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体外诱导的Helios＋调节性T细胞的特征分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2018年第4期38卷 241-247页

作者：杨帆范臻佳顾燕英吴蓓颖林琳蔡刚上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科 200025

目的本研究拟对体外诱导的Helios＋调节性T细胞（induced Helios＋ regulatory T cell，Helios＋ iTreg）的特征进行分析，并比较其与正常人外周血固有Helios＋ Treg（natural Helios＋ Treg, Helios＋ nTreg）的差异。方法采集并分选... 详细信息

目的本研究拟对体外诱导的Helios＋调节性T细胞（induced Helios＋ regulatory T cell，Helios＋ iTreg）的特征进行分析，并比较其与正常人外周血固有Helios＋ Treg（natural Helios＋ Treg, Helios＋ nTreg）的差异。方法采集并分选正常人外周CD4＋CD25－效应性T细胞（effector T cell，Teff），体外以抗CD3/抗CD28合并IL-2及TGF-β刺激诱导Helios＋ iTreg生成，以外周血Helios＋ nTreg作为对照，通过流式细胞术和real-time PCR分别分析其表型特征Foxp3＋ Treg特异性去甲基化区（Treg-specific demethylated region，TSDR）的甲基化水平。结果体外诱导的Helios＋ iTreg高表达CD45RA，而Helios＋ nTreg几乎不表达CD45RA；体外诱导的Helios＋ iTreg较Helios＋ nTreg CD127、ICOS和PD-1的水平明显升高，IL-2和IFN-γ的表达水平明显升高，但CXCR3、CCR4等趋化因子受体的水平则明显下降；另外CD25的表达水平也明显下降；诱导型Helios＋ iTreg TSDR的甲基化水平明显低于Helios＋ nTreg。结论诱导型Helios＋ iTreg具有与Helios＋ nTreg不同的特征，提示其在生理及病理条件下可能发挥不同的免疫调节作用。

关键词：调节性T细胞 Helios IL-2 免疫表型甲基化分析

慢性乙型肝炎患者外周血抗原特异性CD8^+T细胞功能的初步分析

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检验医学 2014年第1期29卷 10-14页

作者：蔡刚吴蓓颖范臻佳沈茜上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 第二军医大学附属长海医院实验诊断科上海200433

目的评价慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血抗原特异性CD8+T细胞的功能及与临床相关指标的关系。方法采用主要组织相容性复合物(MHC)-抗原肽四聚体标记技术检测CHB患者外周血乙型肝炎病毒(HBV)抗原特异性CD8+T细胞,并对其细胞因子分泌能力进... 详细信息

目的评价慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血抗原特异性CD8+T细胞的功能及与临床相关指标的关系。方法采用主要组织相容性复合物(MHC)-抗原肽四聚体标记技术检测CHB患者外周血乙型肝炎病毒(HBV)抗原特异性CD8+T细胞,并对其细胞因子分泌能力进行检测,分析其与临床生化和病毒学指标的关系。结果 35例人类白细胞相关抗原(HLA)-A基因型为A02或A24的患者中有9例患者至少检出1种被四聚体识别的HBV抗原特异性CD8+T细胞,其白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的分泌能力明显低于其自身的外周血总CD8+T细胞。检出抗原特异性CD8+T细胞患者的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平明显高于阴性患者,而HBV DNA水平低于阴性患者。结论 CHB患者外周血抗原特异性CD8+T细胞存在明显的功能缺陷,可能因病毒抗原持续刺激造成功能耗竭,但外周血出现抗原特异性CD8+T细胞仍表明患者体内出现较强抗病毒免疫反应。

关键词： T细胞耗竭慢性乙型肝炎四聚体技术

流式细胞术检测HLA-B27阴阳性判读标准的建立及灰区样本的基因型分析

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检验医学 2020年第1期35卷 15-19页

作者：吴蓓颖顾燕英范臻佳蔡刚上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科

目的建立流式细胞术(FCM)检测人类白细胞抗原(HLA)-B27的阴阳性判读标准,同时探讨灰区样本的特性及应对措施。方法采用FCM检测132例腰背关节痛患者外周血HLA-B27的表达,以流式反向序列特异性寡核苷酸探针(Flow-rSSO)法检测患者HLA-B位... 详细信息

目的建立流式细胞术(FCM)检测人类白细胞抗原(HLA)-B27的阴阳性判读标准,同时探讨灰区样本的特性及应对措施。方法采用FCM检测132例腰背关节痛患者外周血HLA-B27的表达,以流式反向序列特异性寡核苷酸探针(Flow-rSSO)法检测患者HLA-B位点的分型。结果FCM和Flow-rSSO法检测HLA-B27的阳性率分别为18.18%和73.48%。根据FCM HLA-B27试剂盒推荐的判读规则,灰区样本45例,经Flow-rSSO法验证后,HLA-B27全部为阳性。通过对不同d值(荧光强度的均值与校准磁珠中位值的差值)范围样本的基因型分析设定判读规则,即d>2均判读为阳性,d≤-7为阴性,-7范围尽量缩小。灰区样本通常具有特殊的HLA-B型别,可通过Flow-rSSO法来进一步检测,以提高HLA-B27的检出准确度。

关键词：人类白细胞抗原-B27 流式细胞术强直性脊柱炎流式反向序列特异性寡核苷酸探针

2017年至2020年上海地区妇女宫颈脱落细胞HPV感染亚型调查分析

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诊断学理论与实践 2021年第6期20卷 567-572页

作者：孟俊许啸声陆一一范臻佳蔡刚上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 上海交通大学医学院附属瑞金医院妇产科上海200025

目的:统计本院临床及体检受试妇女宫颈脱落细胞人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)病毒的感染情况,分析本地成年女性HPV感染的流行病学特征,为HPV的预防和治疗提供依据。方法:回顾分析2017年10月至2020年12月本院妇科门诊及体检... 详细信息

目的:统计本院临床及体检受试妇女宫颈脱落细胞人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)病毒的感染情况,分析本地成年女性HPV感染的流行病学特征,为HPV的预防和治疗提供依据。方法:回顾分析2017年10月至2020年12月本院妇科门诊及体检中心58 883例女性宫颈脱落细胞的HPV分型检测结果 ,对不同年龄阶段及不同宫颈疾病类型(慢性宫颈炎、宫颈上皮瘤变、宫颈恶性肿瘤)患者的25种常见HPV亚型分布进行统计分析。结果:58 883例受检者中共检出HPV阳性者9 168例,总检出率为15.57%,其中单重感染和多重感染者分别为6 971例和2 197例。检出率居前三位的HPV亚型分别为HPV52(3.31%)、HPV58(2.05%)、HPV16(1.92%)。HPV的检出率与女性年龄相关,其中<20岁及21~30岁女性的HPV检出率分别为37.34%及19.52%,检出率明显高于其他年龄组。2 105例宫颈病变患者中,慢性宫颈炎患者中感染率居前3位的HPV亚型为HPV52 (16.92%)、HPV58(10.68%)、HPV16 (10.16%);宫颈上皮瘤变患者中感染率居前3位的HPV亚型为HPV52 (22.22%)、HPV16(17.46%)、HPV58(14.29%);宫颈恶性肿瘤患者中感染率居前的HPV亚型为HPV16 (29.59%)、HPV52 (11.24%)、HPV58 (10.06%)。结论:上海地区女性的HPV总检出率在15.57%,检出率居前3位的HPV亚型分别为HPV52、HPV58、HPV16型,这3种亚型在宫颈病变患者中检测率也最高,与宫颈癌发生相关,这与既往国外报导HPV16和HPV18亚型是最常见致癌亚型略有不同。

关键词：人乳头状瘤病毒基因分型聚合酶链式反应毛细管电泳技术

急性髓系白血病患者外周血粒细胞、单核细胞膜GPI锚链和红细胞表面CD59表达水平的研究

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现代检验医学杂志 2019年第1期34卷 26-28,33页

作者：范臻佳金丽兰史册刘禹蔡刚上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

目的通过流式细胞术研究急性髓系白血病(AML)患者粒细胞、单核细胞糖基磷脂酰肌醇(glycosyl-phosphatidylinositol,GPI)锚链和红细胞CD59表达水平及其临床意义。方法该研究纳入了36例并发血管内溶血的AML患者及21例阵发性睡眠性血红蛋白... 详细信息

目的通过流式细胞术研究急性髓系白血病(AML)患者粒细胞、单核细胞糖基磷脂酰肌醇(glycosyl-phosphatidylinositol,GPI)锚链和红细胞CD59表达水平及其临床意义。方法该研究纳入了36例并发血管内溶血的AML患者及21例阵发性睡眠性血红蛋白尿(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria,PNH)患者,依据国际临床流式细胞协会推荐的PNH流式诊断指南,分别对受试对象的红细胞和有核细胞进行PNH克隆检测,统计分析AML患者粒细胞、单核细胞及红细胞PNH克隆的水平。结果 AML组患者与PNH组患者相比较无明显红细胞CD59表达缺陷(I型红细胞98.49±4.61vs61.41±25.86,Ⅱ型红细胞1.33±4.55vs 16.82±19.92,Ⅲ型红细胞0.17±0.85vs 21.71±21.12,差异均有统计学意义(t=6.43,3.41,4.71,均P<0.001);粒细胞、单核细胞缺陷克隆检测存在但与PNH组比较则明显减少(粒细胞26.46±23.36vs 73.12±28.41,单核细胞35.80±27.80vs 78.37±25.03,差异有统计学意义(t=4.59,3.76,均P<0.001)。结论 AML患者有核细胞中可出现FLAER阴性的PNH克隆,但未见CD59表达缺陷的红细胞,可与PNH区分。

关键词：急性髓系白血病糖基磷脂酰肌醇 CD59检测嗜水气胞菌溶素变异体检测

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移植患者BK病毒监测的临床意义

检验医学 2014年第5期29卷 493-497页

作者：吴蓓颖蔡刚林佳菲范臻佳樊绮诗上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

目的通过对患者血或尿BK病毒(BKV)载量的监测,探讨性别、年龄、人巨细胞病毒(HCMV)及免疫抑制剂浓度等对患者BKV载量的影响,以及BKV载量对患者疾病的影响。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测移植患者血浆及尿液的BKV载量。分析血... 详细信息

目的通过对患者血或尿BK病毒(BKV)载量的监测,探讨性别、年龄、人巨细胞病毒(HCMV)及免疫抑制剂浓度等对患者BKV载量的影响,以及BKV载量对患者疾病的影响。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测移植患者血浆及尿液的BKV载量。分析血浆HCMV浓度及免疫抑制剂浓度对患者BKV载量的影响以及BKV载量高低对患者肾功能的影响。结果 1 985例移植和非移植肾病患者中BKV阳性242例(12.1%),其中血浆阳性211例(10.6%),尿液阳性118例(5.9%)。骨髓移植患者、肾移植患者及非移植肾病患者的BKV阳性率差异有统计学意义(P150 ng/mL)对患者BKV载量的影响差异有统计学意义(P8.0 ng/mL)与BKV载量差异无统计学意义(P=0.278 5)。BKV阳性患者与BKV阴性患者比较,肾功能中的肌酐(CREA)水平差异有统计学意义(P=0.020 7)。结论 BKV的复制与性别、年龄、是否有HCMV合并感染无关,而与血浆免疫抑制剂的浓度有关。通过对BKV载量的连续监测,调节患者免疫抑制剂的浓度,可以减少由BKV带来的二次损伤。

关键词： BK病毒移植免疫抑制剂

非ST段抬高型急性冠脉综合征患者血浆S100A1水平与GRACE评分及短期预后相关性的研究

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现代生物医学进展 2019年第9期19卷 1665-1669,1761页

作者：范臻佳王学慧吴芳芳臧旺福郭荣上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025 同济大学附属第十人民医院心血管内科上海200072 同济大学附属第十人民医院心胸外科上海200072

目的:探讨非ST段抬高型急性冠脉综合征(NST-ACS)患者血浆S100A1水平与全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分之间的关系,以及S100A1水平对NST-ACS患者30天预后的判定价值。方法:共有162例NST-ACS患者符合入选标准,收集基本临床资料,进行G... 详细信息

目的:探讨非ST段抬高型急性冠脉综合征(NST-ACS)患者血浆S100A1水平与全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分之间的关系,以及S100A1水平对NST-ACS患者30天预后的判定价值。方法:共有162例NST-ACS患者符合入选标准,收集基本临床资料,进行GRACE评分,同时收集次日清晨空腹采集肘静脉血,检测血浆S100A1浓度,与患者的GRACE评分进行比较。根据S100A1的水平进行分组随访,KM生存分析不同组患者30天预后进行评价。结果:不同GRACE分组患者间S100A1水平具有显著性差异(P3.41 ng/mL的患者30天内心血管事件发生率显著升高(P<0.05)。结论:S100A1可作为预测NST-ACE患者病情的发生发展的生化指标;在NST-ACS患者中运用S100A1有助于对患者早期危险分层及评估预后有一定的临床价值。

关键词：急性冠脉综合征生物标记物 S100A1 诊断预后

ST2联合CEA、CYFRA211在早期非小细胞肺癌辅助诊断中的应用价值

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诊断学理论与实践 2023年第5期22卷 441-447页

作者：范臻佳赵珺涛周嘉宽李占权万颖蕾上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

目的:探索3种生物标志物可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulation expressed gene 2protein,ST2)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)和CYFRA211(细胞角蛋白质19片段中的21和1表位)辅助诊断早期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)价值。方法:收集2023年1月至8月期间上海交通大学医学院附属瑞金医院收治的91例早期NSCLC患者(TNM分期Ⅰ期)、21例中晚期NSCLC患者(TNM分期Ⅱ期16例、Ⅲ期5例),另选取同期的50例肺部良性病变患者及50例健康体检人群作为正常对照。用荧光免疫层析法检测所有研究对象的血浆ST2水平,用化学微粒子发光法检测其血清CEA、CYFRA211水平,比较组间差异,并分析单个或联合指标诊断NSCLC的价值。结果:检测ST2水平后发现,NSCLC早期组要高于肺部良性病变组和健康对照组(P<0.001),肺部良性病变组要高于健康对照组(P<0.001)。NSCLC早期组的CEA浓度水平要高于健康对照组(P<0.05)、肺部良性病变组要高于健康对照组(P<0.05)。NSCLC早期组的CYFRA211浓度水平要高于健康对照组(P<0.05)。受试者操作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析显示,ST2、CEA、CYFRA211的临界值分别为≥25.0 ng/L、≥1.8 ng/mL、≥2.0 ng/mL时,其单独检测诊断早期NSCLC的曲线下面积分别为0.957、0.660、0.570;其中ST2的灵敏度和特异度分别为89.0%和98.0%,CEA和CYFRA211的灵敏度和特异度分别46.2%和80.0%、17.6%和96.0%;而三者联合检测诊断早期NSCLC的曲线下面积为0.973,灵敏度为92.3%、特异度为98.0%,均优于各项指标单独检测的结果。在临床病理特征中,肿瘤直径越大,NSCLC患者血浆ST2水平相对较高,差异具有统计学意义(P<0.05);患者CEA水平在不同的肿瘤分化程度的组别间、是否存在区域淋巴结转移的组别间、有无气道播散的组别间、是否浸润胸膜的组别间及TMN分期Ⅰ期组与Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期组间差异均有统计学意义;而CYFRA211水平则在患者的不同性别、不同年龄组别和不同肺癌类型组别(腺癌与鳞癌)中有统计学差异(P<0.05)。结论:相对于CEA和CYFRA211,单独检测ST2水平在区分NSCLC早期患者与肺部良性病变患者、健康对照人群中更有优势;而将三者联合检测,具有较高的诊断价值,可用于辅助诊断早期NSCLC。

关键词：可溶性生长刺激表达基因2蛋白非小细胞肺癌癌胚抗原细胞角蛋白19片段

华法林抗凝治疗患者维生素K依赖性凝血因子、蛋白C及蛋白S活性改变的分析

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诊断学理论与实践 2022年第3期21卷 362-366页

作者：范臻佳刘禹许冠群武文漫王学锋上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科上海200025

目的:探讨华法林抗凝治疗对维生素K依赖的凝血因子[凝血因子Ⅱ(coagulation factorsⅡ,FⅡ)、FⅦ、FⅨ、FⅩ]及抗凝系统中蛋白C(protein C,PC)及蛋白S(protein S,PS)活性的下调作用,以及对抗凝促凝平衡的影响。方法:收集2018年1月至2020... 详细信息

目的:探讨华法林抗凝治疗对维生素K依赖的凝血因子[凝血因子Ⅱ(coagulation factorsⅡ,FⅡ)、FⅦ、FⅨ、FⅩ]及抗凝系统中蛋白C(protein C,PC)及蛋白S(protein S,PS)活性的下调作用,以及对抗凝促凝平衡的影响。方法:收集2018年1月至2020年3月在我院接受华法林抗凝治疗的肺栓塞患者和深静脉血栓患者,检测其FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ、PC及PS活性,分析其与凝血酶原时间(prothrombin time,PT)/国际标准化比值(international standardized ratio,INR)间的相关性;并参照INR进行四分位法分组,比较各组间凝血及抗凝因子活性水平的差异。结果:除PS活性外,不同INR四分位组间所对应的各因子活性水平差异均存在统计学意义(FⅡ、FⅦ、FⅩ,P<0.000 1;PC,P<0.001;FⅨ,P<0.05)。患者的INR (1.32~5.85)与FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ及PC活性呈负相关(r分别为-0.678 7、-0.692 6、-0.376 7、-0.595 4及-0.466 6),但与PS活性间的相关性较弱(r为-0.212 2)。相较于抗凝蛋白PC及PS,华法林抑制的维生素K依赖的羧基化对凝血因子活性和表达的影响更为显著,凝血因子活性与抗凝蛋白活性的比值随INR升高而降低。结论:华法林虽然同时干扰维生素K依赖性凝血因子及抗凝蛋白PC、PS的羧基化,降低其活性,但对凝血因子的抑制更为显著。在使用华法林治疗时对抗凝和凝血因子进行检测,将有助于对患者的精准诊断和治疗。

关键词：华法林国际标准化比值凝血因子活性蛋白C活性蛋白S活性