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天山云杉ABI5基因的克隆与原核表达活性测定

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分子植物育种 2024年第9期22卷 2898-2904页

作者：范晓聪王佳琰阮晓奚雨欣杨丽吴庆飞王强浙江农林大学林业与技术学院杭州311300 浙大宁波理工学院生物与化学工程学院宁波315100

ABI5又名植物脱落酸不敏感蛋白5(Abscisic acid-insensitive 5),作为ABA信号通路中重要的转录因子,协调参与了种子发育和萌发、植物生长、逆境胁迫等方面的调控。目前的研究多是以拟南芥为对象,而在天山云杉等木本植物上报道极少。本研... 详细信息

ABI5又名植物脱落酸不敏感蛋白5(Abscisic acid-insensitive 5),作为ABA信号通路中重要的转录因子,协调参与了种子发育和萌发、植物生长、逆境胁迫等方面的调控。目前的研究多是以拟南芥为对象,而在天山云杉等木本植物上报道极少。本研究以天山云杉的cDNA为模板进行了PCR扩增,得到了天山云杉ABI5序列,经测序发现其全长为1071 bp,共编码了352个氨基酸。将ABI5基因连接pET-24a原核表达载体,得到了重组质粒pET-24a-ABI5。对IPTG浓度、诱导时间、培养基类型和孵育温度进行了优化,得到了最适培养条件为采用LB培养基,IPTG终浓度为0.2 mmol/L,20℃下诱导8 h。通过SDS-PAGE检测纯化产物发现大部分蛋白以包涵体形式存在,对部分包涵体蛋白进行了复性并利用孔雀石绿显色反应进行了活性的验证。

关键词：天山云杉 ABI5 分子克隆原核表达包涵体复性

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天山云杉ABI5的克隆和原核表达

天山云杉ABI5的克隆和原核表达

作者：范晓聪浙江农林大学

学位级别：硕士

ABI5又名植物脱落酸不敏感蛋白5(Abscisic acid-insensitive 5),作为ABA信号通路中重要的转录因子,协调参与了种子发育和萌发、植物生长、逆境胁迫等方面的调控。目前的研究多是以拟南芥为对象,而在天山云杉等木本植物上报道极少。本实... 详细信息

ABI5又名植物脱落酸不敏感蛋白5(Abscisic acid-insensitive 5),作为ABA信号通路中重要的转录因子,协调参与了种子发育和萌发、植物生长、逆境胁迫等方面的调控。目前的研究多是以拟南芥为对象,而在天山云杉等木本植物上报道极少。本实验室前期利用转录组测序技术分析了1mmol/L DHAP处理14天的天山云杉幼苗,发现了处理组中ABI5与对照组相比显著上调,进而推测出ABI5在天山云杉应对DHAP胁迫中发挥着重要的功能,于是本文以天山云杉(Picea schrenkiana)为材料,成功克隆了天山云杉ABI5基因(命名为PFABI5)并通过大肠杆菌原核表达系统成功表达了PFABI5。主要研究结果如下:(1)以天山云杉的c DNA为模板进行了PCR扩增,得到了PFABI5序列,经测序发现其全长为1071bp,共编码了352个氨基酸。(2)构建了p CAMBIA1300-GFP载体,利用农杆菌侵染技术在烟草叶片中瞬时表达,并利用共聚焦激光扫描显微镜观察其荧光信号。结果发现PFABI5定位在细胞核。此外构建了p GBKT7-ABI5载体并转化至Y2H Gold酵母菌株中,发现PFABI5在酵母中具有转录激活活性。这些结果说明PFABI5可以作为转录因子行使功能。(3)将ABI5基因克隆至pET-24a表达载体,得到了重组质粒pET-24a-ABI5。宿主选择为BL21(DE3),转化成功后对其进行原核表达。对IPTG浓度、诱导时间、培养基类型和孵育温度进行了优化,得到了最适培养条件为采用LB培养基,IPTG终浓度为0.2mmol/L,20℃下诱导8h。通过SDS-PAGE检测纯化产物发现大部分蛋白以包涵体形式存在,仅有部分可溶性蛋白产生且表达情况极不稳定。(4)在不改变氨基酸序列的情况下,对ABI5的原序列进行了密码子优化和GC水平调整,得到了新的PFABI5序列。构建了新序列的原核表达载体进行原核表达,经检测发现表达产物相比原序列的表达产物,其蛋白可溶性更高且表达情况更稳定。

关键词：天山云杉 ABI5 原核表达分子克隆密码子

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美的集团多元化经营财务绩效研究

美的集团多元化经营财务绩效研究

作者：范晓聪湖南理工学院

学位级别：硕士

随着互联网和人工智能的普及,传统制造业面临着机遇和挑战,美的集团作为一家家电行业的龙头企业,从21世纪初就开始布局多元化发展战略,从相关产品多元化到非相关领域多元化,再到纵向产业链一体化布局,期间不断进行转型,实施“双智”和... 详细信息

随着互联网和人工智能的普及,传统制造业面临着机遇和挑战,美的集团作为一家家电行业的龙头企业,从21世纪初就开始布局多元化发展战略,从相关产品多元化到非相关领域多元化,再到纵向产业链一体化布局,期间不断进行转型,实施“双智”和“工业互联网”战略。在多元化经营过程中,美的集团从家电领域步入到物流、机器人自动化、数字化创新业务等领域,期间美的集团从传统家电企业发展为一家科技企业。随着政治、经济、文化环境的变迁,美的集团在多元化经营中也面临着机遇和挑战。鉴于此,对美的集团多元化经营财务绩效研究具有其现实意义。文章首先梳理了多元化经营的相关文献,阐释了国内外学者有关企业多元化经营对财务绩效影响的研究理论,为后文研究美的集团多元化经营财务绩效奠定了基础。之后,本文对美的集团多元化经营历程、背景、原因等方面进行分析,并且利用赫芬达尔指数和熵指数法对其多元化经营程度进行测量。其次,通过搜集美的集团2012年到2020年的资料,运用财务指标的营运、偿债、盈利、成长能力对其多元化经营财务绩效进行分析,同时利用因子分析法对其财务绩效进行评价。再利用非财务指标进行补充分析,从企业价值、市场份额、品牌价值三方面评价美的集团多元化经营情况。最后发现美的集团多元化经营对财务绩效有一定的积极作用,提高了存货管理水平,在一定程度上提升了盈利水平。在非财务指标上,美的集团多元化经营提升了企业价值、市场份额、品牌价值。但美的集团多元化经营中也会出现一些问题,应收账款管理水平、长期偿债能力有待提高;机器人分部盈利情况仍需改善;美的集团在家电行业中盈利能力和成本费用管控能力不如格力电器,盈利能力还需继续提高。针对以上结论,本文对美的集团和其他企业提出了有关建议。对于美的集团而言,企业多元化经营中要整合机器人及自动化系统业务板块,还要继续优化资源配置,加强整合内部资源,提升资源利用率,进而继续提升成本费用管理水平和盈利水平。此外,美的集团还需设置合理债务结构,制定合适信用政策。对于其他企业而言,企业在步入其它领域之前一定要先了解自身发展状况,明确未来目标,选择合适的新业务领域,在多元化经营过程中不断进行资源整合以促进各业务单元协同发展,提升企业财务绩效。

关键词：多元化经营财务绩效财务指标因子分析法

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基于模糊PID控制的光伏并网发电系统设计

机电工程 2010年第9期27卷 104-107页

作者：范晓聪方建安东华大学信息科学与技术学院上海201620

随着全球能源危机的日益加剧以及光伏并网发电系统成本的不断降低,人们对光伏并网发电系统的关注也越来越多。针对"光伏并网发电系统具有非线性,以及光伏阵列的输出电压一般较低"等问题,在光伏并网发电系统的模型设计时增加一级DC/DC变... 详细信息

随着全球能源危机的日益加剧以及光伏并网发电系统成本的不断降低,人们对光伏并网发电系统的关注也越来越多。针对"光伏并网发电系统具有非线性,以及光伏阵列的输出电压一般较低"等问题,在光伏并网发电系统的模型设计时增加一级DC/DC变换器,以提高输出电压,利于后级DC/AC逆变器的控制。控制策略采用了模糊PID控制,并利用Matlab/Simulink对模糊PID算法和该模型进行了仿真。研究结果表明基于模糊PID控制以及增加一级DC/DC变换器的光伏并网发电系统的模型是可行的。

关键词：光伏并网发电系统 DC/DC变换器模糊PID控制

角膜基质针刺联合羊膜移植术治疗大泡性角膜病变

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国际眼科杂志 2014年第6期14卷 1127-1129页

作者：王超庆李燕飞程秀春李静范晓聪李琦济南市明水眼科医院中国山东省250200

目的：探讨施行角膜基质针刺联合羊膜移植术治疗大泡性角膜病变（bullous keratopathy，BK）的临床疗效。方法：对35例35眼大泡性角膜病变者施行角膜基质针刺联合羊膜移植术，所有患者术前、术后均行前节OCT、角膜地形图、角膜知觉、共... 详细信息

目的：探讨施行角膜基质针刺联合羊膜移植术治疗大泡性角膜病变（bullous keratopathy，BK）的临床疗效。方法：对35例35眼大泡性角膜病变者施行角膜基质针刺联合羊膜移植术，所有患者术前、术后均行前节OCT、角膜地形图、角膜知觉、共焦显微镜检查。观察患者术后眼部症状、大泡复发情况、角膜知觉改变、角膜厚度变化、角膜各层组织结构变化。结果：角膜基质针刺联合羊膜移植术后随访6～18mo。32例（91%）均在术后第1d疼痛感消失，并在随访期间未再出现疼痛，另外3例（9%）疼痛感减轻并在3d后消失。9例（26%）术后角膜上皮在1wk内愈合，21例（60%）在2wk内愈合，5例（14%）在3wk内愈合。随访期间BK无复发，2例（6%）在术后3，4wk在周边区域见少量微小水泡，无自觉症状，随时间延长未见加重。所有患者无新生血管发生，角膜表面光滑。30例（86%）移植的羊膜于术后2mo变薄，部分溶解吸收，3mo时肉眼基本不见羊膜。34例（97%）视力无改变，1例（3%）由光感到手动/眼前。30例（86%）术后2mo角膜知觉减退，下降幅度为20±7mm，所有患者角膜厚度均增加，由术前的788±35μm，增至940±43μm，术后12mo，角膜厚度增至1 060±27μm。共焦显微镜结果：术后3mo，角膜基底膜下三叉神经纤维数量密度降低，浅基质层基质细胞成纤维化，深基质层更加疏松、细胞肿胀明显，内皮细胞数量较术前减少且肿胀更加明显。结论：角膜基质针刺联合羊膜移植术能有效控制BK的症状，防止BK的复发，尤其是对症状明显，视功能差的患者是简单、安全、实用的方法。

关键词：角膜基质针刺羊膜移植大泡性角膜病变

准噶尔盆地春光区块砂泥岩压实曲线分析及其在砂体识别中的应用

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油气地球物理 2012年第4期10卷 57-59页

作者：雷蕾邵伟民徐少华范晓聪成都理工大学能源学院中国石化河南油田分公司勘探开发研究院

准噶尔盆地春光区块新近系沙湾组埋藏浅,砂泥岩速度随埋深的增加变化幅度大,砂体在地震上的响应也随着深度的变化而有所不同,不同深度砂体的识别方法不一致。砂泥岩压实曲线可很好地描述速度差随深度的变化情况,有助于了解不同深度段波... 详细信息

准噶尔盆地春光区块新近系沙湾组埋藏浅,砂泥岩速度随埋深的增加变化幅度大,砂体在地震上的响应也随着深度的变化而有所不同,不同深度砂体的识别方法不一致。砂泥岩压实曲线可很好地描述速度差随深度的变化情况,有助于了解不同深度段波阻抗的变化情况及砂体类型,再结合合成记录和波形分析,即可了解不同深度的砂体在地震剖面上的显示,从而进行砂体识别。该方法在研究区块应用较好,砂体识别效果显著。

关键词：砂泥岩压实曲线速度差异砂体识别春光区块

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先天性下睑退缩合并睑内翻的手术治疗

中华眼外伤职业眼病杂志 2013年第10期35卷 777-779页

作者：刘凤华郑秀云雷玉琳范晓聪济南市明水眼科医院 250200

目的探讨先天性下睑退缩合并睑内翻的治疗方法。方法距下睑缘1．5mm做皮肤切口，分离下睑缩肌，取与睑板相应长度的巩膜条，高度为下睑退缩量＋2mm，分别缝合于睑板下缘与下睑缩肌之间，缝合皮肤。术后1周、1个月及6个月观察下睑缘位置... 详细信息

目的探讨先天性下睑退缩合并睑内翻的治疗方法。方法距下睑缘1．5mm做皮肤切口，分离下睑缩肌，取与睑板相应长度的巩膜条，高度为下睑退缩量＋2mm，分别缝合于睑板下缘与下睑缩肌之间，缝合皮肤。术后1周、1个月及6个月观察下睑缘位置。结果17例（21只眼）随访2—20个月，平均（6．1±4．5）个月。18只眼治愈，另3眼于术后6个月残存下睑退缩约1mm，此3眼均为术前下睑退缩5mm者，半年后再次手术后治愈。结论下睑缩肌切断联合异体巩膜条植入对于治疗轻中度先天性下睑退缩合并内翻倒睫是较好的方法。

关键词：下睑退缩睑内翻异体巩膜手术

上海中医药大学图书馆藏《简效惠济方书》发覆

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图书馆杂志 2024年

作者：徐晓聪郑洪浙江中医药大学基础医学院浙江省哲学社会科学重点培育研究基地浙江中医药大学浙江中医药文化研究院

《简效惠济方书》在流传过程中长期与《袖珍方》混淆，古今著录不一。上海中医药大学图书馆藏有此书一部。通过对编撰者、校录者生平，以及序文、卷端题署等物理特征的考察可知，两书混淆是因为书商换序文、易书名的作伪活动所致。《惠... 详细信息

《简效惠济方书》在流传过程中长期与《袖珍方》混淆，古今著录不一。上海中医药大学图书馆藏有此书一部。通过对编撰者、校录者生平，以及序文、卷端题署等物理特征的考察可知，两书混淆是因为书商换序文、易书名的作伪活动所致。《惠济方》内容及来源的考察，也证实此书的最后成书时间为嘉靖年间。

关键词：王永辅《简效惠济方书》《袖珍方》莫棠

同种异体脱细胞真皮用于HA义眼台暴露修复观察

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中国实用眼科杂志 2015年第3期33卷 294-296页

作者：王超庆李燕飞程秀春李琦范晓聪李静济南市明水眼科医院山东250200

目的了解同种异体脱细胞真皮应用于羟基磷灰石（HA）义眼台植入术后暴露的修复治疗的有效性和安全性。方法对2010～2013年在济南市明水眼科医院就诊的13例（13只眼）HA义眼台暴露患者术中探查，初步判断HA义眼台植入术式及暴露的原因，... 详细信息

目的了解同种异体脱细胞真皮应用于羟基磷灰石（HA）义眼台植入术后暴露的修复治疗的有效性和安全性。方法对2010～2013年在济南市明水眼科医院就诊的13例（13只眼）HA义眼台暴露患者术中探查，初步判断HA义眼台植入术式及暴露的原因，应用脱细胞真皮覆盖的方法进行处理。结果13例患者术后结膜血运良好，无明显水肿及渗出，无切口哆开、感染等并发症。连续观察10个月，未见暴露复发迹象。结论脱细胞真皮材料容易获得，组织相容性好，抗感染能力强，有一定的柔韧性，引起的免疫反应轻微，作为一种细胞外基质，可引导自身组织的胶原纤维长入，对创面要求低易于成活。对修复HA义眼台植入术后眼台暴露是一种较好的材料。

关键词：同种异体脱细胞真皮 HA 义眼台暴露