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超临界流体萃取黄芪活性成分及抗氧化活性分析

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中药材 2024年 692-696页

作者：黎晶晶范三微于瑞莲浙江药科职业大学制药工程与生物技术学院南京中医药大学药学院

目的:优化黄芪中活性成分的提取方法。方法:采用水提法、醇提法和超临界流体萃取法进行黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷提取以及抗氧化活性分析。以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷总量和抗氧化活性(DPPH法)为评价... 详细信息

目的:优化黄芪中活性成分的提取方法。方法:采用水提法、醇提法和超临界流体萃取法进行黄芪总皂苷、黄芪总黄酮、黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷提取以及抗氧化活性分析。以黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷总量和抗氧化活性(DPPH法)为评价指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化超临界流体萃取黄芪活性成分的工艺。结果:超临界流体萃取对黄芪总皂苷和黄芪甲苷的提取效果与醇提法无显著性差异;对黄芪总黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的提取效果较好;提取物的抗氧化活性也优于其他提取法。超临界流体萃取黄芪活性成分的最佳提取工艺为:18.8 MPa、53℃和77.4%乙醇浓度,黄芪甲苷和毛蕊异黄酮葡萄糖苷总含量达2 083.5μg/g;提取条件为18.2 MPa,50℃和76.4%乙醇浓度时,抗氧化活性IC50的值最小为0.282 mg/mL。结论:该研究可为黄芪超临界流体提取技术的工业化应用,提供理论依据。

关键词：超临界流体萃取黄芪甲苷毛蕊异黄酮葡萄糖苷抗氧化活性响应面法

基于产教深度融合的职业本科课程体系构建研究——以合成生物技术专业为例

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卫生职业教育 2024年第13期42卷 28-33页

作者：黎晶晶范三微浙江药科职业大学制药工程与生物技术学院浙江宁波315100

在生物医药产业新兴背景下,以生物合成技术专业为例,阐述其职业本科教育存在的问题,分析基于产教深度融合的合成生物技术课程体系的构建思路及实施,发掘特色和亮点,促进职业本科教育发展,实现“学科—专业—产业”的协同共进。

关键词：产教深度融合合成生物技术专业课程体系

OBE理念下专业课程与思政教育协同育人教学模式的探究——以合成生物技术专业为例

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卫生职业教育 2024年第15期42卷 25-29页

作者：黎晶晶范三微浙江药科职业大学制药工程与生物技术学院浙江宁波315100

为落实立德树人根本任务,坚持以产出为导向,结合合成生物技术专业特点推进专业课程思政建设,将思想政治教育融入教学团队、人才培养方案、课程体系、教学资源库、教学方法和评价体系等要素,促进课程思政教学质量的持续提升,实现专业人... 详细信息

为落实立德树人根本任务,坚持以产出为导向,结合合成生物技术专业特点推进专业课程思政建设,将思想政治教育融入教学团队、人才培养方案、课程体系、教学资源库、教学方法和评价体系等要素,促进课程思政教学质量的持续提升,实现专业人才的全面可持续发展。

关键词：专业课程思政教育协同育人教学模式

一株抗真菌海洋放线菌的筛选、分离和多相分类鉴定

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核农学报 2022年第10期36卷 1945-1952页

作者：范三微吴祖芳翁佩芳宁波大学食品与药学学院浙江宁波315211 浙江药科职业大学制药工程学院浙江宁波315100

为开发利用宁波近海潮间带药用微生物资源,本研究自宁波慈溪海塘采集7份海泥样品,从中筛选、分离抗真菌放线菌,并对目标菌株进行多相分类鉴定,包括16S rRNA、gyrB基因序列分析、形态观察、生理生化鉴定及细胞化学组成分析。通过筛选培... 详细信息

为开发利用宁波近海潮间带药用微生物资源,本研究自宁波慈溪海塘采集7份海泥样品,从中筛选、分离抗真菌放线菌,并对目标菌株进行多相分类鉴定,包括16S rRNA、gyrB基因序列分析、形态观察、生理生化鉴定及细胞化学组成分析。通过筛选培养获得了25个菌株,其中2P-4对白色念珠菌、黑曲霉表现出抑制生长的作用。细胞化学组成鉴定分析了2P-4全细胞糖、氨基酸、极性脂质、甲基萘醌和脂肪酸组成,结果表明,2P-4属于链霉菌属。2P-4的16S rRNA、gyrB基因序列分析也表明2P-4属于链霉菌属,并且与毒三链霉菌的关系最密切,其16S rRNA基因序列与Streptomyces toxytricini NBRC 13194~T的相似度为99.56%,gyrB基因序列与Streptomyces toxytricini NRRL B-5426~T的相似度为99.04%,但16S rRNA、gyrB基因序列在系统进化树上均形成独立分枝,支持2P-4与毒三链霉菌分属不同的种;此外,2P-4与其近缘种Streptomyces toxytricini NBRC 13194~T相比,两者在形态和生理生化特征方面存在明显差异。基于以上分析,初步鉴定2P-4为链霉菌属的一个新种。本研究为进一步探究2P-4抗真菌代谢产物提供了理论依据。

关键词：放线菌抗真菌多相分类鉴定

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侵染胜红蓟和假马鞭的双生病毒的分子鉴定

侵染胜红蓟和假马鞭的双生病毒的分子鉴定

作者：范三微浙江大学

学位级别：硕士

本研究对侵染胜红蓟(Ageratum conyzoides)和假马鞭(Stachytarpheta jamaicensis)的双生病毒进行了分子鉴定，并获得如下结果：利用三抗体夹心ELISA(TAS-ELISA)及PCR检测的方法对采自海南的胜红蓟(Ageratum conyzoides)和假马鞭(Stachytarpheta jamaicensis)的5个病样进行了检测，表明均为粉虱传双生病毒。PCR扩增产物克隆后进行序列测定，结果表明存在两类双生病毒，其中样品Hn2存在两类病毒的复合侵染。这是在海南首次报道存在有粉虱传双生病毒。在此基础上我们对胜红蓟和假马鞭上WTGs基因组进行了研究。从胜红蓟样本Hn2中克隆并测定了两个DNA-A全序列(Hn2-1和Hn2-19)，经NCBI检索和序列比较分析发现，Hn2-1除与胜红蓟黄脉病毒(AYVV，基因登录号X74516)有85.6％的同源性外，其余均在85.0％以下。根据双生病毒全基因组核苷酸序列同源性小于89％为不同病毒的原则，我们将这些病毒分离物命名为中国胜红蓟黄脉病毒，英文名为Ageratum yellow vein China virus (AYVCNV)。Hn2-19和Hn2-1为Hn2样品中扩增到的不同分子，其基因组序列同源性高达97.7％，这表明Hn2中存在同种双生病毒的不同分离物的复合侵染。从假马鞭样本Hn5和Hn6中克隆并测定了三个DNA-A全序列(Hn5-4、Hn5-1和Hn6-1)，经NCBI检索和序列比较分析发现，Hn5-1、Hn5-4和Hn6-1基因组均与亚洲报道的粉虱传双生病毒的基因组同源性最高，Hn5-4、Hn5-1和Hn6-1 3个序列间同源性＞95％，与印度尼西亚报道的番茄曲叶病毒(ToLCV，基因登录号AB100305)的同源性最高，为81.5％。根据双生病毒分类命名原则，Hn5-1、Hn5-4和Hn6-1为同种病毒的不同分离物，我们将这些病毒分离物命名为假马鞭曲叶病毒(Stachytarpheta leaf curl virus, StaLCV)。Hn5-1和Hn5-4为从Hn5样品中扩增到的2个不同的分了，说明Hn5中存在同种病毒不同分离物的复合侵染。

关键词：双生病毒胜红蓟假马鞭曲叶病毒分离物粉虱木薯花叶病毒序列比较分析同源性比较复合侵染

混合培养条件下酵母菌菌株生长影响因素的初步研究

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现代食品科技 2016年第7期32卷 176-181,303页

作者：刘茜吴祖芳范三微翁佩芳宁波大学食品科学与工程系应用海洋生物技术教育部重点实验室浙江宁波315211

为研究两种酵母菌在混合培养条件下各菌株生长相互影响的因素,本文考察了初糖浓度及p H对两种酵母菌Saccharomyces cerevisiae(简称Sc)和Issatchenkio orientalis(简称Io)生长的影响,以纯培养作对比,研究了混合培养条件下两种酵母菌有... 详细信息

为研究两种酵母菌在混合培养条件下各菌株生长相互影响的因素,本文考察了初糖浓度及p H对两种酵母菌Saccharomyces cerevisiae(简称Sc)和Issatchenkio orientalis(简称Io)生长的影响,以纯培养作对比,研究了混合培养条件下两种酵母菌有机酸代谢的差异性。结果表明,低糖浓度、低p H以及有机酸代谢的差异是造成混合培养条件下Sc生长受到抑制的主要因素;Io代谢葡萄糖速率较Sc快,在初糖浓度为1%的混合培养中,Io优先竞争性地消耗葡萄糖,混合培养体系中Io/Sc(菌落数量比值)为70;Io较Sc耐酸,在p H3.5下,Io/Sc达56;有机酸代谢中,Io可特异性地生成2.52 g/L的乳酸,Sc可特异性地生成1.14 g/L的乙酸,混合培养中,Io可吸收代谢Sc产生的乙酸,而Io产生的乳酸则对Sc的生长产生抑制作用。从细胞生长与有机酸代谢角度分析果酒酵母菌混合培养细胞行为影响的因素,为多菌种混合发酵在果酒产业中的应用提供理论基础。

关键词：混合培养初糖浓度 p H 乙酸乳酸

三叶青松散型和致密型愈伤组织悬浮培养及黄酮积累的比较研究

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中草药 2012年第3期43卷 577-580页

作者：彭昕张剑何军邀范三微凌庆枝浙江医药高等专科学校浙江宁波315100 中国药科大学江苏南京210009

目的比较三叶青松散型和致密型愈伤组织悬浮培养细胞生长及其次生代谢产物黄酮的积累情况。方法将三叶青叶诱导的愈伤组织在不同外源植物激素种类和配比的培养基上多次继代培养,筛选获得松散型和致密型愈伤组织,分别建立相应悬浮细胞体... 详细信息

目的比较三叶青松散型和致密型愈伤组织悬浮培养细胞生长及其次生代谢产物黄酮的积累情况。方法将三叶青叶诱导的愈伤组织在不同外源植物激素种类和配比的培养基上多次继代培养,筛选获得松散型和致密型愈伤组织,分别建立相应悬浮细胞体系,研究了两种悬浮培养细胞生长和总黄酮积累的动态。结果三叶青松散型愈伤组织悬浮培养的继代周期为8 d,增加质量倍数最高达到3.68倍,黄酮积累的最大值11.7 mg/g,较最初接种时的浓度增加34.5%,该悬浮系继代4～5次后生命力衰退且褐化加重;而致密型愈伤组织悬浮培养的继代周期为20 d,增加质量倍数最高达到2.65倍,黄酮积累的最大值40.9 mg/g,较最初接种时的浓度增加212.2%,该悬浮系继代多次细胞无明显变化。结论与松散型愈伤组织悬浮培养相比,致密型愈伤组织悬浮培养更有利于继代培养和次生代谢产物的积累。

关键词：三叶青松散型致密型愈伤组织悬浮培养黄酮

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亮菌液体发酵多糖提取工艺研究

食品工业 2012年第10期33卷 4-6页

作者：董丽辉范三微黄贝贝凌庆枝浙江医药高等专科学校宁波315100

通过正交试验研究亮菌液体发酵的条件和菌丝体多糖的提取工艺,并对多糖采用DEAE-Cellulose-52进行分离。结果显示,亮菌液体发酵接种量为10%,转速为120 r/min,pH为5.5,培养时间7 d;水浴提取亮菌菌丝体多糖的最佳工艺是:料液比1︰60,水浴... 详细信息

通过正交试验研究亮菌液体发酵的条件和菌丝体多糖的提取工艺,并对多糖采用DEAE-Cellulose-52进行分离。结果显示,亮菌液体发酵接种量为10%,转速为120 r/min,pH为5.5,培养时间7 d;水浴提取亮菌菌丝体多糖的最佳工艺是:料液比1︰60,水浴时间3 h,水浴温度80℃。经过DEAE-Cellulose-52层析柱获得一个多糖组分,紫外分析表明,这个组分在200 nm～400 nm都无紫外吸收。

关键词：亮菌液体发酵多糖提取

侵染云南白肋烟的中国番茄黄化曲叶病毒及伴随卫星DNA分子的基因组特征

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农业生物技术学报 2003年第5期11卷 525-530页

作者：李桂新范三微李正和谢艳周雪平浙江大学生物技术研究所杭州310029 浙江大学生物技术研究所

从中国云南省大理地区表现曲叶症状的白肋烟(Nicotinatabacum WhiteBurley)上分离到病毒分离物Y43,该病毒可经烟粉虱(Bemisiatabaci)及嫁接传播。用15种粉虱传双生病毒的单抗对病样进行TAS-ELISA检测,结果表明,该病毒属菜豆金色花叶病毒... 详细信息

从中国云南省大理地区表现曲叶症状的白肋烟(Nicotinatabacum WhiteBurley)上分离到病毒分离物Y43,该病毒可经烟粉虱(Bemisiatabaci)及嫁接传播。用15种粉虱传双生病毒的单抗对病样进行TAS-ELISA检测,结果表明,该病毒属菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus)病毒。对DNA-A1.7kb基因组序列测定和分析表明,Y43与中国广西报道的中国番茄黄化曲叶病毒(TomatoyellowleafcurlChinavirus,TYLCCNV)同源性达89%,其中外壳蛋白(CP)氨基酸同源性达96%,因此Y43应为TYLCCNV的一个新分离物。进一步研究发现,Y43还伴随着一个长1349nt的卫星DNA分子(DNAβ)。Y43DNAβ与AYVVDNAβ、BYVMVDNAβ和CLCuVDNAβ的同源性较低,而与中国分离的烟草曲叶病毒Y5DNAβ和Y8DNAβ的亲缘关系较近。DNAβ可能编码7个分子量超过3.5kD的ORF,其中C1推测为有功能的ORF。

关键词：中国番茄黄花曲叶病毒卫星DNAβ Begomovirus 粉虱传双生病毒