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miR-640在椎间盘退变中的分子机制研究

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miR-640在椎间盘退变中的分子机制研究

作者：董文刚中国人民解放军空军军医大学

学位级别：硕士

【研究背景】椎间盘退变(IDD,Intervertebral Disc Degeneration)是下腰部疼痛最为常见的原因,也是脊柱退变性疾病的始动因素。全世界有6.32亿人患病,严重者可导致劳动能力的丧失,严重的影响了人类的健康。目前针对IDD的主要治疗方法为... 详细信息

【研究背景】椎间盘退变(IDD,Intervertebral Disc Degeneration)是下腰部疼痛最为常见的原因,也是脊柱退变性疾病的始动因素。全世界有6.32亿人患病,严重者可导致劳动能力的丧失,严重的影响了人类的健康。目前针对IDD的主要治疗方法为保守治疗和手术治疗,但以上方法均无法有效控制椎间盘退行性变性的进程。椎间盘退变是一种进行性的疾病,因此,深入揭示椎间盘退变的分子机制,寻找调控相关信号通路和组织病理变化的关键靶分子,开发有针对性的生物治疗方法,对治疗椎间盘退变及其引发的各类疾病有着重要的意义。【目的】我们通过阅读并分析文献,发现,miR-640在退变的椎间盘组织中高表达,而其下游靶基因参与调控NF-κB,WNT等与细胞衰老、凋亡等进程直接相关的信号通路。据此,我们推测,miR-640在椎间盘退变的病理生理过程中可能发挥着重要作用。因此,本研究的主要目的就是,以miR-640的功能及其调控机制研究为突破口,综合利用转染、双荧光素酶报告基因、RNAi等分子生物学技术系统的研究miR-640在椎间盘退变及髓核细胞衰老、凋亡过程中的作用机制,丰富椎间盘退变的理论研究,并为临床椎间盘退变的防治提供潜在的药物作用靶点。【方法】1.人髓核细胞(NP cells)的分离培养。2.提取人椎间盘组织及髓核细胞的总RNA,并通过RT-PCR检测人椎间盘组织及髓核细胞中miR-640的表达情况。3.综合利用qPCR、HE染色、免疫组化染色的方法研究退变髓核细胞中炎症因子的表达情况,及其与miR-640的相关性。4.利用双荧光素酶报告、免疫细胞荧光、生物信息学预测等方法研究NF-κB与miR-640的关系及其在髓核细胞中的分布。5.利用生物信息学分析的方法预测miR-640的下游靶分子,并通过双荧光素酶报告、qPCR证实miR-640对下游靶分子的调控。6.利用SA-β-gal染色检测miR-640过表达髓核细胞的衰老情况。7.流式细胞术测miR-640对髓核细胞衰老及凋亡的影响,CellTiter-Glo试剂盒检测miR-640对髓核细胞活性的影响。【结果】1.在退变的椎间盘组织及髓核细胞中miR-640的表达量显著增高。2.在退变髓核组织中高表达的炎症因子TNF-α和IL-1β能够通过NF-κB信号通路激活miR-640的表达。***-640通过抑制LRP1表达,促进NF-κB的持续激活,构成正反馈环路。***-640能够抑制WNT信号通路的关键分子β-catenin和EP300,故可降低WNT通路活性。***-640能够通过对WNT信号通路的抑制促进髓核细胞的衰老、凋亡。【结论】本研究证实,在衰老退变的髓核组织中形成了炎症微环境,促炎因子与miR-640的表达形成正反馈环路,造成miR-640的大量积累,并抑制其下游WNT通路活性,促进髓核细胞的衰老和凋亡。在此调控网络中,miR-640位于信号通路的关键交叉节点之上,干预其表达可有效减少髓核细胞的凋亡。本研究阐明了髓核细胞退变过程中miR-640相关的分子调控网络,并为治疗椎间盘退变相关的各种疾病提供了潜在的药物作用靶点。

关键词： miR-640 髓核细胞椎间盘退变衰老 WNT通路

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喷钙脱硫成套技术

锅炉技术 1999年第12期30卷 26-30页

作者：董文刚侯栋歧于德亭哈尔滨电站设备成套设计研究所 150046

介绍炉内喷钙──炉后喷水增湿烟气脱硫成套技术以及国内研究开发的集除水滴、固硫和除尘于一体的湿颗粒层过饱和增湿高效脱硫除尘技术。

关键词：炉内喷钙烟气脱硫湿颗粒层成套技术燃煤锅炉

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浅析如何推进马尔康农业产业化进程

阿坝科技 2014年第1期 32-34页

作者：董文刚马尔康县农业局

农业产业化是社会主义市场经济条件下以市场为导向,遵循市场经济规律,以提高经济效益为中心,以开发优势资源为基础,建立产供销,种养加,贸工农一体化经营的模式。以市场来牵动龙头企业,以龙头企业来带动商品生产基地,基地联结农户的链锁... 详细信息

农业产业化是社会主义市场经济条件下以市场为导向,遵循市场经济规律,以提高经济效益为中心,以开发优势资源为基础,建立产供销,种养加,贸工农一体化经营的模式。以市场来牵动龙头企业,以龙头企业来带动商品生产基地,基地联结农户的链锁形式,从而实现农业生产专业化,产品商品化,服务社会化和经营管理企业化。为推动我县农业产业化进程,要以市场为导向,因地制宜,找准主导产业,统筹规划,合理布局,依靠科技,充分利用和发挥我县的自然优势,建设好具有我县地方特色产品的生产基地,创办好农牧业最终产品的加工企业,把公司、基地、农民联结起来触为一体,真正培育出我县的名牌产品,实现我县的农业产业化,达到农民增收、企业盈利的目的。

关键词：浅析推进产业化进程

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企业内部公关面临的问题及对策

公关世界 1994年第6期 18-19页

作者：董文刚

国有企业(包括商业企业)固有的种种矛盾并未因改革体制、经营机制而消失。企业的内部公关正是要针对这些矛盾或问题开展。目前,企业内部公关面临哪些问题呢?就我所知主要有以下几个:上下级之间因为所处的位置不同,看问题的方法、角度不... 详细信息

国有企业(包括商业企业)固有的种种矛盾并未因改革体制、经营机制而消失。企业的内部公关正是要针对这些矛盾或问题开展。目前,企业内部公关面临哪些问题呢?就我所知主要有以下几个:上下级之间因为所处的位置不同,看问题的方法、角度不同,对一些问题所持的观点和看法也就不一样。加之,人员素质参差不齐,上下级缺乏沟通,互相不理解的情况是普遍存在的的。虽然大多数情况

关键词：内部公关企业企业管理公关工作

美国公司电站的装机容量及型式(1988年底)

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电站系统工程 1990年第1期 78-79页

作者：董文刚

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关于新型安全计算机数据库更新机制的研究

电脑知识与技术 2019年第11X期15卷 3-4页

作者：董文刚淮北师范大学信息学院

在当前国内计算机数据库的运行管理当中,虽然基础的管理技术已经有了一定的水准,但是在安全计算机数据库更新机制上,却存在明显的问题,尤其体现在缺乏基础的信息交互,影响后期的使用。在这样的状况下,本文主要针对新型安全计算机数据库... 详细信息

在当前国内计算机数据库的运行管理当中,虽然基础的管理技术已经有了一定的水准,但是在安全计算机数据库更新机制上,却存在明显的问题,尤其体现在缺乏基础的信息交互,影响后期的使用。在这样的状况下,本文主要针对新型安全计算机数据库更新机制进行了研究,并着重分析了新型安全计算机数据库在更新机制上的实践思路。

关键词：安全计算机数据库更新机制

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刍议双黄连制剂研究及其临床应用

中国民族民间医药 2010年第6期19卷 144-145页

作者：董文刚哈尔滨三联药业有限公司黑龙江哈尔滨150025

自九十年代注射用双黄连粉针剂问世以来,双黄连其他制剂接踵而来如雨后春笋般陆续上市,是目前中药剂型最多的一个品种,单品种产值及利润名列中成药前茅。其各项研究仍不断发展深入,且卓有成效。双黄连制剂是由金银花(双花)、连翘、黄芩... 详细信息

自九十年代注射用双黄连粉针剂问世以来,双黄连其他制剂接踵而来如雨后春笋般陆续上市,是目前中药剂型最多的一个品种,单品种产值及利润名列中成药前茅。其各项研究仍不断发展深入,且卓有成效。双黄连制剂是由金银花(双花)、连翘、黄芩制成的纯中药制剂。目前有注射剂(括粉针剂、射液)、气雾荆、口服液三种。双黄连具有广谱抗菌、抗病毒作用,在学领域已经得到良好开发和广泛应用,疗效确切。

关键词：双黄连研究临床应用

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甜菜种子高产的几点体会

现代农业 1984年第2期 18-19页

作者：董文刚

呼市郊区太平庄公社太平庄大队属黑河灌区,地势平坦,土地较肥沃,今年有一户种植的2亩甜菜种子,亩产652斤,比全公社平均亩产增加69.7%。他是怎样取得这样高的产量呢?其具体措施如下。一、栽植前的准备选地势平坦、土层深厚的中上等壤土地... 详细信息

呼市郊区太平庄公社太平庄大队属黑河灌区,地势平坦,土地较肥沃,今年有一户种植的2亩甜菜种子,亩产652斤,比全公社平均亩产增加69.7%。他是怎样取得这样高的产量呢?其具体措施如下。一、栽植前的准备选地势平坦、土层深厚的中上等壤土地,灌溉方便,前茬是小麦,在小麦收获后进行深翻,秋天再翻一次,结合施有机肥每亩3000～4000斤,并进行秋汇地。第

关键词：甜菜种子抽苔期收获适期

腹腔镜下直肠癌前侧切除术治疗直肠癌的临床疗效分析

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医学理论与实践 2018年第5期31卷 683-684页

作者：董文刚王勇平煤神马集团总医院普外一区河南省平顶山市467000

目的:探讨腹腔镜下直肠癌前侧切除术治疗直肠癌的临床效果。方法:选取2014年1月—2016年12月在我院住院的156例直肠癌患者进行分析,随机分为两组(传统组和腹腔镜组),每组78例,传统组患者实施传统开腹手术治疗,腹腔镜组患者实施腹腔镜行... 详细信息

目的:探讨腹腔镜下直肠癌前侧切除术治疗直肠癌的临床效果。方法:选取2014年1月—2016年12月在我院住院的156例直肠癌患者进行分析,随机分为两组(传统组和腹腔镜组),每组78例,传统组患者实施传统开腹手术治疗,腹腔镜组患者实施腹腔镜行直肠癌前侧切除术,并比较两组患者临床疗效、手术时间、手术中出血量、下床活动时间、肛门排气时间、住院时间以及并发症发生率等。结果:与传统组比较,腹腔镜组患者临床治疗总有效率显著增加,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组患者手术时间、手术中出血量、下床活动时间、肛门排气时间以及住院时间等显著优于传统组,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05);腹腔镜组患者术后并发症发生率显著低于传统组,两者比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:与传统开腹手术相比,腹腔镜下行直肠癌前侧术不仅有助于提高患者疗效,而且还能减少术中出血量、缩短住院时间,促进患者早日康复,值得推广借鉴。

关键词：直肠癌腹腔镜直肠癌前侧切除术开腹手术