检索结果-南通市图书馆

非洲马瘟病毒VP2蛋白的截短表达及免疫原性分析

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年

作者：王轩莹范亚亚户鑫兵徐婧张鸿歌田占成苟惠天郑玉姝关贵全罗建勋殷宏独军政中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃农业大学动物医学院河南科技学院动物科技学院甘肃省病原生物学基础学科研究中心

为评价非洲马瘟病毒VP2截短蛋白的免疫原性，以人工合成的含有AHSV S2全长基因为模板，分别构建重组表达质粒pRSF-S2-502(编码1～502 aa)和pRSF-S2-1056(编码503～1056 aa)，分别将其转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达。将纯... 详细信息

为评价非洲马瘟病毒VP2截短蛋白的免疫原性，以人工合成的含有AHSV S2全长基因为模板，分别构建重组表达质粒pRSF-S2-502(编码1～502 aa)和pRSF-S2-1056(编码503～1056 aa)，分别将其转入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达。将纯化后的重组蛋白免疫小鼠后，采用间接ELISA法测定小鼠血清中特异性抗体水平，用流式细胞术检测小鼠脾脏T细胞亚群、CD4+和CD8+T细胞表达IFN-γ的水平。结果显示，与PBS对照组相比，各免疫组小鼠的血清中特异性抗体水平均显著升高，脾内CD4+T和CD8+T细胞水平均显著升高；免疫组小鼠脾CD4+T和CD8+T细胞表达IFN-γ的水平均升高。结果表明，以重组AHSV VP2截短蛋白对小鼠具有较好的免疫原性，为进一步研究VP2蛋白生物学功能及非洲马瘟亚单位疫苗奠定了理论基础。

关键词：非洲马瘟病毒 VP2蛋白截短表达免疫原性

非洲马瘟病毒VP5蛋白在杆状病毒表达系统中的表达及其抗体制备

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国兽医科学 2024年第3期54卷 357-363页

作者：范亚亚王轩莹户鑫兵田占成关贵全罗建勋殷宏郑玉姝独军政河南科技学院动物科技学院河南新乡453003 中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室甘肃兰州730000 甘肃省病原生物学基础学科研究中心甘肃兰州730046

为了确定非洲马瘟病毒(AHSV)VP5蛋白的免疫学特性,通过人工合成非洲马瘟病毒VP5蛋白的S6全长基因序列,经PCR扩增后克隆到转座质粒载体pFastBac HTb上,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑试验筛选出重组杆状病毒质粒Bacmid-AH... 详细信息

为了确定非洲马瘟病毒(AHSV)VP5蛋白的免疫学特性,通过人工合成非洲马瘟病毒VP5蛋白的S6全长基因序列,经PCR扩增后克隆到转座质粒载体pFastBac HTb上,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,通过蓝白斑试验筛选出重组杆状病毒质粒Bacmid-AHSVS6,转染Sf9昆虫细胞;构建了重组质粒pFastBac-AHSVS6,拯救获得含有AHSV S6基因的重组杆状病毒。SDS-PAGE和Western-blot鉴定表明,在Sf9昆虫细胞中成功表达分子质量大小为60 ku的AHSV VP5重组蛋白。采用组氨酸标签纯化树脂对重组VP5蛋白进行纯化,将其与弗氏佐剂乳化后3次免疫新西兰大白兔收集血清,获得了针对AHSV VP5蛋白的多克隆抗体,并通过Western-blot和间接免疫荧光试验验证了该抗体的特异性。本试验利用杆状病毒表达系统成功表达了AHSV全长VP5重组蛋白,成功制备出特异的VP5蛋白多克隆抗体,这为进一步研究AHSV VP5蛋白的功能及研制亚单位疫苗奠定了基础。

关键词：非洲马瘟病毒 VP5蛋白杆状病毒表达系统多克隆抗体免疫荧光

非洲马瘟病毒VP5蛋白和VP2截短蛋白的表达及抗体制备

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

非洲马瘟病毒VP5蛋白和VP2截短蛋白的表达及抗体制备

作者：范亚亚河南科技学院

学位级别：硕士

非洲马瘟(African horse sickness,AHS)是由非洲马瘟病毒(African horse sickness virus,AHSV)引起的一种感染马、驴、骡等马属动物的传染病。该病的主要特征为发热和肺水肿,病死率极高,幼龄马匹可达到95%,是严重危害世界养马业的重大... 详细信息

非洲马瘟(African horse sickness,AHS)是由非洲马瘟病毒(African horse sickness virus,AHSV)引起的一种感染马、驴、骡等马属动物的传染病。该病的主要特征为发热和肺水肿,病死率极高,幼龄马匹可达到95%,是严重危害世界养马业的重大疫病。世界动物卫生组织(OIE)将其列为法定必须报告的疫病,在我国被列为一类动物传染病。非洲马瘟主要分布在撒哈拉沙漠以南的非洲地区,目前在我国尚未发现此病,但与我国邻近的泰国和马来西亚在2020年的3月与8月分别暴发了非洲马瘟疫情,一旦非洲马瘟传入我国,将对我国养马业造成巨大损失。非洲马瘟病毒的VP5和VP2结构蛋白互作形成了病毒的外层衣壳,是诱导机体产生中和抗体是主要蛋白抗原,其中VP2蛋白是AHSV最主要的血清型特异性抗原。本研究首先参考Gen Bank中的AHSV-1参考毒株序列,分别合成了S2(编码VP2)和S6(编码VP5)全长基因,长度分别为3218bp和1564bp。设计表达引物,通过PCR扩增、胶回收纯化后进行酶切,将S6基因亚克隆于杆状病毒穿梭载体p Fast Bac HTB,经PCR、酶切、测序鉴定后,成功构建了含有S6基因的重组穿梭质粒p Fast Bac HTB-AHSV-VP5。将该质粒转化DH10Bac感受态细胞,并经蓝白斑筛选后,进行PCR鉴定,获取阳性单克隆菌株,提取纯化转座杆粒Bacmid-AHSV-VP5,转染sf9昆虫细胞,获得表达AHSV-1 VP5蛋白的重组杆状病毒,SDS-PAGE和Western-blot结果显示,重组表达的VP5蛋白大小为60k Da,并利用镍柱层析获得了纯化的重组VP5蛋白。通过生物信息学软件对AHSV-1 VP2蛋白进行抗原性分析,将其分为1-502aa和503-1056aa进行原核表达,设计表达引物,以合成的S2基因为模板,进行PCR扩增,获得S2(1-502aa)和S2(503-1056aa)两段截短基因,分别与载体p RSF-Duet1-SUMO连接,获得了重组质粒p RSF-S2-502和p RSF-S2-1056,将其分别转化BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,获得了大小分别为70k Da和72k Da的截短表达蛋白,通过镍柱层析分别获得了纯化的目的蛋白,并分别利用SUMO蛋白酶切掉了目的蛋白上的SUMO标签。将纯化的重组VP5、VP2(1-502aa)和VP2(503-1056aa)分别三次免疫新西兰大白兔,制备了特异性多克隆抗体,利用纯化的VP2截短蛋白VP2(1-502aa)和VP2(503-1056aa)进行了Dot-ELISA检测,结果显示制备的VP2截短蛋白特异性良好。本研究利用杆状病毒和大肠杆菌成功表达了AHSV-1 VP5和截短的VP2(1-502aa)和VP2(503-1056aa)结构蛋白并制备了相应的多克隆抗体,这为进一步研制AHSV的亚单位疫苗、病毒样颗粒疫苗提供了实验材料,同时也为建立基于VP2型特异性抗原的ELISA以及胶体金试纸条检测方法奠定了基础,对我国有效防控非洲马瘟的传入具有重要意义。

关键词：非洲马瘟病毒 VP5蛋白 VP2截短蛋白表达多克隆抗体

GVCs关联效应对经济韧性重塑的作用机制研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

科学学研究 2023年第11期41卷 2004-2015页

作者：范亚亚胡振绅叶广宇华南理工大学工商管理学院广东广州510006 昆明理工大学管理与经济学院云南昆明650032

重大国际事件频发,加剧了各国对融入全球价值链分工体系而引发本土经济脆弱性的担忧。部分国家开始诉诸贸易壁垒,试图通过价值链环节向国内回流等“去全球化”的方式,重塑本国经济韧性,但此举究竟是助力经济复苏的长计远策,还是管窥蛙... 详细信息

重大国际事件频发,加剧了各国对融入全球价值链分工体系而引发本土经济脆弱性的担忧。部分国家开始诉诸贸易壁垒,试图通过价值链环节向国内回流等“去全球化”的方式,重塑本国经济韧性,但此举究竟是助力经济复苏的长计远策,还是管窥蛙见的短期幻觉有待证实。文章将技术溢出和市场关联要素统一纳入GVCs前后向关联对经济韧性的分析框架,研究发现:GVCs前向、后向关联度均有利于经济韧性重塑。技术溢出在GVCs前向、后向关联度与经济韧性重塑之间发挥了中介作用。从市场关联要素的中介效应来看,中间品非对称依赖对经济韧性重塑的正向影响难以弥补过度前向关联提升对经济韧性的负面影响;后向关联度提升会致使低增值出口率提升,不利于经济韧性重塑。文章从技术溢出和市场要素层面揭示了“逆全球化”规避GVCs系统性风险的幻觉所在,对于一国价值链治理具有重要的现实启示意义。

关键词：逆全球化经济韧性重塑全球价值链关联

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

古民居绘画创作价值探析

建筑科学 2024年第1期40卷 I0017-I0018页

作者：范亚杰广西师范大学美术学院

古民居是社会历史和文化风俗的载体,是中国古代建筑技术和文化艺术的杰出代表,见证了中国古代社会、经济和文化的发展和变迁,反映了中国古代建筑技术的发展和创新。参观古民居能够使人们深入了解古代社会和文化,感受传统民居建筑演变和... 详细信息

古民居是社会历史和文化风俗的载体,是中国古代建筑技术和文化艺术的杰出代表,见证了中国古代社会、经济和文化的发展和变迁,反映了中国古代建筑技术的发展和创新。参观古民居能够使人们深入了解古代社会和文化,感受传统民居建筑演变和完善过程。

关键词：中国古代建筑古民居传统民居建筑绘画创作中国古代社会价值探析发展和创新历史和文化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

班主任案例《呵护梦想》

班主任案例《呵护梦想》

广东省教师继续教育学会第六届教学研讨会

作者：范亚亚潼关县第三初级中学

班主任是一个班级的灵魂,是学生健康成长的引路人。班主任要从工作中不断总结经验,探索规律,提高自身素质,才能做好班主任工作。本案例以作者个人亲身经历为基础,通过事例反映了班主任工作的重要意义,用鲜活的事例感染学生、激励学生。...

班主任是一个班级的灵魂,是学生健康成长的引路人。班主任要从工作中不断总结经验,探索规律,提高自身素质,才能做好班主任工作。本案例以作者个人亲身经历为基础,通过事例反映了班主任工作的重要意义,用鲜活的事例感染学生、激励学生。本案例重点阐述了"呵护梦想"这一主题,从帮助一位学生坚定自己的梦想事迹中可以看出作者对学生梦想的呵护。从案例中可以看出教育学生的关键在于"引导"而不是"要求";教育学生最好的方法就是激发其内在潜力;教育学生首先要尊重他们、信任他们,然后再适当地放手,给他们一片自由飞翔的天空。

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

浅谈初中语文探究式阅读教学有效开展策略

浅谈初中语文探究式阅读教学有效开展策略

Ni/P金刚石复合镀层的抗接触疲劳性能研究

2023教育理论与管理第三届“创新教育与精准管理高峰论坛”

作者：范亚亚潼关县第三初级中学

"探究式"是《语文课程标准》提出的一种全新的教育思想,它的提出,将直接关系到我们如何在初中阶段提高学生的语文水平。过去,我们的语言教育,注重知识传授,轻探究扩展,导致我们的初中生缺少了主观能动性与创造力,严重影响了初中语文阅... 详细信息

"探究式"是《语文课程标准》提出的一种全新的教育思想,它的提出,将直接关系到我们如何在初中阶段提高学生的语文水平。过去,我们的语言教育,注重知识传授,轻探究扩展,导致我们的初中生缺少了主观能动性与创造力,严重影响了初中语文阅读教育的发展。文章通过对探究式学习的必要性进行剖析,并在此基础上,针对探究式学习在初中语文阅读中的应用,给出了相应的实施对策,希望对初中语文阅读教学的发展起到一定的推动作用。

关键词：初中语文探究式阅读策略

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

兵器材料科学与工程 2024年

作者：原征宇范亚洲郑州工商学院工学院华北水利水电大学地球科学与工程学院

在高载荷、高频率的接触疲劳下，材料表面的耐磨性、抗疲劳性、硬度等对提高机械零件的寿命和可靠性至关重要。为向多领域提供性能优异的镀层材料，利用金刚石的硬度和耐磨性，研究Ni/P金刚石复合镀层的抗接触疲劳性能。用粒径分别为2、... 详细信息

在高载荷、高频率的接触疲劳下，材料表面的耐磨性、抗疲劳性、硬度等对提高机械零件的寿命和可靠性至关重要。为向多领域提供性能优异的镀层材料，利用金刚石的硬度和耐磨性，研究Ni/P金刚石复合镀层的抗接触疲劳性能。用粒径分别为2、4、8 μm的金刚石及Ni/P基础镀液制备Ni/P金刚石复合溶液，将其喷涂在20钢试块上，制成3种镀层试件，通过接触疲劳试验机、摩擦磨损试验仪测试不同试件的性能。结果表明：金刚石粒径为8 μm的试件抗接触疲劳效果较好，在接触疲劳试验中的特征寿命较长，其摩擦因数较小，耐摩擦性能较强，同时硬度、耐蚀性也较高。在高温下该组试件的氧化增质量较低，当温度为800 ℃时，其硬度仍大于9 700 kg/mm2，因此得出，金刚石粒径为8 μm的Ni/P金刚石复合镀层具有良好的抗接触疲劳性能。

关键词：金刚石复合镀层抗接触疲劳特征寿命摩擦因数耐蚀性

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于自监督域自适应网络的苹果叶部病害识别

重庆师范大学学报(自然科学版) 2024年

作者：程超吕佳范亚洲重庆师范大学计算机与信息科学学院重庆市数字农业服务工程技术研究中心

实际农业生产环境中的苹果叶部病害识别较为困难，本文提出一种基于自监督域自适应网络的识别模型。该模型首先引入域自适应的方法，通过苹果叶部图片源域与目标域数据集的联合训练，减少源域到目标域的域偏差，增强预训练的模型在目标... 详细信息

实际农业生产环境中的苹果叶部病害识别较为困难，本文提出一种基于自监督域自适应网络的识别模型。该模型首先引入域自适应的方法，通过苹果叶部图片源域与目标域数据集的联合训练，减少源域到目标域的域偏差，增强预训练的模型在目标域上的泛化能力。其次添加自监督模块并引入一种对比损失，使模型在特征空间上学习到病变区域更为细致的表征信息，从而有效增强对相似症状的辨别能力，提高模型的分类性能。模型在具有复杂背景的公共苹果数据集上进行实验，实验表明，本文模型对各类病害的平均识别准确率达到了91.31%，实现了较高的分类准确度。本文模型与其它流行的卷积神经网络方法相比，实验结果对比其它模型均有一定的提升，验证了提出模型在实际生产环境中对苹果叶部病害识别上的有效性。

关键词：苹果叶部病害识别域自适应自监督对比损失