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DRP1介导的线粒体自噬在纳米二氧化硅致小鼠海马细胞凋亡中的作用

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DRP1介导的线粒体自噬在纳米二氧化硅致小鼠海马细胞凋亡中的作用

作者：田甜甜吉林大学

学位级别：硕士

目的:通过建立纳米二氧化硅（Silica nanoparticles）暴露小鼠海马细胞体外实验模型,研究纳米SiO2细胞毒性作用,明确纳米SiO2暴露可以诱导HT22细胞发生线粒体自噬和细胞凋亡,探讨氧化应激和线粒体动力失衡在纳米SiO2诱导线粒体自噬和细... 详细信息

目的:通过建立纳米二氧化硅（Silica nanoparticles）暴露小鼠海马细胞体外实验模型,研究纳米SiO2细胞毒性作用,明确纳米SiO2暴露可以诱导HT22细胞发生线粒体自噬和细胞凋亡,探讨氧化应激和线粒体动力失衡在纳米SiO2诱导线粒体自噬和细胞凋亡中的作用及机制,为揭示纳米SiO2神经毒性机制提供实验依据。方法:选取小鼠海马细胞HT22为细胞模型,纳米SiO2为受试物,剂量分组分别为0、6.25、12.5、25.0、50.0和100.0μg/m L,作用24 h。采用透射电子显微镜观察纳米SiO2颗粒的形貌和分散性;纳米粒度电位分析仪检测纳米SiO2颗粒在不同介质中Zeta电位和水合粒径;MTT检测细胞存活率;倒置显微镜观察细胞形态;透射电子显微镜观察纳米SiO2在细胞内的分布和细胞超微结构;生物化学法检测细胞外液中LDH活性;DCFH-DA标记细胞观察和检测细胞内ROS水平;流式细胞术检测细胞内Ca2+含量、线粒体膜电位及细胞凋亡情况;生物化学法检测细胞内GSH-Px、SOD和CAT的活性以及ATP含量;Western Blot法检测细胞内和线粒体中线粒体动力、线粒体自噬和细胞凋亡相关蛋白的表达;抑制剂组分别使用ROS抑制剂NAC预处理HT22细胞1 h,纳米SiO2作用24 h和使用DRP1抑制剂Mdivi-1预处理HT22细胞1 h,纳米SiO2作用24 h。结果:1.纳米SiO2对HT22细胞毒性作用实验所使用纳米SiO2平均粒径为（57.35±9.46）nm,作用HT22细胞24h,细胞存活率随着纳米SiO2浓度升高逐渐降低,各剂量组之间比较差异具有显著性（P<0.05）;对照组细胞生长良好,多呈梭型,随着纳米SiO2浓度的增加,细胞触角逐渐收缩变圆形;对照组细胞超微结构显示细胞鞭毛、核仁、核膜完整,染色质分布均匀。6.25μg/m L组纳米SiO2在细胞内散在分布,溶酶体或囊泡内可见内吞膜结构。50.0μg/m L组,胞质内出现大量纳米SiO2颗粒、细胞空化、线粒体肿胀,嵴断裂、内质网核糖体颗粒脱落;LDH检测结果显示纳米SiO2暴露组LDH漏出率明显增加（P<0.05）。2.纳米SiO2对HT22细胞氧化损伤的影响纳米SiO2作用HT22细胞3 h,随纳米SiO2浓度增加,绿色荧光逐渐增多增强;流式细胞术检测分析结果显示,ROS荧光强度随纳米SiO2浓度增加逐渐增强（P<0.05）;细胞内GSH-Px、SOD和CAT活性结果显示,随着暴露剂量的增加,GSH-Px活性受到抑制、SOD活性和CAT活性明显降低（P<0.05）。3.纳米SiO2对HT22细胞线粒体功能的影响纳米SiO2作用HT22细胞1 h,线粒体膜电位随纳米SiO2浓度增加逐渐下降（P<0.05）;纳米SiO2作用HT22细胞24 h,随着纳米SiO2浓度的升高,细胞内Ca2+浓度明显升高（P<0.05）;细胞内ATP含量结果显示,纳米SiO2染毒剂量升高,细胞内ATP含量明显降低（P<0.05）。4.纳米SiO2对HT22细胞线粒体功能、动力和自噬相关蛋白表达的影响随着纳米SiO2浓度升高,VDAC和UCP2的表达逐渐升高,SOD2的表达逐渐降低（P<0.05）;Mfn2和OPA1的表达逐渐降低,DRP1的表达逐渐升高（P<0.05）;PINK1和Parkin的表达逐渐增加,LC3B表达呈上升趋势,SQSTM1/p62蛋白表达下调（P<0.05）。随着纳米SiO2浓度升高,线粒体内Mfn2和OPA1的表达逐渐降低,而DRP1和p-DRP1的表达升高（P<0.05）;PINK1和Parkin的表达逐渐增加,LC3B表达呈上升趋势,SQSTM1/p62蛋白表达下调（P<0.05）。5.纳米SiO2对HT22细胞凋亡的影响随着纳米SiO2浓度升高,细胞凋亡率逐渐增加（P<0.05）;细胞内凋亡相关蛋白Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9、Bax和Cyt C表达逐渐升高（P<0.05）。而线粒体内凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9和Cleaved-Caspase-3随纳米SiO2浓度增加逐渐升高,Cyt C表达逐渐降低（P<0.05）。***在纳米SiO2诱导HT22细胞凋亡中的作用NAC+纳米SiO2组细胞存活率高于纳米SiO2组（P<0.05）;NAC+纳米SiO2组与纳米SiO2组相比,ROS含量显著降低,MMP显著升高,凋亡率下降（P<0.05）;细胞内总蛋白检测结果显示,NAC+纳米SiO2组与纳米SiO2组相比,Mfn2的表达明显升高,DRP1的表达降低（P<0.05）,PINK1、Parkin和LC3B蛋白表达下调,UCP2表达下

关键词：纳米二氧化硅小鼠海马细胞氧化损伤线粒体自噬动力相关蛋白1

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商贸流通供应链数字化协同机制及其效果

商业经济研究 2024年第20期 20-24页

作者：田甜曹颖重庆对外经贸学院重庆401520

企业数字化转型会受到供应链上下游企业的影响。本文选取2011-2022年沪深A股上市商贸流通企业作为研究样本,实证分析数字化转型在商贸流通供应链上的影响以及供应链上数字化协同带来的效果,得出如下结论:其一,商贸流通企业数字化转型会... 详细信息

企业数字化转型会受到供应链上下游企业的影响。本文选取2011-2022年沪深A股上市商贸流通企业作为研究样本,实证分析数字化转型在商贸流通供应链上的影响以及供应链上数字化协同带来的效果,得出如下结论:其一,商贸流通企业数字化转型会通过供应链进行传导,上下游企业如果进行了数字化转型,会带动相应的下游和上游企业进行数字化转型;其二,供应链上下游企业的数字化水平提升能够显著促进企业自身数字化水平提升,且下游客户企业的影响要大于上游供应企业的影响;其三,上下游企业在供应链中越重要,那么其数字化水平对企业的影响也越来越大;其四,企业供应链上下游企业都进行了数字化转型,数字化水平越高,越能实现供应链数字化协同,促进企业实现更高的财务绩效和创新绩效。最后,本文基于研究发现提出了针对性的政策建议。

关键词：商贸流通企业供应链数字化协同财务绩效创新绩效

人工智能与战略性新兴企业新质生产力——基于劳动力结构调整和要素增益技术变迁的视角

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山西财经大学学报 2024年第9期46卷 89-99页

作者：张轩铭田甜对外经济贸易大学保险学院中国矿业大学孙越崎学院

基于2011—2022年沪深A股上市公司数据，探讨人工智能对战略性新兴企业新质生产力的影响。研究发现：人工智能培育了战略性新兴企业的新质生产力，且该效应在直辖市、中心城市、高科技和高竞争性行业更显著，但存在时间滞后效应；从劳... 详细信息

基于2011—2022年沪深A股上市公司数据，探讨人工智能对战略性新兴企业新质生产力的影响。研究发现：人工智能培育了战略性新兴企业的新质生产力，且该效应在直辖市、中心城市、高科技和高竞争性行业更显著，但存在时间滞后效应；从劳动力结构调整视角看，人工智能可通过减少常规劳动岗位与低技能劳动力同时增加非常规劳动岗位与高技能劳动力的途径培育新质生产力；从要素增益技术变迁视角看，人工智能可通过增益资本和劳动要素的途径培育新质生产力；人工智能对战略性新兴企业新质生产力的影响在行业和地区内部表现为溢出效应。

关键词：人工智能新质生产力战略性新兴企业劳动力结构调整要素增益技术变迁

基于五芯光子晶体光纤的超大带宽低损耗新型模分复用器/解复用器

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光学学报 2024年第16期44卷 47-58页

作者：惠战强李泽林韩冬冬李田甜西安邮电大学电子工程学院陕西西安710121 西安市微波光子与光通信技术重点实验室陕西西安710121

提出了一种基于五芯光子晶体光纤的新型模分复用器/解复用器(MUX/DMUX)。采用本征模有限差分法和本征模展开法对MUX/DMUX的结构参数进行了优化。数值模拟结果表明,该器件能够以超低的插入损耗(IL)在主芯中同时复用/解复用LP_(01)、LP_(... 详细信息

提出了一种基于五芯光子晶体光纤的新型模分复用器/解复用器(MUX/DMUX)。采用本征模有限差分法和本征模展开法对MUX/DMUX的结构参数进行了优化。数值模拟结果表明,该器件能够以超低的插入损耗(IL)在主芯中同时复用/解复用LP_(01)、LP_(11)、LP_(21)、LP_(31)和LP_(12)5种模式。当输入光中心波长为1.55μm时,器件的模式转换效率大于96.7%,IL小于0.15 dB。所提出的MUX/DMUX结构紧凑,长度仅为1.84 mm。此外,该器件可以在620 nm(1.33~1.95μm,覆盖E、S、C、L、U波段)的超宽带内以小于-11.34 dB的串扰高效工作,在未来的模分复用系统中具有巨大应用潜力。

关键词：模分复用器/解复用器多芯光子晶体光纤模式耦合效率插入损耗

氮肥减施及作物轮作对枣棉间作系统碳氮足迹的影响

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氮肥减施及作物轮作对枣棉间作系统碳氮足迹的影响

作者：李田甜塔里木大学

学位级别：硕士

探索新的种植模式以维持或提高作物产量,同时降低对环境的负面影响,已成为农业可持续生产的迫切需求。优化施肥及耕作措施是减少温室气体排放的有效策略,间作目前被认为是农田土壤减排的重要途径,然而在间作系统中氮肥减施及作物轮作对... 详细信息

探索新的种植模式以维持或提高作物产量,同时降低对环境的负面影响,已成为农业可持续生产的迫切需求。优化施肥及耕作措施是减少温室气体排放的有效策略,间作目前被认为是农田土壤减排的重要途径,然而在间作系统中氮肥减施及作物轮作对碳氮足迹的调控机制尚不清楚,这将进一步加剧农业环境污染并降低生产效率。本研究以枣棉间作系统为研究对象,枣园连年间作棉花（C）、枣园种植苜蓿后轮作棉花（R）两种植模式为主因素,四个氮肥梯度:0 kg/hm2（N0）、140 kg/hm2（N1）、280 kg/hm2（N2）、420 kg/hm2（N3）为副因素,通过田间试验测定土壤温室气体排放量,基于生命周期评价法定量评估碳氮足迹,并对其影响因子进行探究,旨在探索出协同作物生产和固碳减排的种植新模式。主要研究结果如下:（1）枣棉间作系统温室气体排放通量具有明显的季节性变化,苜蓿可作为较优的前茬作物,与棉花轮作后能够减少温室气体排放,氮肥减施能显著降低温室气体累计排放量。轮作苜蓿后有效地减少了间作棉田的CO2、N2O排放通量,增加CH4的固定量,降低13.88%的全球增温潜势以及30.76%的温室气体排放强度。氮肥减施可显著的降低了温室气体累积排放量,减氮处理N2、N1、N0的CO2累积排放量分别较N3低10.87%、17.18%、31.73%,同时大幅降低了全球增温潜势。（2）轮作倒茬及氮肥减施后降低了碳氮足迹,促进了枣棉间作系统环境的可持续性。土壤CO2排放对枣棉间作系统碳足迹贡献率最高为44.2%,其次是覆盖薄膜及灌溉用电。施氮所引的NH3挥发、N2O直接排放及NO3-、NH4+淋溶也是氮足迹的重要组成部分。轮作苜蓿后降低了2.51%的单位产量碳足迹和7.23%的单位面积碳足迹,其中RN2处理的单位产量碳足迹最低为1.45 kg CO2-eq/kg。氮肥减施可以显著减少活性氮排放从而降低氮足迹,RN0处理的单位产量、单位面积氮足迹分别较CN3处理低91.14%、85.59%。（3）轮作倒茬及氮肥减施能够改善枣棉间作系统土壤理化性质,对土壤健康具有积极的影响。轮作及氮肥减施降低土壤容重,改善土壤团粒结构,且提升了>0.25 mm的大团聚体占比,其中,RN2处理最高为78.3%,并具有最稳定的平均重量直径、几何平均直径的团聚体结构,保持了最高的有机质、全氮含量分别为22.61 g/kg、1.57 g/kg。土壤硝态氮、铵态氮含量表现为RN2处理较RN0处理分别增加26.62%、35.42%,与RN3处理差异不显著。（4）枣棉间作系统中减氮造成的生物产量损失,可以通过倒茬苜蓿后棉花的后补偿作用进行弥补。倒茬后枣棉间作系统通过恢复地力,棉花干物质得到了更多的积累,从而提高了作物产量。轮作后籽棉产量增幅为25.79%,红枣产量增幅为9.87%,其中RN2处理的籽棉产量最高,且保持了最高的土地当量比。N3处理下营养器官氮素积累最高,但并未有效地提高氮肥利用效率。（5）温室气体排放及单位面积碳氮足迹与土壤温度、含水量、全氮、全碳、铵态氮、有机质呈正相关关系,与p H、土壤容重、土壤团聚体、平均重量直径呈负相关关系。通过结构方程模型预测,得出土壤水分、土壤温度、铵态氮是枣棉间作系统单位面积碳氮足迹的重要影响因子,可以很好地解释土壤温室气体排放及碳氮足迹的变化。可持续评价结果表明,RN2处理可持续性指数最高,同时净经济效益、农产品服务价值及土地当量比最高,可为枣棉间作系统的可持续发展提供有力保障。综上所述,在枣棉间作系统中纳入轮作倒茬,并采取280 kg/hm2的氮肥水平可通过苜蓿的固氮作用来代替减施化肥带来的氮效益,可有效地改善土壤环境,提升农田生产力,保持较好的经济产出,同时相应地降低了碳氮足迹,有助于枣棉间作复合系统的可持续。研究为建立绿色高效的多样化种植体系及南疆农果间作系统减排潜力的研究提供科学依据。

关键词：枣棉间作轮作施氮量温室气体排放碳氮足迹

人源性RPL22基因的原核表达与纯化及功能分析

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安徽医科大学学报 2024年 1785-1793页

作者：田甜张星娟杨明夏南京医科大学第三附属医院(常州市第二人民医院)呼吸科

目的了解人类核糖体蛋白L22（RPL22）基因的生物信息学,原核表达与纯化人类RPL22重组蛋白,在体外合成人类RPL22（标记为试剂M）,研究试剂M对NSCLC A549细胞增殖、周期、凋亡的影响,分析试剂M和顺铂（DDP）联合进行化疗的效果。方法分... 详细信息

目的了解人类核糖体蛋白L22（RPL22）基因的生物信息学,原核表达与纯化人类RPL22重组蛋白,在体外合成人类RPL22（标记为试剂M）,研究试剂M对NSCLC A549细胞增殖、周期、凋亡的影响,分析试剂M和顺铂（DDP）联合进行化疗的效果。方法分析RPL22生物信息学。PCR克隆RPL22基因,进行单链寡核苷酸的设计及合成,获得目的基因后连接pET-28α载体,构建pET-28α-RPL22重组质粒,转化大肠埃希菌感受态细胞DH5α,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、Western blot分析重组蛋白RPL22的表达情况。CCK-8检测试剂M和DDP在A549细胞中的半抑制率(IC50)以及试剂M对A549细胞增殖的影响;流式细胞术检测试剂M对A549细胞凋亡、周期的影响;qPCR、Western blot检测试剂M和DDP分别对磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）、腺苷5'-单磷酸激活蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（AMPK/mTOR）信号通路的影响。结果 RPL22蛋白为不稳定亲水性蛋白质。诱导表达的重组蛋白经溶解纯化后获得了高浓度重组蛋白。在A549细胞中,试剂M的IC50为400μg/L,DDP的IC50为10μmol/L,试剂M抑制细胞增殖,其浓度与细胞活性成反比;试剂M（200μg/L）与DDP（2.5μmol/L）联合运用时,效果与单独使用10μmol/L DDP抑制增殖比相似;试剂M能诱导G2细胞周期停止、促进细胞凋亡,且可能参与PI3K/AKT、AMPK/mTOR通路的调节。结论该研究首次克隆得到人类RPL22重组蛋白,使其成功纯化表达。

关键词：核糖体蛋白L22 非小细胞肺癌生物信息学分析原核表达与纯化功能分析

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暴马丁香的叶绿体微卫星特征分析

分子植物育种 2024年第8期22卷 2501-2507页

作者：田甜王宏霞青海民族大学生态环境与资源学院西宁810007 青海民族大学青海省特色经济植物高值化利用重点实验室西宁810007

暴马丁香具有很高的观赏价值和药用价值。为研究暴马丁香叶绿体微卫星特征,本研究在暴马丁香叶绿体全基因组序列(156141 bp)的基础上,采用MISA v1.0软件,分析其叶绿体全基因组序列,共识别出231个微卫星位点(平均每676 bp出现一个)。其中... 详细信息

暴马丁香具有很高的观赏价值和药用价值。为研究暴马丁香叶绿体微卫星特征,本研究在暴马丁香叶绿体全基因组序列(156141 bp)的基础上,采用MISA v1.0软件,分析其叶绿体全基因组序列,共识别出231个微卫星位点(平均每676 bp出现一个)。其中,叶绿体微卫星主要集中于大单拷贝区(94.52%),主要由A、T构成。重复序列中主要以单碱基重复序列为主,占重复序列总数的66.97%。微卫星长度集中在8~19 bp,占96.79%,有7个叶绿体微卫星长度大于20 bp,说明暴马丁香叶绿体基因组上的微卫星位点大多数具有多态性的潜能。实验结果为暴马丁香的物种鉴定和系统发育研究提供理论基础。

关键词：暴马丁香微卫星叶绿体

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代谢重编程在肺癌中的研究进展

南京医科大学学报（自然科学版） 2024年第3期44卷 410-416页

作者：田甜杨明夏南京医科大学附属常州第二人民医院呼吸科江苏常州213003

代谢重编程是肿瘤细胞的一个重要特征。肿瘤细胞通过重新编程代谢途径来满足快速增殖所需要的能量、物质和氧化还原力,葡萄糖代谢、谷氨酰胺代谢、脂质代谢、单碳代谢是肿瘤的重要代谢途径,靶向代谢途径可以有效抑制肿瘤生长。本文总结... 详细信息

代谢重编程是肿瘤细胞的一个重要特征。肿瘤细胞通过重新编程代谢途径来满足快速增殖所需要的能量、物质和氧化还原力,葡萄糖代谢、谷氨酰胺代谢、脂质代谢、单碳代谢是肿瘤的重要代谢途径,靶向代谢途径可以有效抑制肿瘤生长。本文总结了肺癌中葡萄糖、脂肪、氨基酸、核苷酸等代谢的异常变化,以及相关临床药物的最新研究,旨在为肺癌的预防、早期诊断以及临床治疗用药提供新思路。

关键词：肺癌代谢重编程葡萄糖代谢谷氨酰胺代谢脂质代谢

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12例外伤后牙颈部外吸收患者临床特点分析

口腔医学研究 2024年第3期40卷 221-226页

作者：贺祖武田甜南华大学附属长沙中心医院口腔科湖南长沙410028

目的:分析外伤后牙颈部外吸收的临床特点,探讨其治疗策略。方法:收集2020年2月~2023年2月来南华大学附属长沙中心医院就诊的牙外伤后出现牙颈部外吸收的病例,收集患者的基本信息、患牙位置、吸收程度、初诊时主要症状、采取的治疗措施... 详细信息

目的:分析外伤后牙颈部外吸收的临床特点,探讨其治疗策略。方法:收集2020年2月~2023年2月来南华大学附属长沙中心医院就诊的牙外伤后出现牙颈部外吸收的病例,收集患者的基本信息、患牙位置、吸收程度、初诊时主要症状、采取的治疗措施、牙齿存留以及治疗后恢复情况等,并对收集的数据进行分析和讨论。结果:共收集到12例牙颈部外吸收病例,发现患牙21颗,其中上颌中切牙9颗,上颌侧切牙3颗,下颌中切牙7颗,下颌侧切牙2颗,吸收程度为Ⅰ级0颗,Ⅱ级7颗,Ⅲ级5颗,Ⅳ级9颗,根据患牙情况我们进行了根管治疗、龈下刮治、局部充填以及拔除中一种或者两种以上的治疗,在随访期内,有8例共11颗患牙因吸收严重最终拔除,其余4例中2例共4颗患牙经过根管治疗联合龈下刮治以及缺损局部充填后原有根尖瘘管消失,牙颈部透射影未见扩大,1例共4颗患牙经过根管治疗后牙颈部透射影消失,无临床阳性症状发生,1例共2颗患牙经过根管治疗联合局部充填后牙颈部透射影未见扩大,无临床阳性症状发生。结论:外伤后牙颈部外吸收早期发现较为困难,致病机制尚不清楚,但是外伤后的定期随访有助于及时发现,并采取适当的治疗可以有效终止外伤后牙颈部外吸收对牙齿的进一步破坏,避免牙齿丧失。

关键词：牙外伤牙颈部外吸收牙齿松动根管治疗