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基于代谢组学研究不同产地狗牯脑茶化学成分差异

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基于代谢组学研究不同产地狗牯脑茶化学成分差异

作者：吴福茹南昌大学

学位级别：硕士

狗牯脑茶产于罗霄山脉南麓支脉的遂川县,是江西省的优质绿茶。狗牯脑茶产地目前在遂川县各地均有分布,各产地生态环境和小气候的差异可能会导致不同产地狗牯脑茶的品质存在差异,而狗牯脑茶品质控制对维护其品牌效益有重要意义。因此,全... 详细信息

狗牯脑茶产于罗霄山脉南麓支脉的遂川县,是江西省的优质绿茶。狗牯脑茶产地目前在遂川县各地均有分布,各产地生态环境和小气候的差异可能会导致不同产地狗牯脑茶的品质存在差异,而狗牯脑茶品质控制对维护其品牌效益有重要意义。因此,全面评价不同产地狗牯脑茶化学成分的差异对于其品质控制非常重要,并且可以为狗牯脑茶产地溯源提供参考。本文以遂川县戴家埔乡(DJP)、泉江镇(QJ)和汤湖镇(TH)的16个狗牯脑茶样品为实验材料,初步测定了总酚、总黄酮和可溶性糖等品质成分含量和体外抗氧化活性,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)、硅烷化衍生法结合气相色谱质谱联用技术(GC-MS)和固相微萃取-气相色谱质谱联用技术(SPME-GCMS)进一步对狗牯脑茶中的代谢物进行全面、系统的鉴定和表征,进而比较分析不同产地狗牯脑茶化学成分的差异,并筛选狗牯脑茶的关键香气成分,分析狗牯脑茶的香气特征。结合感官评价,分析狗牯脑茶的品质特征和滋味特征,并筛选出导致各产地狗牯脑茶滋味产生差异的化合物。主要研究结果如下:1、狗牯脑茶中总酚、总黄酮、可溶性糖、可溶性蛋白和总游离氨基酸含量范围分别为202.86-237.36 mg/g DW、8.98-10.73 mg/g DW、16.14-19.68 mg/g DW、10.56-11.38 mg/g DW、21.67-25.94 mg/g DW。不同产地狗牯脑茶的总黄酮、可溶性糖、可溶性蛋白以及总游离氨基酸含量均无显著性差异,总酚含量有显著性差异,TH的总酚含量最高,其次是QJ和DJP。TH的ABTS、FRAP和DPPH测定值均高于DJP和QJ。总酚、总黄酮含量和和抗氧化活性(ABTS、FRAP和DPPH)呈正相关。酚类和黄酮类化合物是狗牯脑茶主要的抗氧化成分。2、基于UPLC-Q-TOF-MS,共鉴定出160种代谢物。进一步对其中的14种酚类化合物和茶氨酸进行了定量。狗牯脑茶中总儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、没食子儿茶素(GC)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、儿茶素没食子酸酯(CG)、表没食子儿茶素(EGC)含量范围为53.67-62.12 mg/g DW、22.57-23.93 mg/g DW、5.34-8.34 mg/g DW、1.29-2.56 mg/g DW、3.96-7.40 mg/g DW、0.57-1.17 mg/g DW、3.67-5.05 mg/g DW、15.41-16.26 mg/g DW。狗牯脑茶中茶氨酸含量为12.43-12.88 mg/g DW。不同产地的狗牯脑茶中C、EC、GC、GCG、CG、总儿茶素、高良姜素和杨梅素含量有显著差异。偏最小二乘判别分析(PLS-DA)结果表明不同产地的狗牯脑茶化学成分有较大差异。共筛选出29种差异化合物,包括氨基酸、有机酸、酚酸和黄酮类等化合物。层次聚类分析(HCA)显示DJP、QJ和TH根据各自的产地形成了独立的簇,这表明筛选出的29种差异化合物可用于区分不同产地的狗牯脑茶。3、基于硅烷化衍生法结合GC-MS,共鉴定出42种初级代谢物。不同产地的狗牯脑茶中初级代谢物数量和含量均存在差异。PLS-DA结果也表明不同产地狗牯脑茶中初级代谢物有较大差异,DJP和QJ的化学成分更具有相似性。不同产地的狗牯脑茶有6种差异化合物,包括苯丙氨酸、谷氨酰胺、哌啶酸、丙酸、乳糖和N-甲基二乙醇胺。DJP中哌啶酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺、丙酸和乳糖相对含量最高,QJ中N-甲基二乙醇胺的相对含量显著高于其他两个产地的狗牯脑茶。HCA分析显示DJP、QJ、TH根据各自的产地形成了独立的簇,表明筛选出的这6种差异化合物可用于区分不同产地的狗牯脑茶。4、对不同产地的狗牯脑茶进行了感官评价。结果表明,狗牯脑茶的品质特征为外形紧结,芽端微勾,汤色黄绿明亮,香气高爽,带有花香,滋味清爽醇厚,叶底嫩匀有芽。狗牯脑茶具有轻微苦涩味,甜味强度值较低。不同产地狗牯脑茶的外形、汤色、香气和叶底均无显著差异,滋味存在显著差异。TH的苦味和涩味强度值最高,QJ的甜味强度值最高。为了找到对不同产地狗牯脑茶滋味的差异有重要贡献的化合物,通过双向正交偏最小二乘法分析(O2PLS),筛选出5种差异化合物,包括原花青素B2-3'-没食子酸酯、原花青素B1、原花青素B2、儿茶素-3',5-二葡萄糖苷以及脯氨酸。TH中的原花青素B2-3'-没食子酸酯和原花青素B1含量较高,脯氨酸含量较低,这可能导致了TH茶汤苦味的增强。5、基于SPME-GC-MS,共鉴定出54种VOCs。烯烃类是狗牯脑茶的主要挥发物。DJP的烯烃类和酯类含量较高,QJ和TH的烯烃类和酮类含量较高。PLS-DA结果表明不同产地的狗牯脑茶VOCs有一定

关键词：狗牯脑茶产地超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用气相色谱-质谱联用感官评价代谢组学

基于fNIRS的汽车内饰氛围色光对乘员情绪感知影响的研究

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基于fNIRS的汽车内饰氛围色光对乘员情绪感知影响的研究

作者：曲静茹吉林大学

学位级别：硕士

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基于价值感知的校园文创设计与实践研究

基于价值感知的校园文创设计与实践研究

作者：张子茹齐鲁工业大学

学位级别：硕士

习近平总书记在全国高校思想政治工作会议上强调,要注重以文化人、以文育人,广泛开展形式多样、健康向上、格调高雅的校园文化活动。校园文创是在高校特定的文化环境中所形成的文化创意产品,是对校园文化的高度凝练,校园文创作为校园文... 详细信息

习近平总书记在全国高校思想政治工作会议上强调,要注重以文化人、以文育人,广泛开展形式多样、健康向上、格调高雅的校园文化活动。校园文创是在高校特定的文化环境中所形成的文化创意产品,是对校园文化的高度凝练,校园文创作为校园文化的载体,体现了校园的文化内涵和精神风貌,凸显了高校的历史文化底蕴和人才培养特色,承载着高校文化传承和发展的责任,并且对高校美育和思政教育的发展有着重要的影响。将校园文化进行创造性转化和创新性发展,丰富校园文创产品的表现形式,能够促进校园文化建设,提升师生的校园文化自信和归属感,进而提升学校的知名度和社会影响力。通过探讨校园文化创意产品的相关内容,为校园文化创意产品设计发展提供新的思路,推动校园文化传播,提升文化育人价值。本文首先对校园文化产品进行相关论述,对其内涵、种类以及文化资源等进行了整理,总结了校园文创设计发展现状,对校园文创产品进行用户价值感知分析,并探寻校园文创产品与用户价值感知之间的联系,通过问卷调查和深度访谈的方式,对用户消费需求进行深入挖掘。其次,结合叙事性设计方法,提出“感知叙事—聚焦用户需求,事件叙事—凝练叙事主题,目标叙事—绘制设计目标,形意叙事—产品设计表达”的校园文创叙事性设计方法,构建了校园文创产品用户价值感知模型和校园文创叙事设计模型,为后续的设计提供指导。最后,以齐鲁工业大学校园文创产品为例,考虑不同主题下的用户需求,将校园文化元素运用叙事修辞手法进行创新设计,设计完成后邀请用户和相关从业者对产品进行综合评估,从而论证设计目标是否实现以及设计模型的可行性,并且通过实践得出校园文创产品宣传和推广的经验。本研究通过用户价值感知理论和叙事性设计方法,将校园文化以讲故事的方式融入校园文创产品的设计中,为满足用户需求、活化文化资源、提升产品价值、优化用户体验、推动校园文化传播等目标的实现提供了具有参考意义的校园文创产品用户调研路径和设计方法体系。

关键词：校园文创价值感知叙事性设计设计模型

LAMP-CRISPR/Cas应用于禽类结构变异检测的方法研究及其评价

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LAMP-CRISPR/Cas应用于禽类结构变异检测的方法研究及其评价

作者：雷艳茹河南农业大学

学位级别：硕士

禽类基因组中的结构变异对物种的适应性演化和复杂性状形成具有重要影响。这些变异包括大片段DNA序列的插入、缺失、倒位和易位等,可以改变基因的编码序列和数量,同时影响调控元件如启动子和增强子的功能。目前已知禽类定位的经济性状... 详细信息

禽类基因组中的结构变异对物种的适应性演化和复杂性状形成具有重要影响。这些变异包括大片段DNA序列的插入、缺失、倒位和易位等,可以改变基因的编码序列和数量,同时影响调控元件如启动子和增强子的功能。目前已知禽类定位的经济性状原因突变以结构变异形式为主,因此精准快的结构变异分型技术在家禽育种生产工作具有巨大的应用前景。但当前单个结构变异检测主要依赖于聚合酶链式反应(PCR)结合琼脂糖凝胶电泳,其在生产现场的应用受到限制。CRISPR/Cas系统结合恒温扩增(LAMP)具有温度恒定、反应迅速、便携性强等特点,该系统提供了一种高特异性和可视化核酸检测手段,更适用于野外或现场环境。因此,本研究以LAMP联合CRISPR/Cas12a技术为基础建立一种新型禽类结构变异检测方法:一是通过LAMP技术于恒温条件下迅速扩增目标核酸,二是利用CRISPR/Cas12a技术特异性识别LAMP产物中的目标序列,三是在Cas12a被激活后对F-Q探针进行切割以输出荧光,实现检测结果的可视化。最后,通过扩增曲线和荧光信号辨别检测结果,并与普通PCR检测结果进行一致性检验,评估该检测方法的灵敏性和特异度。本研究通过以鸭白羽性状MITF基因、鸭生长性状IGF2BP1基因、鸡绿壳蛋性状SLCO1B3基因及鸡生长性状IGF2BP1基因原因突变(均为结构变异)为研究对象,构建LAMP-CRISPR/Cas结构变异检测方法,随后以普通PCR为标准进行检测方法准确性评估。具体研究结果如下:1)利用引物设计网站成功设计针对以上四个基因的LAMP引物,完成了目的基因的扩增,并成功建立LAMP的可视化反应;2)成功设计并构建了针对目的基因的cr RNA;3)成功建立了LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法;4)以PCR为标准的LAMP可视化反应检测各基因结构变异的一致率分别为:鸭MITF基因D等位基因83%、I等位基因87%,鸭IGF2BP1基因D等位基因83%、I等位基因89%,鸡SLCO1B3基因W等位基因81%,鸡IGF2BP1基因W等位基因93%、L2等位基因88%;5)以PCR为标准LAMP-CRISPR/Cas12a检测方法对各基因结构变异敏感度和特异性均为100%,一致率分别为:鸭MITF基因D等位基因和I等位基因均为92%;鸭IGF2BP1基因D等位基因87%、I等位基因92%,鸡SLCO1B3基因W等位基因91%;鸡IGF2BP1基因W等位基因96%、L2等位基因93%;综上所述,本研究基于LAMP恒温扩增技术和CRISPR/Cas12a技术成功建立了同时满足现场可视分析和高特异性的禽类结构变异检测方法,该方法在45min内便可通过蓝光照射肉眼观察到结果,具有良好的灵敏性和特异性,且操作简便、无需昂贵设备,为实现现场、快速、特异的禽类结构变异可视化分析提供了切实可行的技术支持,具有广泛的应用前景。

关键词： LAMP CRISPR/Cas12a 基因组结构变异检测方法

基于噬菌体展示技术筛选和鉴定人源性HPV18VLP中和抗体

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基于噬菌体展示技术筛选和鉴定人源性HPV18VLP中和抗体

作者：顾亚茹重庆理工大学

学位级别：硕士

[目的]构建人源性Fab噬菌体抗体库,筛选出与HPV18VLP特异性结合的人源性Fab抗体,为HPV18中和抗体研发及基于抗原抗体复合物结构学指导的HPV疫苗设计提供参考。[方法]1.从接种人乳头瘤病毒（HPV）疫苗的15名女性的外周血中分离出外周血... 详细信息

[目的]构建人源性Fab噬菌体抗体库,筛选出与HPV18VLP特异性结合的人源性Fab抗体,为HPV18中和抗体研发及基于抗原抗体复合物结构学指导的HPV疫苗设计提供参考。[方法]1.从接种人乳头瘤病毒（HPV）疫苗的15名女性的外周血中分离出外周血单个核细胞（PBMC）,并从中提取总RNA,进行反转录以制备c DNA。以此c DNA为模板分别扩增抗体重链和轻链的可变区序列,并以p Comb3XTT和p Comb3XLambda噬菌体质粒为模板,扩增抗体重链和轻链的恒定区。2.通过重叠延伸PCR技术,将抗体重链的可变区与恒定区连接,同时将轻链的可变区与恒定区连接,形成了Fd重链和λ/κ轻链。再以Fd重链和λ/κ轻链作为模板,进行进一步的重叠延伸PCR,最终获得完整的Fab基因片段。将Fab片段连接至p Comb3XTT噬菌体质粒中,通过电转化的方式将其导入大肠杆菌XL1-Blue并以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,以构建人源性Fab噬菌体抗体库。3.以纯化的HPV18VLP作为抗原进行亲和筛选,通过四轮筛选,富集特异性结合HPV18VLP的噬菌体抗体。采用Phage-ELEIA法对第三轮和第四轮筛选后的噬菌体抗体进行鉴定,并对获得的阳性克隆进行可溶性表达。利用Western-Blot和免疫组化技术鉴定获得的VLP18-Fab抗体的特异性,采用BLI技术评估该VLP18-Fab抗体的亲和力,并通过人乳头瘤病毒假病毒中和实验验证该VLP18-Fab抗体的中和活性。4.使用人工智能结构解析工具Alphafold2对VLP18-Fab抗体及HPV18VLP重组抗原的三维结构进行预测,并利用Discovery Studio模拟了抗体与抗原结合复合物的结构,以及锚定抗体与抗原结合的潜在表位。[结果]1.成功构建了库容量为4.91×10～9的Fabλ噬菌体抗体库和库容量为2.92×10～9的Fabκ噬菌体抗体库,通过PCR鉴定和酶切鉴定,阳性率均达到了100%。基因序列分析,Fabλ和Fabκ噬菌体库的同源性分别66.84%和56.65%。2.用纯化的HPV18VLP作为抗原,Fabλ噬菌体抗体库四轮筛选后,同源性增加为80.82%;Fabκ噬菌体抗体库四轮筛选后,同源性增加为82.22%。将Fabλ噬菌体抗库中序列一致且阳性值最高的单克隆转入大肠杆菌HB2151进行周质空间表达,SDS-PAGE电泳检测表明VLP18-Fab抗体成功表达,且分子量约为42 k Da。***-Blot、免疫组化鉴定结果显示VLP18-Fab抗体可以特异性结合HPV18VLP抗原,BLI结果显示出微摩尔级亲和力(KD值为1.002×10 M),假病毒中和实验显示VLP18-Fab抗体组与对照组相比,中和活性显著增强（P<0.0001）。4.将Alphafold2预测的VLP18-Fab抗体与HPV18VLP抗原PLDD评分值最高的三维结构,用Discovery Studio预测抗体与抗原的结合表位结果显示VLP18-Fab抗体与抗原上Ser、Ile、Phe、Tyr、His、Phe、Gly、Leu、Pro、Asp、Asn、Ser、Ile、Glu、Lys、Phe、Ser 、Leu、Asp、Leu、Asp、Gln、Asp、Leu、Leu、Arg、Thr、Ile、Arg、Lys、Arg、Ser氨基酸序列结合。[结论]成功构建人源特异性Fab噬菌体抗体库,并从中筛选到1株与HPV18VLP特异性结合的Fab抗体,该抗体还表现出强大的中和活性。此外,利用Discovery Studio对抗体与抗原的结合表位进行了模拟。总体而言,研究结果强调了噬菌体展示的抗体库技术筛选中和抗体的潜力,并为HPV疫苗的设计提供了指导意义。

关键词：噬菌体展示技术宫颈癌中和抗体分子对接

时间轴上具有次线性中立项的二阶动力方程的振动性

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数学的实践与认识 2024年第6期54卷 225-230页

作者：赵春茹梧州学院广西机器视觉与智能控制重点实验室广西高校智能软件重点实验室广西梧州543002

利用时间轴上的微积分理论和广义黎卡提变换以及不等式技巧,研究了一类具有次线性中立项的二阶动力方程的振动性,建立了该类动力方程的一些新的振动准则,推广且丰富了已有文献中的结果,并给出应用实例.

关键词：振动性二阶动力方程次线性中立项时间轴

复杂环境下含电动汽车的多区域电力系统容错负荷频率控制

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复杂环境下含电动汽车的多区域电力系统容错负荷频率控制

作者：梁瑜茹西安理工大学

学位级别：硕士

在通信技术不断革新的背景下,现代电力系统逐渐发展为由多个子区域所构成的复杂系统。伴随着电力系统整体复杂性的提升,系统频率稳定问题日益凸显其重要性。鉴于电动汽车的大规模渗透以及车到网技术的发展,电动汽车可看作一种可控负载,... 详细信息

在通信技术不断革新的背景下,现代电力系统逐渐发展为由多个子区域所构成的复杂系统。伴随着电力系统整体复杂性的提升,系统频率稳定问题日益凸显其重要性。鉴于电动汽车的大规模渗透以及车到网技术的发展,电动汽车可看作一种可控负载,为电力系统提供辅助调频服务。此外,电力系统通常运行在极端环境(如高压、高磁场)中,这些条件极大地提升了系统控制回路部件故障的风险。同时,由于采用开放式网络进行信号通信,电力系统面临来自网络攻击的威胁和风险,并且当系统发生大量的数据通信时,有限的网络信道带宽会导致网络拥塞,对系统稳定性构成了考验。因此,针对上述挑战,制定可靠的控制策略以确保系统频率稳定是本文的核心工作。本文主要工作内容如下:(1)针对含电动汽车的多区域电力系统中执行器故障问题,设计了一种容错负荷频率控制器。首先,考虑到电动汽车电池荷电状态(Stateof Charge,SOC)变化所带来的不确定性因素和系统存在执行器故障,建立了一种执行器故障下含电动汽车的多区域电力系统模型。然后,利用滑模观测器所得估计值设计了容错负荷频率控制器,并结合李雅普诺夫-克拉索夫斯基(Lyapunov-Krasovskii,L-K)泛函法对电力系统稳定性进行分析。最后,通过仿真验证了该方案能有效减少执行器故障对系统稳定运行造成的影响。(2)针对含电动汽车的多区域电力系统中欺骗攻击和传感器故障问题,设计了一种欺骗攻击下容错负荷频率控制器。首先,针对一种基于频率触发的欺骗攻击,构建了传感器故障和欺骗攻击下含电动汽车的多区域电力系统模型。然后,利用滑模观测器对系统状态和传感器故障值进行同时估计,并利用估计值设计了容错负荷频率控制器。最后,基于L-K泛函法分析了电力系统稳定性,并通过仿真验证了该方案能有效减少传感器故障和欺骗攻击对系统安全稳定运行造成的影响。(3)针对含电动汽车的多区域电力系统中通信通道带宽有限和传感器故障问题,设计了一种事件触发下容错负荷频率控制器。首先,建立了传感器故障下含电动汽车的多区域电力系统模型。然后,设计了一种基于记忆的自适应混合事件触发机制,并将事件触发机制和容错负荷频率控制相结合。最后,基于L-K泛函法建立了电力系统稳定性判据,并通过仿真验证了该方案能在减少传感器故障对系统稳定运行造成影响的同时节约网络通信资源。

关键词：多区域电力系统负荷频率控制容错控制欺骗攻击事件触发机制

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基于核心素养的高中化学大单元教学研究

基于核心素养的高中化学大单元教学研究

作者：叶文茹伊犁师范大学

学位级别：硕士

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基于改进麻雀优化PID的波浪补偿控制方法

工程科学与技术 2024年第1期56卷 22-34页

作者：张琴蔡慧茹兰明东浦克胡雄上海海事大学物流工程学院上海201306

随着海上风电“十四五”规划的不断推动,在深远海域对兆瓦级大功率海上风机的需求量随之增加,其规模也在不断扩大。但是,在吊运、安装等海上工作过程中,复杂海浪对船舶产生的持续影响导致风机安装的精度和效率大幅下降,甚至会对人员安... 详细信息

随着海上风电“十四五”规划的不断推动,在深远海域对兆瓦级大功率海上风机的需求量随之增加,其规模也在不断扩大。但是,在吊运、安装等海上工作过程中,复杂海浪对船舶产生的持续影响导致风机安装的精度和效率大幅下降,甚至会对人员安全以及财产造成重大损失。在深远海域复杂海况下对工程船舶进行有效的波浪补偿,可提供稳定的作业环境以保证精准高效地完成各项工作,因此,本文提出了一种基于改进麻雀优化PID的波浪补偿控制方法并将其应用于Stewart补偿平台。首先,建立波浪补偿平台动力学以及运动学反解模型,并设计正解模型迭代求解算法。随后,使用PID进行波浪补偿控制,并通过麻雀搜索算法优化参数。接着,采用Circle混沌映射对其进行初始化分布,以解决初始化不均匀的问题;并采用动态自适应加权、柯西突变以及反向学习以提升算法全局寻优能力。最后,生成4~6级海况下的某工程船运动数据作为系统输入,利用MATLAB和Simulink软件平台搭建模型进行补偿控制验证,并在Stewart硬件平台上做补偿试验。结果表明,改进麻雀搜索算法具有较快的收敛速度、较高的精度和更好的寻优能力,优化后的PID控制方法更适合用于复杂海况下波浪补偿平台的控制优化,可为大功率海上风机安装的补偿平台控制系统设计提供参考。

关键词：波浪补偿平台 3自由度补偿比例积分微分控制器改进麻雀搜索算法