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梅花鹿SCF基因参与色素合成的作用研究

中国畜牧兽医 2023年第9期50卷 3663-3670页

作者：陈旭董依萌邢秀梅杨苏坤刘欣东北林业大学野生动物与自然保护地学院哈尔滨150040 中国农业科学院特产研究所长春130112

【目的】探究干细胞因子(stem cell factor, SCF)对梅花鹿色素合成过程的影响。【方法】构建梅花鹿SCF基因野生型(SCF1-9)和突变型(SCF789)表达载体并转染HEK293细胞。用孵育HEK293细胞的培养液培养小鼠黑色素瘤细胞(B16),模拟SCF在机... 详细信息

【目的】探究干细胞因子(stem cell factor, SCF)对梅花鹿色素合成过程的影响。【方法】构建梅花鹿SCF基因野生型(SCF1-9)和突变型(SCF789)表达载体并转染HEK293细胞。用孵育HEK293细胞的培养液培养小鼠黑色素瘤细胞(B16),模拟SCF在机体的转运过程,检测B16细胞的黑色素含量及酪氨酸酶活性;用RT-PCR法检测小眼症转录因子M型(MITF-M)、酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP1)、TYRP2、溶质载体家族45成员2(SLC45A2)、SRY盒转录因子10(SOX10)和cAMP反应元件结合蛋白(CREB)的mRNA表达量;用Western boltting检测MITF-M、TYR蛋白表达水平。【结果】SCF1-9组黑色素含量、酪氨酸酶活性和MITF-M、TYR、SOX10基因mRNA表达量及TYR和MITF-M的蛋白表达量与对照组、SCF789组相比均极显著或显著升高(P0.05)。【结论】梅花鹿SCF基因通过SCF/c-kit信号通路调节色素基因MITF-M、SOX10、TYR、SLC45A2表达,促进色素合成。试验结果为进一步研究色素合成相关基因的表达调控提供理论依据。

关键词：梅花鹿 SCF基因表达载体黑色素细胞

马克思主义生态观下我国乡村绿色发展道路研究

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黑龙江粮食 2023年第8期 118-120页

作者：董依萌沈阳师范大学马克思主义学院辽宁沈阳110034

农村生态文明建设是我国现代化进程中的重要问题,从生态文明概念的提出,到生态文明建设纳入“五位一体”中国特色社会主义总布局,体现着国家对生态文明建设的重视。随着我国经济的发展,农村在取得显著成就的同时,也出现了许多生态问题,... 详细信息

农村生态文明建设是我国现代化进程中的重要问题,从生态文明概念的提出,到生态文明建设纳入“五位一体”中国特色社会主义总布局,体现着国家对生态文明建设的重视。随着我国经济的发展,农村在取得显著成就的同时,也出现了许多生态问题,人与自然之间的关系严重失衡。为解决这一问题,就要运用马克思主义生态观的立场和观点,来分析当代我国农村生态文明建设中出现的问题,积极寻求我国乡村绿色发展道路,建设生态宜居美丽乡村。

关键词：马克思主义生态观生态文明建设

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敖鲁古雅驯鹿SRY基因的生物信息学分析

吉林农业大学学报 2022年第1期44卷 97-103页

作者：何金明鞠妍邢秀梅王磊董依萌鞠贵春吉林农业大学动物科学技术学院长春130118 中国农业科学院特产研究所长春130112

对敖鲁古雅驯鹿SRY(Sex-determiningregion of Y-chromosome)基因的cDNA序列进行测序及初步生物信息学分析。运用RT-PCR技术从敖鲁古雅驯鹿鹿茸组织中扩增SRY基因的cDNA序列,利用生物信息学软件对敖鲁古雅驯鹿SRY基因的cDNA序列及蛋白... 详细信息

对敖鲁古雅驯鹿SRY(Sex-determiningregion of Y-chromosome)基因的cDNA序列进行测序及初步生物信息学分析。运用RT-PCR技术从敖鲁古雅驯鹿鹿茸组织中扩增SRY基因的cDNA序列,利用生物信息学软件对敖鲁古雅驯鹿SRY基因的cDNA序列及蛋白质结构进行分析,同时构建系统发育树。结果表明:扩增的敖鲁古雅驯鹿SRY基因的cDNA序列与GenBank数据库中登录的驯鹿SRY基因的cDNA序列(登录号AB247629.1)一致,全长690 bp。敖鲁古雅驯鹿SRY基因编码229个氨基酸;敖鲁古雅驯鹿SRY蛋白无信号肽和跨膜结构;结合其二级结构和结构域预测分析,SRY蛋白的二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,具有HMG结构域。通过构建NJ系统发育树,发现敖鲁古雅驯鹿与白尾鹿之间的亲缘关系相对较近。研究结果为深入探索敖鲁古雅驯鹿SRY基因的生物学功能提供了基础参考。

关键词：敖鲁古雅驯鹿 SRY基因 cDNA序列生物信息学分析系统进化分析

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不同生长时期梅花鹿鹿茸代谢组分析

畜牧兽医学报 2022年第12期53卷 4518-4526页

作者：张然然荣敏董依萌王天骄邢秀梅中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物重点实验室长春130112 德州市畜牧兽医事业发展中心德州253000

旨在探究梅花鹿鹿茸不同生长时期小分子代谢物表达差异变化,为鹿茸快速生长与骨化分子机制的研究奠定基础。本研究选取体况良好的4岁龄雄性东北梅花鹿,收取生长25、45、65、100、130 d的鹿茸作为试验样品,每个时期3个生物学重复。利用UH... 详细信息

旨在探究梅花鹿鹿茸不同生长时期小分子代谢物表达差异变化,为鹿茸快速生长与骨化分子机制的研究奠定基础。本研究选取体况良好的4岁龄雄性东北梅花鹿,收取生长25、45、65、100、130 d的鹿茸作为试验样品,每个时期3个生物学重复。利用UHPLC-TOF-MS技术对样品进行代谢组学分析。样品主成分分析与层次聚类分析结果显示,5个生长时期可分为鹿茸生长期(25、45与65 d)与鹿茸骨化期(100与130 d)两个阶段。筛选、鉴定到171种显著差异表达代谢物(VIP>1,P2),比对到HMDB数据库的112种代谢物,分为7大类;其中L-焦谷氨酸、L-组氨酸、L-肌肽与阿坎酸等有机酸类化合物在100 d含量最高,15-脱氧-Δ12,14-前列腺素J2、前列腺素H2、前列腺素I2在130 d显著上调,而其他氨基酸及有机酸类化合物均在生长期表达上调。差异代谢物显著富集到氨酰-tRNA生物合成、组氨酸代谢等13种KEGG代谢通路。本研究从代谢组水平为鹿茸快速生长与骨化分子机制的探究提供数据支撑。

关键词：梅花鹿鹿茸不同生长时期 UHPLC-TOF-MS

基于mtDNA和Y染色体基因片段的塔河马鹿种公鹿遗传多样性分析

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畜牧兽医学报 2023年第6期54卷 2402-2413页

作者：杨苏坤董依萌王洪亮赵喜堂陈旭邢秀梅中国农业科学院特产研究所农业农村部特种经济动物遗传育种与繁殖重点实验室长春130112 新疆兵团第二师三十四团农业发展服务中心库尔勒841506 东北林业大学野生动物与自然保护地学院哈尔滨150006

旨在从分子层面探究塔河马鹿种公鹿的遗传多样性和塔河马鹿的祖先类型。本研究在锯茸期采集新鲜血液并提取DNA,通过PCR扩增和直接测序的方法对38头塔河马鹿种公鹿Y染色体的AMELY2、DBY、SRY基因和mtDNA的ND1、COX1、ATP6、ND5、Cytb基... 详细信息

旨在从分子层面探究塔河马鹿种公鹿的遗传多样性和塔河马鹿的祖先类型。本研究在锯茸期采集新鲜血液并提取DNA,通过PCR扩增和直接测序的方法对38头塔河马鹿种公鹿Y染色体的AMELY2、DBY、SRY基因和mtDNA的ND1、COX1、ATP6、ND5、Cytb基因进行分析,计算碱基组成、核苷酸多样性(Pi)、平均核苷酸差异数(K)、Tajima’D值、单倍型数量(H)以及单倍型多样性(Hd)来评估塔河马鹿种公鹿的遗传多样性;构建单倍型网络图并计算各单倍型之间的遗传距离,以白唇鹿为外群构建系统进化树,分析塔河马鹿种公鹿父母系的类型。结果显示,Y染色体的AMELY2、DBY、SRY基因比对后拼接长度为3577 bp,共检测出17个SNPs多态位点,定义4个单倍型,优势单倍型为Hap-1,所占频率为65.79%。核苷酸多样性为0.00195,单倍型多样性为0.4950,遗传多样性水平较低,基于Y染色体基因构建的系统进化树显示存在A、B两大分支。mtDNA的ND1、COX1、ATP6、ND5、Cytb基因比对后拼接长度为6160 bp,共检测出41个SNPs多态位点,定义8个单倍型,优势单倍型为Hap-1,所占频率为47.37%。核苷酸多样性为0.00154,单倍型多样性为0.6999,表现出高单倍型多样性低核苷酸多样性的不平衡状态,遗传多样性处于较低水平,基于mtDNA构建的系统进化树显示存在Ⅰ、Ⅱ两大分支。塔河马鹿种公鹿的遗传多样性处于较低的水平,塔河马鹿群体存在两个祖先类型。

关键词： mtDNA Y染色体塔河马鹿种公鹿遗传多样性

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满意度视角下山海关区小学教师队伍建设研究

满意度视角下山海关区小学教师队伍建设研究

作者：董依萌燕山大学

学位级别：硕士

论文以秦皇岛山海关区小学教师为研究对象,基于马斯洛需要层次理论、赫茨伯格双因素理论和亚当斯公平理论,应用问卷调查、深度访谈等方法,从小学教师对职业管理、职业回报、职业发展等问题的满意度角度,以主位视角探索小学教师队伍建设... 详细信息

论文以秦皇岛山海关区小学教师为研究对象,基于马斯洛需要层次理论、赫茨伯格双因素理论和亚当斯公平理论,应用问卷调查、深度访谈等方法,从小学教师对职业管理、职业回报、职业发展等问题的满意度角度,以主位视角探索小学教师队伍建设问题。通过量化分析,研究认为,对薪酬待遇水平、考核评价制度、培训进修和职业发展的低满意度,是小学教师的普遍情况,更是影响其工作积极性,进而影响教育教学质量的重要因素,而造成这些低满意度的原因,除了一些个体原因外,从总体上却是源于管理制度不健全、激励制度不完善、付出回报不对等和发展目标不明确。基于此,论文尝试从促进管理部门规划设计、完善学校中教师评价与激励机制、建立高效监督体系和提升教师的专业化发展四个方面提出加强小学教师队伍建设的一些针对性建议:切实提高教师待遇,进行教师资源规划,完善相关政策体系;建立科学的评价体系、构建有效的激励机制;优化外部监管、深化内部监督作用;合理安排教师培训与继续教育工作、完善教师心理健康管理、组织教师进行职业发展规划。

关键词：小学教师教师满意度教师队伍建设教师管理

基于重测序技术的塔河马鹿特异性SNP位点筛选

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中国畜牧兽医 2022年第4期49卷 1413-1421页

作者：邓伊华王天娇王洪亮董依萌刘欣邢秀梅东北林业大学野生动物与自然保护地学院哈尔滨150006 中国农业科学院特产研究所特种经济动物分子生物重点实验室长春130112

【目的】筛选出塔河马鹿高质量的单核苷酸多态性位点(SNP),构建特异性分子遗传标记,为塔河马鹿的纯种鉴别提供参考。【方法】对国家特种经济动物资源共享平台1999年收集整理的32份塔河马鹿血液DNA样本进行全基因组重测序,与梅花鹿染色... 详细信息

【目的】筛选出塔河马鹿高质量的单核苷酸多态性位点(SNP),构建特异性分子遗传标记,为塔河马鹿的纯种鉴别提供参考。【方法】对国家特种经济动物资源共享平台1999年收集整理的32份塔河马鹿血液DNA样本进行全基因组重测序,与梅花鹿染色体级别的参考基因组进行比对,统计比对率、覆盖度和测序深度。用SNPEff统计每条染色体上SNP位点的分布,用SNPhylo基于位点构建分子进化树,用VCFTOOLS计算遗传分化指数(Fst),按降序排序并设定阈值Fst≥0.25,淘汰不符合条件位点,用R语言进行主成分分析(PCA),统计33条染色体排名前1500的SNPs位点,提取前100个SNPs集合的特征值,分别进行主成分分析。【结果】全基因组重测序结果表明,32份质检合格的塔河马鹿血液基因组DNA有效数据量为868791354600 bp,测序质量均符合后续数据分析要求。32份样品测序数据的平均比对率为98.06%,平均覆盖度为97.66%,平均深度为6.787。过滤后得到20139122个高质量的SNPs位点,其中4号染色体上SNPs分布最多,90%以上的变异位于基因间和外显子区域。建树后候选特异性SNPs位点数为12050781个。使用VCFTOOLS筛选得到544717个SNPs位点。选取每条染色体排名前1500的SNPs位点进行主成分分析,主成分分析结果显示,当SNPs从49500降至100时区分效力没有下降,最终筛选出100个特异性强、稳定性高的塔河马鹿SNPs位点。【结论】通过全基因组重测序技术和生物信息学分析得到了100个塔河马鹿特异性SNPs位点,为塔河马鹿的纯种鉴别以及核心种质的筛选工作提供了理论依据。

关键词：塔河马鹿重测序技术 SNPs 筛选

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微卫星标记及其在动物亲缘关系鉴定中的应用

基因组学与应用生物学 2018年第4期37卷 1406-1412页

作者：张正义邢秀梅胡鹏飞刘松啸董依萌鞠贵春吉林农业大学中药材学院长春130118 中国农科院特产研究所长春130112

未来养殖业的持续发展中,离不开完善的家族系谱,微卫星的亲子鉴定为精确繁殖策略和群体总体质量提供了有力的工具。只有利用亲子鉴定技术才能对家族系谱进行有效的修改和完善,才能进行优势选择,扩大优势生产力。微卫星分子具有共显性遗... 详细信息

未来养殖业的持续发展中,离不开完善的家族系谱,微卫星的亲子鉴定为精确繁殖策略和群体总体质量提供了有力的工具。只有利用亲子鉴定技术才能对家族系谱进行有效的修改和完善,才能进行优势选择,扩大优势生产力。微卫星分子具有共显性遗传、稳定性好、多态性高等特点,已经成为第二代分子标记,并在动物上面应用广泛。通过对猪、马、羊、牛等大家畜、禽类、鱼类、鹿科动物和其它动物亲子鉴定,阐述微卫星在不同动物亲缘关系鉴定中的应用,探索出在不同动物中设计了适合该物种的多态性的微卫星引物和亲子鉴定的方法,并对动物亲缘关系鉴定的应用还需注意的问题进行了探讨。

关键词：微卫星分子标记亲子鉴定

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马鹿的起源进化与遗传多样性研究进展

中国畜牧兽医 2021年第12期48卷 4575-4587页

作者：房瑞新田雪琪邹晨董依萌刘欣邢秀梅中国农业科学院特产研究所长春130112 东北林业大学哈尔滨150040

马鹿是非常重要的物种资源,由于栖息地的流失和人为干扰进行近亲繁殖等导致野生马鹿数量急剧减少,而家养马鹿多经过改良,因此马鹿的纯种数量锐减。对马鹿进行分子遗传学研究不仅可以加深人们对马鹿起源和物种形成的认识,还能帮助开展遗... 详细信息

马鹿是非常重要的物种资源,由于栖息地的流失和人为干扰进行近亲繁殖等导致野生马鹿数量急剧减少,而家养马鹿多经过改良,因此马鹿的纯种数量锐减。对马鹿进行分子遗传学研究不仅可以加深人们对马鹿起源和物种形成的认识,还能帮助开展遗传多样性保护研究。随着高通量测序技术、分子生物学和生物信息学的迅速发展,马鹿的起源进化研究已发展到全基因组水平,并取得了一定的成果。马鹿的起源进化研究从最初对体态外貌和染色体核型的研究逐渐发展到对DNA序列与生理指标的研究。文章回顾了近年来国内外对马鹿起源进化和遗传多样性方面的研究,从起源时间、起源地和迁徙路线等方面揭示了马鹿的演化历史,介绍了父系、母系和常染色体研究方面分析了马鹿遗传多样性选取的不同分子标记,为进一步揭示马鹿种群的遗传变异、分化情况、迁徙路线和系统发育关系等提供基础信息,同时为马鹿遗传资源的利用和保护以及马鹿产业的良性发展提供重要的借鉴与参考。

关键词：马鹿起源进化遗传多样性