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利什曼原虫K26基因的克隆、表达和检测我国内脏利什曼病特异抗体的效果评价

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中国人兽共患病学报 2024年

作者：丁丹王颖高春花莫筱瑾石锋张璟贾孝凯危芙蓉上海市浦东新区疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际联合研究中心

目的分别克隆并表达分离于我国3种类型内脏利什曼病流行区的利什曼原虫K26基因，并对其检测我国内脏利什曼病特异抗体的效果进行评价。方法分别将我国新疆喀什（KS-6株）、四川九寨沟县（SC6株）和新疆伽师县（JIASHI-1株）K26基因进... 详细信息

目的分别克隆并表达分离于我国3种类型内脏利什曼病流行区的利什曼原虫K26基因，并对其检测我国内脏利什曼病特异抗体的效果进行评价。方法分别将我国新疆喀什（KS-6株）、四川九寨沟县（SC6株）和新疆伽师县（JIASHI-1株）K26基因进行全基因合成并加入BamH I 与Xho I酶切位点，分别将K26基因连接至双酶切的pET32a表达载体，转入大肠埃希菌（E. coli）BL21 （DE3）中经1 mmol/L 的异丙基-β-D-半乳糖苷（IPTG）进行诱导表达，用组氨酸标签亲和纯化柱（Ni-NTA树脂）纯化重组蛋白。用制备的3种抗原分别作为包被抗原，以酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）检测病原学确诊的内脏利什曼病患者及其它寄生虫病患者和健康者血清中抗体，以评价其检测的敏感性和特异性。用美国InBios公司rK39（Recombinant K39， rK39）试条进行平行检测。同时用χ2检验比较3种抗原检测的敏感性。结果成功构建利什曼原虫pET32a-K26重组质粒，并在原核细胞中成功表达。以KS-6株、SC6株、JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白为包被抗原的ELISA法和rK39试条法检测黑热病患者血清的敏感性分别为90.00%（99/110）、92.73%（102/110）、90.91%（100/110）和93.64%（103/110），共检测45份其他寄生虫病患者血清包括日本血吸虫病、疟疾、细粒棘球蚴病、华支睾吸虫病、并殖吸虫病和弓形虫病均无交叉反应，健康者血清（40份）也无假阳性反应，特异性均为100.00%。KS-6株、SC6株和JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白ELISA法和rK39试条法的阳性检出率差异无统计学意义(χ2KS-6= 0.97，P =0.33；χ2SC6=0.07，P =0.79；χ2JIASHI-1=0.57，P =0.45)。3种K26抗原的阳性检出率之间的差异无统计学意义(χ2=0.53，Ｐ=0.97)。结论重组K26抗原在内脏利什曼病诊断上具有潜在的应用价值。

关键词：内脏利什曼病 rK26 基因克隆表达酶联免疫吸附试验 rK39 评价

以创新创业为导向的高职工程管理专业教育模式探究

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创新创业理论研究与实践 2024年第2期7卷 146-148页

作者：陈晓桐莫筱婵广西建设职业技术学院广西南宁530007

随着高职学生就业压力的增大,推动高职学生就业观念的转变已成为一项紧迫的任务。加速创新创业和专业教育的有机融合,在创新创业大背景下实现“就业迈向创业”的任务目标,已成为提高就业率的重要途径。该文针对目前高职工程管理专业中... 详细信息

随着高职学生就业压力的增大,推动高职学生就业观念的转变已成为一项紧迫的任务。加速创新创业和专业教育的有机融合,在创新创业大背景下实现“就业迈向创业”的任务目标,已成为提高就业率的重要途径。该文针对目前高职工程管理专业中创新创业教育与专业教育的关系及融合现状,探讨创建“3+2”人才培养模式,从课程体系内容、师资培养等几个方面提出相应的解决措施。

关键词：高职工程管理创新创业专业教育人才培养第二课堂

2016—2022年青海省新发现棘球蚴病病例时空分布特征

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中国血吸虫病防治杂志 2024年

作者：崔馨禄马霄刘娜刘佳雷雯吴树声秦香兰才仁尼玛龚春花莫筱瑾杨诗杰张颋曹莉海南医科大学公共卫生学院青海省地方病预防控制所青海省玉树藏族自治州疾病预防控制中心青海省玉树市疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室

目的分析2016—2022年青海省新发现棘球蚴病病例时空分布特征及潜在影响因素，为制定青海省棘球蚴病防治策略提供参考依据。方法自2016—2022年青海省棘球蚴病防治项目年报表获取棘球蚴病筛查人数、新发现棘球蚴病病例数、登记管理犬... 详细信息

目的分析2016—2022年青海省新发现棘球蚴病病例时空分布特征及潜在影响因素，为制定青海省棘球蚴病防治策略提供参考依据。方法自2016—2022年青海省棘球蚴病防治项目年报表获取棘球蚴病筛查人数、新发现棘球蚴病病例数、登记管理犬数、流浪犬数等数据，计算新发现棘球蚴病病例检出率。检索《青海省统计年鉴》，获取青海省各县（市、区）人口数、降水量、温度、风速、日照时数、平均海拔、年末牛存栏数、年末羊存栏数、人均国内生产总值（gross domestic product,GDP）、村卫生室数等数据。于国家地理信息公共服务平台下载青海省县级电子地图，采用ArcGIS 10.8软件绘制青海省新发现棘球蚴病病例分布电子地图，并进行空间自相关分析。采用SaTScan 10.1.2软件对青海省棘球蚴病筛查人数、新发现棘球蚴病病例数、地理坐标进行时空扫描分析，采用地理探测器（GeoDetector）分析新发现棘球蚴病病例检出率空间分层异质性。结果 2016—2022年，青海省累计筛查棘球蚴病6 569 426人，新发现棘球蚴病病例5 924例，各年新发现棘球蚴病病例检出率呈逐年下降趋势（χ2=11.107,P 1.96,P均 0.05）。局部空间自相关分析发现，2016—2022年青海省新发现棘球蚴病病例检出率“高-高”聚集区和“低-低”聚集区均呈聚集趋势。时空扫描分析发现，2016—2022年青海省新发现棘球蚴病病例一级聚集区主要分布于玉树藏族自治州和果洛藏族自治州。基于地理探测器的青海省新发现棘球蚴病病例检出率空间分层异质性驱动因子分析发现，平均海拔、村卫生室数、牛羊存栏数、人均GDP、年均日照时数和年均温度对其空间分布的解释力较强，q值分别为0.630、0.610、0.600、0.590、0.588、0.537和0.526。结论 2016—2022年青海省新发现棘球蚴病病例检出率逐年下降，呈一定空间聚集性分布。应在青海省新发现棘球蚴病病例聚集区开展有针对性防控，以进一步控制该病流行。

关键词：棘球蚴病新发现病例空间自相关空间聚集性空间分层异质性青海省

利什曼原虫K26基因的克隆、表达及用于我国内脏利什曼病特异性抗体检测的效果评价

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中国人兽共患病学报 2024年第8期40卷 763-767页

作者：丁丹王颖高春花莫筱瑾石锋张璟贾孝凯危芙蓉上海市浦东新区疾病预防控制中心上海200136 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心) 国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际联合研究中心上海200025

目的克隆并表达分离于我国3种类型的利什曼原虫K26基因,并用其检测我国内脏利什曼病特异性抗体,同时进行效果评价。方法分别将我国新疆喀什(KS-6株)、四川九寨沟县(SC6株)和新疆伽师县(JIASHI-1株)K26基因进行全基因合成并加入Bam H I与... 详细信息

目的克隆并表达分离于我国3种类型的利什曼原虫K26基因,并用其检测我国内脏利什曼病特异性抗体,同时进行效果评价。方法分别将我国新疆喀什(KS-6株)、四川九寨沟县(SC6株)和新疆伽师县(JIASHI-1株)K26基因进行全基因合成并加入Bam H I与Xho I酶切位点,分别将K26基因连接至双酶切的pET32a表达载体,转入大肠埃希菌(***)BL21(DE3)中经1 mmol/L的异丙基-β-D-半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用组氨酸标签亲和纯化柱(Ni-NTA树脂)纯化重组蛋白。用制备的3种抗原分别作为包被抗原,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测病原学确诊的内脏利什曼病患者及其它寄生虫病患者和健康者的血清中和抗体,以评价其检测的敏感性和特异性。用美国InBios公司rK39试条进行平行检测,比较3种抗原检测的敏感性。结果成功构建利什曼原虫pET32a-K26重组质粒,并在原核细胞中成功表达。以KS-6株、SC6株、JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白为包被抗原的ELISA法和rK39试条法检测黑热病患者血清的敏感性分别为90.00%(99/110)、92.73%(102/110)、90.91%(100/110)和93.64%(103/110),共检测45份其他寄生虫病患者(包括日本血吸虫病、疟疾、细粒棘球蚴病、华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病和弓形虫病)的血清均无交叉反应,健康者血清(40份)也无假阳性反应,特异性均为100.00%。KS-6株、SC6株和JIASHI-1株利什曼原虫重组K26蛋白ELISA法和rK39试条法的阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)_(KS)-6=0.97,P=0.33;χ^(2)_(SC6)=0.07,P=0.79;χ^(2)_(JIASHI)-1=0.57,P=0.45)。3种K26抗原的阳性检出率差异无统计学意义(χ^(2)=0.53,P=0.97)。结论重组K26抗原在内脏利什曼病诊断上具有潜在的应用价值。

关键词：内脏利什曼病 rK26 基因克隆表达酶联免疫吸附试验 rK39 评价

多房棘球蚴感染诱导肝窦内皮细胞发生毛细血管化的动态研究

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第1期36卷 34-43页

作者：张仁杰谢俊卫繁娜莫筱瑾宋鹏蔡玉春卢艳孙家辉周魇林琳张颋陈木新中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)、传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室、WHO热带病合作中心、科技部国家级热带病国际联合研究中心上海200025 海南热带病研究中心(国家热带病研究中心海南分中心) 海南海口571199 内蒙古大学生命科学学院广东省深圳市疾病预防控制中心广东深圳518073

目的观察泡型棘球蚴病发展过程中肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSEC)毛细血管化现象及与肝纤维化的关系,为探索LSEC在泡型棘球蚴病所致肝损伤和肝纤维化发生和转归中的作用机制奠定基础。方法取40只C57BL/6小鼠(6~... 详细信息

目的观察泡型棘球蚴病发展过程中肝窦内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSEC)毛细血管化现象及与肝纤维化的关系,为探索LSEC在泡型棘球蚴病所致肝损伤和肝纤维化发生和转归中的作用机制奠定基础。方法取40只C57BL/6小鼠(6~8周龄),随机分为对照组和感染1、2、4周组,每组各10只。感染1、2、4周组每只小鼠经肝脏直视穿刺注射接种2000个多房棘球蚴原头节,对照组用相同方法注射等量磷酸盐缓冲液。在感染后1、2、4周,取小鼠肝脏,经苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后观察肝脏病理变化,经Masson三色染色后对染色阳性区域面积进行半定量分析以判断肝纤维化程度,采用免疫组织化学染色法评价α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白α1(collagen typeⅠalpha 1,COL1A1)表达水平以判断肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)活化和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积,用扫描电子显微镜观察LSEC表面窗孔。从小鼠肝脏中分离原代LSEC,用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qPCR)法检测LSEC标志基因稳定素(Stabilin)-1、Stabilin-2、Ehd3、CD209b、GATA4、Maf mRNA表达水平。结果多房棘球蚴感染2周后,可见小鼠肝脏局部肝小叶结构被破坏;感染4周后,小鼠肝脏可见多房棘球蚴囊泡,周围有肉芽肿组织包绕。Masson三色染色半定量分析结果显示,4组小鼠肝脏内胶原纤维比例差异有统计学意义(F=26.060,P<0.001),感染4周组小鼠肝脏内胶原纤维比例[(11.29±2.58)%]较对照组增加(P<0.001)。免疫组织化学染色结果显示,感染1、2周组小鼠肝脏内见少量HSC活化和ECM沉积;感染4周组小鼠肝组织中可见大量棕黄色α-SMA和COL1A1聚集沉积在病变区域,并向周围扩散。半定量分析结果显示,4组小鼠肝脏内α-SMA和COL1A1表达水平差异均有统计学意义(F=7.667、6.530,P均<0.05),感染4周组小鼠肝脏内α-SMA[(7.13±3.68)%]和COL1A1[(13.18±7.20)%]表达水平均较对照组增加(P均<0.05)。扫描电子显微镜结果显示,4组小鼠LSEC开窗频率和孔隙率差异均有统计学意义(F=37.730、16.010,P均<0.001),感染1[分别为(1.22±0.48)个/μm^(2)、(3.05±0.91)%]、2周组[分别为(3.47±0.10)个/μm^(2)、(7.57±0.23)%]小鼠LSEC开窗频率和孔隙率均较对照组降低(P均<0.001)。4组小鼠LSEC平均窗孔直径差异有统计学意义(F=15.330,P<0.001),感染1[(180.80±16.42)nm]、2周组[(161.70±3.85)nm]小鼠LSEC平均窗孔直径均较对照组增加(P均<0.05)。4组小鼠LSEC中Stabilin-1、Stabilin-2、Ehd3、CD209b、GA TA4、Maf mRNA表达水平差异均有统计学意义(F=153.100、57.010、31.700、177.400、17.740、72.710,P均<0.001);与对照组相比,感染1、2、4周组小鼠上述基因相对表达量均降低(P均<0.001)。结论多房棘球蚴感染可诱导小鼠LSEC发生毛细血管化,并使LSEC功能和表型标志基因表达水平降低;LSEC毛细血管化早于HSC活化及肝纤维化发生。

关键词：多房棘球蚴泡型棘球蚴病肝窦内皮细胞毛细血管化肝纤维化

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2023年青海省玉树市小型啮齿类动物棘球属绦虫感染调查

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中国血吸虫病防治杂志 2024年第2期36卷 169-173页

作者：贺耿城吴树声秦香兰马吉龙余庭俊宋成玺莫筱瑾马霄巴建峰郑贵荣姜斌田添杨诗杰张颋周晓农中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)、传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室、国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室、WHO热带病合作中心、科技部国家级热带病国际联合研究中心上海200025 青海省玉树藏族自治州疾病预防控制中心西藏自治区疾病预防控制中心、国家卫生健康委包虫病防治研究重点实验室青海省地方病预防控制所四川省石渠县疾病预防控制中心内蒙古大学生命科学学院

目的了解青海省玉树市人群聚居区周边小型啮齿类动物棘球属绦虫感染率,为进一步开展棘球蚴病精准防控提供参考。方法 2023年6月,于青海省玉树市上拉秀乡与隆宝镇牧场分别随机设置1~2处50 m×50 m样方,每个样方内放置300个板式鼠夹(12.0... 详细信息

目的了解青海省玉树市人群聚居区周边小型啮齿类动物棘球属绦虫感染率,为进一步开展棘球蚴病精准防控提供参考。方法 2023年6月,于青海省玉树市上拉秀乡与隆宝镇牧场分别随机设置1~2处50 m×50 m样方,每个样方内放置300个板式鼠夹(12.0 cm×6.5 cm),每日10:00—18:00捕捉小型啮齿类动物,持续4 d。对捕获的啮齿类动物进行鉴定、剖检,对疑似棘球蚴感染的肝脏组织进行病理学检查。采用PCR法扩增棘球属绦虫细胞色素c氧化酶1(cytochrome c oxidase 1,cox1)基因,并与Gen Bank数据库中的序列进行比对以鉴定虫种,以邻接法构建棘球绦虫系统进化树。结果在玉树市上拉秀乡与隆宝镇累计捕获小型啮齿类动物236只,其中上拉秀乡捕获青海田鼠65只(占56.0%)、高原鼠兔51只(占44.0%);隆宝镇捕获青海田鼠62只(占51.7%)、高原鼠兔58只(占48.3%),两地小型啮齿类动物构成差异无统计学意义(χ^(2)=0.294,P> 0.05)。剖检共发现7只高原鼠兔和12只青海田鼠疑似感染棘球蚴,病理学检查可见疑似棘球蚴感染动物肝脏肝小叶结构不清、肝细胞排列紊乱。PCR扩增疑似棘球蚴感染病灶组织DNA,发现7只青海田鼠感染石渠棘球蚴,均捕获自上拉秀乡。系统进化分析发现,捕获的小型啮齿类动物所感染棘球蚴cox1基因序列与已报道的石渠棘球绦虫cox1基因序列高度同源。结论 2023年青海省玉树市人群聚居区周边小型啮齿类动物以高原鼠兔和青海田鼠为主,存在石渠棘球蚴感染。

关键词：棘球蚴病石渠棘球绦虫高原鼠兔青海田鼠细胞色素c氧化酶1 玉树市

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见证陶瓷艺术的多样与折中——1895中国当代陶瓷艺术展

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装饰 2014年第1期 42-51页

作者：莫筱

2013年6月至2014年3月,"1895中国当代工艺美术系列大展暨学术论坛"在江苏省南通市1895文化创意产业园举行。活动以中国高等教育领域和产业领域的工艺美术五个专业方向——金工、漆器、陶艺、玻璃、纤维所取得的创新作品和学术研究成果... 详细信息

2013年6月至2014年3月,"1895中国当代工艺美术系列大展暨学术论坛"在江苏省南通市1895文化创意产业园举行。活动以中国高等教育领域和产业领域的工艺美术五个专业方向——金工、漆器、陶艺、玻璃、纤维所取得的创新作品和学术研究成果为重点,展示具有创新性、学术性、实验性的当代工艺美术领域的力作,引领当代工艺美术发展的最新成就和发展趋势。中国当代陶瓷艺术展是系列大展的第三个展览,由南通市人民政府和清华大学美术学院主办,南通国有置业集团和清华大学美术学院陶瓷艺术设计系承办。本刊于近日采访了这次展览的策展人、清华大学美术学院陶瓷艺术设计系主任白明。话题从展览的策展理念及组织形式开始,随着交流的深入,亦涉及到中国当代陶艺的现状、陶瓷艺术设计教育、日用陶瓷与陶瓷艺术的关系等问题。

关键词：陶瓷艺术设计艺术展中国清华大学美术学院工艺美术艺术设计教育南通市学术性

利用数学语言构建数学模型--以人教版教材《乘法分配律》教学为例

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教学月刊（小学版）（数学） 2022年第3期 17-20页

作者：莫筱晖浙江省杭州市江南实验学校教育集团滨兴学校 310056

数学语言是一种简洁而精确的抽象语言。构建数学模型是用数学语言进行概括和抽象的过程。利用数学语言构建数学模型,有助于学生通过文字、图形、符号等方式精确表征、合理应用、融会贯通。

关键词：数学语言数学模型

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“设计·明星制”学术研讨会

装饰 2013年第3期 16-21页

作者：莫筱

随着中国设计和经济的发展,一方面,国外的明星设计师纷纷前往中国开展项目;另一方面,本土设计行业中也出现明星化的倾向。在西方,设计明星制度已较为成熟,有一套支持培养、营销宣传的模式,设计明星也为行业和社会所知。相比较而言,目前... 详细信息

随着中国设计和经济的发展,一方面,国外的明星设计师纷纷前往中国开展项目;另一方面,本土设计行业中也出现明星化的倾向。在西方,设计明星制度已较为成熟,有一套支持培养、营销宣传的模式,设计明星也为行业和社会所知。相比较而言,目前在中国,设计明星和明星制的表现形式是怎样?它在行业内部产生怎样的影响,它的社会价值是什么?设计明星和明星制的积极意义在哪里,同时,它是否存有潜在的问题和弊端?1月9日下午,《装饰》杂志社在北京798白盒子艺术馆举行了一次小型专家研讨会,邀请设计师、媒体人、策展人和学者从学术及行业的角度探讨中国设计界的明星现象。

关键词：学术研讨会设计师明星设计行业社会价值中国艺术馆杂志社