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多元主体协同下马拉松运动员职业化发展的思考

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体育与科学 2022年第5期43卷 80-86页

作者：刘天茁董维鹏东北师范大学体育学院长春师范大学体育学院

在体育强国的目标下，政府、社会、市场作为马拉松协同发展的主体携手并进，马拉松运动员职业化发展迅速。对我国马拉松运动员职业化发展进行探析，探索马拉松运动员职业化发展过程中产生的问题，以期促进马拉松运动发展和为更多项目体... 详细信息

在体育强国的目标下，政府、社会、市场作为马拉松协同发展的主体携手并进，马拉松运动员职业化发展迅速。对我国马拉松运动员职业化发展进行探析，探索马拉松运动员职业化发展过程中产生的问题，以期促进马拉松运动发展和为更多项目体育职业化改革提供相应的参考。从举国体制主导、市场经济支持和社会资本参与三个方面对马拉松运动员发展现状进行分析，探析政府、市场和社会多元主体协同对马拉松运动员职业化发展的影响，深入思考，厘清多元主体的权责分工，优化多元主体协同的制度保障，建立健全多元主体利益分配机制，加强马拉松品牌赛事的建设，从而进一步推进多元主体协同下马拉松运动员职业化的快速发展。

关键词：多元主体马拉松运动员职业化

PLIN1基因敲除对3T3-L1细胞脂解的影响及机制探究

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PLIN1基因敲除对3T3-L1细胞脂解的影响及机制探究

作者：董维鹏山西医科大学

学位级别：硕士

目的:构建PLIN1基因敲除载体,敲除3T3-L1前脂肪细胞中PLIN1基因,有效降低PLIN1蛋白的表达,研究脂肪细胞中PLIN1基因敲除对脂肪水解的影响,并探究其机制。方法:1.利用CRISPR/Cas9技术,双酶切法构建PLIN1基因敲除载体,DNA测序技术鉴定载体... 详细信息

目的:构建PLIN1基因敲除载体,敲除3T3-L1前脂肪细胞中PLIN1基因,有效降低PLIN1蛋白的表达,研究脂肪细胞中PLIN1基因敲除对脂肪水解的影响,并探究其机制。方法:1.利用CRISPR/Cas9技术,双酶切法构建PLIN1基因敲除载体,DNA测序技术鉴定载体;常规培养3T3-L1前脂肪细胞,PCR扩增PLIN1基因目的片段;sgRNA体外转录,Cas9体外酶切,鉴定sgRNA活性。2.电穿孔转染3T3-L1前脂肪细胞,嘌呤霉素筛选转染成功的细胞;优化的“鸡尾酒”法,诱导3T3-L1前脂肪细胞分化;Western blot检测脂肪细胞中PLIN1蛋白的表达,RT-PCR检测PLIN1 mRNA相对表达量,检验阳性载体的敲除作用。3.油红O染色脂肪细胞中脂滴,测量脂滴大小、读计脂滴数量;酶法测定脂肪细胞中甘油三酯和甘油含量,了解细胞脂解情况;Western blot法检测细胞中脂解酶、Fsp27、PPARγ蛋白表达,RT-PCR检测细胞中HSL、ATGL mRNA相对表达量。结果:1.3个sgRNA均可以识别PLIN1基因靶点,发挥作用,体外酶切活性检测均有效;3个敲除载体的DNA测序结果均与预期一致。2.各组质粒纯度均介于1.8-2.0,浓度在1.5?g/μL左右;电转染后细胞存活率80%,嘌呤霉素4 d杀死细胞的最低浓度是4?g/ml,嘌呤霉素筛选后细胞存活率为30%;完成敲除后,3个阳性敲除组细胞中PLIN1蛋白表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),PLIN1 mRNA相对表达量均明显降低。3.诱导分化完成后,脂肪细胞中脂滴体积增大,在细胞核周围形成明显的“戒环样”结构;与对照组相比,PLIN1基因敲除组中大脂滴数量减少,小脂滴分布广泛,脂滴融合速度减慢;PLIN1基因敲除组细胞中甘油三脂含量(0.0310±0.0053 mmol/g protein)与对照组相比(空白对照组:0.1078±0.0039 mmol/g protein,阴性对照组:0.1256±0.0076 mmol/g protein)明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);PLIN1基因敲除组细胞中甘油含量(0.0984±0.0076 mmol/g protein)与对照组相比(空白对照组:0.0485±0.0131 mmol/g protein,阴性对照组:0.0376±0.0124 mmol/g protein)升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,PLIN1基因敲除组细胞中HSL、ATGL蛋白表达量与mRNA相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与PLIN1基因敲除组细胞中Fsp27、PPARγ蛋白表达量没有明显差异。结论:1.成功构建3个PLIN1基因敲除载体,体外酶切活性检测均有效。2.3个PLIN1基因敲除载体均成功敲除3T3-L1前脂肪细胞中PLIN1基因。3.脂肪细胞中PLIN1基因敲除后,细胞脂解速度加快。4.脂滴表面失去PLIN1蛋白的屏障作用,而脂滴融合速度减慢,小脂滴数量增多,导致脂滴表面积增加,同时脂肪细胞中ATGL、HSL的蛋白表达增加等因素共同作用,导致脂肪细胞脂解速度加快。

关键词：脂解围脂滴蛋白 CRISPR/Cas9 基因敲除 3T3-L1前脂肪细胞

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优秀速度滑冰运动员承受训练负荷水平的研究

优秀速度滑冰运动员承受训练负荷水平的研究

作者：董维鹏吉林体育学院

学位级别：硕士

目的：通过分析和总结优秀速度滑冰运动员的训练负荷结构，参考和借鉴速度滑冰项目已有的专项训练的理论，运用本研究选定的生理生化指标，准确的、及时的了解速度滑冰运动员运动员在所承受的训练负荷影响下身体机能水平的变化情况，即... 详细信息

目的：通过分析和总结优秀速度滑冰运动员的训练负荷结构，参考和借鉴速度滑冰项目已有的专项训练的理论，运用本研究选定的生理生化指标，准确的、及时的了解速度滑冰运动员运动员在所承受的训练负荷影响下身体机能水平的变化情况，即速度滑冰运动员的承受训练负荷水平。从而合理的安排和调整速滑项目的训练计划，避免在训练的过程中出现过度疲劳，减少运动损伤，以达到提高训练的科学性和有效性的效果。方法：本研究以我国优秀速度滑冰运动员男女个五名为实验研究对象，通过分析速度滑冰项目运动员的整体训练负荷的结构，根据速度滑冰运动员自身机体功能的不同和代谢供能系统之间存在的差异，选定优秀速度滑冰运动员身体机能检测以及评定的生理生化指标和生理生化指标方法，以便更加具有针对性的对优秀速度滑冰运动员承受训练负荷的水平进行研究与评定。结果：通过研究选定能够反映速度滑冰项目运动员生理负荷的生理生化指标，对优秀速度滑冰运动员的测试，所测试的结果表明所选定的生理生化指标均可以用来评定运动员承受训练负荷水平的变化情况。结论：通过研究选定标志着速度滑冰运动员生理负荷的生理生化指标，对优秀速度滑冰运动员的测试，评定优秀速度滑冰运动员的承受训练负荷水平，建立反映优秀速度滑冰运动员承受训练负荷水平的评定系统，主要包括对速度滑冰运动员的身体机能水平和专项运动能力有着直接影响作用的心血管系统，内分泌系统，骨骼肌系统及组织损伤，氧转运系统及贫血，物质能量代谢及代谢能力这五个系统，以及各个系统相关的生理生化监测指标，以完成应用生理生化指标对优秀速度滑冰运动员所承受训练负荷水平的综合评定。对提高我国速滑运动竞技能力的研究起到积极作用，同时能间接的推动冰上运动的开展和普及。另外，在探求科学化训练的同时，也能为提高和发展速滑运动员的竞技能力寻求新的发展思路。

关键词：速度滑冰承受训练负荷生理生化指标

我国女子马拉松备战柏林世锦赛高原训练的模式

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武汉体育学院学报 2011年第8期45卷 59-64页

作者：杨明王江董维鹏吉林体育学院竞技研究中心吉林长春130022 山西师范大学体育学院山西临汾041000 国家马拉松队．北京100084

国家女子马拉松队在柏林田径世锦赛上取得了单项和团体冠军的优异成绩,通过对备战过程中的高原训练跟踪与监控,分析与研究我国女子马拉松项目重大比赛前高原训练的特点与规律,针对高原训练开始的时间、高度的选择、高原训练的时间、高... 详细信息

国家女子马拉松队在柏林田径世锦赛上取得了单项和团体冠军的优异成绩,通过对备战过程中的高原训练跟踪与监控,分析与研究我国女子马拉松项目重大比赛前高原训练的特点与规律,针对高原训练开始的时间、高度的选择、高原训练的时间、高原训练负荷的安排、高原训练过程阶段的划分、高原适应期的时间及下高原的时机,结合实践从科研的角度对高原训练的模式再认识。

关键词：马拉松柏林世锦赛高原训练训练模式

下调Fsp27基因表达联合杨梅素干预对3T3-L1细胞脂解的影响

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中国生物工程杂志 2018年第12期38卷 7-13页

作者：董维鹏张少华许祥燕炯山西医科大学公共卫生学院

目的下调脂肪特异性蛋白27(Fsp27)基因表达联合杨梅素干预,观察对3T3-L1细胞中脂质代谢的影响,并探究脂滴发生、发展变化的调控机制。方法常规培养3T3-L1前脂肪细胞,采用“鸡尾酒”法诱导其分化为成熟脂肪细胞。脂质体法转染sh-Fsp27干... 详细信息

目的下调脂肪特异性蛋白27(Fsp27)基因表达联合杨梅素干预,观察对3T3-L1细胞中脂质代谢的影响,并探究脂滴发生、发展变化的调控机制。方法常规培养3T3-L1前脂肪细胞,采用“鸡尾酒”法诱导其分化为成熟脂肪细胞。脂质体法转染sh-Fsp27干扰载体,以杨梅素浓度为100μmol/L的完全培养基干预成熟脂肪细胞72h。油红O染色,观察脂滴形态及大小的变化;酶法测定细胞内甘油及甘油三酯的含量,观察细胞脂质代谢的变化。Westernblot检测Fsp27、激素敏感性甘油三酯脂肪酶(HSL)、甘油三酯脂肪酶(ATGL)以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白的表达。结果1.3T3-L1细胞诱导分化后,形态由纤维样变成圆形,并伴随有细胞体积的增大。2.与对照组相比,杨梅素组和转染组细胞中甘油三酯含量下降,甘油含量升高(P<0.05)。与其他三组相比,联合干预组细胞中甘油三酯含量减少,甘油含量增加(P<0.05)。3.与对照组相比,其余三组细胞内Fsp27蛋白的表达量均降低,ATGL和PPARγ的表达量升高(P<0.05)。另外,联合干预组和杨梅素组细胞内HSL的表达量和p-p38MAPK/p38MAPK的比值均大于sh-Fsp27组和对照组(P<0.05)。结论***27基因沉默与杨梅素联合干预可以更大程度地促进脂肪分解代谢。2.杨梅素可通过激活MAPK信号通路,上调HSL和ATGL的蛋白表达来发挥其促脂解的作用;sh-Fsp27干扰载体通过调节PPARγ和Fsp27蛋白的表达,增加ATGL含量来加速脂肪分解。

关键词：脂肪特异性蛋白 RNA干扰杨梅素 3T3-L1前脂肪细胞脂肪水解

CRISPR/Cas9敲除PLIN1基因增强3T3-L1脂肪细胞的脂解作用

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生物工程学报 2020年第7期36卷 1386-1394页

作者：冯晨毅许祥董维鹏陈朝阳燕炯山西医科大学公共卫生学院山西太原030001

应用CRISPR/Cas9技术敲除3T3-L1前脂肪细胞plin1,观察PLIN1缺失对脂肪细胞中脂肪水解的影响并探究可能机制。常规培养3T3-L1前脂肪细胞,电穿孔法转染plin1敲除载体,嘌呤霉素培养基挑选plin1敲除细胞,观察转染及筛选后的细胞存活率。"鸡... 详细信息

应用CRISPR/Cas9技术敲除3T3-L1前脂肪细胞plin1,观察PLIN1缺失对脂肪细胞中脂肪水解的影响并探究可能机制。常规培养3T3-L1前脂肪细胞,电穿孔法转染plin1敲除载体,嘌呤霉素培养基挑选plin1敲除细胞,观察转染及筛选后的细胞存活率。"鸡尾酒"法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,酶法测定甘油和TG含量,油红O染色观察脂滴形态及数目的变化。Western blotting检测PLIN1、PPARγ、Fsp27和脂肪酶的蛋白表达;RT-PCR检测PLIN1和脂肪酶的mRNA表达。对照组细胞诱导分化后,微小脂滴数目较少,单房脂滴数目较多并围绕细胞核呈环型排列。相较于对照组,敲除组细胞诱导分化后微小脂滴数目增加,单房脂滴体积缩小,数目减少;细胞中PLIN1mRNA及蛋白表达被显著抑制(P<0.05);甘油水平显著上升(0.0984±0.0076),TG含量显著下降(0.0310±0.0053);HSL和ATGL两种脂肪酶的mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05);PPARγ和Fsp27的表达未有明显变化。上述结果表明plin1敲除后通过暴露脂滴中脂质以及上调脂肪酶等效应增强了3T3-L1脂肪细胞的脂解作用。

关键词：脂滴甘油三酯脂肪酶基因敲除

适应城乡一体化发展的农村土地管理制度改革思考

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品牌(下半月) 2012年第1期 14-15页

作者：董维鹏江苏省徐州市丰县国土资源局

本文通过对我国城乡二元体制弊端的分析,结合我国典型试点地区农村土地改革实践经验,对适应城乡一体化发展的农村土地管理制度改革的基本原则、方向和措施等进行了探讨。

关键词：农村土地管理制度改革城乡一体化

多元主体协同下我国竞技体育职业化发展路径的研究

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多元主体协同下我国竞技体育职业化发展路径的研究

第十二届全国体育科学大会

作者：董维鹏长春师范大学

研究目的:2019年《体育强国建设纲要》的颁发,明确了新时期我国体育事业的发展目标,即实现由体育大国向体育强国的转变。而《体育强国建设纲要》的提出,引领了我国竞技体育职业化发展的大方向。我国竞技体育职业化发展过程较为曲折,实... 详细信息

研究目的:2019年《体育强国建设纲要》的颁发,明确了新时期我国体育事业的发展目标,即实现由体育大国向体育强国的转变。而《体育强国建设纲要》的提出,引领了我国竞技体育职业化发展的大方向。我国竞技体育职业化发展过程较为曲折,实行举国体制的竞技体育事业在计划经济的背景之下,促使我国竞技体育飞速发展,但是也存在着一定的问题。而通过国外竞技体育职业化发展的研究可知职业化发展是竞技体育的必经之路。但是,当前我国体育除了许多竞技体育职业化与举国体制的矛盾,单纯的职业化并未完全适应我国体育国情。通过深入分析国外竞技体育职业化的发展经验,探讨如何在体育强国目标下实现我国竞技体育职业化发展,结合我国体育国情,兼并市场经济体制与举国体制,以多元化主体协同发展为基础,探索符合中国体育国情的同事以多元化发展相衔接的新型的竞技体育职业化发展路径,以期为我国竞技体育职业化发展提供借鉴。研究方法:本研究运用文献资料法、问卷调查法、访谈法、实地考察法等研究方法,深入探析国外竞技体育职业化发展经验及我国竞技体育职业发展现状。研究从竞技运动员系统化服务保障体系构建、竞技运动员选材的机制构建、竞技运动员训练管理机制的构建、竞技运动员竞赛体系的构建、竞技运动员激励机制的构建等5个方面提出构建多元主体协同下竞技体育职业发展路径的构建。同时,结合国外竞技体育职业化发展经验,在"体育强国"建设大背景下,提出以市场经济体制与举国体制相融合,多元主体协同下我国竞技体育职业化发展路径。研究结果:1.竞技运动员系统化服务保障体系的构建。主要针对当前社会保障、商业保障、自我保障三个方面的内容。在现有的国家社会保障的基础上,进一步完善职业运动员的社会保险、医疗、就业等服务保障体系。同时,兼并多元化商业保障资源,融合商业经济资源和体育竞赛品牌赛事的经济效益,进一步带动体育职业经济公司的发展,充分发挥体育市场经济的作用,为竞技体育职业化发展提供强有力的经济支持和全面的训练服务保障,促进竞技体育的市场化发展,最大限度做好竞技体育的市场价值的开发,做好竞技体育与多元化市场经济的相互协同与相互发展。另外,渐进性完善竞技体育职业化相关法律法规内容,同时建立相应职业运动员协会（或工会）等服务保障机构,确保竞技运动员服务保障出现问题时有法可依,有组织可寻,确保运动员可以更好的做好基本自我保障。2.竞技运动员选材的机制构建。主要根据竞技体育不同的项目规律和项目特点,在竞技体育项目发展适应的年龄阶段进行科学的选材,进一步发挥家庭体育、社区体育、学校体育的作用,鼓励和支持社会化、商业化俱乐部做好青少年体育的启蒙和培养。同时,完善不同年龄阶段的竞赛选拔和竞技体育人才培养、输送机制,借助商业俱乐部的市场资源开发和服务保障优势,加强竞技体育"体制内"与"体制外"人才的梯队建设,保障竞技体育人才储备充足,以促进竞技体育的可持续发展。3.竞技运动员训练管理机制的构建方面,充分发挥行业协会的监督和引导作用,推动竞技体育职业化发展进程,进一步做好竞技体育的市场开发,整合举国体制和市场经济体制下的多样化资源,为竞技运动员提供多元化、全方位的训练服务保障,对竞技运动员进行不同体制下的联合培养。同时,充分发挥行业协会的职能和作用,加强商业俱乐部、商业赛事等内容的监管,并出台相应商业的俱乐部、商业赛事的管理办法,保障竞技体育职业化管理机制的健全和行业项目的健康发展。4.竞技运动员竞赛体系的构建方面,在现有的竞赛体系的基础上,进一步完善竞技体育全面化职业联赛发展进程,整合多元化市场经济资源,引导举国体制下赛事发展向市场经济体制下职业化联赛方向发展,充分发挥商业品牌赛事效应优势,调动竞技体育项目的商业价值开发,助力竞技体育人才的选拔和竞技体育项目的可持续发展。5.竞技运动员激励机制的构建,通过马斯洛需要层次理论进行分析,对竞技运动员的生存保障问题、职业化发展规划问题、职业化归属问题、竞技运动员职业化等级划分问题、竞技运动员职业化自我价值实现等五个方面进行分析。将举国体制与市场经济体制下资源进行融合,通过进一步优化的保障体系和奖励机制,激励竞技运动员在职业化生涯长久发展。结论:竞技体育职业化发展路径必将经历举国体制与市场经济体制等多元化主体协同的资源融合的过程。竞技体育职业化的发展需要市场,俱乐部,国家的帮助,无论是单轨制还是双轨制或者多轨制,政府和市场的支持是竞技体育职业化的动力和保障,通过竞技运动员系统化服务保障体系构建、竞技运动员选材的机制构建、竞技运动员训练管理机制的构建、竞技运动员竞赛体系的构建、竞技运动员激励机制的构建等5个方面提出构建多元主体协同下竞技体育职业发展路径的构建,将进一步推进我国竞技体育职业化的发展进程,为竞技体育的可持续化发展提供有力支持。

关键词：多元主体协同竞技体育职业化

来源： cnki会议评论

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优秀马拉松运动员专项战术的研究

青少年体育 2014年第12期 57-58页

作者：董维鹏吉林师范大学博达学院体育系吉林四平136000

马拉松项目是运动项目中的传统项目,拥有非常久远的历史.马拉松运动能够将人的力量、速度、耐力展现出来.随着马拉松运动的不断发展,运动员的竞技水平不断提高,马拉松竞技比赛的世界纪录不断被刷新,这对于运动员而言,不仅要拥有超乎常... 详细信息

马拉松项目是运动项目中的传统项目,拥有非常久远的历史.马拉松运动能够将人的力量、速度、耐力展现出来.随着马拉松运动的不断发展,运动员的竞技水平不断提高,马拉松竞技比赛的世界纪录不断被刷新,这对于运动员而言,不仅要拥有超乎常人的身体素质,同时还要讲究战术的运用以及实际比赛中的状态发挥.由于马拉松运动是一项以人为本的运动。

关键词：马拉松运动运动员战术传统项目运动项目人的力量竞技水平世界纪录