关键词：爪蟾卵非细胞体系细胞凋亡核酸酶

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爪蟾卵非细胞体系诱导小鼠肝细胞核凋亡

科学通报 1998年第4期43卷 409-413页

作者：蒋争凡朱山翟中和北京大学生命科学学院北京100871

通过向正常爪蟾卵提取物S_150中加入dATP和细胞色素c,得到能有效诱导外源细胞核凋亡的非细胞体系 .温育在上述非细胞体系中的小鼠肝细胞核表现出明显的凋亡特征并形成大量的凋亡小体 .染色质在核膜下凝集形成直径相差较大并相互分离的... 详细信息

通过向正常爪蟾卵提取物S_150中加入dATP和细胞色素c,得到能有效诱导外源细胞核凋亡的非细胞体系 .温育在上述非细胞体系中的小鼠肝细胞核表现出明显的凋亡特征并形成大量的凋亡小体 .染色质在核膜下凝集形成直径相差较大并相互分离的球形区域 ,球形小体通过核膜向外突出 ,并逐渐与核膜分离 .最后 ,细胞核几乎将所有DNA凝集并排出 ,只在核膜边缘残留一些DNA成分 ,而温育体系中充满高度凝集的凋亡小体 .这种凋亡小体产生的过程以往工作未见描述 .同时 ,小鼠肝细胞核在卵提取物中发生的形态变化伴随着染色质DNA被降解成DNAladder.我们的研究表明 ,利用爪蟾卵提取物研究细胞核凋亡是一个很好的实验模式 .

关键词：非洲爪蟾卵提取物细胞凋亡非细胞体系鼠

非细胞体系核重建并非必需核小体与染色质的装配

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中国科学（C辑） 1998年第3期28卷 211-218页

作者：蒋争凡张博翟中和北京大学生命科学学院北京100871

以质粒DNA在爪蟾卵提取物S 1 5 0中进行核小体构建时形成的超螺旋结构检测核小体的形成 ;利用阳离子交换剂CM Cellulose定量结合组蛋白H2A和H2B ;并结合小球菌核酸酶分析核小体的形成 ,研究了爪蟾去膜精子在去除H2A ,H2B的S 1 5 0中的... 详细信息

以质粒DNA在爪蟾卵提取物S 1 5 0中进行核小体构建时形成的超螺旋结构检测核小体的形成 ;利用阳离子交换剂CM Cellulose定量结合组蛋白H2A和H2B ;并结合小球菌核酸酶分析核小体的形成 ,研究了爪蟾去膜精子在去除H2A ,H2B的S 1 5 0中的核重建过程 .结果表明CM Cellulose可有效去除组蛋白并阻止质粒DNA的核小体构建和精子染色质的改建 .但处理后的S 1 5 0与膜泡组分仍可诱导去膜精子进行体外核重建 ,进一步表明非细胞体系核重建与外源DNA长度无关 ;核小体及染色质的组装对于核重建并非必需 .

关键词：非细胞体系装配染色质核重建核小体染色质

应用大肠杆菌染色体DNA在非洲爪蟾卵提取物实现诱导非细胞体系核装配

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实验生物学报 1997年第2期30卷 183-191页

作者：蒋争凡曲健翟中和北京大学生命科学学院北京100871

近年来我们实验室已成功地利用细胞核体外组装的实验模式,将多种生物的DNA在非洲爪蟾卵提取物中实现了非细胞体系核装配。但亲缘关系最远的原核生物的染色体DNA是否也能在此真核体系中进行核装配一直没有报道。我们以大肠杆菌染色体DNA... 详细信息

近年来我们实验室已成功地利用细胞核体外组装的实验模式,将多种生物的DNA在非洲爪蟾卵提取物中实现了非细胞体系核装配。但亲缘关系最远的原核生物的染色体DNA是否也能在此真核体系中进行核装配一直没有报道。我们以大肠杆菌染色体DNA为材料,研究了它诱导的非细胞体系核装配。在光镜与电镜水平观察了核装配的过程。显微分光光度计扫描显示DNA片段在核装配过程中经历了凝集-去凝集的变化。证明大肠杆菌染色体DNA也能诱导爪蟾卵提取物装配成具有典型结构的核。α-^(32)P-dCTP的掺入实验表明重建核具有较高的DNA复制活性。

关键词：大肠杆菌 DNA 非洲爪蟾卵非细胞体系核装配

诱导凋亡的非洲爪蟾卵提取物中激活的DNase特性及其鉴定

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科学通报 1998年第4期43卷 413-418页

作者：朱山蒋争凡张博卢智刚翟中和北京大学生命科学学院北京100871

dATP和细胞色素c加入非洲爪蟾 (Xenopuslaevis)卵提取物 ,可诱导其转化为非细胞凋亡体系 .伴随诱导过程 ,卵提取物表现出凋亡特异的DNase活性 .诱导的酶活性依赖Mg2 + 的存在 ,并被Zn2 + 抑制 .in gel核酸酶试验表明 ,卵提取物中 2 7ku... 详细信息

dATP和细胞色素c加入非洲爪蟾 (Xenopuslaevis)卵提取物 ,可诱导其转化为非细胞凋亡体系 .伴随诱导过程 ,卵提取物表现出凋亡特异的DNase活性 .诱导的酶活性依赖Mg2 + 的存在 ,并被Zn2 + 抑制 .in gel核酸酶试验表明 ,卵提取物中 2 7ku核酸酶与诱导的凋亡特异的DNase特性一致 .与大多数依赖Ca2 + /Mg2 +的DNase不同 ,2 7ku核酸酶可能是一新的DNase.

关键词：细胞凋亡 DNase 非细胞体系非洲爪蟾卵提取物

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细胞色素c诱导胡萝卜细胞核的体外凋亡

科学通报 1999年第11期44卷 1181-1185页

作者：赵允孙英丽蒋争凡翟中和北京大学生命科学学院北京100871

在胡萝卜细胞胞浆提取物CS 10 0中加入Cytc可建成高效诱导细胞凋亡的植物非细胞体系 .在上述诱导体系中 ,温育的胡萝卜细胞核在表现典型的凋亡形态学特征的同时 ,其DNA发生特异降解形成DNALadder,TUNEL实验也说明DNA发生了 3′ OH特异断... 详细信息

在胡萝卜细胞胞浆提取物CS 10 0中加入Cytc可建成高效诱导细胞凋亡的植物非细胞体系 .在上述诱导体系中 ,温育的胡萝卜细胞核在表现典型的凋亡形态学特征的同时 ,其DNA发生特异降解形成DNALadder,TUNEL实验也说明DNA发生了 3′ OH特异断裂 .研究表明 ,CS 10 0非细胞体系是研究植物细胞凋亡机理的一个很好的、方便的实验模式 ;

关键词：细胞凋亡胡萝卜细胞核细胞色素C 体外调亡

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非细胞体系诱导小鼠肝细胞核凋亡的超微观察

电子显微学报 1998年第4期17卷 361-362页

作者：蒋争凡卞婕翟中和北京大学生命科学学院

非细胞体系诱导小鼠肝细胞核凋亡的超微观察蒋争凡卞婕翟中和（北京大学生命科学学院，北京１００８７１）细胞编程性死亡，又称细胞调亡，是细胞的一种基本生命现象，在多种生理和病理过程中具重要作用，可保证有害细胞或多余细胞从多... 详细信息

非细胞体系诱导小鼠肝细胞核凋亡的超微观察蒋争凡卞婕翟中和（北京大学生命科学学院，北京１００８７１）细胞编程性死亡，又称细胞调亡，是细胞的一种基本生命现象，在多种生理和病理过程中具重要作用，可保证有害细胞或多余细胞从多细胞生物体中被清除［１］。肿瘤转化...

关键词：细胞核凋亡非细胞体系诱导细胞凋亡小鼠

Nuclear reassembly in vitro is independent of nucleosome/chromatin assembly

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Science China(Life Sciences) 1998年第5期41卷 512-519页

作者：蒋争凡张博翟中和 College of Life Sciences Peking University Beijing China

It was shown that nuclear reassembly was induced by small pieces of DNA fragments in cell free extracts of Xenopus. In an attempt to learn the relationship between the nuclear reassembly and nucleosome/chromatin assembly, limited amounts of CM Cellulose are used to eliminate the capacity of the egg extract S 150 to assemble chromatin, while the forming of nucleosomes is checked with DNA supercoiling by plasmid DNA pBR322 incubated in the extract, and further analysed by micrococcal nuclease digestion. This depleted extract is then used to induce nuclear reassembly around demembraned sperms with membrane vesicles. It is found that CM Cellulose depletes histones H2A and H2B efficiently and blocks the assembly of nucleosomes, the demembraned sperms are yet reconstituted into nuclei in the treated S 150, although the chromatin in reassembled nuclei does not produce protected DNA fragments when digested with micrococcal nuclease. It suggests that in the cell free system of Xenopus, DNA can be formed into nuclei without assembly of nucleosomes or chromatin.

关键词： Xenopus laevis egg extract S 150 nuclear reassembly pBR322 demembraned sperm nucleosome chromatin.