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异源双链泳动分析法快速检测TT病毒基因型

中华流行病学杂志 2003年第9期24卷 801-805页

作者：何忠平庄辉姚均董庆鸣戴旺苏宋淑静北京大学医学部微生物学系 100083 北京地坛医院

目的　建立一种简单、敏感、特异和成本低的TT病毒 (TTV)基因型测定方法。方法采用巢式聚合酶链反应方法 (nPCR)对 96名正常人和 180例各型肝炎患者血清标本进行TTVDNA检测 ,然后采用异源双链泳动分析法 (HMA)和序列测定分析法对TTVDNA... 详细信息

目的　建立一种简单、敏感、特异和成本低的TT病毒 (TTV)基因型测定方法。方法采用巢式聚合酶链反应方法 (nPCR)对 96名正常人和 180例各型肝炎患者血清标本进行TTVDNA检测 ,然后采用异源双链泳动分析法 (HMA)和序列测定分析法对TTVDNA阳性标本进行基因分型。结果　各型病毒性肝炎中TTVDNA阳性率为 2 2 .2 % (40 / 180 ) ,正常人为 19.8% (19/ 96 ) ,两者差异无显著性 (χ2 =0 .2 2 0 ,P =0 .6 39)。在甲、乙、丙、戊型肝炎和非甲～戊型肝炎患者中TTVDNA阳性率分别为2 0 .0 % (6 / 30 )、16 .7% (5 / 30 )、2 3.3% (7/ 30 )、36 .7% (11/ 30 )和 18.3% (11/ 6 0 )。在 4 0例TTVDNA阳性标本中 ,经HMA法分型 ,G1型为 5 0 .0 % (2 0 / 4 0 ) ,G2型为 17.5 % (7/ 4 0 ) ,混合型为 2 5 .0 % (10 / 4 0 ) ,另有 7.5 %(3/ 4 0 )未能分型。 10例TTV混合型感染的标本经克隆测序及基因进化树分析 ,5例为G1和G2型 ,2例为G1和G3型 ,1例为G1和G4型 ,1例为G2和G3型 ,1例为G1、G2和G3混合型感染。结论　HMA是一种简单、敏感、特异和经济的分型法 ,可用于TTV基因型分型。

关键词：异源双链泳动分析法快速检测 TT病毒基因型基因进化树

中国北方5城市慢性乙型肝炎患者中SEN病毒检测

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中华流行病学杂志 2003年第1期24卷 33-35页

作者：闫杰何忠平庄辉董庆鸣宋淑静朱林王小红北京地坛医院病毒研究室 100011 北京大学医学部病原生物学系北京市东城区疾病预防控制中心流行病科

目的　了解SEN病毒D和H(SENV D H)在中国慢性乙型肝炎患者 (CHB)中的感染情况。方法　应用巢式聚合酶链反应法 (nPCR) ,对中国北方 5城市 5 95例CHB患者和北京市 96名正常人血清检测SENV D HDNA ,并用PCR产物直接测序法对 7株SENV进行... 详细信息

目的　了解SEN病毒D和H(SENV D H)在中国慢性乙型肝炎患者 (CHB)中的感染情况。方法　应用巢式聚合酶链反应法 (nPCR) ,对中国北方 5城市 5 95例CHB患者和北京市 96名正常人血清检测SENV D HDNA ,并用PCR产物直接测序法对 7株SENV进行了序列分析。结果CHB患者SENV感染率为 61.3 % ,正常人为 62 .5 % ,两者差异无显著性 ( χ2 =0 .0 47,P =0 .82 9)。但不同城市CHB患者中SENV感染率存在一定差异。从不同城市分离的SENV的核苷酸序列同源性较高 ,4株SENV D同源性为 91%～ 98% ,3株SENV H同源性为 95 %～ 98%。结论　在 5城市CHB患者中存在SENV D H感染 ,其感染率与正常人群相似 ,提示SENV D

关键词：慢性乙型肝炎 SEN病毒巢式聚合酶反应 CHB

SARS患者的外周血淋巴细胞及其亚群动态变化

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中华流行病学杂志 2004年第2期25卷 124-126页

作者：何忠平董庆鸣庄辉宋淑静刘志英冯金鑫北京大学医学部微生物学系 100083 北京地坛医院

目的探索外周血淋巴细胞亚群在严重急性呼吸综合征(SARS)患者病程中的动态变化。方法采用流式细胞测定法对240例确诊为SARS患者外周血淋巴细胞及其亚群的绝对计数进行测定,并对不同组别SARS患者与正常对照组比较。结果 SARS患者的淋... 详细信息

目的探索外周血淋巴细胞亚群在严重急性呼吸综合征(SARS)患者病程中的动态变化。方法采用流式细胞测定法对240例确诊为SARS患者外周血淋巴细胞及其亚群的绝对计数进行测定,并对不同组别SARS患者与正常对照组比较。结果 SARS患者的淋巴细胞及其亚群(CD45、CD3、CD4、CD8)的绝对计数分别为1298±785、897±606、510±372、362±263个/mm^3,明显低于正常对照组(2024±423、1391±289、795±129、551±183个/mm^3);重型(极重型)患者(1095±740、740±562、419±346、304±244个/mm^3)低于普通型(1404±788、991±612、564±378、396±267个/mm^3);死亡组(587±493、369±371、204±191、150±130个/mm^3)低于治愈组(1355±776、948±603、539±375、382±263个/mm^3);普通型与重型(极重型)以及治愈组与死亡组患者之间淋巴细胞亚群(CD45、CD3、CD4、CD8)绝对计数差异有显著统计学意义(P0.05)。SARS患者的淋巴细胞亚群(CD45、CD3、CD4、CD8)计数于病程第1周即开始下降,第2周降至最低水平(977±579、641±466、360±275、270±216个/mm^3),然后随病情恢复而逐渐上升。结论测定SARS患者外周血淋巴细胞及其亚群可作为判断病情轻重和疾病预后的方法之一。

关键词： SARS患者外周血淋巴细胞亚群动态严重急性呼吸综合征流式细胞

检测病毒性肝炎患者血清中SEN病毒及其临床意义

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中华微生物学和免疫学杂志 2002年第5期22卷 568-571页

作者：何忠平庄辉闫杰姚均王小红董庆鸣北京大学医学部微生物学教研室北京地坛医院

目的　检测病毒性肝炎患者血清中SEN病毒D和H(SENV D、SENV H) ,并探讨其临床意义。方法　采用巢式聚合酶链反应法 (nPCR)检测甲、乙、丙、戊型肝炎和非甲～戊型肝炎患者血清中SENV D和SENV HDNA。结果　在 180例病毒性肝炎患者血清中 ,... 详细信息

目的　检测病毒性肝炎患者血清中SEN病毒D和H(SENV D、SENV H) ,并探讨其临床意义。方法　采用巢式聚合酶链反应法 (nPCR)检测甲、乙、丙、戊型肝炎和非甲～戊型肝炎患者血清中SENV D和SENV HDNA。结果　在 180例病毒性肝炎患者血清中 ,SENV D和SENV H检出率分别为 17.2 % (31 180 )和 5 .6 % (10 180 ) ,总检出率为 18.3% (33 180 )。甲、乙、丙、戊型肝炎患者的SENV D H检出率高于非甲～戊型肝炎患者。从甲、乙、丙、戊型肝炎和非甲～戊型肝炎患者中分离的SENV D H核苷酸序列 ,与SENV D H原型株比较 ,其同源性在 94 %以上。甲、乙、丙和戊型肝炎患者有无SENV D H合并感染 ,其血清生化学指标无明显差异。结论　SENV D H可能不是非甲～戊型肝炎的病原 ,甲、乙、丙和戊型肝炎患者合并感染SENV D H并不加重病情。

关键词： SEN病毒非甲-戊型肝炎病毒性肝炎巢式聚合酶链反应

严重急性呼吸综合征患者外周血细胞因子的动态变化

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中华传染病杂志 2005年第1期23卷 54-56页

作者：董庆鸣何忠平庄辉宋淑静北京地坛医院 100011 北京大学医学部微生物系

严重急性呼吸综合征(SARS)是由SARS冠状病毒(SARS-CoV)引起的急性传染病.主要通过空气飞沫和密切接触传播;以发热、干咳为主要临床症状;可出现一侧或双侧肺部片状或团块状浸润灶;病死率较高.但目前对本病尚无特异性治疗和预防方法[1,2]... 详细信息

严重急性呼吸综合征(SARS)是由SARS冠状病毒(SARS-CoV)引起的急性传染病.主要通过空气飞沫和密切接触传播;以发热、干咳为主要临床症状;可出现一侧或双侧肺部片状或团块状浸润灶;病死率较高.但目前对本病尚无特异性治疗和预防方法[1,2].有人认为SARS冠状病毒可损害人体的免疫器官,其发病与免疫器官损伤有关[3,4].个别报告SARS患者血中一些细胞因子水平升高[5,6],但例数相对较少,且缺乏系统的随访研究.为此,我们对41例临床和血清学确证为SARS的患者,于不同病程取其外周血检测白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-5和干扰素-γ(INF-γ),以了解其动态变化规律.现将研究结果报告如下。

关键词：外周血细胞因子严重急性呼吸综合征患者 SARS冠状病毒干咳双侧密切接触相对病死率

猪戊型肝炎病毒IgG抗体检测和部分核酸序列分析

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中华肝脏病杂志 2003年第7期11卷 405-407页

作者：朱永红庄辉董庆鸣陈焰锋李政泰吴华柳剑北京大学医学部病原生物学系 100083

目的了解猪戊型肝炎病毒(HEV)感染情况,探讨猪HEV基因型与人HEV的关系。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录巢式聚合酶链反应法(RT-nPCR)分别检测猪血清抗-HEV IgG抗体和猪HEV RNA,并用Vector NTI Suite 7和TreeView软件进行人与猪HE... 详细信息

目的了解猪戊型肝炎病毒(HEV)感染情况,探讨猪HEV基因型与人HEV的关系。方法用酶联免疫吸附法(ELISA)和逆转录巢式聚合酶链反应法(RT-nPCR)分别检测猪血清抗-HEV IgG抗体和猪HEV RNA,并用Vector NTI Suite 7和TreeView软件进行人与猪HEV核酸序列和基因进化树分析。结果猪抗-HEV抗体阳性率为16.67%(18/108),并从18份抗-HEV IgG阳性的猪血清中扩增到2株(11.11%,分别命名为S18和S43)HEV 开放读码框(ORF)1片段(102～387bp),两者核苷酸序列同源性为99%,与HEV基因型1～8的核苷酸序列同源性分别为76%～77%、78%、76%～79%、85%～86%、77%、80%、79%和75%～79%。其中1株(S18)还扩增出HEV ORF2片段(5994～6297bp),与HEV基因型1～4的核苷酸序列同源性分别为76%～78%、74%、74%～77%、85%～94%。结论分离的2株猪HEV属于HEV基因型4。

关键词：猪戊型肝炎病毒 HEV IgG抗体核苷酸序列

乙型肝炎病毒聚合酶链反应基因分型法的建立及应用

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中华肝脏病杂志 2003年第5期11卷 310-311页

作者：王小红何忠平庄辉阎杰董庆鸣宋淑静北京大学医学部微生物学系北京地坛医院

目前应用基因序列测定法分析乙型肝炎病毒(HBV)基因型虽然结果可靠,但操作较复杂,且费用较高,不适用于大规模的临床和流行病学调查.旨在建立一种简便的HBV基因分型法,即基因型特异引物PCR法,并用此法对 2001年北京地坛医院110例慢性乙... 详细信息

目前应用基因序列测定法分析乙型肝炎病毒(HBV)基因型虽然结果可靠,但操作较复杂,且费用较高,不适用于大规模的临床和流行病学调查.旨在建立一种简便的HBV基因分型法,即基因型特异引物PCR法,并用此法对 2001年北京地坛医院110例慢性乙型肝炎患者的HBV基因型进行了分析.

关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应基因分型建立应用

SARS患者外周血B淋巴细胞和自然杀伤细胞动态变化

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中华流行病学杂志 2004年第8期25卷 695-697页

作者：董庆鸣何忠平庄辉宋淑静戴旺苏张四萍陈志海孙静媛北京地坛医院 100011 北京大学医学部微生物学系

目的研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者的外周血B淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞动态变化。方法应用流式法对240例SARS患者的602份系列标本外周血B淋巴细胞和NK细胞进行绝对计数测定。结果 SARS患者的B淋巴细胞和NK细胞计数显著低于正常... 详细信息

目的研究严重急性呼吸综合征(SARS)患者的外周血B淋巴细胞和自然杀伤(NK)细胞动态变化。方法应用流式法对240例SARS患者的602份系列标本外周血B淋巴细胞和NK细胞进行绝对计数测定。结果 SARS患者的B淋巴细胞和NK细胞计数显著低于正常人(P<0.001);重型(极重型)患者明显低于普通型(P<0.001)。治愈组SARS患者的B淋巴细胞于发病时处于低水平,但于发病后第2周开始上升,然后随病情恢复逐渐升至正常水平。但NK细胞于发病时已处于低水平,至发病后第2周继续下降,于发病后第5周有所上升,但仍未恢复至正常水平。结论 SARS患者的B淋巴细胞和NK细胞计数与病情轻重有关,测定SARS患者的该两种细胞计数有助于判断预后。

关键词：外周血 B淋巴细胞自然杀伤细胞严重急性呼吸综合征 SARS 传染性非典型肺炎

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婚检人群乙、丙型肝炎、梅毒及艾滋病毒检测

中国公共卫生 2003年第12期19卷 1417-1418页

作者：何忠平庄辉董庆鸣李朋朱林北京地坛医院 100011 北京大学医学部微生物学系北京市东城区卫生防疫站

目的　了解北京市婚检人群乙型和丙型肝炎、梅毒及艾滋病病毒感染情况。方法　乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体和艾滋病毒抗体采用酶免法检测 ;梅毒采用快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)和梅毒螺旋体血凝试验 (TPHA)检测 :乙型和丙型... 详细信息

目的　了解北京市婚检人群乙型和丙型肝炎、梅毒及艾滋病病毒感染情况。方法　乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗体和艾滋病毒抗体采用酶免法检测 ;梅毒采用快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR)和梅毒螺旋体血凝试验 (TPHA)检测 :乙型和丙型肝炎病毒载量采用PCR荧光定量方法检测 ,病毒基因型采用直接PCR基因分型法测定。结果　 80 0例婚检人群乙型和丙型肝炎感染率分别为 12 0 % ,6 0 % ,梅毒和艾滋病病毒未检出。 96例乙肝表面抗原阳性婚检人群中 ,乙型肝炎病毒载量小于 10 5 拷贝 /ml者占 88 5% ,大于 10 5 拷贝 /ml者仅占 11 5%。 5例丙型肝炎病毒RNA阳性者中 ,病毒载量均小于 10 4 拷贝 /ml。该婚检人群HBV感染者中 ,B型占 18 6% ,B和C混合型占42 4% ,C型占 2 3 7%。 3例丙型肝炎病毒感染者均为HCV1b型。结论　该婚检人群中 ,乙型和丙型肝炎病毒感染率相对较高 ,但病毒载量相对较低。

关键词：乙型肝炎丙型肝炎梅毒艾滋病基因型