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TRIM47在肝癌发生发展过程中的作用与机制研究

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TRIM47在肝癌发生发展过程中的作用与机制研究

作者：范晓琪南昌大学

学位级别：硕士

研究背景与目的肝细胞癌/原发性肝癌（简称肝癌）是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,具有病情隐蔽、早期诊断率低、放化疗效果差、预后不良等特征。研究肝癌的发生发展及其机制,寻找肿瘤细胞恶性增殖过程中起着重要调控作用的靶点对于... 详细信息

研究背景与目的肝细胞癌/原发性肝癌（简称肝癌）是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一,具有病情隐蔽、早期诊断率低、放化疗效果差、预后不良等特征。研究肝癌的发生发展及其机制,寻找肿瘤细胞恶性增殖过程中起着重要调控作用的靶点对于肝癌的防治具有重要意义。TRIM家族是一类具有E3泛素连接酶活性的蛋白,它们在调控细胞凋亡、周期、病毒免疫应答、分化以及肿瘤发生等过程中起重要作用。TRIM47是一个具有E3连接酶活性和原癌基因特征的TRIM家族成员,参与调控多种恶性肿瘤的发生发展。本论文旨在深入探究TRIM47在肝癌中的作用及其分子机制,从而为临床上肝癌的防治及寻找新的药物靶标提供理论依据和新思路。实验方法及结果1.基于多个数据库分析表明TRIM47与肝癌的发生发展密切相关在多个肿瘤数据库中展开TRIM47与HCC相关性的分析,结果显示:肝癌组织中的TRIM47的m RNA表达水平高于正常肝组织,且与肝癌患者的临床分期及肿瘤分级呈正相关。结果还显示,TRIM47表达水平越高,肝癌患者总生存期越短,并且TRIM47的基因突变能明显影响患者的总生存期。此外,TRIM47表达水平也与肝癌患者的淋巴结转移、肿瘤组织学亚型、性别呈不同程度的相关性。2.临床肝癌患者组织芯片分析证实TRIM47在肝癌细胞中的表达显著高于癌旁组织组织芯片（上海芯超公司提供）免疫组化实验分析得出结论:TRIM47在肝癌组织中的蛋白表达水平显著高于癌旁组织。为了进一步研究其生物学功能,我们运用蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR技术检测了Huh7、Hep G2、Hep3B三种不同肝癌细胞系中TRIM47的蛋白及m RNA表达水平,并与HK-2、293T两种正常上皮细胞株作比较,发现TRIM47在肝细胞癌中蛋白与m RNA水平呈现高表达,表明临床样本的结果与数据库的分析结果一致。3.干扰或过表达TRIM47的稳转细胞株证明TRIM47参与肝癌的发生发展过程研究选择TRIM47表达水平最高的Huh7细胞株转染两种TRIM47 si RNA并通过细胞计数和划痕实验对TRIM47的生物功能进行了初步研究。为了深入研究TRIM47在肝癌中的作用,我们利用慢病毒感染体系构建了稳定干扰TRIM47表达的Huh7和Hep G2细胞株。同时,在TRIM47表达量较低的Hep3B细胞中构建了过表达TRIM47的稳转细胞株。1)干扰TRIM47明显抑制肝癌细胞的增殖和迁移:细胞增殖观察、CCK-8细胞活性检测实验、集落形成以及划痕、Transwell小室迁移等实验证明,干扰TRIM47显著抑制肝癌细胞的增殖、迁移,而过表达TRIM47则可促进肝癌细胞的生长和迁移。EMT相关指标蛋白水平变化的趋势进一步证实干扰TRIM47可降低肝癌细胞的迁移能力,部分指标m RNA趋势与其蛋白表达水平一致,表明干扰TRIM47的表达也可能会影响部分EMT相关蛋白的转录。2)干扰TRIM47显著抑制肝癌细胞周期及促进肝癌细胞凋亡:细胞周期检测、细胞凋亡实验（生理/DOX诱导）以及流式分析仪检测显示:干扰Huh7和Hep G2细胞株的TRIM47表达可阻滞肝癌细胞的细胞周期G1/S期,促进肝癌细胞的凋亡。检测细胞凋亡相关蛋白水平的变化趋势进一步印证了这一结论。荧光实时定量PCR也检测到细胞周期相关基因的m RNA水平皆有不同程度的下降,部分细胞凋亡基因的m RNA改变趋势与其蛋白水平一致。3)TRIM47促进肝癌发生发展的可能分子机制:Western Blot检测结果表明,肝癌细胞株Huh7、Hep G2和Hep3B的内源性PLK1蛋白水平显著高于正常上皮细胞株HK-2;干扰Huh7和Hep G2肝癌细胞株TRIM47表达可抑制PLK1的表达;用蛋白合成抑制剂（CHX）处理TRIM47干扰的稳定细胞株Huh7,并通过蛋白半衰期实验发现,TRIM47可抑制肝癌细胞PLK1蛋白的降解。免疫共沉淀实验表明,TRIM47可与PLK1相互作用。以上结果表明TRIM47很可能是通过稳定PLK1的蛋白水平,促进肝癌细胞的增殖和迁移。结论***47在肝癌组织中表达显著上调,并与患者的临床预后相关;***47能够促进肝癌细胞的增殖、迁移和集落形成;***47能促进肝癌细胞的细胞周期,并抑制细胞凋亡;***47能与PLK1发生互作并抑制其蛋白的降解,进而促进肝细胞癌的发生发展。以上结果提示:TRIM47有望成为一个潜在的肝癌早期诊断与预后评估的生物标志物以及治疗肝癌的药物靶点。

关键词： TRIM47 肝细胞癌泛素连接酶恶性肿瘤生物学行为细胞周期

中等职业学校德育现状及对策研究——以通化师范学院分院为例

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中等职业学校德育现状及对策研究——以通化师范学院分院为例

作者：范晓琪吉林师范大学

学位级别：硕士

近年来,国家对职业教育越来越重视,中等职业学校为社会发展培养大量技术人才的作用也不断被社会所认可。伴随着国家对职业教育的不断投入,中等职业学校的数量和规模得到不断扩大,办学条件和师资队伍得到不断提高。但与此同时,伴随而来... 详细信息

近年来,国家对职业教育越来越重视,中等职业学校为社会发展培养大量技术人才的作用也不断被社会所认可。伴随着国家对职业教育的不断投入,中等职业学校的数量和规模得到不断扩大,办学条件和师资队伍得到不断提高。但与此同时,伴随而来的问题也日益凸显。进入新世纪以来,由于社会、家庭和网络时代教育环境的日益复杂化,中等职业学校德育工作面临着一系列的困难,其中学生的思想道德教育是突出的难题之一。中等职业学校的学生正处在“半成人”时期,品德发展可塑性大。电视、电影以及网络媒介环境的出现,严重扭曲了部分学生的价值取向,尤其对一些自我控制能力差、自我约束力弱的学生的世界观、人生观、价值观产生了不良影响。面对如此严峻的现状,如何把各级各类文件精神和中等职业学校学生的实际紧密结合在一起,全面加强学生的道德教育,并使当前的中等职业学校德育工作提高到一个新水平,已经成为中等职业学校教育工作者的主要工作。本文对中等职业学校德育工作的现状及问题进行了调查与分析,就新形势下如何开展中等职业学校的德育工作进行了初步的研究与探索,并提出了改进中等职业学校德育现状的具体对策。本文共由四大部分组成,具体内容如下:第一部分引言,阐明了问题提出的背景、研究的意义与价值、国内外文献研究综述,以及研究的思路与方法等。第二部分对中等职业学校以及德育的相关概念进行了界定。第三部分通过调查研究,明确了目前中等职业学校德育工作的现状与问题,并对导致中等职业学校学生产生道德问题的原因进行了具体深入的分析。第四部分主要论述了改进中等职业学校德育工作的思路与对策。包括:中等职业学校德育工作应遵循的原则以及改进中等职业学校德育现状的具体对策。

关键词：中等职业学校德育现状对策

玉米品种的抗虫性鉴定与玉米田节肢动物群落特征研究

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玉米品种的抗虫性鉴定与玉米田节肢动物群落特征研究

作者：范晓琪山东农业大学

学位级别：硕士

本研究调查了山东省种植的75个玉米品种上害虫和天敌的发生种类及数量,进行了玉米品种抗虫性鉴定,并研究玉米在不同生育时期对主要害虫的抗虫性;明确了害虫和天敌的种群动态;分析了不同品种玉米上的害虫和天敌的优势种以及节肢动物群落... 详细信息

本研究调查了山东省种植的75个玉米品种上害虫和天敌的发生种类及数量,进行了玉米品种抗虫性鉴定,并研究玉米在不同生育时期对主要害虫的抗虫性;明确了害虫和天敌的种群动态;分析了不同品种玉米上的害虫和天敌的优势种以及节肢动物群落特征。本研究为充分利用玉米抗性、发挥天敌生态效益,为综合防治玉米害虫提供了理论和实践基础。主要结果如下:1.依据虫情指数鉴定了75个玉米品种的抗虫性,可知不同玉米品种之间的抗虫性存在差异,同一玉米品种不同生育时期抗虫性也有所不同。调查发现,不存在高抗桃蛀螟、亚洲玉米螟和棉铃虫的玉米品种,但菏玉157、隆平208和郁青358均对3种鳞翅目害虫表现为中抗及以上抗性。高抗禾缢管蚜、玉米蚜和棉蚜的玉米品种较多,但未发现对3种蚜虫均表现为高抗的品种。2.玉米田节肢动物群落主要由刺吸类害虫、食叶与钻蛀类害虫以及捕食性和寄生性天敌组成,所有玉米品种上节肢动物群落中主要害虫及天敌共38种,隶属于1门、2纲、7目、23科。其中,害虫共11种,天敌共27种。在整个群落中,蚜虫类和鳞翅目幼虫发生量大,自然天敌中蜘蛛类数量最多。蚜虫类优势种为禾缢管蚜和棉蚜,鳞翅目类害虫优势种为棉铃虫,天敌优势种为草间钻头蛛、八斑鞘腹蛛、龟纹瓢虫、异色瓢虫、蚜小蜂。3.明确了玉米田主要害虫及天敌的种群动态变化规律,发现天敌对害虫表现出一定的跟随现象。禾缢管蚜和玉米蚜种群动态基本相似,主要在9月中下旬达到高峰期;棉蚜则主要在8月上旬发生。棉铃虫迁入玉米田较早并在8月下旬达到高峰期;亚洲玉米螟在9月中上旬达到危害盛期;桃蛀螟自8月下旬则一直处于种群数量上升状态,并与亚洲玉米螟在9月份同时为害玉米雌穗。自然天敌发生高峰期相近,集中在8月底至9月中下旬。4.综合分析了75个玉米品种节肢动物群落特征,表明品种抗虫性与群落的多样性具有一定相关性。

关键词：玉米品种害虫自然天敌抗虫性群落多样性

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网络教育中师生情感交互的缺失与构建

现代教育管理 2013年第1期 76-79页

作者：范晓姝范晓琪通化师范学院吉林通化134002 通化师范学院分院吉林通化134000

随着网络教育的开展,网络环境下师生之间如何进行情感交互日渐为人们所关注。网络教育中师生情感交互缺失,主要表现在认知目标与情感目标严重失衡、教学模式单一,缺乏师生之间的互动反馈、教师的角色与职能被弱化或替代等。在网络教育中... 详细信息

随着网络教育的开展,网络环境下师生之间如何进行情感交互日渐为人们所关注。网络教育中师生情感交互缺失,主要表现在认知目标与情感目标严重失衡、教学模式单一,缺乏师生之间的互动反馈、教师的角色与职能被弱化或替代等。在网络教育中,构建师生情感交互平台的策略,一是基于BBS论坛的情感交互策略;二是基于"任务驱动"的情感交互策略;三是基于协作学习的情感交互策略;四是基于多元评价的情感交互策略。

关键词：网络教育情感缺失情感交互

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悲剧中的硬汉形象——海明威与《永别了,武器》中人物的性格对照

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作家 2009年第20期 41-42页

作者：杜彬陈强范晓琪吉林大学通化师范学院大学外语教学部长春大学公共外教研部通化师范学院分院大学外语教学部

《永别了,武器》通过叙述美国中尉亨利和英国护士凯瑟琳的感情生活,有力地描述了一战中和一战刚刚结束时这对儿年轻人复杂的心理,以及最后的爱情悲剧。小说所描写的主人公亨利的感情生活及在悲剧中体现出来的硬汉形象与海明威本人非常... 详细信息

《永别了,武器》通过叙述美国中尉亨利和英国护士凯瑟琳的感情生活,有力地描述了一战中和一战刚刚结束时这对儿年轻人复杂的心理,以及最后的爱情悲剧。小说所描写的主人公亨利的感情生活及在悲剧中体现出来的硬汉形象与海明威本人非常相似。本文试从二者某些相似的经历,对二者的硬汉性格加以对照。

关键词：海明威硬汉《永别了,武器》

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失智症人群的居家护理

养生大世界 2020年第5期 68-69页

作者：范晓琪早稻田大学

据2015年全球失智症报告显示:2015年全球失智症人口为4680万人,到2050年人数将高达1亿3150万人。另据《中国老年人走失状况白皮书》(2016,10,9)的相关调查数据显示:每年全国走失老人约有50万人,而平均每天约有1370名老人走失;从年龄上看... 详细信息

据2015年全球失智症报告显示:2015年全球失智症人口为4680万人,到2050年人数将高达1亿3150万人。另据《中国老年人走失状况白皮书》(2016,10,9)的相关调查数据显示:每年全国走失老人约有50万人,而平均每天约有1370名老人走失;从年龄上看,65岁以上老人容易走失,比例达到80%以上;其中,迷路,精神疾病和老年失智是老人走失的重要原因。走失老人中72%的老人大多都出现记忆力障碍情况,经过医院确诊的老年失智症患者只占到总比例的25%,未确诊的老人却占了一大部分。

关键词：失智症地点定向障碍居家护理时间定向障碍

动画片对学龄儿童道德发展的影响及其机制探究

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学园 2011年第19期4卷 94-95页

作者：范晓琪上海市建平香梅中学

动画片是现代儿童的亲密伙伴，在儿童成长过程中有着举足轻重的作用。学龄儿童正处于生理和心理发育的高峰，可塑性非常强，道德人格易受到动画片的影响，因而成人对学龄儿童观看动画片的行为和心理进行干预变得十分重要。本文是将理论... 详细信息

动画片是现代儿童的亲密伙伴，在儿童成长过程中有着举足轻重的作用。学龄儿童正处于生理和心理发育的高峰，可塑性非常强，道德人格易受到动画片的影响，因而成人对学龄儿童观看动画片的行为和心理进行干预变得十分重要。本文是将理论和调查相结合，从“动画片视听语言”、“动画片的角色和故事”以及“动画片的时间条件”三个角度理清动画片对学龄儿童道德发展的影响机制。再论证动画片对学龄儿童道德发展的影响，包括：强化道德认知的基本影响；培养道德情感的核心影响；引发道德行为的潜在影响。

关键词：动画片学龄儿童道德发展

《道德与法治》教材资源个性化处理的方法探究

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现代教学 2020年第20期 33-35页

作者：范晓琪上海市建平香梅中学上海200127

教材是教师教学的核心资源。教师在道德与法治课教学时结合学生的学情,对教材资源进行个性化处理。在教学实践中,要从学生的认知起点和学习需求出发,探讨如何基于学情围绕教学内容和教学结构这两个角度对教材资源进行个性化处理,切实提... 详细信息

教材是教师教学的核心资源。教师在道德与法治课教学时结合学生的学情,对教材资源进行个性化处理。在教学实践中,要从学生的认知起点和学习需求出发,探讨如何基于学情围绕教学内容和教学结构这两个角度对教材资源进行个性化处理,切实提高课堂教学实效。

关键词：道德与法治教材资源教学内容教学结构

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立德树人,以德启智--浅谈中等职业学校德育工作的策略

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文教资料 2020年第21期 154-155页

作者：范晓琪通化师范学院分院吉林通化134000

在中等职业学校开展德育教育时,必须以"立德树人"为最终目标,因为关系到院校培养的人才能否适应国家的发展需要。本文从德育工作的渐进性、完整性、实践性、多元性四个方面,探究中等职业院校开展德育工作的具体方法。策略研究,对于开展... 详细信息

在中等职业学校开展德育教育时,必须以"立德树人"为最终目标,因为关系到院校培养的人才能否适应国家的发展需要。本文从德育工作的渐进性、完整性、实践性、多元性四个方面,探究中等职业院校开展德育工作的具体方法。策略研究,对于开展科学育人,提高培养人才质量具有重要意义;可为民族伟大复兴、祖国繁荣发展,造就可靠接班人。

关键词：立德树人德能全员育人全程育人实践育人

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