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不同抗骨髓瘤纳米疫苗的制备及其诱导的免疫应答研究

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不同抗骨髓瘤纳米疫苗的制备及其诱导的免疫应答研究

作者：董文娟电子科技大学

学位级别：硕士

MART-1疫苗多肽特异性的细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cell,CTL)能有效裂解表达HM1.24的多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞,但是该多肽的半衰期较短,以致其免疫原性较差,不能有效诱导肿瘤特异性CTL免疫应答的产生。寻找疫苗多肽的优... 详细信息

MART-1疫苗多肽特异性的细胞毒性T细胞(Cytotoxic T cell,CTL)能有效裂解表达HM1.24的多发性骨髓瘤(Multiple myeloma,MM)细胞,但是该多肽的半衰期较短,以致其免疫原性较差,不能有效诱导肿瘤特异性CTL免疫应答的产生。寻找疫苗多肽的优良载体以保护疫苗多肽快速有效的到达抗原递呈细胞(Antigen-presenting cell,APC),以被APCs快速大量摄取与加工递呈,是提高抗肿瘤疫苗疗效的关键研究策略。脂质体(Liposome,LP)和非离子表面活性剂囊泡(Nonionic surfactant vesicle,NS)是最常用的纳米递送系统,具有生物相容性、生物可降解性、靶向性、延长血液循环时间、低毒性等优点。更重要的是,其可以模拟肿瘤细胞的尺寸、形态等特性,能最大程度的激活抗肿瘤免疫反应以消除肿瘤细胞。因此,本研究利用LP和NS包载MART-1多肽,研究这两种纳米疫苗诱导MART-1特异性CTL免疫应答的效果以及差异,为进一步研究和推广肿瘤纳米疫苗奠定基础。研究方法:(1)建立反相高效液相色谱法(RP-HLPC)测定MART-1的体外分析方法,并采用薄膜分散法制备MART-1脂质体纳米疫苗(MART-1-LP)和MART-1类脂囊泡纳米疫苗(MART-1-NS),以及利用正交试验优化纳米疫苗的制备处方和工艺。最后,对所制备得到的MART-1-LP和MART-1-NS进行包括外观、形态、粒径、Zeta电位、多分散系数(Polydispersity indices,PDI)、包封率以及载药量等药剂学性质方面的表征。(2)采用健康供者外周血作为标本,从中分离外周血单个核细胞(Peripheralblood mononuclear cell,PBMNC)。其中一部分用于冻存,用作T细胞来源使用;另一部分进行体外培养、诱导形成非成熟树突状细胞(Immature dendritic cell,imDC)后,将其平均分成7个实验组,每个组分别给予MART-1-LP、MART-1-NS、空白LP(LP-Blank)、空白NS(NS-Blank)、游离MART-1(MART-1-PBS)、PBS以及阳性给药处理,以刺激、诱导形成成熟DC(Mature dendritic cell,mDC)。此后,将诱导形成的各组mDCs,分别与等量的T细胞(之前冻存备用的PBMNCs)共同培养,以进行DCs细胞刺激特异性T细胞活化增殖。最后,收集各组T细胞,并分离出各组CD56CD8T细胞,研究并比较各组活化的特异性CD56CD8CTL细胞的数目、颗粒酶B(granzyme B)的量、DC细胞表面成熟相关标志物的表达。研究结果与结论:(1)本研究通过薄膜分散法制备了MART-1-LP,并通过正交试验优化了MART-1-LP的制备处方和工艺。结果显示,MART-1-LP的最优制备处方和工艺是磷脂终浓度为10μg/mL、磷脂与胆固醇质量比为6:1、多肽终浓度为1mg/mL以及水合时间为30min。(2)本研究通过RP-HLPC建立了MART-1的体外分析方法,并通过粒径分析仪和透射电镜对制备的MART-1-LP和MART-1-NS进行了表征。结果显示,MART-1-LP和MART-1-NS的平均包封率分别为49.4%、52.89%,平均载药量分别为4.06%、6.22%,平均粒径分别为192.4nm、207.50nm,平均Zeta电位分别为-9.41mv、-12.50mv,平均PDI分别为0.27、0.15。(3)本研究通过体外人源细胞实验检测了MART-1-LP、MART-1-NS和MART-1-PBS等诱导的CTL免疫应答。结果显示,MART-1-LP和MART-1-NS均能显著促进CD80在DC表面的表达,并能显著提高CD56CD8CTLs数目,且这些CD56CD8CTLs会产生大量的granzyme B。

关键词： MART-1aa26-35*A27L 多发性骨髓瘤纳米疫苗脂质体类脂囊泡

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论日本宪政文化对民初中国立宪的影响

论日本宪政文化对民初中国立宪的影响

作者：董文娟湘潭大学

学位级别：硕士

宪政文化源远流长,宪政思想可以追溯到古希腊,具体的宪法制度产生要晚一些,英国被视为宪法制度的最早发源地。宪政文化之于亚洲国家而言是“舶来品”,十九世纪中期才传入中国。中国和日本相邻而处,日本曾在很长一段时间里学习中国法律文... 详细信息

宪政文化源远流长,宪政思想可以追溯到古希腊,具体的宪法制度产生要晚一些,英国被视为宪法制度的最早发源地。宪政文化之于亚洲国家而言是“舶来品”,十九世纪中期才传入中国。中国和日本相邻而处,日本曾在很长一段时间里学习中国法律文化,受到中国传统文化影响十分深远。近代两国宪政文化发展差距增大,日本宪政文化在清末民初之时影响着中国宪政的发展。日本明治维新取得成功,1889年颁布了明治宪法。清政府直至20世纪初,才迫于国内外的压力宣布预备立宪,立宪从形式到内容都受到日本宪政文化的影响。然而,清廷始终不肯放弃封建专制制度和其统治地位,最终被辛亥革命的浪潮所颠覆。1912年1月1日,中华民国成立,以孙中山为代表的革命派主张民主共和制,《中华民国临时约法》的颁布正是这一宪政思想的体现。民初,中国政局动荡不安,政治的变革影响着宪政的发展。一方面,袁世凯任大总统以后,干涉立宪、聘请宪法顾问并借鉴日本宪法理论为其称帝提供法理基础,日本宪政文化在这一时期影响力增大;另一方面,随着留日法科学生的归国,他们有的在政府担任要职、有的在大学教授法律,也使得日本宪政文化继续影响着中国。日本宪政文化影响民初中国立宪的内容主要是在君主立宪制度、国家元首制度、预算制度和公民权利等方面。袁世凯政府之所以借鉴日本以上制度,为的是扩大总统权力,从而满足个人的政治野心。民初,日本宪政文化对中国的影响有着延续性和浓厚的功利色彩,对中国之后的宪政发展有一定的负面作用,宪法沦为争权夺利的工具,而不是控制国家权力和保障公民权利的利器。

关键词：民国初期日本宪政文化中国影响

猕猴桃果实后熟软化过程中己糖激酶基因的表达分析

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食品科学 2024年第9期45卷 189-196页

作者：董文娟陈明向妙莲陈金印曾教科江西农业大学农学院江西省果蔬保鲜与无损检测重点实验室江西南昌330045

为解决猕猴桃果实采后快速软化问题,本研究以‘红阳’猕猴桃果实为材料,探究10 mmol/L N-乙酰-D-葡萄糖胺(N-acetyl-D-glucosamine,NAG)对猕猴桃后熟软化过程中基本生理变化、己糖激酶(hexokinase,HXK)活性和AcHXKs基因表达的影响。结... 详细信息

为解决猕猴桃果实采后快速软化问题,本研究以‘红阳’猕猴桃果实为材料,探究10 mmol/L N-乙酰-D-葡萄糖胺(N-acetyl-D-glucosamine,NAG)对猕猴桃后熟软化过程中基本生理变化、己糖激酶(hexokinase,HXK)活性和AcHXKs基因表达的影响。结果表明,与对照组(CK组)相比,外源NAG处理可有效降低猕猴桃的呼吸速率和乙烯释放量,延缓其硬度和总酸含量的下降以及果胶和淀粉的水解,维持较低的可溶性固形物含量。与CK组相比,NAG能够同时抑制HXK活性和AcHXK3表达水平,进而影响糖代谢和呼吸代谢过程。此外,AcHXK7~AcHXK9基因被NAG诱导上调表达,且表达量与硬度显著正相关,其可能作为糖信号分子介导猕猴桃后熟软化进程。综上,AcHXK3、AcHXK7~AcHXK9受NAG诱导差异表达,进而发挥催化和调节功能,延缓猕猴桃后熟软化。本实验结果可为猕猴桃后熟软化机制提供理论依据,也为猕猴桃保鲜技术的研发提供新思路。

关键词：猕猴桃 N-乙酰-D-葡萄糖胺后熟软化己糖激酶

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从千亿向万亿:全球气候治理中的资金问题

气候变化研究进展 2023年第5期19卷 653-662页

作者：谢璨阳董文娟王灿清华大学环境学院北京100084 清华大学气候变化与可持续发展研究院北京100084

当前全球金融系统仍然未能有效驱动金融资源支持气候行动,具体表现为全球气候融资规模与《巴黎协定》下温升控制目标所对应的资金需求之间存在着数量级的资金缺口。多年来《联合国气候变化框架公约》(以下简称《公约》)下的资金谈判一... 详细信息

当前全球金融系统仍然未能有效驱动金融资源支持气候行动,具体表现为全球气候融资规模与《巴黎协定》下温升控制目标所对应的资金需求之间存在着数量级的资金缺口。多年来《联合国气候变化框架公约》(以下简称《公约》)下的资金谈判一直围绕发达国家对发展中国家的资助展开,然而在2022年《公约》第27次缔约方会议(COP27)上,除了在长期气候资金、新的集体量化目标、损失和损害资金3个“资助”议题下形成了单独决定之外,大会还开启了《巴黎协定》2.1 (c)条的讨论窗口,呼应了全球金融系统改革。这标志着《公约》下气候资金的内涵拓展到了广义的气候资金和系统性解决方案,即如何在全球范围内调动更多的气候资金来响应贫穷国家和气候脆弱国家的急迫需求,以及《巴黎协定》温升控制目标所对应的广义资金需求。目前来看,这一转变既有可能模糊《公约》下资金谈判焦点和共同但有区别的责任原则,又使资金议题谈判的内容进一步泛化,超越《公约》的边界,与发展中国家债务减免、全球金融体系改革等议题紧密关联。针对正在发生的变革,我国应积极准备有关《巴黎协定》2.1(c)条相关内容的谈判,把握全球金融系统变革的重大机遇,积极参与新资金机制的讨论以及国际标准和规则制定。

关键词：全球气候治理资金机制 COP27 《巴黎协定》2.1(c)条全球金融系统转型

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乳液聚合制备丙烯酸十八酯共聚物及性能研究

乳液聚合制备丙烯酸十八酯共聚物及性能研究

作者：董文娟北京化工大学

学位级别：硕士

丙烯酸酯共聚物乳液制备简便、性能优异,因绿色环保,使其在涂料、粘合剂、纺织整理涂层等领域得到广泛应用。丙烯酸高碳醇酯共聚物,不仅具有优异的超疏水性、极低的表面能,而且比市售丙烯酸共聚物胶乳具有更好的“透汽性”,在纺织整理... 详细信息

丙烯酸酯共聚物乳液制备简便、性能优异,因绿色环保,使其在涂料、粘合剂、纺织整理涂层等领域得到广泛应用。丙烯酸高碳醇酯共聚物,不仅具有优异的超疏水性、极低的表面能,而且比市售丙烯酸共聚物胶乳具有更好的“透汽性”,在纺织整理涂层和非硅类离型剂中的应用备受青睐,但丙烯酸高碳醇酯单体因其具有强疏水性因此很难在乳液聚合过程中实现“单体液滴→水相→胶束或乳胶粒中”的扩散,导致其单体转化率较低,难以超过50%,使丙烯酸高碳醇酯的应用受限。本研究以长碳链乳化剂为主乳化剂,通过长碳链乳化剂与丙烯酸十八酯(SA)的疏水相互作用,将SA单体从单体液滴“摆渡”到胶束或乳胶粒表面,协助其与其它丙烯酸酯单体成功实现乳液共聚合,并探究了丙烯酸十八酯共聚物乳胶膜的隔离性能及消光性能,有望在离型剂和消光涂料中得到应用。论文主要工作如下:(1)由于SA沸点高(400.2℃),其真实转化率的测定已经不能沿用现有的国家标准进行测定(烘干减重法),针对该问题,本论文首先比较了三种单体转化率测定方法(烘干减重法、索氏提取法、核磁计算法)的准确性及便捷性。结果表明:索氏提取法更适于用作有高沸点单体参与的乳液聚合中单体转化率的测定。(2)为了便于研究SA参与的乳液聚合,在乳液聚合体系中引入苯乙烯(St)单体共聚,在长碳链阴离子乳化剂N-3203N和非离子乳化剂N-390的共同作用下,通过预乳化半连续种子乳液聚合工艺制备了苯丙乳液共聚物。考察了乳化剂用量(N-390用量保持不变,改变N-3203N用量)、引发剂用量等对乳液聚合稳定性、单体转化率的影响。结果表明:当N-3203N用量为4 wt%、APS用量为0.6 wt%时,所得乳液聚合稳定性最优,SA转化率可达86.92%。(3)在SA参与苯丙乳液共聚的研究基础上,以丙烯酸丁酯(BA)、甲基丙烯酸甲酯(MMA)、丙烯酸十八酯(SA)、丙烯酸(AA)为单体,以长碳链乳化剂N-3203N和N-390为复配乳化剂,以APS为引发剂、Na HCO为p H缓冲剂,通过预乳化半连续种子乳液聚合工艺成功制备了柔韧性好、聚合稳定性好、SA转化率高的纯丙乳液共聚物,并用FTIR、DSC、TG、XRD等对共聚物进行了表征。通过改善聚合条件提高聚合稳定性,在N-3203N用量为4 wt%,APS用量为0.5 wt%,Na HCO用量为0.2 wt%时,所得乳液的聚合稳定性最好、单体转化率最高,此时聚合过程的絮凝率达到最小值为1.27%,SA转化率最高达83.98%。(4)研究了共聚物乳胶膜的隔离性能及消光性能。随着SA用量的增加,共聚物乳胶膜的表面张力、光泽度、胶带与乳胶膜之间的180°剥离强度大幅降低。当SA用量从0 wt%增加到30 wt%时,乳胶膜表面张力从38 m N/m降为32 m N/m,胶带在乳胶膜上的180°剥离强度从8.6N/24mm减小到0 N/24mm,光泽度从88.7°降至47.3°。表明SA的引入可以提高丙烯酸酯共聚物乳胶膜的隔离性能和消光性能,所得胶乳有望用于制备离型剂和消光涂料。

关键词：提高转化率常规乳液聚合丙烯酸十八酯长碳链乳化剂隔离性能消光性能

穿山龙总皂苷对胶原诱导关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子、血管生成素-2及受体Tie-2表达的影响

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中国药学杂志 2013年第2期48卷 101-105页

作者：董文娟郭亚春宋鸿儒承德医学院病原生物学教研室河北承德067000

目的观察穿山龙总皂苷对胶原诱导关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子、血管生成素2及其受体Tie-2的影响,探讨穿山龙总皂苷治疗类风湿关节炎的抗血管新生机制。方法建立胶原诱导关节炎大鼠模型,动物随机分为空白对照组、胶原诱导关节炎模型... 详细信息

目的观察穿山龙总皂苷对胶原诱导关节炎大鼠滑膜血管内皮生长因子、血管生成素2及其受体Tie-2的影响,探讨穿山龙总皂苷治疗类风湿关节炎的抗血管新生机制。方法建立胶原诱导关节炎大鼠模型,动物随机分为空白对照组、胶原诱导关节炎模型组、穿山龙总皂苷组、雷公藤多苷组(作为阳性对照组)和薯蓣皂苷元组,采用实时荧光定量PCR方法检测大鼠膝关节滑膜血管内皮生长因子mRNA的表达情况,采用免疫组织化学方法检测大鼠膝关节滑膜血管生成素-2及其受体Tie-2蛋白的表达。结果胶原诱导关节炎模型组大鼠滑膜血管内皮生长因子mRNA、血管生成素-2及Tie-2蛋白表达明显高于空白对照组(P<0.01),经穿山龙总皂苷、雷公藤和薯蓣皂苷元治疗后血管内皮生长因子mRNA和血管生成素-2表达均低于胶原诱导关节炎模型组(P<0.01);而Tie-2表达呈降低趋势,差异无统计学意义。穿山龙总皂苷组血管内皮生长因子mRNA表达比雷公藤组和薯蓣皂苷元组血管内皮生长因子mRNA明显降低(P<0.01)。结论穿山龙总皂苷可能通过降低滑膜血管内皮生长因子mRNA、血管生成素-2及Tie-2的表达,抑制滑膜血管新生,从而对类风湿关节炎发挥治疗作用。

关键词：血管内皮生长因子血管新生穿山龙总皂苷血管生成素2 Tie-2

金纳米“关-开”型荧光探针测定三价铁离子和L-赖氨酸

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化学研究与应用 2024年第7期36卷 1558-1567页

作者：石佳董文娟山西医科大学汾阳学院山西汾阳032200 山西大学山西太原030000

以N-乙酰-L-半胱氨酸为配体,通过硼氢化钠还原氯金酸合成单层修饰的、水溶性良好的金纳米簇(AuNCs),采用TEM、FTIR、UV-Vis和PL等分析测试技术对AuNCs的形貌特征和光学性质进行了考察。实验结果表明,该AuNCs具有优良的荧光性能,当激发... 详细信息

以N-乙酰-L-半胱氨酸为配体,通过硼氢化钠还原氯金酸合成单层修饰的、水溶性良好的金纳米簇(AuNCs),采用TEM、FTIR、UV-Vis和PL等分析测试技术对AuNCs的形貌特征和光学性质进行了考察。实验结果表明,该AuNCs具有优良的荧光性能,当激发波长为520 nm时,其最大发射波长为620 nm。研究发现,Fe^(3+)能强烈猝灭AuNCs的荧光,而加入L-赖氨酸后,AuNCs的荧光被恢复。AuNCs的荧光猝灭和恢复的程度与Fe^(3+)和L-赖氨酸的浓度在一定范围内呈线性关系,Fe^(3+)和L-赖氨酸的线性范围分别为11.65~163.35μmol·L^(-1)和13.36~266.64μmol·L^(-1),检出限分别为1.65μmol·L^(-1)和1.28μmol·L^(-1)。本研究建立了一种基于AuNCs荧光的“关-开”型传感体系依次用于Fe^(3+)和L-赖氨酸的检测,该方法具有简单、快速、准确度高、灵敏度高、选择性好等优点。

关键词：金纳米簇 “关-开”型荧光探针三价铁离子 L-赖氨酸

基于Mn掺杂ZnS量子点的室温磷光猝灭法测定H_2O_2

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分析科学学报 2013年第3期29卷 307-311页

作者：苏丽霞董文娟董川山西大学环境科学与工程研究中心山西太原030006

以N-乙酰基-L-半胱氨酸为稳定剂,合成了具有独特光学性质的水溶性Mn掺杂ZnS量子点(QDs)。该量子点在室温不除氧的条件下即可发射较强的磷光信号,最大发射波长位于592nm处。在pH=7.0的磷酸盐缓冲溶液中,H2O2对量子点有显著的磷光猝灭作用... 详细信息

以N-乙酰基-L-半胱氨酸为稳定剂,合成了具有独特光学性质的水溶性Mn掺杂ZnS量子点(QDs)。该量子点在室温不除氧的条件下即可发射较强的磷光信号,最大发射波长位于592nm处。在pH=7.0的磷酸盐缓冲溶液中,H2O2对量子点有显著的磷光猝灭作用,且在一定的范围内H2O2的浓度与磷光猝灭值(P0/P)呈现良好的线性关系,以此建立了测定H2O2的新方法。在最佳的实验条件下,该方法的检出限为1.0×10-6 mol/L,线性范围为1.0×10-5～2.5×10-2 mol/L,相关系数为0.9978。通过测定猝灭过程的时间分辨磷光光谱,推断猝灭机理为动态猝灭。

关键词： Mn掺杂ZnS量子点室温磷光猝灭过氧化氢

“互联网+”时代基于MOOC混合教学模式改革探究——以山东外事翻译职业学院“3DS MAX”课程为例

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中国职业技术教育 2018年第12期34卷 93-96页

作者：董文娟王萌付海娟天津大学教育学院天津300072 山东外事翻译职业学院山东济南250100

为克服"3DS MAX"课程目前所采用的传统教学模式的弊端,以蓝墨云班课的应用为基础,引入MOOC平台对"3DS MAX"课程进行混合教学模式的改革,取得了良好教学效果,重构了教学生态链,既发挥了教师的主导作用,又体现了学生的主体作用。"互联网+... 详细信息

为克服"3DS MAX"课程目前所采用的传统教学模式的弊端,以蓝墨云班课的应用为基础,引入MOOC平台对"3DS MAX"课程进行混合教学模式的改革,取得了良好教学效果,重构了教学生态链,既发挥了教师的主导作用,又体现了学生的主体作用。"互联网+"时代背景下基于MOOC平台混合教学模式的构建,需要一系列保障条件:一是智能终端应用和普及作为现实基础,二是在线学习服务作为技术支持,三是基于互联网的课程重构,四是学校管理层、教师、学生观念的转变。

关键词： “互联网+” MOOC 混合教学模式职业教育