检索结果-南通市图书馆

大肠杆菌多酚氧化酶的分子克隆及异源高效表达

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国饲料 2024年第5期 26-31页

作者：邓卉余丹邹成义范景胜李斌屈东倪青松郑钰嘉陈瑾四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室四川成都610066

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB... 详细信息

菜籽粕、棉籽粕等非粮饲料资源存在的酚类化合物芥子碱、棉酚等抗营养因子,严重影响了其饲喂价值。本课题组筛选出的一株大肠杆菌属芥子碱降解菌SDB2已被证实能通过分泌多酚氧化酶来降解芥子碱和棉酚,本试验旨在运用基因工程技术克隆SDB2多酚氧化酶基因,实现其高效表达,为SDB2多酚氧化酶在饲料工业上的规模化应用奠定基础。从大肠杆菌SDB2中克隆出多酚氧化酶基因,将其与质粒pET28a连接后转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中培养,通过PCR鉴定及质粒酶切验证方法构建重组菌株,同时对重组克隆基因进行生物信息学分析。采用“2×2”交叉试验设计,以温度和诱导剂IPTG浓度两个影响因素诱导SDB2多酚氧化酶基因在重组菌株中高效表达,经SDS-PAGE和WB双重验证后,确立最佳诱导条件,最终纯化出目标酶蛋白。结果表明:(1)成功克隆SDB2多酚氧化酶基因,构建出异源表达重组菌株。(2)克隆出的SDB2重组多酚氧化酶基因含目标核苷酸741个,总编码氨基酸263个(含标签氨基酸20个),氨基酸组成的蛋白相对分子质量为28499.0,理论等电点为6.94,据此预测出SDB2重组多酚氧化酶三维结构模型。(3)确立SDB2多酚氧化酶异源高效表达的最佳诱导条件为温度37℃,IPTG浓度1 mmol,该条件下表达出大量可溶性酶蛋白,有利于工业化生产。本试验条件下,大肠杆菌SDB2多酚氧化酶成功实现了分子克隆及异源高效表达,为我国非粮饲料资源实现高效利用提供了技术参考。

关键词：大肠杆菌多酚氧化酶克隆高效表达

同方期刊数据库

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

舍饲条件下简州大耳羊生产性能研究

草学 2024年第1期 74-77,83页

作者：张林周爱民邱时秀俄木曲者许锋范景胜徐媛张晓晖许祯莹熊朝瑞四川省畜牧科学研究院/动物遗传育种四川省重点实验室四川成都610066 绵阳市农业科学研究院四川绵阳621023 成都市农林科学院四川成都611130

简州大耳羊是四川省培育的肉用山羊品种之一,也是简阳市特色产业发展的基础,对推动我国肉用山羊的品种改良和肉羊产业发展发挥着重要的作用。试验以简州大耳羊为研究对象,在舍饲条件下开展体重、体尺、产羔率、断奶成活率等生产性能测... 详细信息

简州大耳羊是四川省培育的肉用山羊品种之一,也是简阳市特色产业发展的基础,对推动我国肉用山羊的品种改良和肉羊产业发展发挥着重要的作用。试验以简州大耳羊为研究对象,在舍饲条件下开展体重、体尺、产羔率、断奶成活率等生产性能测定。结果表明:简州大耳羊早期生长发育较快,6月龄前平均日增重达130g/d;个体体型高大,成年公羊体长83.63cm、体高76.18cm、胸围88.64cm;繁殖性能较强,平均产羔率达219.01%。加强简州大耳羊在舍饲条件下繁育,研究及应用推广其高效育肥、饲养管理等技术,推动简州大耳羊改良其他品种及其产业发展。

关键词：简州大耳羊舍饲生产性能

维普期刊数据库博看期刊

山羊CD4基因外显子6多态性与精子内化外源DNA能力的相关性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

山羊CD4基因外显子6多态性与精子内化外源DNA能力的相关性研究

作者：范景胜西南大学

学位级别：硕士

哺乳动物精子具有自发结合内化外源DNA的能力。精子介导基因转移是转基因效率较高的技术方法之一,但同时存在着极大的随机性和不确定性。DNA的内化转运受到精子质膜分子的严格调控,仅有少量结合的DNA能被内化转运到精子细胞核,极大的降... 详细信息

哺乳动物精子具有自发结合内化外源DNA的能力。精子介导基因转移是转基因效率较高的技术方法之一,但同时存在着极大的随机性和不确定性。DNA的内化转运受到精子质膜分子的严格调控,仅有少量结合的DNA能被内化转运到精子细胞核,极大的降低了精子介导基因转移效率。研究发现精子供体对精子载体法制备转基因动物有显著影响,不同品种的动物精子结合内化外源DNA能力存在显著差异。本研究以精子质膜上的转运系统之一CD4分子为研究对象,通过PCR-SSCP技术分析山羊CD4基因,并与精子内化外源DNA能力进行相关性分析。(1)选取了体况、精液品质相近的南江黄羊、波尔山羊和波尔山羊×川东白山羊杂交一代羊(简称波川F)3个品种的种公羊17只,假阴道法采集精液,离心去除精清,与地高辛标记的线性pEGFP-N质粒共孵育,免疫组化法检测转染效率;(2)通过PCR-SSCP技术分析了南江黄羊、川东白山羊、波尔山羊和波川F代山羊4个品种共97个个体的CD4基因外显子6序列的单核苷酸多态性;(3)对南江黄羊、波尔山羊和波川F代山羊3个品种的种公羊CD4基因外显子6多态性与其精子内化转运外源DNA的能力进行相关性分析。主要研究结果如下: 1.不同山羊品种的精子内化外源DNA的能力不同。在3个品种中,南江黄羊精子内化外源DNA的能力较高,为(35.994±1.71)%,其次是波川F代山羊,为(32.06±3.21)%,波尔山羊最低,为(21.54±2.31)%,南江黄羊、波川F代山羊的内化转染效率极显著高于波尔山羊(P＜0.01)。 2.在选取的4个山羊品种中,发现CD4基因外显子6存在1个SNP位点。山羊CD4基因cDNA编码区700 bp处存在G/A突变,引起了234位氨基酸发生G/R突变。南江黄羊、川东白山羊检测到AA、AB和BB型3种基因型,波尔山羊和波川F代检测到AA和AB型2种基因型。4个山羊品种的PIC、He、Ne从大到小排列是南江黄羊,川东白山羊,最后是波尔山羊和波川F代羊。 3.山羊CD4基因外显子6的SNP位点与精子内化外源DNA能力存在相关性。在所检测样本中,BB型山羊精子内化外源DNA效率最高(35.26±0.43)%,AA型和AB型山羊精子内化效率分别为(27.83±2.29)%和(29.37±3.28)%。BB型内化效率显著高于AA型和AB型内化效率(0.01≤P≤0.05),表明山羊CD4基因外显子6的SNP位点可能是影响精子内化外源DNA能力的因素之一,其B型等位基因可能是精子内化外源DNA能力的分子标记之一。

关键词：山羊精子外源DNA SMGT CD4 PCR-SSCP

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

肥羔型黑山羊繁殖及生长发育规律研究

四川畜牧兽医 2022年第2期49卷 27-29页

作者：许锋张林孟元华熊朝瑞范景胜俄木曲者四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室四川成都610066 四川省凉山州农业科教中心四川西昌615000

为了探究肥羔型黑山羊繁殖及生长发育规律,给新品种选育提供参考,本试验测定了177只母羊的繁殖性状和初生、1月龄、2月龄、4月龄、6月龄羊的体重体尺数据,并进行统计分析。研究表明,肥羔型黑山羊多胎性好、早期生长发育较快,具有进一步... 详细信息

为了探究肥羔型黑山羊繁殖及生长发育规律,给新品种选育提供参考,本试验测定了177只母羊的繁殖性状和初生、1月龄、2月龄、4月龄、6月龄羊的体重体尺数据,并进行统计分析。研究表明,肥羔型黑山羊多胎性好、早期生长发育较快,具有进一步选育的价值。

关键词：肥羔型黑山羊生长发育繁殖选育研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

高效养肉用山羊

高效养肉用山羊

白芥子诱导的鸡内源性芥子碱降解菌的筛选、鉴定及酶活测定

2016年

作者：熊朝瑞俄木曲者范景胜副

本书归纳了养肉用山羊所需的技术和知识，内容包括山羊的生物学特性、肉用山羊品种资源与品种利用、肉用山羊高效繁育技术、肉用山羊日粮供给技术、肉用山羊饲养管理技术、肉用山羊主要疫病防控技术、肉用山羊场建设与经营管理。

关键词：肉用羊山羊饲养管理

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

在线全文

汇雅图书（南通市图书馆）

学校读者我要写书评

暂无评论

中国饲料 2023年第3期 44-49页

作者：邓卉余丹范景胜屈东邹成义李斌殷勤郑钰嘉倪青松汪林书四川省畜牧科学研究院动物遗传育种四川省重点实验室四川成都610066

本试验旨在通过分离鉴定白芥子诱导的芥子碱降解菌,并对其核心功能酶漆酶进行酶活测定,建立芥子碱的生物降解方法,为探寻白芥子等十字花科类非粮饲料资源的高效利用提供技术支撑。本试验以藏香鸡为模型,在基础日粮中添加20%白芥子饲喂2... 详细信息

本试验旨在通过分离鉴定白芥子诱导的芥子碱降解菌,并对其核心功能酶漆酶进行酶活测定,建立芥子碱的生物降解方法,为探寻白芥子等十字花科类非粮饲料资源的高效利用提供技术支撑。本试验以藏香鸡为模型,在基础日粮中添加20%白芥子饲喂28 d进行芥子碱降解菌体内诱导。分别采集鸡空肠、回肠、盲肠内容物在不同培养基中分离筛选芥子碱降解菌,对筛选出的优势菌进行形态学和分子生物学鉴定,测定该菌株的芥子碱降解效果和漆酶活性。结果表明:(1)在鸡盲肠中筛选出9株目标菌,筛出率明显高于空肠和回肠,并进一步选出1株芥子碱降解优势菌SDB2(Sinapine-degrading bacteria 2)。(2)经鉴定,SDB2菌株属于变形菌门;γ-变形菌纲;肠杆菌目;肠杆菌科;大肠埃希菌。(3)芥子碱浓度与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系(P <0.01),芥子碱浓度随培养时间增加而降低,培养72 h的芥子碱降解率可达50%。(4)漆酶活力与SDB2菌株培养时间存在极显著的线性回归关系(P <0.01),漆酶活力随培养时间增加而降低。(5)漆酶活力与芥子碱浓度存在极显著的线性回归关系(P <0.01),漆酶活力与芥子碱浓度呈正相关。综上,本试验条件下,筛选出的SDB2能利用自身分泌的漆酶有效降解芥子碱,为高效利用十字花科类非粮饲料资源奠定了基础。

关键词：芥子碱降解菌芥子碱漆酶白芥子大肠杆菌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

简州大耳羊繁殖性能选育研究及遗传进展分析

畜牧与兽医 2014年第12期46卷 37-39页

作者：范景胜熊朝瑞俄木曲者王永张红平郑水明四川省畜牧科学研究院四川成都610066 西南民族大学四川成都610225 四川农业大学四川雅安625014 简州市畜牧食品局四川简州641400

对简州大耳羊核心群世代选育母羊繁殖性能进行了系统测定。简州大耳羊发情周期平均为20.66 d,发情持续期为48.52 h,妊娠期平均为148.76 d;初产母羊平均产羔率为153.51%,经产母羊为242.41%;年均产羔1.75胎;公羔平均初生重为3.10 kg,母羔... 详细信息

对简州大耳羊核心群世代选育母羊繁殖性能进行了系统测定。简州大耳羊发情周期平均为20.66 d,发情持续期为48.52 h,妊娠期平均为148.76 d;初产母羊平均产羔率为153.51%,经产母羊为242.41%;年均产羔1.75胎;公羔平均初生重为3.10 kg,母羔平均初生重为2.95 kg。结果表明简州大耳羊具有多胎、多羔,常年发情产羔,羔羊初生重较大,繁殖性能好的优良特性。通过世代选育,简州大耳羊繁殖性能取得了一定的遗传进展,四世代初产母羊产羔率比零世代提高了3.39%;四世代公羔初生重比零世代提高了9.15%,母羔初生重比零世代提高了7.66%。研究结果揭示了简州大耳羊的发情、配种、产羔等繁殖规律,表明简州大耳羊具有较高的繁殖力,并随胎次的不同而异,而且各世代间稳定性好。

关键词：繁殖性能选择培育简州大耳羊世代

奶牛性控冷冻精液品质和转染外源DNA的特点

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国畜牧杂志 2010年第1期46卷 20-22,52页

作者：王岭斌于明举范景胜赵永聚西南大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室重庆400716

本研究分析了奶牛性控冻精与普通冻精解冻后精液品质和转染外源DNA的特点。奶牛性控冻精与普通冻精解冻后,分别检测精液品质和精子超微结构,并与地高辛标记的线性化pEGFP-N1质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率。... 详细信息

本研究分析了奶牛性控冻精与普通冻精解冻后精液品质和转染外源DNA的特点。奶牛性控冻精与普通冻精解冻后,分别检测精液品质和精子超微结构,并与地高辛标记的线性化pEGFP-N1质粒共育转染,用免疫组化的方法检测精子转染外源DNA的效率。结果表明:性控冻精与普通冻精相比,有效精子数少(P<0.01),精子活力、顶体完整率差(P<0.05);2组精子超微结构都出现一定程度的顶体破裂、脱落等形态变化;2组精子都具有自动结合和转运外源DNA的能力,性控冻精转染率极显著高于普通冻精(P<0.01),分别为(11.34%±2.41%)和(7.30%±2.14%)。

关键词：性控精液冷冻保存外源DNA 奶牛

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

环境对种公牛精液品质的影响及应对措施

黑龙江动物繁殖 2009年第1期17卷 27-29页

作者：范景胜徐恢仲西南大学动物科技学院重庆北碚400716

分析了环境应激对种公牛的危害,尤其是对精液品质的影响,并提出了抗应激措施。

关键词：环境应激种公牛精液品质