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蛹虫草缓解新型冠状病毒感染研究进展

微生物学杂志 2024年第2期44卷 109-119页

作者：怀美玉徐方旭刘梦潜董彩虹沈阳师范大学生命科学学院辽宁沈阳110034 辽宁省功能性蛹虫草重点实验室辽宁沈阳110034 沈阳师范大学实验教学中心辽宁沈阳110034 沈阳市功能性蛹虫草产业技术研究院辽宁沈阳110034 中国科学院微生物研究所北京100101

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的COVID-19在全球范围内大流行,危害了人类健康和公共安全,随着对SARS-CoV-2的结构、功能和致病过程的了解,越来越多的潜在药物被开发。蛹虫草(Cordyceps militaris)是我国传统的药用真菌,... 详细信息

严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)引起的COVID-19在全球范围内大流行,危害了人类健康和公共安全,随着对SARS-CoV-2的结构、功能和致病过程的了解,越来越多的潜在药物被开发。蛹虫草(Cordyceps militaris)是我国传统的药用真菌,具有显著的抗病毒作用,虫草素作为蛹虫草的主要活性成分能够与SARS-CoV-2刺突蛋白、主蛋白酶(Mpro)相结合,抑制病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RDRP)活性,阻断SARS-CoV-2在机体内复制。蛹虫草还具有提升机体免疫力、修复受损组织的作用。本文概述虫草素抗SARS-CoV-2的机制和蛹虫草其他相关药理作用,以期为蛹虫草用于新型冠状病毒感染的辅助治疗提供参考。

关键词：蛹虫草 SARS-CoV-2 新型冠状病毒感染虫草素免疫调节

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表型与亲本不易区分的茯苓同核体菌株新类型

菌物学报 2022年第8期41卷 1279-1292页

作者：李寿建董彩虹中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室北京100101 中国科学院大学北京100049

茯苓Wolfiporiahoelen是我国传统中药材之一,也是一种食药兼用的大型真菌,目前已规模化栽培,但由于其交配系统一直不明确,影响了种质改良。前期我们发现了茯苓的同核体,明确了茯苓的交配系统和生活史,并建立了以培养特性和分子标记区分... 详细信息

茯苓Wolfiporiahoelen是我国传统中药材之一,也是一种食药兼用的大型真菌,目前已规模化栽培,但由于其交配系统一直不明确,影响了种质改良。前期我们发现了茯苓的同核体,明确了茯苓的交配系统和生活史,并建立了以培养特性和分子标记区分同核体的方法,但未明确是否适用于茯苓种群的不同个体。在对多个菌株的研究中,发现了同核体表型与亲本不易区分的茯苓菌株。本研究主要以来自日本的菌株775(NBRC 30628)为亲本,对其同核体菌株进行收集鉴定,并对同核体菌株的培养特性、交配现象和杂交等进行了研究。此类菌株的同核体菌株可通过与亲本对峙培养进行鉴定,但菌丝生长、菌落形态和吃料速度等与亲本没有显著差异,不同交配型的同核体之间交配时没有明显的交配现象。rpb2杂合位点标记可以用于鉴定该类型同核体菌株,且能验证是否交配。该类型同核体与之前发现的同核体类型之间可以进行杂交,杂交菌株可与两亲本都产生拮抗现象。该发现补充了之前建立的茯苓同核体鉴定方法,加深了对茯苓物种群体的了解,同时丰富了茯苓的育种资源。

关键词：同核体单孢菌株交配系统 rpb2 杂交育种

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茯苓原生质体单核化及同核体杂交

菌物学报 2023年第6期42卷 1258-1272页

作者：李寿建董彩虹中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室北京100101 中国科学院大学北京100049

茯苓Wolfiporia hoelen是一种食药兼用的大型真菌,在我国栽培历史悠久,但由于长期无性繁殖,导致菌种退化,栽培产量下降,严重影响产业发展。为解决茯苓育种的难题,我们前期建立了茯苓同核体鉴定方法,明确了其交配系统,建立了单孢同核体... 详细信息

茯苓Wolfiporia hoelen是一种食药兼用的大型真菌,在我国栽培历史悠久,但由于长期无性繁殖,导致菌种退化,栽培产量下降,严重影响产业发展。为解决茯苓育种的难题,我们前期建立了茯苓同核体鉴定方法,明确了其交配系统,建立了单孢同核体杂交育种体系,但是部分茯苓菌株子实体形成困难或子实体贴生,导致担孢子收集困难,因此原生质体单核化的研究具有重要意义。本研究以两株存在较大遗传差异且同核体类型不同的菌株776和775为材料,核荧光染色表明超过60%的原生质体具有细胞核,原生质体再生率分别为11.0%和7.6%,不易生长的再生菌株中既有同核也有异核菌株。原生质体单核化获得了两个菌株的同核体菌株,比例可达到10%以上,菌株776获得了两种交配型的同核体菌株(5:3),不存在偏分离(χ~2=0.5),但菌株775原生质体单核化仅获得了一种交配型的同核体菌株,表现出严重的交配型偏分离。通过杂交菌株与两亲本对峙试验及基于rpb2的杂合位点验证,证实获得了原生质体同核体杂交菌株25株,原生质体同核体与单孢同核体杂交菌株50株,表明茯苓原生质体同核体杂交育种的可行性。

关键词：原生质体单核化交配型因子偏分离原生质体核荧光染色 rpb2

鱼腥草鼻用喷雾剂研究及中医药鼻部疾病用药规律分析

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鱼腥草鼻用喷雾剂研究及中医药鼻部疾病用药规律分析

作者：董彩虹江西中医药大学

学位级别：硕士

目的:1基于电子鼻及气质联用技术对鲜、干鱼腥草进行质量评价,揭示了鲜、干两类鱼腥草的“腥气”特征及差异,为建立基于感官评价技术的鱼腥草质量评价体系以及鲜、干鱼腥草的质量控制提供参考。2在药材质量研究的基础上,进行鱼腥草鼻用... 详细信息

目的:1基于电子鼻及气质联用技术对鲜、干鱼腥草进行质量评价,揭示了鲜、干两类鱼腥草的“腥气”特征及差异,为建立基于感官评价技术的鱼腥草质量评价体系以及鲜、干鱼腥草的质量控制提供参考。2在药材质量研究的基础上,进行鱼腥草鼻用喷雾剂的开发,通过对鱼腥草芳香水提取工艺和制剂成型工艺的研究,确定鱼腥草鼻用喷雾剂的最优制备工艺。3为了更好地控制制剂质量,建立鱼腥草鼻用喷雾剂的质量标准。4对鱼腥草鼻用喷雾剂进行体外抗炎试验,明确其抗炎作用。5收集中医药治疗鼻部疾病的有效处方,基于中医传承计算平台构建鼻部疾病中医用药数据库,并进行用药规律分析及处方挖掘,为鼻部疾病的临床治疗和创新中药的处方发现提供参考。方法:1采用电子鼻技术和气相色谱质谱联用技术分别对鲜、干两类鱼腥草样本的“腥味”和挥发性成分进行分析,通过主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLSDA)等数据建模及可视化分析方法,对鲜、干两类鱼腥草样本进行分析比较,在此基础上采用相关性分析揭示化学成分表达与“腥味”指标间的相关性。2制剂工艺研究:以鱼腥草主要有效成分甲基正壬酮含量为指标,通过单因素试验确定最佳鱼腥草芳香水最佳提取工艺;以制剂澄清度、透光率等理化或外观指标,对增溶剂、防腐剂、PH调节剂的选择及用量进行考察,确定鱼腥草鼻用喷雾剂的最终成型工艺。3对鱼腥草鼻用喷雾剂进行一般质量检查(性状、pH值、装量等),并建立鱼腥草鼻用喷雾剂的质量标准,主要包括:薄层鉴别和含量测定及指纹图谱。4在细胞水平上,采用LPS(脂多糖)诱导RAW264.7(小鼠巨噬细胞细胞)体外炎症模型,用酶联免疫吸附法测定炎症介质NO(一氧化氮)的含量变化及炎症因子IL-6(白介素-6)、TNF-α(肿瘤坏死因子)的含量变化,研究鱼腥草鼻用喷雾剂的抗炎作用。5基于中医传承计算平台,以《中医方剂大辞典》、《中华人民共和国卫生部药品标准—中药成方制剂》等经典著作以及相关现代研究文献为基础,以“鼻渊”、“鼻鼽”、“鼻槁”、“鼻窒”、“鼻炎”、“过敏性鼻炎”、“变应性鼻炎”、“慢性鼻炎”、“鼻窦炎”、“萎缩性鼻炎”等为关键词,从中筛选出治疗鼻部病的中药处方,构建鼻部用药数据库。采用中医传承计算平台,针对鼻部用药从“不同症状”、“用药方法”、“用药频次”、“组方频次”、“核心药物”等角度进行挖掘,对治疗鼻部疾病的组方规律和用药经验进行分析,“方剂分析”功能,进行主治疾病统计、组方配伍及用药特点的分析。结果:1对鲜、干两类鱼腥草进行电子鼻、气质测定,电子鼻10种传感器检测指标的雷达图直观的刻画了鲜、干鱼腥草的“腥味”特征差异,通过建模分析(PCA、OPLS-DA)整体表征了鲜、干鱼腥草组间的气味差异并对二者进行了区分,筛选确定了W1W、W2W、W3C、W5C 4种主要差异传感器指标;GC-MS分析从鲜、干鱼腥草中共鉴定表征了90个挥发性成分,建模分析(PCA、OPLS-DA)整体表征了鲜、干鱼腥草组间的化学成分差异并对二者进行了区分,筛选得到35个主要差异成分;相关性分析结果表明d-柠檬烯、(±)-2-蒎烯、Beta-蒎烯、石竹素、(-)-spathulenol、正壬醛、(Z)-β-法呢烯、月桂烯、邻-异丙基苯为代表的9种物质,在鱼腥草“腥味”中起到重要影响。鉴于各挥发性成分在干鱼腥草中测得的含量整体上均大于鲜鱼腥草,且由于鲜鱼腥草药材不易运输和长期保存,从实际生产的角度出发选用干鱼腥草作为鱼腥草鼻用喷雾剂的原料药进行制剂的开发。2确定鱼腥草鼻用喷雾剂的制备工艺为100 g干鱼腥草加25倍量水,蒸馏提取5 h,收集初馏液约500 ml,再进行重蒸馏,收集重蒸馏液100 ml,重蒸馏液加入0.4%聚山梨酯80、0.2%山梨酸钾,混匀,滤过。最佳制备成型工艺下制备的鱼腥草鼻用喷雾剂呈近无色澄明液体并具有芳香气味,PH为6.7～6.8。3建立了鱼腥草鼻用喷雾剂的质量控制方法:薄层鉴别、甲基正壬酮含量测定,以及指纹图谱质量控制方法。其中指纹图谱中标定了15个共有峰;并且检测结果表明不同批次的鱼腥草鼻用喷雾剂制备工艺稳定,不同批次鱼腥草鼻用喷雾剂的指纹图谱相似度均大于90%。4采用LPS诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞成功建立体外炎症模型,进行鱼腥草鼻用喷雾剂给药。体外抗炎试验结果显示,鱼腥草鼻用喷雾剂的浓度小于50 mg/m L时对细胞没有明显毒性,模型组中炎症介质NO、炎症因子TNF-α和IL-6含量高于空白组,炎症模型建模成功。给药组炎症介质NO的分泌量与炎症因子TNF-α、IL-6的分泌量都随着剂量浓度的升高而显著降低,且表现出剂量依赖性。炎症介质炎症因子NO的分泌量抑制率最高达45.23%,炎症因子TNF-α、IL-6的分泌量抑制率最高达69.89%、82.17%,鱼腥草鼻用喷雾剂能显著抑制炎症细胞中NO,IL-6、TNF-α的分泌(P<0.01),降低炎症反应。5通过检索并结合纳入与排除标准筛选后,共纳入文

关键词：鱼腥草鼻用喷雾剂制备工艺质量标准抗炎活性用药规律分析

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茯苓的交配系统与杂交育种体系

菌物研究 2023年第1期21卷 143-150页

作者：李寿建董彩虹中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室北京100101 中国科学院大学生命科学学院北京100049

茯苓Wolfiporia hoelen是我国传统中药,使用和栽培历史悠久,由于其配伍率高,在中药中具有重要的地位。茯苓菌核在我国广泛栽培,但是存在菌种同质化、退化和基质利用率低等多种问题,归根结底在于其交配系统不明确,缺乏杂交育种体系。近年... 详细信息

茯苓Wolfiporia hoelen是我国传统中药,使用和栽培历史悠久,由于其配伍率高,在中药中具有重要的地位。茯苓菌核在我国广泛栽培,但是存在菌种同质化、退化和基质利用率低等多种问题,归根结底在于其交配系统不明确,缺乏杂交育种体系。近年来,相关研究建立了茯苓的同核体菌株鉴定方法,确认了其二极性交配系统,发现了同核体类型不同的茯苓群体,并基于单孢和原生质体同核体建立了茯苓的杂交育种体系和杂交菌株鉴定方法。文中对茯苓的交配系统和杂交育种体系进行总结,以促进茯苓育种工作的开展和茯苓产业的良性发展,并基于茯苓的特性和目前产业相关问题对其育种方向进行了展望。

关键词：子实体二极性同核体菌株原生质体单核化 rpb2 SSR

纳米医学用于CRISPR-Cas9基因编辑技术治疗疾病

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Science Bulletin 2022年第6期67卷 572-576页

作者：马丽芳董彩虹余美华宋新然于永春陈雨 Shanghai Institute of Thoracic Oncology Shanghai Chest HospitalShanghai Jiao Tong UniversityShanghai 200030China Department of Clinical Laboratory Medicine Shanghai Chest HospitalShanghai Jiao Tong UniversityShanghai 200030China Department of Ultrasound Zhongshan HospitalFudan Universityand Shanghai Institute of Medical ImagingShanghai 200032China Materdicine Laboratory School of Life SciencesShanghai UniversityShanghai 200444China

In recent years,the clustered regularly interspaced short palindromic repeats-associated protein 9(CRISPR-Cas9)technology that won the 2020 Nobel Prize in Chemistry has served as one of the most prominent and powerful tools in gene editing for biomedical research and the treatment of various diseases[1].Nevertheless,it remains a substantial challenge to effectively and safely deliver CRISPR-Cas9 molecules into target cells[2].

关键词：纳米医学 diseases 基因编辑技术

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虫草专刊：蛹虫草菌株退化特征及鉴别方法

菌物学报 2022年

作者：怀美玉刘晴徐方旭王升厚董彩虹沈阳师范大学生命科学学院辽宁省功能性蛹虫草重点实验室沈阳师范大学实验教学中心中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室

蛹虫草菌株在继代培养和低温长期保藏过程中极易退化导致子实体产量下降，对产业造成重大影响。本研究以正常菌株、PDA斜面长期4 ℃保藏导致退化的菌株和连续继代培养的菌株为材料，观察其子实体、菌落、菌丝形态和分生孢子数量，对菌...

蛹虫草菌株在继代培养和低温长期保藏过程中极易退化导致子实体产量下降，对产业造成重大影响。本研究以正常菌株、PDA斜面长期4 ℃保藏导致退化的菌株和连续继代培养的菌株为材料，观察其子实体、菌落、菌丝形态和分生孢子数量，对菌丝细胞核、线粒体、活性氧积累和芽生孢子内脂滴进行染色观察；并对菌丝中虫草素、腺苷和麦角甾醇含量进行比较分析。结果表明PDA斜面长期4 ℃保藏和连续继代培养导致的蛹虫草菌株退化表型大多数一致，即退化菌株较正常菌株子实体产量降低、菌丝粘连打结、分生孢子数量显著降低、菌丝活性氧含量升高、细胞内线粒体数量减少、芽生孢子脂滴由弥散的小脂滴融合为大脂滴。然而，在菌落见光转色方面，长期低温保藏退化菌株基本不转色，而继代培养退化菌株转色不稳定；长期保藏退化菌株菌丝细胞核数目无明显变化，继代培养退化菌株细胞核数量明显减少；长期保藏退化菌株菌丝中虫草素、腺苷和麦角甾醇含量较正常菌株降低58%、41%和70%，继代培养退化菌株麦角甾醇含量无明显变化。因此，显微观察菌丝是否出现粘连打结及氮蓝四唑NBT检测菌丝活性氧含量，操作简单、用时较短，可用于大规模生产中蛹虫草菌株退化的检测手段；线粒体和脂滴染色也可作为退化菌株的鉴别方法；而生产中常用的通过菌落见光转色判断菌种优劣的方法需要慎重。继代培养菌株第四代开始出现明显的退化特征，因此在生产中使用的菌株最好控制在继代培养三代以内。

关键词：

我国东北及山东部分地区野生蛹虫草资源采集及观察

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同方期刊数据库

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菌物学报 2022年第11期41卷 1761-1771页

作者：刘晴刘梦潜王芬怀美玉王丽董彩虹中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室北京100101 中国科学院大学北京100049 沈阳师范大学生命科学学院辽宁沈阳110034 山东农业大学植物保护学院山东省农业微生物重点实验室山东泰安271018

蛹虫草是一种重要的食药用真菌,其子座可规模化栽培。然而,栽培中菌种极易退化,成为限制其发展的重要因素,野生种质资源为蛹虫草栽培生产菌株的重要来源。本研究对东北和山东部分地区蛹虫草资源进行了持续调查,对其生态分布和宏观、微... 详细信息

蛹虫草是一种重要的食药用真菌,其子座可规模化栽培。然而,栽培中菌种极易退化,成为限制其发展的重要因素,野生种质资源为蛹虫草栽培生产菌株的重要来源。本研究对东北和山东部分地区蛹虫草资源进行了持续调查,对其生态分布和宏观、微观形态等进行了系统研究。从5个地点共采集野生蛹虫草标本414份,寄主绝大多数为鳞翅目昆虫的蛹,少数为鳞翅目昆虫的幼虫和茧。野生蛹虫草子座单生或2-25根,长1-17 cm,棒状、扁平状或不规则畸形,扁平状子座常具纵沟,部分可分支;子座可从寄主头、胸和腹部各部位长出,其中以头部为主。子座地上部分长1-6 cm,颜色呈深橙黄色。可育部位长0.5-4 cm,宽1.2-6 mm,大多数与不育柄部分界明显;地下部分0.5-11 cm,其长度与腐殖质厚度相关。首次明确观察到蛹虫草菌索,菌索连接蛹体和子座,或单从子座、蛹体上长出,但不是所有野生蛹虫草都有菌索。蛹虫草菌索与子座内部的疏丝组织菌丝形态各异,菌索菌丝中间膨大。人工栽培与野外采集的子座宏观形态差异明显,但子囊和子囊孢子形态无明显差异。通过野外采集和调研,获得了大量的野生蛹虫草种质资源,为解决蛹虫草种业问题奠定基础。

关键词：野生蛹虫草资源调查根状菌索

术中复合保温措施对老年髋关节置换术病人阵痛效果及早期复苏的影响

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中文科技期刊数据库（引文版）医药卫生 2022年第11期 102-105页

作者：董彩虹陇南市第一人民医院甘肃陇南746000

探究术中复合保温措施对老年髋关节置换术病人阵痛效果及早期复苏的影响。方法选取2021年4月至2022年7月行髋关节置换术的老年患者(年龄≥65岁)共102例,分成了两组,每组的数量相同,各51例。对照组在术中采取常规手术护理,研究组在此基... 详细信息

探究术中复合保温措施对老年髋关节置换术病人阵痛效果及早期复苏的影响。方法选取2021年4月至2022年7月行髋关节置换术的老年患者(年龄≥65岁)共102例,分成了两组,每组的数量相同,各51例。对照组在术中采取常规手术护理,研究组在此基础上加入复合保温措施干预。结果 T1、T2、T3时刻研究组的鼻咽温均高于对照组(P<0.05),研究组有2例发生低体温,对照组是10例发生,研究组更低(3.92% VS 19.61%)(P<0.05)。研究组在术后60min、术后120min后感受到的疼痛没有对照组强烈,VAS评分均更低(P<0.05)。研究组的拔管、麻醉清醒、PACU需要的时间更少,和对照组的数据比较是有区别的(P<0.05)。研究组一共有50例患者是对护理满意的,比对照组的37例更多,优势更大(98.04% VS 72.55%)(P<0.05)。结论在进行髋关节置换术的过程中给老年患者实施术中复合保温措施后患者的体温可以维持的很好,术后复苏消耗的时间也更短,对护理更加满意。

关键词：术中复合保温老年髋关节置换术术后疼痛早期复苏