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正交设计探讨续苓健骨方对快速骨丢失模型大鼠的组方优化研究

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中国骨质疏松杂志 2024年第7期30卷 1006-1012页

作者：陈赛楠李生强谢丽华陈玄黄景文叶云金葛继荣福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学研究室福建福州350003 福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院、福建中医药大学附属康复医院) 福建福州350003 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122 福建省中西医结合老年性疾病重点实验室福建福州350122

目的通过正交设计观察续苓健骨方中的药物对卵巢切除术(ovariectomy, OVX)模型大鼠骨密度、骨微结构和骨代谢影响的主次作用,并探讨疗效较佳优化组别的潜在作用机制。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓健骨方组、优化1组、优化... 详细信息

目的通过正交设计观察续苓健骨方中的药物对卵巢切除术(ovariectomy, OVX)模型大鼠骨密度、骨微结构和骨代谢影响的主次作用,并探讨疗效较佳优化组别的潜在作用机制。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓健骨方组、优化1组、优化2组、优化3组、优化4组、优化5组、优化6组、优化7组和优化8组,每组10只,采用OVX制备大鼠快速骨丢失模型,连续灌胃12周后取材备检。双能X线骨密度仪检测胫骨近端骨密度,micro-CT检测胫骨微观结构,ELISA检测血清骨吸收金指标CTX和骨形成金指标PINP的含量,Real-time PCR和Western blot检测股骨OPG、RANKL mRNA和蛋白的表达水平。结果续苓健骨方组、优化4组、6组和7组骨密度均显著升高(P<0.05),优化4和7组Tb.N和BV/TV显著升高(P<0.001),续苓健骨方组和优化1~8组血清CTX、PINP均不同程度降低,续苓健骨方组和优化7组OPG mRNA和蛋白表达水平显著升高、RANKL mRNA和蛋白表达水平显著降低。结论优化4组、6组和7组是治疗效果较好的组别,可通过调控OPG/RANKL发挥抗骨质疏松作用,续断、骨碎补、女贞子、红花和川芎是续苓健骨方取效的主要有效药物。

关键词：绝经后骨质疏松症续苓健骨方正交设计 OPG/RANKL 中医中药

阿仑膦酸钠治疗骨质疏松模型大鼠机制的串联质量标签蛋白质组学分析

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中国组织工程研究 2024年第16期28卷 2505-2511页

作者：黄惠敏谢冰颖黄景文黄小彬谢丽华李生强葛继荣福建中医药大学福建省福州市350003 福建省中医药科学院基础研究所福建省福州市350003 福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院福建中医药大学附属康复医院)福建省福州市350003

背景:目前关于阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的作用机制及作用靶点,仍需深入研究。目的:探究阿仑膦酸钠调节骨质疏松模型大鼠骨代谢的作用机制,并进行差异表达蛋白生物信息学分析。方法:雌性SD大鼠随机分为模型组、阿仑膦酸钠组、假手术组,... 详细信息

背景:目前关于阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的作用机制及作用靶点,仍需深入研究。目的:探究阿仑膦酸钠调节骨质疏松模型大鼠骨代谢的作用机制,并进行差异表达蛋白生物信息学分析。方法:雌性SD大鼠随机分为模型组、阿仑膦酸钠组、假手术组,每组12只,前两组均采用去卵巢法建立骨质疏松症模型,造模4周后阿仑膦酸钠组大鼠予阿仑膦酸钠灌胃;另外两组予等体积生理盐水。连续灌胃12周后测定胫骨骨密度,采用串联质量标签联合液相色谱-串联质谱法联用技术对大鼠腰椎进行蛋白质组学分析,筛选出差异表达蛋白,并进行基因本体、京都基因和基因组百科全书通路及蛋白相互作用网络分析。结果与结论:①筛选出阿仑膦酸钠组与模型组组间上调/下调差异表达蛋白分别为32个/51个;②基因本体富集分析结果显示,差异表达蛋白主要参与结合、催化活性等分子功能以及细胞过程、代谢过程等生物过程;③京都基因和基因组百科全书富集分析结果显示,阿仑膦酸钠组/模型组组间差异表达蛋白功能主要参与泛酸和辅酶A的生物合成过程;④蛋白相互作用分析结果表明,阿仑膦酸钠组/模型组组间共同差异表达蛋白中Hspa1l、Enpp3、Unc45a、Myh9、Cant1位于蛋白互作网络节点并与骨代谢密切相关;⑤结果显示,阿仑膦酸钠可能通过调控差异表达蛋白及泛酸和辅酶A生物合成过程来调节骨质疏松模型大鼠的骨代谢。

关键词：阿仑膦酸钠串联质量标签技术骨质疏松蛋白质组学蛋白互作差异表达蛋白骨代谢

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不同滋阴补肾法干预去势大鼠破骨通路的机制

中国组织工程研究 2025年第6期29卷 1214-1219页

作者：黄小彬葛继荣李生强谢丽华黄景文何艳艳薛立鹏福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学重点研究室福建省福州市350000 福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院福建中医药大学附属康复医院)福建省福州市350000

背景:六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点,补泻兼施以滋阴补肾;左归丸以“阳中求阴”为配伍特点,以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法,其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的:观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用,探讨... 详细信息

背景:六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点,补泻兼施以滋阴补肾;左归丸以“阳中求阴”为配伍特点,以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法,其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的:观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用,探讨其在破骨通路骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptoractivatorofnuclearfactor-κBligand,RANKL)的作用机制。方法:将32只SD随机大鼠分为模型组、六味地黄丸组、左归丸组、假手术组,每组8只。除假手术组大鼠外,其余大鼠切除双侧卵巢制备骨质疏松模型。术后30 d开始六味地黄丸组大鼠灌胃六味地黄丸1.125 g/(kg·d);左归丸组大鼠灌胃左归丸2.25 g/(kg·d);假手术组和模型组灌胃生理盐水10 mL/(kg·d)。灌胃12周后,取大鼠胫骨检测骨密度,采用ELISA检测血清中雌激素E2、骨碱性磷酸酶、cAMP/cGMP水平,Westernblot法检测股骨中OPG/RANKL的表达情况。结果与结论:①与假手术组相比,模型组骨密度及雌激素E2、骨碱性磷酸酶水平降低(P0.05)。③结果显示,“阳中求阴”的左归丸能够有效提高OPG表达,不能下调RANKL蛋白,而“三补三泻”的六味地黄丸能双向调节OPG和RANKL蛋白的表达,提示了六味地黄丸对抑制破骨功能方面可能比左归丸显著,此结论仍有待进一步的研究加以验证。

关键词：绝经后骨质疏松症肾阴虚证六味地黄丸左归丸骨保护 OPG RANKL 蛋白印迹

阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠骨质疏松的腰椎代谢组学分析

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2277-2284页

作者：陈鑫飞戴雅惠谢冰颖黄小彬黄惠敏黄景文李生强葛继荣福建中医药大学福建省福州市350003 福建省中医药科学院基础研究所福建省福州市350003 福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院福建中医药大学附属康复医院)福建省福州市350003

背景:研究报道,阿仑膦酸钠的摄入能显著提高骨质疏松症患者的骨密度。目的:利用色谱-质谱技术分析比对阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠模型前后代谢物变化,进一步探索阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的具体机制及作用靶点。方法:选择雌性SD大鼠36只... 详细信息

背景:研究报道,阿仑膦酸钠的摄入能显著提高骨质疏松症患者的骨密度。目的:利用色谱-质谱技术分析比对阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠模型前后代谢物变化,进一步探索阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的具体机制及作用靶点。方法:选择雌性SD大鼠36只,随机分为骨质疏松症组、阿仑膦酸钠组及假手术组,前两组采用去卵巢法建立骨质疏松症模型。造模4周后,阿仑膦酸钠组大鼠给予阿仑膦酸钠灌胃;假手术组和骨质疏松症组分别给予等体积生理盐水灌胃。连续灌胃12周后,通过色谱-质谱技术分析腰椎代谢物,得出共同差异代谢物,对其进行京都基因与基因组百科全书通路等生物信息学分析。结果与结论:①3组共得到17种共同显著性差异代谢物;②通过京都基因与基因组百科全书富集分析表明,阿仑膦酸钠可能调节不饱和脂肪酸生物合成、亚油酸代谢等通路保护去卵巢模型大鼠;③结果提示,阿仑膦酸钠可能通过干预不饱和脂肪酸生物合成代谢和亚油酸代谢发挥其抗骨质疏松作用,从而达到预防骨质疏松症的目的。

关键词：骨质疏松代谢组学阿仑膦酸钠亚油酸代谢不饱和脂肪酸生物合成差异代谢物色谱-质谱技术中医药

基于HIF-1α/VEGF通路探讨续苓健骨方对去卵巢大鼠骨代谢和局部血管生成的影响

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福建中医药 2024年第1期55卷 21-24,31页

作者：谢冰颖李生强林若慧黄小彬黄景文谢丽华葛继荣福建中医药大学中医学院福建福州350122 福建省中医药科学院福建福州350003 福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室福建福州350003

目的基于低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路探讨续苓健骨方对去卵巢大鼠骨代谢和局部血管生成的影响。方法将24只3月龄大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓组和雌二醇组,每组6只。假手术组大鼠仅摘除双侧卵巢周... 详细信息

目的基于低氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路探讨续苓健骨方对去卵巢大鼠骨代谢和局部血管生成的影响。方法将24只3月龄大鼠随机分为假手术组、模型组、续苓组和雌二醇组,每组6只。假手术组大鼠仅摘除双侧卵巢周围部分脂肪,其余3组均摘除双侧卵巢。摘除1周后,续苓组按体质量1 mL/(100 g·d)灌胃含生药浓度1.5 g/mL续苓健骨方药液,雌二醇组按体质量1 mL/(100 g·d)灌胃0.0125 mg/mL雌二醇药液,假手术组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,每日1次。干预12周后检测4组大鼠左胫骨近端骨密度、左股骨远端骨小梁面积百分比(Tb.Ar%)、骨小梁宽度(Tb.Wi)、骨小梁间距(Tb.Sp)以及血清雌二醇(E_(2))、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(P1NP)、Ⅰ型胶原交联C末端肽(S-CTX)水平,免疫组化法检测4组大鼠左股骨远端分化决定簇抗原31(CD31)、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组左胫骨近端骨密度下降(P0.05),Tb.Ar%降低,Tb.Sp变大,血清E_(2)、P1NP水平降低,S-CTX水平上升,左股骨远端HIF-1α、VEGF蛋白表达水平显著下降(P均0.05),Tb.Ar%增高,Tb.Sp缩小,血清E_(2)、P1NP水平升高,续苓组S-CTX水平下降(P均0.05)。结论续苓健骨方能上调股骨远端骨组织HIF-1α/VEGF表达,促进血管生成及骨形成,从而稳定骨代谢,减少去卵巢大鼠的骨丢失。

关键词：骨质疏松血管生成骨代谢 HIF-1α/VEGF 续苓健骨方

阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠骨质疏松的腰椎代谢组学分析

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中国组织工程研究 2024年

作者：陈鑫飞戴雅惠谢冰颖黄小彬黄惠敏黄景文李生强葛继荣 1.福建中医药大学 2.福建省中医药科学院基础研究所 3.福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室(福建省中医药科学院,福建中医药大学附属康复医院)

背景：研究报道，阿仑膦酸钠的摄入能显著提高骨质疏松症患者的骨密度。目的：利用色谱-质谱技术分析比对阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠模型前后代谢物变化，进一步探索阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的具体机制及作用靶点。方法：选择雌性SD大... 详细信息

背景：研究报道，阿仑膦酸钠的摄入能显著提高骨质疏松症患者的骨密度。目的：利用色谱-质谱技术分析比对阿仑膦酸钠干预去卵巢大鼠模型前后代谢物变化，进一步探索阿仑膦酸钠治疗骨质疏松症的具体机制及作用靶点。方法：选择雌性SD大鼠36只，随机分为骨质疏松症组、阿仑膦酸钠组及假手术组，前两组采用去卵巢法建立骨质疏松症模型。造模4周后，阿仑膦酸钠组大鼠给予阿仑膦酸钠灌胃；假手术组和骨质疏松症组分别给予等体积生理盐水灌胃。连续灌胃12周后，通过色谱-质谱技术分析腰椎代谢物，得出共同差异代谢物，对其进行京都基因与基因组百科全书通路等生物信息学分析。结果与结论：(1)3组共得到17种共同显著性差异代谢物；(2)通过京都基因与基因组百科全书富集分析表明，阿仑膦酸钠可能调节不饱和脂肪酸生物合成、亚油酸代谢等通路保护去卵巢模型大鼠；(3)结果提示，阿仑膦酸钠可能通过干预不饱和脂肪酸生物合成代谢和亚油酸代谢发挥其抗骨质疏松作用，从而达到预防骨质疏松症的目的。

关键词：骨质疏松代谢组学阿仑膦酸钠亚油酸代谢不饱和脂肪酸生物合成差异代谢物色谱-质谱技术中医药

从肝脾肾探讨原发性骨质疏松症与老年衰弱综合征

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中国骨质疏松杂志 2023年第5期29卷 671-675页

作者：林嵛镌葛继荣福建省中医药科学院福建福州350003 福建省中西医结合防治骨质疏松重点实验室福建福州350003

骨质疏松症(osteoporosis, OP)是一种全身代谢性骨病,随着我国人口老龄化进程的发展,原发性OP和老年衰弱综合征成为目前常见的两种老年疾病。在中医理论方面,原发性OP以肾虚为本,脾虚为源,肝虚为关键,衰弱多由于老年人五脏俱虚,脾肾尤甚... 详细信息

骨质疏松症(osteoporosis, OP)是一种全身代谢性骨病,随着我国人口老龄化进程的发展,原发性OP和老年衰弱综合征成为目前常见的两种老年疾病。在中医理论方面,原发性OP以肾虚为本,脾虚为源,肝虚为关键,衰弱多由于老年人五脏俱虚,脾肾尤甚,二者有部分相同的病机。从分子生物学角度,二者在钙磷调节激素、外泌体、营养物质、炎症因子等方面均有联系。通过对相关文献的梳理和总结,从肝脾肾和分子生物学角度寻找原发性OP和衰弱之间的相同点,为后续两种疾病的预防和治疗提供理论依据。

关键词：中医理论肝脾肾原发性骨质疏松症老年衰弱综合征

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基于学科核心素养的高中生物课堂教学探究

试题与研究 2023年第16期 63-65页

作者：葛继荣甘肃省天水市第三中学

核心素养成为高中生物教学的重要导向，对生物教师的教学活动提出了更高的要求，教师应当准确把握生物学科核心素养的内涵，将核心素养全面融入教学活动中，关注学生核心素养的发展情况，助力学生实现知识、素养和情感多元发展。对此，... 详细信息

核心素养成为高中生物教学的重要导向，对生物教师的教学活动提出了更高的要求，教师应当准确把握生物学科核心素养的内涵，将核心素养全面融入教学活动中，关注学生核心素养的发展情况，助力学生实现知识、素养和情感多元发展。对此，本文从生物学科核心素养的内涵出发，分析了培养学生核心素养的必要性，进而针对如何帮助学生形成生物核心素养提出建议，希望通过本文的研究，可以引起师生对核心素养的重视，使核心素养培养理念有效融入课堂教学中。

关键词：高中生物核心素养课堂教学

女性原发性骨质疏松症与中医肝脾亏虚的关联分析

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中国骨质疏松杂志 2022年第10期28卷 1472-1475页

作者：蒋红柴昊郭澜谢丽华葛继荣福建中医药大学福建福州350122 福建省中医药科学院骨质疏松证候基因组学重点研究室福建福州350003

目的探讨女性原发性骨质疏松症(primary osteoporosis,POP)与中医肝脾亏虚的关联性,为运用健脾、补肝法防治POP提供临床依据。方法对近15年来在我院骨质疏松专科门诊检测的女性3350例进行回顾性研究,结合问卷调查、骨密度检测和中医辨证... 详细信息

目的探讨女性原发性骨质疏松症(primary osteoporosis,POP)与中医肝脾亏虚的关联性,为运用健脾、补肝法防治POP提供临床依据。方法对近15年来在我院骨质疏松专科门诊检测的女性3350例进行回顾性研究,结合问卷调查、骨密度检测和中医辨证,采用SPSS统计软件分析。结果纳入2692例,其中,POP组934例,无POP组1758例,POP组中肝虚418例(44.80%)、脾虚159例(17.00%),无POP组中肝虚803例(45.70%)、脾虚232例(13.20%),脾虚在两组间的差异有统计学意义(P0.05);②与无POP妇女相比,女性POP与脾虚、肝脾俱虚存在相关性(P<0.05);③二分类Logistic回归结果显示女性POP的危险因素包括年龄、脾虚(P<0.05)。结论肝脾亏虚是女性POP的重要因素;脾虚是女性POP发病的危险因素;肝虚在绝经后及老年妇女中发生率均较高,但不随着骨量丢失而进一步增加。

关键词：脾虚证肝虚证原发性骨质疏松症相关性