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作者：董瑞萍南京医科大学

学位级别：硕士

2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2, S. suis 2)是一种重要的人兽共患病病原。该菌不仅能引起猪疫病,给全世界养猪业造成巨大的威胁,而且严重影响着公共卫生安全。人类可通过直接接触感染该菌,导致脑膜炎、败血症、心内膜炎等... 详细信息

2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2, S. suis 2)是一种重要的人兽共患病病原。该菌不仅能引起猪疫病,给全世界养猪业造成巨大的威胁,而且严重影响着公共卫生安全。人类可通过直接接触感染该菌,导致脑膜炎、败血症、心内膜炎等,严重可致死亡。我国是本病的重灾区,1998年和2005年,我国江苏省和四川省分别发生S. suis 2暴发流行感染猪和人的公共卫生事件,患者中出现高比例的、国内外罕见的链球菌中毒性休克综合征(streptococcal toxic shock syndrome, STSS),病情凶险,病死率高达81.3%～97.4%。如此反复密集的爆发人感染2型猪链球菌事件,并造成严重后果,使得该病原菌的分子致病机制研究倍受国内外学者关注。S. suis 2的不同分离株致病性具有很大差异,可能与其毒力因子密切相关。已知荚膜多糖(Capsular polysaccharide, CPS)是S. suis 2极为重要的毒力因子,无荚膜突变株在体外极易被猪肺巨噬细胞吞噬,经鼻粘膜接种仔猪无致病性。S. suis 2的CPS由5种单糖组成,分别为葡萄糖、半乳糖、鼠李糖、N-乙酰葡糖胺和N-乙酰神经氨酸。其中,N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)又称唾液酸,是一种已在多种致病菌中被证实的毒力因子,该组分在S. suis 2中的致病作用尚不明确。本课题组对2005年四川流行的强致病株05ZYH33进行了全基因组测序和组功能注释。生物信息学分析结果显示,05ZYH33中含有唾液酸合成酶编码基因neuB。同源比对发现,05ZYH33的唾液酸合成酶NeuB与无乳链球菌中的唾液酸合成酶序列一致性高达91%。为探讨唾液酸在S. suis 2致病过程中的作用,本研究以强致病株05ZYH33为对象,唾液酸合成酶编码基因neuB为靶标,利用同源重组方法获得了neuB基因敲除突变株,对其进行深入细致的生物学功能研究。其实验内容和结果主要包括以下几个方面:1. 05ZYH33 neuB基因敲除突变株的构建:以S. suis 2强致病株05ZYH33基因组DNA为模板,PCR扩增neuB基因的上下游片断;同时以pSET2穿梭质粒DNA为模板,PCR扩增壮观霉素抗性基因Spcr,在限制性内切酶和T4连接酶的作用下,将它们依次克隆到pUC18载体的多克隆位点上,形成一个在Spcr两侧具有与靶基因同源序列的neuB基因敲除载体LSR- pUC18。将LSR- pUC18电转化05ZYH33感受态细菌,筛选具有壮观霉素抗性的S. suis 2菌落,扩大培养后提取基因组DNA,采用组合PCR验证和Southern杂交的方法证实neuB基因已被Spcr替换掉,从而获得具有壮观霉素抗性的neuB基因敲除突变株ΔneuB。2.基因敲除突变株ΔneuB的生物学特性研究:在相同的条件下,观察S. suis 2野生株05ZYH33与突变株ΔneuB的基本生物学性状的差异。结果发现,neuB基因敲除后,细菌能稳定生长,壮观霉素抗性表型能够在突变株中稳定传代。同时,neuB的缺失未明显影响细菌的菌落形态、溶血活性以及染色特性等生物学特性。但是与野生株05ZYH33相比,突变株ΔneuB的唾液酸含量明显下降,表面结构组分发生了显著变化,荚膜变薄,质地更加紧密;抗血清凝集特性也发生了改变,凝集时间明显延长;生长曲线中的延滞期延长,导致生长曲线右移;全血存活能力下降、黏附及侵袭能力有所提高。3. neuB缺失对细菌毒力的影响及免疫保护性试验:①用同等剂量(1mL)的野生株05ZYH33(108CFU)、突变株ΔneuB(108CFU)和THB分别腹腔注射BALB/c小鼠。结果发现,野生株05ZYH33组10只小鼠中有8只死亡,而neuB缺失的突变株组10只小鼠全部存活,仅部分小鼠轻微发病,THB阴性对照动物无明显发病或异常表现。②用同等剂量(1mL)的突变株ΔneuB(108CFU)和THB分别腹腔注射BALB/c小鼠,共免疫三次,其后腹腔注射野生株05ZYH33(108CFU)。结果发现,THB对照组10只小鼠全部死亡,ΔneuB免疫组10只小鼠中有7只死亡,突变株ΔneuB无明显的免疫保护作用。以上研究结果提示菌体荚膜中的唾液酸对于猪链球菌2型侵袭和致病具有重要作用。

关键词： 2型猪链球菌唾液酸基因敲除生物学特性致病性

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中国江苏地区慢性粒细胞白血病患者KIR基因多态性的研究

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中国输血杂志 2010年第S1期23卷 146-147页

作者：董瑞萍戴宇东南京红十字血液中心 210008

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针灸与穴位注射药物治疗肝癌疼痛51例

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陕西中医 2008年第3期29卷 347-348页

作者：刘秀艳董瑞萍河北省唐山市丰润区中医院肝病科 064000

目的:观察针灸与穴位注射药物治疗肝癌疼痛的疗效。方法:治疗组51例,采用针灸与穴位注射药物,先针刺双曲泉、双肝俞、双心俞、大椎,再穴位注射丹参注射液,最后艾灸。对照组51例采用WHO推荐的三阶梯药物止痛法。结果:治疗组的总有效率96.... 详细信息

目的:观察针灸与穴位注射药物治疗肝癌疼痛的疗效。方法:治疗组51例,采用针灸与穴位注射药物,先针刺双曲泉、双肝俞、双心俞、大椎,再穴位注射丹参注射液,最后艾灸。对照组51例采用WHO推荐的三阶梯药物止痛法。结果:治疗组的总有效率96.08%,对照组92.15%(P<0.05)。提示:针灸与穴位注射药物合用具有益气活血、通络止痛的功效,可缓解肝癌疼痛。

关键词：肝肿瘤/针灸疗法肝肿瘤/外科疗法疼痛/并发症穴,曲泉穴,肝俞

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慢性粒细胞白血病患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体基因多态性的研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2013年第4期33卷 490-493页

作者：董瑞萍杜海林戴宇东南京红十字血液中心研究室江苏南京210003

目的:了解慢性粒细胞白血病(CML)患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)基因型及单倍型,为探讨KIR在慢性粒细胞白血病中发挥的作用奠定基础。方法:采用PCR-SSP方法对84例慢性粒细胞白血病患者进... 详细信息

目的:了解慢性粒细胞白血病(CML)患者杀伤细胞免疫球蛋白样受体(killer cell immunoglobulin-like receptor,KIR)基因型及单倍型,为探讨KIR在慢性粒细胞白血病中发挥的作用奠定基础。方法:采用PCR-SSP方法对84例慢性粒细胞白血病患者进行KIR基因分型。结果:框架基因2DL4、3DL2、3DL3及3DP1存在于所有个体中,其他较为高频的基因依次为2DL1、2DL3、2DP1及3DL1,表型频率均>80%。CML患者的KIR2DL2和KIR2DS2表型频率较健康人有所降低,但除2DL5B(OR=0.208,P<0.05)外,分析的所有基因在CML患者和健康人间的分布均不具有显著差异。结论:基因KIR2DL5B可能与CML之间存在相关性。

关键词：慢性粒细胞白血病 KIR基因多态性

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核心素养视域下学生语文思维能力的培养探究

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华夏教师 2023年第32期 20-22页

作者：董瑞萍江西省景德镇市第十二小学

在新课程改革的大背景下,培养学生核心素养成为语文学科教育教学的终极目标,思维品质作为语文核心素养的四个维度之一,对学生的语文学习有着关键性影响。在新时代的背景下,国家对创新人才的需求不断增长,教育教学应当顺应时代发展的脚步... 详细信息

在新课程改革的大背景下,培养学生核心素养成为语文学科教育教学的终极目标,思维品质作为语文核心素养的四个维度之一,对学生的语文学习有着关键性影响。在新时代的背景下,国家对创新人才的需求不断增长,教育教学应当顺应时代发展的脚步,成为培育人才的摇篮。本文围绕着“核心素养视域下学生语文思维能力的培养”这一主题,论述了培养思维能力的必要性、应用原则以及实践路径,旨在提升小学语文教学质量。

关键词：核心素养语文教学思维能力

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中药熏洗配合功能锻炼治疗四肢骨折后期功能障碍50例的体会

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贵阳中医学院学报 2012年第3期34卷 103-104页

作者：董瑞萍唐山市丰润区中医医院河北唐山064000

骨折是骨科最常见的疾病之一,由于骨折部位出血,周围组织损伤,骨折术后较长时间的肢体制动,常导致损伤部位及关节粘连、挛缩,甚至强直,造成肢体功能障碍。笔者自2009年6月～2010年6月采用中药熏洗配合中药熏洗治疗50例,取得良好的效果。

关键词：四肢骨折功能障碍中药熏洗中药熏洗

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葡萄白粉病的发生与防治措施

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农业科技与信息 2011年第13期 35-36页

作者：董瑞萍焉耆县林业局新疆焉耆841100

葡萄白粉病菌是北方干旱种植区发生的一种病害,近几年随着栽培面积扩大,白粉病危害程度逐渐上升,影响果品产量、质量下降,给果农造成很大的损失。

关键词：葡萄白粉病发生防治

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论环境污染事故的应急监测

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能源研究与管理 2011年第4期 43-45页

作者：董瑞萍江西省瑞昌市环境监测站江西瑞昌332200

应急处理能力是处理突发污染事故的首要环节,针对目前环境污染事故中应急监测存在的不足,本文提出了应急监测和在现场处理中的建议和要求,明确了建立先进的环境应急监测预警体系,完善事故应急预案,做好应急监测的准备,是对污染事故进行... 详细信息

应急处理能力是处理突发污染事故的首要环节,针对目前环境污染事故中应急监测存在的不足,本文提出了应急监测和在现场处理中的建议和要求,明确了建立先进的环境应急监测预警体系,完善事故应急预案,做好应急监测的准备,是对污染事故进行及时、正确的处理、处置和制定恢复措施提供科学的决策依据。

关键词：应急监测突发性环境污染事故处置能力

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一例剖宫产术后急性结肠假性肠梗阻患者的护理

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中国城乡企业卫生 2013年第6期28卷 86-87页

作者：董瑞萍天津市中心妇产科医院产科天津300100

目的一例剖宫产术后发生急性结肠假性肠梗阻患者的护理体会。方法对2012年12月一例剖宫产手术后发生的肠梗阻患者进行观察、治疗和护理分析。结果对确诊为低位完全性肠梗阻患者,经及时治疗痊愈,未造成其它后果。结论护理人员平时应加强... 详细信息

目的一例剖宫产术后发生急性结肠假性肠梗阻患者的护理体会。方法对2012年12月一例剖宫产手术后发生的肠梗阻患者进行观察、治疗和护理分析。结果对确诊为低位完全性肠梗阻患者,经及时治疗痊愈,未造成其它后果。结论护理人员平时应加强对患者病情的观察,了解患者有无便秘史,并对患者进行必要的饮食、作息指导。与此同时,保持与医生之间的有效沟通,及时反映临床患者的主诉与体征,尽量减少术后肠梗阻的发生。

关键词：剖宫产术急性结肠假性肠梗阻护理体会

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果园化学农药安全使用时应注意的几点

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农业科技与信息 2011年第13期 32-33页

作者：董瑞萍焉耆县林业局新疆焉耆841100

化学农药在果园有害生物的应急防控工作中有着不可替代的地位和作用，果农为了提高果品质量，盲目大量使用农药，由于使用方法不当，不但增加了投资，甚至在生产中造成了一些严重的负面作用：污染环境，减产，影响果品安全，对人民群众... 详细信息

化学农药在果园有害生物的应急防控工作中有着不可替代的地位和作用，果农为了提高果品质量，盲目大量使用农药，由于使用方法不当，不但增加了投资，甚至在生产中造成了一些严重的负面作用：污染环境，减产，影响果品安全，对人民群众的生命健康构成了严重威胁，人畜中毒事件时有发生等。

关键词：农药安全使用化学农药果园有害生物果品质量污染环境负面作用果品安全

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